氫苯酚超聲測定的研究

氫硅和酚具有一定的滲透性和一定的美白效果，通常添加到美白膏中。由于氫醌、苯酚對人體均有毒性,被國家明令禁止在護(hù)膚類化妝品中使用,可是現(xiàn)在很多美容院為了爭取顧客,迎合其快速祛斑的心理需求,四處尋找一涂即白的“神奇水”、“魔力膏”,一些不法廠商為了牟取暴利,投其所好,無視國家法規(guī),在化妝品中加入大量的違禁物質(zhì)。氫醌(對苯二酚)屬于超抑制酪氨酸酶和黑色素細(xì)胞毒劑,它通常以2%～4%的濃度作為工業(yè)生產(chǎn)中的脫色劑使用,后來有人把它用在治療黃褐斑上,確實(shí)很有效。于是“氫醌霜”就盛行起來了,并一度被認(rèn)為是祛斑的首選產(chǎn)品。但后來人們發(fā)現(xiàn),長期使用“氫醌霜”會導(dǎo)致黑色素細(xì)胞死亡,使色素脫失,發(fā)生白斑,或引起褐黃病(oehronosis)。倘若大面積使用,還會引起全身中毒,使肝、腎功能受到嚴(yán)重的傷害,甚至導(dǎo)致死亡。因此目前美國、法國的祛斑產(chǎn)品中禁止使用氫醌,而且在產(chǎn)品包裝盒的顯著位置還明確標(biāo)明“本品中不含氫醌”的字樣。我國強(qiáng)制性國家標(biāo)準(zhǔn)GB7916-1987《化妝品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定了化妝品中禁用及限用物質(zhì),其中對氫醌及苯酚作了明確規(guī)定:氫醌可以在染發(fā)類化妝品中作氧化著色劑,苯酚也只能在洗發(fā)類化妝品中限量使用,禁止加在其它類化妝品中。近幾年來,國內(nèi)美白、祛斑產(chǎn)品市場發(fā)展十分迅速,這些產(chǎn)品在給人們帶來皮膚白皙、色斑淡化、祛除色素沉著的同時,給消費(fèi)者造成傷害的問題也比比皆是,如皮膚紅腫、脫皮等現(xiàn)象時有發(fā)生。所以監(jiān)測檢驗(yàn)祛斑美白類化妝品的質(zhì)量,保證消費(fèi)者用到衛(wèi)生、安全的化妝品已成為當(dāng)前檢驗(yàn)檢疫工作的重點(diǎn)。目前,氫醌、苯酚的檢測方法有分光光度法、氣相色譜法、液相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用法。筆者建立了二極管陣列檢測器的高效液相色譜法,該方法具有樣品前處理簡單、快速、靈敏度高、成本低、測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠等特點(diǎn),為美白類、祛斑類化妝品和香波等日用化學(xué)品中氫醌和苯酚的檢測提供了一種有效的分析手段。1實(shí)驗(yàn)部分1.1儀器、試驗(yàn)設(shè)備高效液相色譜儀:Agilent1200型,附帶DAD二極管陣列檢測器,美國安捷倫公司;超聲波清洗器:D-78224型,德國Elma公司;高速離心機(jī):3-30K型,德國Sigma公司;分析天平:AL204型,梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;超純水儀:Milli-Q型,美國密理博公司;有機(jī)性樣品濾膜:0.45μm;甲醇:色譜純;氫醌標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):Lot00526,純度99.0%,德國Dr.Ehrenstorfer公司;苯酚標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):Lot80428,純度99.5%,德國Dr.Ehrenstorfer公司。1.2標(biāo)準(zhǔn)儲備液的制備分別精密稱取氫醌、苯酚標(biāo)準(zhǔn)品0.099、0.1212g,用甲醇溶解后定容至100mL棕色容量瓶中,分別得到0.990、1.212mg/mL的氫醌、苯酚標(biāo)準(zhǔn)儲備液,于4℃暗處保存。臨用時將標(biāo)準(zhǔn)儲備液用甲醇稀釋成所需濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。1.3超聲提取試劑準(zhǔn)確稱取試樣1.00g于具塞比色管中,必要時在水浴上餾除乙醇等揮發(fā)性有機(jī)溶劑,用甲醇定容至10mL,充分振蕩,于超聲波清洗器中常溫超聲提取15min,離心,取上清液過0.45μm濾膜后備用,同時做試劑空白。1.4流動相、流速色譜柱:AgilentZORBAXEclipseXDB-CN(250mm×4.6mm,5-Micron);流動相:水-甲醇(體積比為75∶25),等度洗脫;流速:1.0mL/min;柱溫:25℃;進(jìn)樣量:10μL;檢測器:二極管陣列(DAD)檢測器,檢測波長為280nm。2結(jié)果與討論2.1氫、苯酚分光吸收法在190～370nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行全波長掃描,氫醌、苯酚均在222、280nm處有特征吸收,氫醌、苯酚在222nm處有一最大吸收峰,在此波長下測定氫醌、苯酚具有較高的靈敏度,但實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),在此條件下樣品中許多組分都有吸收,對測定產(chǎn)生干擾。為保證二者同時測定,選擇280nm作為檢測波長。在此條件下氫醌、苯酚有較好的分離效果,干擾少,靈敏度高,分析速度快。2.2提取溶劑的選擇根據(jù)各個物質(zhì)的理化性質(zhì),選擇了甲醇、甲醇-水、乙腈作為提取溶劑,結(jié)果表明,乙腈的提取效果最差且毒性大;甲醇-水系統(tǒng)引入了大量的水溶性雜質(zhì);甲醇對各物質(zhì)的提取效果最好,是理想的提取溶劑,且毒性相對較小,操作簡單。2.3提取的峰面積測定按照1.3樣品前處理方法,分別在10、15、20、25、30min測定提取物的峰面積,結(jié)果見表1。由表1可知,最佳提取時間為15min。2.4色譜柱及流動相的選擇選擇AgilentZORBAXEclipseXDB-Cl8(150mm×4.6mm,5-Micron)和AgilentZORBAXEclipseXDB-CN(250mm×4.6mm,5-Micron)色譜柱及甲醇、不同比例的甲醇-水為流動相,分別進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果表明,在AgilentZORBAXEclipseXDB-CN柱上以甲醇-水(體積比為25∶75)為流動相,分析時間短,峰型好,靈敏度高,符合分析要求。在此條件下,氫醌和苯酚混合標(biāo)準(zhǔn)溶液及洗發(fā)香波樣品中添加標(biāo)準(zhǔn)溶液后的色譜圖分別見圖1、圖2。2.5標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制利用氫醌和苯酚標(biāo)準(zhǔn)儲備液配制成氫醌濃度依次為7.920、15.840、31.680、39.600、79.200mg/L,苯酚濃度依次為9.696、19.392、38.784、48.480、96.960mg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)混合工作溶液。按照1.4的條件分別進(jìn)行測定,以氫醌或苯酚的濃度(x)對相應(yīng)的峰面積(y)進(jìn)行線性回歸,在7.920～79.200mg/L范圍內(nèi)氫醌線性方程為y=10.37075x-1.15602,相關(guān)系數(shù)r=0.99999;在9.696～96.960mg/L范圍內(nèi),苯酚的線性方程為y=4.17640x+0.17247,相關(guān)系數(shù)r=0.99999。以3倍信噪比計(jì)算氫醌和苯酚的檢出限分別為0.04929、0.1258mg/kg。2.6精密度測試對氫醌濃度為7.920mg/L和苯酚濃度為9.696mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)進(jìn)樣6次,測定結(jié)果見表2。2.7樣品處理和測定對不含氫醌和苯酚的洗發(fā)香波樣品進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn),加入3個不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,每個濃度平行測定6次,按1.3方法進(jìn)行樣品處理,在1.4條件下進(jìn)行測定,結(jié)果見表3。由表3可知,加標(biāo)回收率為9