獸用疫苗生產與質量控制第一張，課件共六十八張，編輯于2022年5月主要內容獸用生物制品簡介疫苗的定義和分類疫苗生產工藝簡介疫苗生產質量控制疫苗研究發展趨勢第二張，課件共六十八張，編輯于2022年5月一、獸用生物制品簡介1.

獸用生物制品概念2.

獸用生物制品分類第三張，課件共六十八張，編輯于2022年5月1、獸用生物制品概念?概念：系用天然或人工改造的微生物、寄生蟲、生物毒素或生物組織及代謝產物等為材料，采用生物學、分子生物學或生物化學等相應技術制成的一類生物活性制品，用于預防、治療和診斷畜禽等動物疾病?獸用生物制品學科：是一門涉及多種學科領域的應用科學（微生物學、免疫學、生物化學、實驗動物學、細胞學、分子生物學、制冷學、生物工程學、管理學等）第四張，課件共六十八張，編輯于2022年5月2、獸用生物制品分類按生物制品性質分類?

疫苗（vaccine）：接種動物后能產生自動免疫和預防疾病的一類生物制劑稱為疫苗。?

類毒素（toxoid）：又稱脫毒毒素，是指細菌生長繁殖過程中產生的外毒素，經化學藥品（如甲醛）處理后成為無毒性但保留免疫原性的生

物制劑，接種動物后也能產生自動免疫，產生

抗毒素血清。第五張，課件共六十八張，編輯于2022年5月?

診斷制品（diagnostic

preparation）：利用微生物、寄生蟲及其代謝產物，或動物血清、組織等，

根據免疫學和分子生物學原理制備，用于疫病診斷、免疫監測和病原鑒定的一類生物制劑。?

抗病血清（antiserun）：或高免血清，為含有高效價特異性抗體的血清，能用于治療或緊急

預防相應病原體所致的疾病。第六張，課件共六十八張，編輯于2022年5月?

微生態制劑（probiotics）：又稱活菌制劑，是用非病原微生物如乳酸桿菌、雙歧桿菌等活菌

制劑，口服治療畜禽腸道正常菌群失調引起的

下痢。?

副免疫制品（paraimmunity

preparation）：

這類物質能通過刺激機體，提高特異性和非特異性

免疫，從而使動物機體對其他抗原物質的特異性

免疫力更強更持久，如脂多糖、多糖、緩釋微球、細胞因子，免疫刺激復合物等。第七張，課件共六十八張，編輯于2022年5月?普通制品：指用一般方法制備的、未經濃縮和純化處理，或僅按毒（效）價標準稀釋的制品。如現有國內的大部分傳統疫苗均為普通制品。?

精制生物制品：將普通制品（原制品）經濃縮和純化處理，去除無效成分，毒（效）價高于普通制品效力更好，如精制破傷風毒素和精制結核菌素等。第八張，課件共六十八張，編輯于2022年5月?

液狀制品：濕性制品。一些滅活疫苗如兔病毒性出血癥滅活疫苗，診斷制品如血清、抗原等為液狀制品。多數既不耐高溫和陽光，又不宜低溫凍結和反復凍融，否則其效價會受到影響，只能在低溫冷暗處保存，保存時間較短。?干燥制品：液狀制品加入適當穩定劑或凍干保護劑經冷凍真空干燥處理，將96%以上水分除去后剩留疏松海綿狀的物質，為干燥制品，生物制品經干燥后能較長時間保護活性和抗原效價。?

佐劑制品：為了增強疫苗制劑誘導動物機體的免疫應答反應，提高免疫效果，在疫苗制備的過程中加入適量的佐劑，如氫氧化鋁膠、油佐劑等，這類制品稱為佐劑制品。第九張，課件共六十八張，編輯于2022年5月二、疫苗的定義和分類1.

疫苗定義2.

疫苗分類第十張，課件共六十八張，編輯于2022年5月1、疫苗定義?由特定細菌、病毒、立克次體、衣原體等微生物及寄生蟲制成的，接種動物后能產生自動免疫和預防疾病的一類生物制劑均稱為疫苗，制劑的主要成分為微生物或寄生蟲。第十一張，課件共六十八張，編輯于2022年5月2、分類按微生物分類1.

細菌類疫苗2.

病毒類疫苗3.

寄生蟲類疫苗第十二張，課件共六十八張，編輯于2022年5月按疫苗抗原的性質和制備工藝分類?

活疫苗（live

vaccine）弱毒活疫苗基因缺失疫苗基因工程活載體疫苗病毒抗體復合疫苗：特異性高免血清與適當比例的相應病毒組成，其特點是可以延緩病毒釋放，提高疫苗的安全性和免疫效果。第十三張，課件共六十八張，編輯于2022年5月?

活疫苗特點可在體內繁殖系統免疫反應和局部免疫反應免疫力持久，產量高，成本低有毒力增強和反祖危險抗原干擾現象保存條件苛刻第十四張，課件共六十八張，編輯于2022年5月?

死疫苗（killed

vaccine）滅活疫苗：由完整的病毒或細菌經滅活劑滅活后制成，即要使病原體充分死亡，喪失感染性或毒性，又要保留其免疫原性。亞單位疫苗：是指將病原體經物理或化學方法處理，

除去無效物質，提取其有效抗原部分制備的一類疫苗，經提取、純化，通過化學合成，制成不同的亞單位疫苗。第十五張，課件共六十八張，編輯于2022年5月基因工程重組亞單位疫苗：利用DNA重組技術，將編碼病原微生物保護性的基因 導入原核或真核細胞，使其在受體細胞中高效表達，分泌保護性抗原肽鏈，提取肽鏈加入佐劑制成。該類疫苗安全性好，副反應小（有害的反應原少），穩定性好，便于保存和運輸，但研發、生產成本高，免疫原性較差，需多次免疫才能得到有效保護。第十六張，課件共六十八張，編輯于2022年5月?

死疫苗特點不能在體內繁殖有利于制備多價或多聯疫苗比較安全，不發生全身性副反應，無毒力反祖現象受外界影響小，有利于保存運輸免疫劑量大，需多次免疫，成本高只能誘導機體產生體液免疫通常需要用佐劑或攜帶系統來增強其免疫效果第十七張，課件共六十八張，編輯于2022年5月?

基因疫苗（genetic

vaccine）：

包括DNA疫苗和RNA疫苗，是將編碼某種抗原蛋白的基因置于真核表達元件的控制下，構成重組表達質粒

DNA或RNA，將其直接注入動物體內，通過宿主細胞的轉錄翻譯系統合成抗原蛋白，從而誘導宿主產生抗原蛋白的免疫應答。第十八張，課件共六十八張，編輯于2022年5月?

單價疫苗（univalent

vaccine）：利用同一種微生物（菌）毒株或同一種微生物中的單個血清型（菌）毒株的增殖培養物制備的疫苗。?

多價疫苗（polyvalent

vaccine）：利用同一種微生物（菌）毒株或同一種微生物中的多個血清型（菌）毒株的增殖培養物制備的疫苗?

多聯疫苗（mixed

vaccine）：利用不同的微生物增殖培養物，按免疫學原理和方法組合而成的疫苗。接種動物后能獲得相應疾病的免疫保護，一針多防，可減少勞動力和動物應激。第十九張，課件共六十八張，編輯于2022年5月—按疫苗病原菌（毒）株來源分類?同源疫苗：采用同種、同型或同源微生物制備，應用于同類動物免疫接種的疫苗。?異源疫苗：采用不同種微生物的（菌）毒株制備的疫苗，接種動物后能使其獲得對疫苗中未含有的病原體產生抵抗力，如犬在接種麻疹疫苗后，能產生對犬瘟熱的抵抗力。或采用同一種中一種型微生物的（菌）毒株制備的疫苗，接種動物后能使其獲得對異型病原體的抵抗力。第二十張，課件共六十八張，編輯于2022年5月三、疫苗生產工藝介紹1.

疫苗生產基本條件2.

疫苗生產工藝流程3.

生產中影響疫苗質量的關鍵環節4.

疫苗抗原制造技術介紹5.

疫苗檢驗6.

疫苗保存第二十一張，課件共六十八張，編輯于2022年5月1、疫苗生產基本條件產品批準文號菌（毒）種疫苗《制造及檢驗規程》GMP廠房、設施和儀器設備第二十二張，課件共六十八張，編輯于2022年5月產品批準文號?

農業部頒發批準文號?

GMP證書(具備該疫苗生產線)?

產品復核檢驗(具備生產該疫苗的能力)?

標簽、說明書樣稿審查(符合規程規定)?

省級文號？第二十三張，課件共六十八張，編輯于2022年5月菌（毒）種?

菌（毒）種是疫苗生產必備的原材料，國家對菌（毒）的保管和使用有嚴格的規定和限制（生物安全問題）。?

生產疫苗的菌（毒）種來源：中國獸醫藥品監察所或新獸藥轉讓單位。?

菌（毒）種保管和使用：基礎種毒由中國獸醫藥品監察所或其委托的保管單位進行生產、鑒定和保管，生產用種子批由企業生產、鑒定和保管。第二十四張，課件共六十八張，編輯于2022年5月菌（毒）種分類菌（毒）種分強毒和弱毒?

強毒：通常指從得病動物體內分離到的致病毒株，只能用于制造滅活疫苗和檢驗用?

弱毒：通常是采用人工的方法用強毒致弱而成，一般于制造活疫苗第二十五張，課件共六十八張，編輯于2022年5月菌（毒）種質量標準?

生物學特性明顯、歷史清楚：形態、培養特性、生化特性及血清免疫學特性等明顯，易于鑒別；人工感染動物引起穩定一致的臨床癥狀和病理變化特征；原始細菌或病毒株的來源地區、動物品種流行資料清楚；分離鑒定資料完整；傳代、保藏和生物學特性檢查方法明確。?

遺傳學上相對純一與穩定：菌毒種在傳代增殖過程中某些遺傳形狀會發生改變和分離，如形態特征、毒力、反應原性、免疫原性等方面，因此要求制造生物制品

的菌（毒）種的這種改變和分離越小越好，應經常進

行挑選，純化和克隆。第二十六張，課件共六十八張，編輯于2022年5月?反應原性和免疫原性優良：反應原性高，即使微量量的抗原物質進入機體內既能產生強烈的免疫反應，血清學上會出現很高的特意性；優良的免疫原性物質能使免疫動物產生完善的免疫應答，從而獲得堅強的免疫力?

毒力應在規定的范圍以內：用于制造弱毒疫苗的菌毒種，毒力應盡量弱一些；用于制造抗血清、滅活疫苗和疫苗效力檢測的菌（毒）種毒力應強，且抗原性要盡量高第二十七張，課件共六十八張，編輯于2022年5月菌（毒）種的篩選程序和內容免疫原性TCID50

血清學實驗攻毒保護實驗LD50穩定性實驗篩選出毒力強、抗原性好、生長穩定、純凈的毒株，用于制備疫苗、診斷液和治療用抗體或疫苗效力檢驗用凍干、冷凍或冷藏保存實驗動物EID50

ELD50雞胚細胞 反應原性純粹性試驗抗原性試驗原動物致病性試驗病毒分離第二十八張，課件共六十八張，編輯于2022年5月弱毒菌（毒）種的選育弱毒菌（毒）種的選育自然弱毒株的分離人工誘變致弱同源動物（如NDVLaSota株）異源動物（HVTFC126株）化學途徑物理途徑生物途徑亞硝基胍醋酸坨洗衣粉高溫紫外線適應非易感動物或細胞雜交減毒第二十九張，課件共六十八張，編輯于2022年5月疫苗《制造及檢驗規程》?

任何一種疫苗都有其《制造及檢驗規程》，它是國家法定標準。?

疫苗的生產必須嚴格按《規程》規定的方法進行生產和檢驗，若要改變方法，則要提供研究材料證明是可行的，并報農業部評審批準，形成新《規程》才能進行生產。?

《規程》來源中華人民共和國《獸用生物制品規程》（常規疫苗）轉讓單位（新獸藥）第三十張，課件共六十八張，編輯于2022年5月廠房、設施和儀器設備?

《GMP》證書是疫苗生產的準入證，疫苗生產必需擁有與生產工藝相符合的生產線?

GMP生產車間設計要求功能區：抗原制備區、成品生產區、洗滌區、辦公區。各區域和功能間以潔凈走廊相連，嚴格按人流物流分開原則進行設計。潔凈度：按各功能間潔凈度、壓力、壓差要求設計施工。有10萬級區、萬級區和局部百級區。六大系統：供電、供水、供汽、污水處理、凈化、監控。第三十一張，課件共六十八張，編輯于2022年5月廠房、設施和儀器設備?

檢驗設施質檢室檢驗動物舍（應配備有符合各類實驗動物級別飼養設施）?

倉儲設施原輔材料庫半成品庫成品庫第三十二張，課件共六十八張，編輯于2022年5月廠房、設施和儀器設備?

滅菌設備：高壓蒸氣滅菌柜、干熱箱、鍋爐等；?

凈化設備：凈化機組、無菌室、超凈工作臺等；?

微生物培養設施設備：溫室、孵化器、細胞培養轉瓶機、各種罐體、生化培養箱等；?

乳化設備：各種罐體、膠體摸、高壓勻漿機等；?

凍干設備：凍干機；?

灌裝設備：洗烘連動線、自動灌裝加塞聯動機；?

包裝設備：扎蓋機、帖標機；?

冷藏冷凍設施設備：冷庫、冷柜、液氮罐等；?

污水廢棄物處理設施設備：滅菌柜、消毒罐、污水處理站；?

檢驗儀器設施設備：各種顯微鏡、水分測定儀、二氧化碳培養箱、生物安全柜、動物房等。第三十三張，課件共六十八張，編輯于2022年5月福州大北農公司總體布局圖主廠房大動物房小動物房污水

處理站質檢樓脾林苗鍋爐房倉儲辦公區大門生活區第三十四張，課件共六十八張，編輯于2022年5月第三十五張，課件共六十八張，編輯于2022年5月第三十六張，課件共六十八張，編輯于2022年5月疫苗生產工藝流程菌（毒）種培養物（培養基、動物、禽胚或細胞等） 收獲抗原（培養液、含毒組織、胚液或細胞液等） 配苗分裝凍干成活疫苗或滅活后制成滅活疫苗。第三十七張，課件共六十八張，編輯于2022年5月細菌疫苗的制造流程培養基蛋白胨、肉浸液等原料配制、滅菌菌種生產用種子培養菌液菌苗原液活疫苗原料滅活菌液佐劑

配苗乳化分裝、扎蓋、帖簽滅活疫苗滅活檢驗配制、滅菌配苗

保護劑分裝凍干、扎蓋帖簽原料配制、滅菌第三十八張，課件共六十八張，編輯于2022年5月病毒性細胞疫苗的制造工藝流程健康動物（或胚胎）組織原料生長細胞病毒液配苗分裝凍干、扎蓋帖簽活疫苗基礎種毒細胞懸液生產用種毒原料保護劑配制滅菌細胞培養液傳代細胞滅活病毒液配苗（混勻、乳化）分扎蓋帖簽裝滅活疫苗檢驗原料佐劑配制滅菌滅活檢驗配制培養收獲第三十九張，課件共六十八張，編輯于2022年5月病毒性組織疫苗的制造工藝流程感染動物或胚胎分裝、扎蓋、貼簽健康動物或SPF雞胚等健康動物或SPF雞胚等動物或SPF雞胚等基礎種毒生產用種毒收獲感染組織或胚液純化配制成含毒懸液配苗分裝凍干活疫苗保護劑原料配制檢驗滅活病毒液配苗、乳化滅活疫苗原料佐劑配制滅活檢驗第四十張，課件共六十八張，編輯于2022年5月影響疫苗質量的關鍵環節?

活疫苗生產用菌（毒）種的制備是否優良制苗用抗原制備（微生物增殖）是否高效凍干保護劑的選擇和凍干曲線的制定是否合理?

滅活疫苗生產用菌（毒）種的制備是否優良制苗用抗原制備（微生物增殖）是否高效抗原滅活是否徹底乳化工藝是否先進第四十一張，課件共六十八張，編輯于2022年5月疫苗抗原制造技術介紹?

細菌類疫苗抗原增殖技術（培養基增殖）

細菌培養是指細菌在動物體外的人工培養基上以及人工控制的環境中（通常用培養罐進行培養）生長繁殖的過程。細菌性疫苗都是利用培養基制造的，首先通過分離培養，獲得單個菌落，制備細菌種子，然后逐級培養進行規模化生產。第四十二張，課件共六十八張，編輯于2022年5月傳統病毒類疫苗抗原增殖技術?

動物增殖?

禽胚增殖?

細胞增殖第四十五張，課件共六十八張，編輯于2022年5月5、疫苗檢驗?

活疫苗物理性狀（凍干苗）無菌檢驗（純粹檢驗）鑒別檢驗：特異性血清中和檢驗。外源病毒檢驗（病毒類疫苗）：中和法檢驗。活菌計數（細菌類疫苗）：平板計數。病毒含量測定（病毒類疫苗）：EID50、ELD50或TCID50。第四十六張，課件共六十八張，編輯于2022年5月安全檢驗：動物或雞胚（劑量幾倍至幾十倍）效力檢驗：攻毒保護或微生物含量測定。水份測定（凍干苗）：4%以內。真空度測定（凍干苗）：白色、粉色或紫色輝光。第四十七張，課件共六十八張，編輯于2022年5月?

滅活疫苗滅活檢驗：半成品檢測：EID50、ELD50或TCID50。物理性狀：外觀、劑型、穩定性、粘度檢驗。無菌檢驗：培養基檢測安全檢驗：動物檢驗效力檢驗：攻毒保護或測抗體。滅活劑含量測定：化學分析第四十八張，課件共六十八張，編輯于2022年5月6、疫苗保存?疫苗對溫度極為敏感，保存不當會使效價嚴重受損（尤其是活疫苗）或劑型破壞，并導致疫苗失效，因此應嚴格在規定的條件下保存。第四十九張，課件共六十八張，編輯于2022年5月7、豬瘟活疫苗產品介紹?

種類：豬瘟活疫苗根據抗原制備途徑不同又分為：?

豬瘟活疫苗（成兔脾淋源）?

豬瘟活疫苗（乳兔源）?

豬瘟活疫苗（細胞源）?

豬瘟活疫苗（牛體源）?

疫苗研究和發展歷史背景第五十張，課件共六十八張，編輯于2022年5月3.6豬瘟活疫苗產品介紹—生產和使用對比疫苗類型使用種毒抗原制備方法質量標準生產成本臨床使用豬瘟活疫苗（成兔脾淋源）豬瘟兔化弱毒接種成兔，采集兔體脾淋組織150個RID高非特異免疫強抗原含量高過敏率低豬瘟活疫苗（乳兔源）豬瘟兔化弱毒接種乳兔，采集乳兔肌肉組織150個RID較高無非特異免疫抗原含量較低過敏率高豬瘟活疫苗（細胞源）豬瘟兔化弱毒接種牛睪丸細胞，收貨細胞培養液750個RID（新標準

7500

RID）低無非特異免疫，抗原含量高，

過敏率較高豬瘟活疫苗（牛體源）豬瘟兔化弱毒接種犢牛，采集犢牛脾淋組織150個RID較底非特異免疫強抗原含量高過敏率低第五十一張，課件共六十八張，編輯于2022年5月豬瘟活疫苗質量控制要素?

菌毒種純凈（細菌和外源性病毒污染）含毒量高于國家標準代次控制在5代以內?

原材料的選擇組織苗家兔的選擇（兔種、年齡、體重、健康狀況等）乳兔的選擇（日齡、體重、健康狀況等）細胞苗細胞的選擇（無污染外原病毒等）第五十二張，課件共六十八張，編輯于2022年5月豬瘟活疫苗質量控制要素?

生產環境控制組織苗動物飼養條件控制接毒后動物反應觀察與判斷生產線功能間潔凈級別要求細胞苗細胞檢測（BVDV等）健康細胞和接毒后細胞的觀察與判斷生產線功能間潔凈級別要求?

半成品檢測?

成品檢測第五十三張，課件共六十八張，編輯于2022年5月四、疫苗生產質量控制1.

質量控制意義2.

質量控制要求3.

質量控制保證措施（獸藥GMP管理）4.

疫苗質量評價第五十四張，課件共六十八張，編輯于2022年5月1、質量控制意義?國家強制要求禽流感事件，人血白蛋白事件?企業自身要求品牌、效益、責任?

生物制品特殊性表現在在生產和使用過程中人和動物的安全性（污染、混毒、人畜共患）對環境的安全性群體性危害第五十五張，課件共六十八張，編輯于2022年5月2、質量控制要求?

安全性：毒副作用、殘留、環境、人類?

有效性：有效成分達到要求，療效確切?

均一性：批間、最小單元間、貯存運輸后等?

穩定性：貯存期穩定，有較長的有效期?

方便性：給藥的方式、途徑?

經濟性：在保證質量的前提下，改進生產工藝，提高效力，降低成本第五十六張，課件共六十八張，編輯于2022年5月3、保證措施——獸藥GMP管理GMP是英文Good

Manufacturing

PracticeforDrugs的縮寫，直譯為“優良產品的生產實踐”。我國的《獸藥GMP》是《藥品生產質量管理規范的簡稱》。《獸藥GMP》是在獸藥生產過程中，用科學、規范化的條件和方法來保證生產優良獸藥的整套科學體系。它實施的目標就是對獸藥生產的全過程進行質量控制，以保證生產的獸藥質量是合格優良的。第五十七張，課件共六十八張，編輯于2022年5月3、保證措施——獸藥GMP背景?

GMP是從藥品生產實踐中取得經驗教訓的總結。?

人類社會經歷了12次藥物災難，特別是20世紀出現的藥物災難“反應停”事件后，公眾要求制定嚴格監督法律；?

最 的GMP是由美國坦普爾大學6名教授編寫制定；?

1963年美國頒布第一部GMP，美國FDA經過實施；?

1975年WHO正式公布GMP，開始向成員國推薦，并確定為WHO的法規之一，迄今為止有100多個國家實施了GMP；?

我國醫用藥品從1982年開始頒布GMP，農業部于己于1989年頒布并決定實施GMP，規定至2005年12月31日未取得《GMP合格證》的企業，不得進行藥品生產。第五十八張，課件共六十八張，編輯于2022年5月3、保證措施——控制要求GMP基本控制要求影響質量的因素訓練有素的

生產、管理人員經驗證合適的

廠房、設施、設備經檢驗合格的原料、包裝材料經過驗證的生產方法可靠的檢驗、監控完善的售后服務完善的管理文件第五十九張，課件共六十八張，編輯于2022年5月3、保證措施——控制要求在GMP管理要求中，3條主線貫穿全過程T生產處處防污染：原材料或產品被微生物或外來物攙雜、玷污、混雜、失真、遺漏、任意等造成產品的質量問題，生產過程對環境和人員的安全性：T事物件件有驗證：能證明任何程序、生產過程、設備、物料、活動或系統能導致預期結果，有文件證明的行動。凡是須問個為什么？怎么樣？好不好？行不行？----通過驗證----放心使用T

工作一律守制度：有一項工作或活動就必須有一項制度；有制度就必須執