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文檔簡介
血清葡萄糖濃度的測定〔GOD-POD法〕1編輯ppt實驗?zāi)康?、掌握血糖變化的臨床意義。2、掌握酶法測定血清葡萄糖濃度的原理。2編輯ppt生理性高血糖
可見于攝入高塘食物后,或情緒緊張腎上腺分泌增加時。生理性低血糖
見于饑餓和劇烈運動時。臨床意義低血糖<2.8mmol/L高血糖〔空腹〕>7.1mmol/L3編輯ppt臨床意義病理性高血糖糖尿病:胰島素絕對或相對缺乏的糖尿病患者。內(nèi)分泌腺功能障礙:引起各種對抗胰島素的激素分泌過多,或升高血糖的激素增多引起的高血糖。〔胰島素是唯一降低血糖的激素〕顱內(nèi)壓增高:可刺激血糖中樞,引起血糖增高。如腦膜炎、顱外傷、顱內(nèi)出血等。脫水引起的高血塘:如嘔吐、腹瀉和高熱等也可使血糖輕度增高。病理性低血糖特發(fā)性功能性低血糖最多見,其次是藥源性、肝源性和胰島素瘤等。4編輯ppt實驗原理——
酶法分析偶聯(lián)酶反響定量法:ABC酶1酶2使用此方法條件:當(dāng)單酶反響的底物或產(chǎn)物用物理化學(xué)手段不能區(qū)分時
〔即:當(dāng)測定A或B很困難時,可用酶2作為指示酶,通過測定C的含量來間接測定A的含量〕5編輯ppt實驗原理——
酶法分析以H2O2酶作指示酶系統(tǒng):〔本次實驗使用方法〕某底物H2O2顯色過氧化物酶底物相應(yīng)酶H2O2氧化色素原吸光度過氧化物酶的底物有兩類:1.
單一色素原:鄰聯(lián)茴香胺、二氨基聯(lián)苯胺、四甲基聯(lián)苯胺等2.
成對色素原:苯酚與4-氨基安替比林
本次實驗所使用的兩種色素原同時存在以脫氫酶作指示酶系統(tǒng):〔略〕6編輯ppt實驗原理葡萄糖苯酚O2葡萄糖氧化酶〔GOD〕葡萄糖酸H2O紅色醌類化合物4-氨基安替比林過氧化物酶〔POD〕H2O2氧化色素原2
H2O27編輯ppt實驗器材與試劑器材:5mL移液管,微量可調(diào)式移液器,721E分光光度計,37℃恒溫水浴。試劑:1、0.1mol/L磷酸鹽緩沖液〔pH7.0〕2、酶試劑4℃保存3、酚溶液用棕色瓶貯存4、酶酚混合試劑酶試劑與酚溶液等量混合5、苯甲酸鈉溶液〔12mmol/L〕6、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)儲存液〔100mmol/L〕7、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)工作液〔5mmol/L〕8編輯ppt操作步驟試劑/mL空白管標(biāo)準(zhǔn)管測定管血清------0.020葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液---0.020---蒸餾水0.020------酶酚混合試劑3.003.003.00先取3支試管,然后按表格操作混勻,置于37℃水浴中,保溫25min,在波長510nm處比色,以空白管調(diào)零,讀取標(biāo)準(zhǔn)管及測定管的吸管度9編輯ppt計算公式血清葡萄糖濃度=A
測定A
標(biāo)準(zhǔn)X5
mmol/L葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液5
mmol/L參考值:空腹血清葡萄糖濃度:3.89
~
6.11
mmol/L10編輯ppt1、葡萄糖氧化酶法可直接測定腦脊液葡萄糖含量,但不能直接測定尿酸葡萄糖含量。〔因為尿液中等等尿酸等干擾性物質(zhì)濃度過高,可干擾過氧化物酶反響,而造成結(jié)果假性偏低。〕2、血液樣品需及時別離血細胞。〔因為紅細胞的酵解將導(dǎo)致測定結(jié)果偏低。建議測定樣品以草酸鉀-氟化鈉
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