高效液相色譜法測定美司鈉的含量

采用高效液相色譜法測定了美國鈉含量。利用KIO1實驗部分1.1儀器和試劑UV-250pc分光光度計(日本島津公司)。40μg/mL美司鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液;40μg/mLKIO1.2實驗方法準(zhǔn)確移取40μg/mLKIO2結(jié)果討論2.1美司鈉存在時測定波長的確定按照上述實驗方法在波長440~600nm范圍內(nèi)掃描測定吸收曲線,結(jié)果如圖1所示,曲線1是空白溶液的吸收光譜,曲線2是有美司鈉存在時測定溶液的吸收光譜,兩條曲線的最大吸收波長均在522nm,表明美司鈉的存在對體系有色產(chǎn)物的最大吸收波長不影響,因此實驗中選擇522nm作為測定波長。2.2反應(yīng)物用量的選擇考察了不同酸度H對氨基苯磺酸是體系中反應(yīng)生成重氮鹽的重要原料,其加入量對重氮鹽的生成及最后產(chǎn)物偶氮染料的生成有重要的影響。當(dāng)對氨基苯磺酸溶液用量在0.80mL以內(nèi)隨著其用量增加,吸光度差值呈現(xiàn)上升趨勢。當(dāng)用量在0.80~1.20mL之間時體系吸光度差值保持最大值且穩(wěn)定。因此選用1.00mL2g/L對氨基苯磺酸溶液作為體系的反應(yīng)條件之一。在反應(yīng)體系中ION-1-萘乙二胺鹽酸鹽用量對體系的有色偶氮染料的生成有直接的影響,結(jié)果表明,其用量在1.40~2.50mL之間吸光度差值基本保持穩(wěn)定。所以實驗選擇2.00mL0.5g/L的N-1-萘乙二胺鹽酸鹽溶液作為測試條件之一。作為美司鈉和鹽酸羥胺的氧化劑,當(dāng)KIO2.3偶聯(lián)反應(yīng)時間在加入N-1-萘乙二胺鹽酸鹽之前,體系會發(fā)生重氮化反應(yīng),實驗發(fā)現(xiàn)重氮化反應(yīng)溶液放置時間在45~60min內(nèi)體系吸光度差值基本保持穩(wěn)定。另外新生的對氨基苯磺酸重氮鹽與N-1-萘乙二胺鹽酸鹽進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng),反應(yīng)3min后體系吸光度差值保持不變,說明體系偶聯(lián)反應(yīng)速度比較快。因此,選擇重氮化時間為50min,偶聯(lián)反應(yīng)時間為5min。2.4干擾物質(zhì)的測定按實驗方法,考察了美司鈉制劑中可能遇到的一些物質(zhì)對體系的干擾,對40μg/mL的美司鈉,當(dāng)相對誤差小于等于±5%時,下列物質(zhì)無干擾(以倍數(shù)計):Al2.5美司鈉標(biāo)準(zhǔn)工作曲線a按實驗方法對美司鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行操作測定522nm處的吸光度差值,并繪制工作曲線,工作曲線的回歸方程為△A=0.0791ρ+0.0512,相關(guān)系數(shù)R為0.9927,美司鈉濃度在1.0~12mg/L范圍內(nèi)服從比耳定律,摩爾吸光系數(shù)為1.297×102.6u3000樣品溶液的配制批號為MS140604和MS140812的市售美司鈉注射劑,規(guī)格是0.4g/4mL。準(zhǔn)確移取MS140604注射液0.20mL于250mL容量瓶中,用蒸餾水定容至刻度,配成樣品溶液A,相當(dāng)于標(biāo)示質(zhì)量濃度80.0mg/L。對于MS140812注射液,準(zhǔn)確移取0.10mL于250mL容量瓶中,用蒸餾水定容,配成樣品溶液B,相當(dāng)于標(biāo)示質(zhì)量濃度40.0mg/L。取適量樣品A和樣品B按所述實驗方法進(jìn)行加標(biāo)回收實驗,分別平行操作測定6份,取平均值,所得結(jié)果見表1。2.7百分含量及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差的平均分別取適量樣品溶液A或樣品溶液B,以下按實驗方法操作平行測定6次,所得吸光度差值分別代入工作曲線的回歸方程,計算出測定值和相對標(biāo)示量的百分含量及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差的平均值(表2),批號為MS140604的樣品的相對標(biāo)示量平均值為100.8%,RSD為0.82%;批號為MS140812的樣品的相對標(biāo)示量平均值為99.8%,RSD為0.54%。采用HPLC法對上述兩樣品進(jìn)行測定,含量結(jié)果分別為100.1%和100.0%(規(guī)定應(yīng)為標(biāo)示量的90.0%~110.0%),說明本文所擬方法所測結(jié)果與HPLC法結(jié)果一致。3重氮化-偶聯(lián)反應(yīng)分光光度測定美司納基于兩步氧化還原反應(yīng)(碘酸根氧化美司鈉后剩余的碘酸根氧化鹽酸羥胺)產(chǎn)生的亞硝酸根與對氨基苯磺酸