芳酸及其酯類藥物的分析

典型藥物鑒別試驗含量測定

返回主目錄雜質檢查基本要求基本要求

一、掌握水揚酸類、苯甲酸類藥物的鑒別和含量測定的基本原理與方法。二、熟悉其他方酸類藥物鑒別和含量測定的基本原理與方法。。三、了解本類藥物的體內分析方法。返回

一、水揚酸類

（一）典型藥物結構第一節典型藥物分類與理化性質水楊酸（salycylicacid）阿司匹林（aspirin)

對氨基水楊酸鈉（sodiumaminosalicylate)雙水楊酯（salsalate)貝諾酯（benorilate)

1.酸性

SA(PKa2.95)、ASA(PKa3.49)、雙水楊酯均有酸性。

2.溶解性:

均為固體，有一定溶點。除鈉鹽溶于水，其余不溶。

3.UV和IR光譜特性：分子結構中具有苯環,有UV和IR特征吸收。

4.芳伯氨基和酚羥基特性：5.水解特性：ASA、雙水楊酯及其制劑應檢查水楊酸,對氨基水楊酸鈉和貝諾酯檢查間氨基酚和對氨基酚。（二）主要理化性質

（一）典型藥物結構苯甲酸及其鈉鹽(benzoicacid）二、苯甲酸類羥苯乙酯(ethylparoben)丙磺舒(probenecid)甲芬那酸(mefenamicacid)（二）主要理化性質

1.溶解性:

均為固體，有一定溶點。除鈉鹽溶于水，其余不溶。

2.UV和IR光譜特性：分子結構中具有苯環,有UV和IR特征吸收。

3.具有酚羥基特性：

4.分解反應特性：苯甲酸鈉分解為苯甲酸；丙磺舒分解為SO2

5.酸性：苯甲酸、丙磺舒和甲芬那酸有游離的羧基，可用NaOH直接滴定測定其含量。三、其他芳酸類

(一)典型藥物結構氯貝丁酯（clofibrate）布洛芬（ibuprofen）

(二)主要理化性質

1.溶解性：水中不溶，有機溶劑溶解，氯貝丁酯為液體；布洛芬為固體，有一定熔點。

2.UV和IR特征吸收光譜：基于分子結構中具有苯環和特征基團。返回

一、與三氯化鐵反應

含有酚羥基藥物可與FeCl3反應；能與FeCl3反應不一定含酚羥基.第二節鑒別試驗Ar-OH+FeCl3紫堇色鐵配位化合物pH4~61.直接反應

SA在中性或弱酸性條件下，與FeCl3生成紫堇色配位化合物赭色苯甲酸（中性或堿性水溶液）+FeCl3

丙磺舒與NaOH成鈉鹽后，在pH5.0~6.0中與FeCl3生成米黃色布洛芬與高氯酸羥胺，N，N’-雙環基己羧二亞胺及高氯酸鐵反應，即顯紫色[JP（14）方法]。基于分子中-COOH的結構。2.水解或分解后與三氯化鐵反應ASA水解成SA后與FeCl3

反應，成紫堇色二、重氮化-偶合反應

凡是分子結構中含有芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物均可反應。

1.直接反應

對氨基水楊酸鈉

2.水解后反應

貝諾酯具有潛在芳伯氨基

3.甲芬那酸與對-硝基苯重氮鹽在NaOH介質中偶合產生橙紅色。

+K2Cr2O7

深藍色

棕綠色甲芬那酸+H2SO4

黃色

綠色熒光[JP(14)△三、氧化反應

1.ASA酸水解生成SA和CH3COOH：SA的mp為156℃～161℃。

2.雙水楊酯水解生成SA：SA的mp為158℃。

3.氯貝丁酯堿水解后與鹽酸羥胺生成異羥肟酸鹽，在弱酸條件下再與三氯化鐵反應生成紫色的異羥肟酸鐵。四、水解反應

1.苯甲酸鹽加熱分解生成苯甲酸升華物，可用于鑒別。

2.丙磺舒與NaOH熔融分解成Na2SO3,經硝酸氧化成Na2SO4。

3.丙磺舒加熱分解，生成SO2氣體，有臭味五、分解產物反應

1.測定λmax；λmin。

例如：布洛芬用0.4%NaOH溶液制備0.25mg/ml；λmax；265nm,273nm;λmin。245nm,271nm。

2.在λmax處測定一定濃度供試液的吸收度A。

例如：羥苯乙酯，5μg/mlλmax=295nm;A=0.48

3.在λmax處測定供試液的百分吸收系數。

例如：貝諾酯在λmax=240nm;E1%1cm=730~760

六、紫外吸收光譜法

4.在規定的波長測定吸收度比值（即雙波長吸收度比值法）

例如：對氨基水楊酸鈉10μg/ml;A265/A299=1.56~1.56

再例如：甲芬那酸14μg/ml;A278~280/A348~352=1.15~1.30

七、紅外吸收光譜法水楊酸的紅外吸收圖譜3700~2900cm-1

N-H、

O-H1660cm-1

C=O1610,15701480,1440

C=C775cm-1

Ar-H返回3700~2900cm-1

N-H、

O-H1640cm-1

N-H1580cm-11500cm-1

C=C1300cm-1

C-N1188cm-1

C-O對氨基水楊酸鈉的紅外吸收圖譜第三節特殊雜質檢查一、ASA中特殊雜質的檢查

1.溶液的澄清度

主要檢查Na2CO3中不溶物，有苯酚；醋酸苯酯；水楊酸苯酯；乙酰水楊酸苯酯。ASA溶解因此ASA溶液應澄清。

2.游離水楊酸檢查

利用SA可與FeCl3呈色，用比色法檢查。

3.易炭化物檢查

主要檢查ASA中能被硫酸炭化顯色的低分子有機雜質。采用與標準比色液比色的方法檢查。

主要檢查成品藥物中可能殘留的間氨基酚。間氨基酚易氧化呈色，而且有毒性，因此要嚴格控制。

雙向滴定法：利用間氨基酚溶于乙醚，取3.0g樣品用乙醚提取0.02mol/LHCl測定方法滴定V＜0.3ml。

HPLC法：采用內標法，以磺胺作內標（USP）

二、對氨基水楊酸鈉中特殊雜質的檢查三、羥苯乙酯中有關物質的檢查BP收載的方法，由于雜質的結構不清，故采用TLC法中的供試品自身對照法：固定相：GF254C18化學鍵合硅膠展開劑：甲醇-水-冰醋酸反相TLC法

甲芬那酸是以鄰-氯苯甲酸和2，3-二甲基苯胺在Cu的催化下縮合而成，因此成品藥物中要檢查銅鹽及有關物質。分光光度法：利用Cu2+與Na-DDC呈色后測定A

1.銅鹽檢查法

原子吸收分光光度法：BP（2000）

2.有關物質的檢查主要檢查的是酰胺、二甲基苯胺和鄰氯苯甲酸各國藥典均采用TLC法中的自身高低濃度對照法。四、甲芬那酸中特殊雜質的檢查五、氯貝丁酯中特殊雜質的檢查

主要檢查成品藥物中殘留的對氯酚原料和揮發性雜質GC-FID法HPLC法：以對-羥乙基酚作內標，用正相HPLC2.揮發性雜質的檢查方法

GC法1.對氯酚檢查返回

一、酸堿滴定法（一）直接滴定法

基于本類藥物-COOH；可用堿直接滴定，如ASA的含量測定，其原理如下：第四節

含量測定1.原理：2.條件：在中性乙醇中，以酚酞作指示劑；摩爾比為1:1。3.應用：多國藥典用于雙水楊酯、苯甲酸、丙磺舒、布洛芬測定；USP和BP還用于甲芬那酸的測定。（二）水解后剩余滴定法

1.ASA含量測定原理：條件：水溶液

具體試驗：I份NaOHI份NaOHVVOVo-V相當于ASA消耗

硫酸的ml數ASA%=(Vo–V)×F×T/W×100%2.羥苯乙酯的含量測定（三）兩步滴定法

1.ASA片的含量測定第一步為中和ASA+NaOHASA-Na+H2O水解產物SA+NaOHSA-Na+H2O酸性穩定劑+NaOH中性鹽第二步為水解與測定

2.氯貝丁酯含量測定

第一步：中和酸性雜質

第二步：水解與測定

二、亞硝酸鈉滴定法

對氨基水楊酸鈉有芳伯氨基,在HCl中與NaNO2發生重氮化反應Ar-NH2+NaNO2+2HClAr-N2Cl+NaCl+2H2O

因此可用亞硝酸鈉滴定法測定其含量，此法在下章重點討論。三、雙相滴定法

是指在水相和有機相中的滴定。如苯甲酸鈉的含量測定：

生成的苯甲酸不溶于水，終點pH突躍不明顯，不易觀察。苯甲酸在乙醚中易溶，在水相中加入乙醚將滴定中產生的苯甲酸萃取入醚層。因此用雙相滴定可使反應完全終點明顯。（一）直接紫外分光光度法

丙磺舒片的測定：Ch.P(2000)在HCl中，采用百分吸收系數法。

BP(1998)再鹽酸-乙醇,采用百分吸收系數法.

USP(24)用氯仿提取后，采用對照品比較法。四、紫外分光光度法（二）離子交換-紫外分光光度法

氯貝丁酯及其制劑Ch.P(2000)采用酸堿滴定法；當含有酸性雜質對氯酚時，可采用強堿性陰離子交換樹脂吸附酸性雜質后，在甲醇溶液中，226nm波長處，采用對照品比較法。

具體計算：W×1000×1/100×1/100=Cu(μg/ml)Au/As=Cu/CCu=C(Au/As)W(mg)=10×Cu=10×C(Au/As)（三）柱分配色譜-紫外分光光度法

USP(24)采用此法同時測定ASA膠囊中ASA和SA。

1.SA的限量測定

色譜柱的制備；對照品溶液的制備；供試品溶液的制備。供試品液：CHCl3液洗脫液1：CHCl3洗脫液2：HAC-

乙醚硅藻土，FeCl3-尿素玻璃棉硅藻土，Na2CO3供試品液：CHCl3-HCl液洗脫液1：HAC-CHCl3

(1:10)10ml洗脫液2：HAC-CHCl3(1:100)85ml

1-雜質先洗脫2-SA后洗脫

max=306nmAu＜As1-雜質先洗脫2-ASA后洗脫

max=280nmASA(mg)=C(Au/As)

2.ASA的含量測定色譜柱的制備；對照品溶液