(-)選擇題

A型題

1.判定基因結構異常最直接的方法是

A.PCR法

B.核酸分子雜交

C.DNA序列測定

D.RFLP分析

E.SSCP分析

2.不符合基因診斷特點的是

A.特異性強

B.靈敏度高

C.易于做出早期診斷

D.樣品獲取便利

E.檢測對象僅為自體基因

3.遺傳病基因診斷的最重要的前提是

A.了解患者的家族史

B.疾病表型與基因型關系已被闡明

C.了解相關基因的染色體定位

D.了解相關的基因克隆和功能分析等知識

E.進行個體的基因分型

4.若要采用Southern或Northern印跡方法分析某特定基因及其表達產物，需

要

A.制備固定在支持物上的組織或細胞

B.收集組織或細胞樣品，然后從中提取總DNA或RNA

C.利用PCR技術直接從標本中擴增出待分析的片段

D.收集組織或細胞樣品，然后從中提取蛋白質

E.收集培養細胞的上清液

5.目前基因診斷常用的分子雜交技術不包括哪一項

A.Southern印跡

B.Western印跡

C.Northern印跡

D.DNA芯片技術

E.等位基因特異性寡核甘酸分子雜交

6.SNP的實質是

A.堿基缺失

B.堿基插入

C.堿基替換

D.移碼突變

E.轉錄異常

7.DNA指紋的遺傳學基礎是

A.連鎖不平衡

B.DNA的多態性

C.串聯重復序列

D.MHC的限制性

E.MHC的多樣性

8.在對臨床病例進行基因診斷時，若遇到不能檢測出已知類型突變的情況，如

果表型明確指向某種疾病，適用下列哪一類篩查技術

A.PCR法

B.ASO分子雜交

C.反向點雜交

D.變性高效液相色譜（DHPLC）

E.STR拷貝異常的診斷

9.生殖細胞若發生基因結構突變可引起哪種疾病

A.腫瘤

B.高血壓

C.糖尿病

D.遺傳病

E.傳染病

10.PCR技術容易出現

A.假陰性結果

B.假陽性結果

C.靈敏度不高

D.適用不廣

E.操作繁冗

11.目前檢測血清中乙肝病毒最敏感的方法是

A.斑點雜交試驗

B.等位基因特異性寡核甘酸分子雜交

C.Southern印跡

D.PCR法

E.Northern印跡

12.核酸分子雜交的原理是

A.磷酸化

B.甲基化

C.抗原抗體結合

D.配體受體結合

E.堿基互補配對

13.目前法醫學中主要應用的基因診斷方法是

A.基于Southern印跡的操作

B.FISH檢測

C.基于PCR的DNA指紋技術

D.SSCP分析

E.變性高效液相色譜分析

B型題

A.確定被檢核酸在組織或細胞中的定位

B.同時對樣品中多種類核酸進行檢測和分析

C.檢測組織樣品中的RNA種類和含量

D.檢測細胞基因拷貝數的變化或者mRNA含量的變化

E.基因組DNA分析

14.Southern印跡法主要用于

15.Northern印跡法主要用于

16.斑點印跡雜交主要用于

17.組織原位雜交主要用于

18.DNA芯片技術可以

X型題

19.基因診斷的常用技術主要有

A.PCR-RFLP

B.Southern印跡

C.RNAi

D.ASO分子雜交

E.DHPLC

20.被稱為基因診斷間接方法的是下列哪幾種

A.RFLP連鎖分析

B.基于STR的微衛星分析

C.基于SNP的單倍型分析

D.Southern印跡法

E.PCR法

21.對基因連鎖分析描述正確的是

A.可能發生基因重組

B.檢測方法更為簡單可靠

C.結果更為直接和準確

D家系成員可能不夠完整

E.遺傳標志雜合性所帶信息量有限

22.目前用于基因診斷的遺傳標志主要包括下列哪些形式的DNA變異

A.單核甘酸變異

B.短串聯重復序列

C.限制性片段長度多態性

D.點突變

E.單核甘酸多態性

23.關于STR,下列說法不正確的有

A.STR大多位于基因組非編碼區

B.最常見的是三核甘酸重復

C.同卵雙生子的STR不同

D,是繼RFLP之后第二代DNA遺傳標志

E.重復順序最多的是(CA)n、(GT)n

24.基因診斷主要涉及哪些方面的技術

A.準確獲得足夠量樣品的技術

B.轉基因技術

C.基因敲除技術

D.對樣品進行結構或含量分析的技術

E.基因沉默技術

25.符合RFLP技術的選項有

A.目前主要用于多基因遺傳病的基因診斷

B.需進行足夠數量的家系成員分析

C.重組的發生不影響診斷的準確性

D.被利用的限制性位點雜合率較高，可以提供基因連鎖的有用信息

E.得名于核酸外切酶消化DNA分子產生不同長度的片段

26.符合DNA芯片技術的有哪些選項

A.實質是一種基于RDB的技術

B.高效、高通量且操作易于自動化

C.一次集成數量巨大的基因探針

D.代表基因診斷的發展趨勢

E.假陽性率比較高

27.以核酸分子雜交為基礎的基因診斷方法有

A.DNA芯片

B.Northern印跡

C.基因序列測定

D.等位基因特異寡核甘酸探針雜交法

E.PCR法

28.結構基因突變主要包括哪些

A.基因重排

B.基因擴增

C.點突變

D.基因缺失

E.基因表達異常

29.符合SSCP（單鏈構象多態性分析）的選項有

A.其靈敏度隨著檢測序列的增長而增大

B.檢測對象長度以不超過300nt核甘酸為宜

C.其檢測準確率高于直接的核酸序列測定

D.檢測對象可以是DNA分子

E.檢測對象可以是RNA分子

30.mRNA的相對定量分析方法主要包括

A.紫外分光光度法

B.點雜交

C.狹線雜交

D.RT-PCR法

E.Northern印跡法

(二)名詞解釋

1.基因診斷(genediagnosis)

2.連鎖分析(linkageanalysis)

3.限制性片段長度多態性(restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP)

4.單核甘酸多態性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)

5.核酸分子雜交(nucleicacidmolecularhybridization)

6.連鎖不平衡(linkagedisequilibrium)

7.聚合酶鏈反應(polymerasechainreaction,PCR)

8.擴增片段長度多態性(amplifiedfragmentlengthpolymorphism,AFLP)

9.短串聯重復序列(shorttandemrepeat,STR)

10.反向點雜交(reversedotblot,RDB)

11.產前基因診斷(prenataldiagnosis)

12.植入前遺傳診斷(preimplantationgeneticdiagnosis,PGD)

（三）簡答題

1.請簡述基因診斷的基本流程。

2.簡述基因診斷的一般內容。

3.請簡述用于連鎖分析的遺傳標志需具備的特點。

4.請簡述遺傳分析中用于直接診斷的代表性技術有哪些。

5.試述內源基因結構突變的主要類型以及內源基因結構突變所致的疾病。

（四）論述題

1.試述基因診斷的特點及基本技術。

2.試述PCR技術的原理、步驟及其應用。

3.試述基因診斷在醫學中的應用。

參考答案與提示

（-）選擇題

題答案考察的知識點題號答案考察的知識點

號

1C基因結構的特異性分析2E基因診斷的特點

3B基因診斷的前提4B獲得待測樣品的技術原理

5B核酸分子雜交技術6CSNP（單核昔酸多態性）

7BDNA指紋8D變性高效液相色譜分析

9D內源基因結構突變10BPCR技術

11D感染性疾病的基因診斷12E核酸分子雜交的原理

13C法醫學基因診斷方法14ESouthern印跡法

15CNorthern印跡法16D斑點印跡雜交

17A組織原位雜交18BDNA芯片

19ABDE基因診斷的常用技術20ABC間接診斷方法

21ADE基因連鎖分析22ABCE基因診斷的遺傳標志

23BCSTR24AD基因表達產物定性定量分

析

25BDRFLP26ABCDDNA芯片

27ABD基因診斷方法28ABCD內源基因的結構突變

29BDE單鏈構象多態性分析30BCDEmRNA相對定量

（二）名詞解釋

1.用分子生物學技術針對DNA和/或mRNA進行定性、定量分析，通過分析這些

遺傳信息分子的序列，從而在分子水平上確定疾病的病因，具高度特異性。

2.利用與致病基因相連的某些基因，作為遺傳標志，通過鑒定遺傳標志的存在

而判斷個體是否帶有致病基因。本法無需更多了解致病基因結構及其分子機

制，屬于間接診斷。

3.指DNA序列上發生某個變異（如單堿基置換、少數堿基缺失或插入）后獲得

或丟失了某一限制性識別位點，使DNA限制性酶解片段的長度發生變化，在

人群中形成兩種或兩種以上的限制性類型，可以用作遺傳標志。

4.指基因組內特定核甘酸位置上存在兩種不同的堿基，其中最少的一種在群體

中的頻率不小于DLSNP是一種最常見的可遺傳變異，是第三代遺傳標志物。

5.利用堿基互補配對，以已知的核酸片段作為探針，檢測樣本中是否存在及有

多少與其互補的核酸序列，這是基因診斷最基本的方法，又稱為核酸分子探

針技術。

6.在人群中，某一RFLP或者主要存在于具有某一疾病基因的染色體上；或者主

要存在于正常染色體上，這種非隨機的遺傳現象稱為連鎖不平衡。

7.一種在體外利用酶促反應獲得特異序列的基因組DNA片段或cDNA的專門技術。

根據樣品來源不同分為基因組PCR和反轉錄PCR兩類。

8.PCR擴增致病基因內部或兩側與其緊密連鎖的特定STR,電泳檢測擴增產物長

度的多態性，從而快速作出診斷。

9.指一種2-4bp的核心序列重復排列，又稱為微衛星（microsatellite）o在

人類基因組中分布廣泛，最常見的是二核甘酸重復，其次是三、四核甘酸重

復。

10.是改進的等位基因特異性寡核甘酸（ASO）分子雜交技術。將針對各種突變

和正常序列的ASO探針固定在雜交膜上，而將原來在AS0雜交體系中固定在

膜上的PCR產物改為液相進行雜交，從而能夠同時檢測多種突變。

11.通過對胎兒羊水、絨毛或臍帶血等來源的DNA進行基因型分析或染色體核型

分析，達到診斷患病胎兒的目的，主要診斷對象是人類染色體病和單基因遺

傳病。

12.指對配子或移入宮腔之前的胚胎進行快速的遺傳分析，篩選出健康配子或胚

胎，以避免異常妊娠的一項技術。

(三)簡答題

1.基因診斷的基本流程包括

(1)樣品的核酸抽提。

(2)目的序列的擴增。

(3)核酸分子雜交。

(4)信號檢測。

2.基因診斷的一般內容包括

(1)檢測個體的基因序列的特征。

(2)基因突變分析。

(3)測定基因的拷貝數。

(4)基因表達產物分析。

(5)檢測是否存在外源基因等。

3.用于連鎖分析的遺傳標志，需要具備三個特點

(1)不同個體之間存在高度的多態性。

(2)需要獲得足夠數量的家系成員樣本，以區分和確定遺傳標志與致病基

因之間的連鎖關系。

(3)遺傳標志與致病基因相連鎖，而且兩者之間的距離越小越好，以盡量

排除減數分裂中遺傳標志與致病基因之間出現重組或交換而誤診。

4.用于遺傳分析的代表性直接診斷技術主要有

(1)基因缺失或插入的診斷

1)Southern印跡法

2)PCR法

(2)點突變的診斷

1)等位基因特異性寡核昔酸分子雜交

2)反向點雜交

3)變性高效液相色譜

(3)STR拷貝異常的診斷。

5.

(1)內源基因結構突變包括點突變、缺失或插入突變、染色體易位、基因

重排、基因擴增等。

(2)突變若發生在生殖細胞，可引起各種遺傳性疾病；若發生在他細胞，

可導致腫瘤、心血管疾病等。

(四)論述題

1.

(1)基因診斷的特點為特異性高；靈敏度高；穩定性高；診斷范圍廣,

適用性強；臨床應用前景好。

(2)常用技術包括

1)核酸分子雜交技術，其方法主要有斑點印跡、Southern印跡、

Northern印跡、原位雜交、等位基因特異寡核甘酸探針雜交；

2)限制性內切酶酶譜分析法；

3)DNA限制性片段長度多態性(RFLP)分析；

4)PCR技術；

5)DNA芯片；

6)基因測序。

2.

(1)PCR技術實際上是在模板DNA,引物和4種脫氧核糖核甘三磷酸存在的條

件下依賴于耐熱DNA聚合酶的酶促合成反應。其原理主要有幾個方面

1)DNA合成需要引物，兩條互補鏈上都需要引物；

2)DNA的復性與變性的原理；

3)PCR技術的特異性取決于引物和模板DNA結合的特異性。

4)耐高溫的DNA聚合酶的發現和運用。

(2)PCR全過程包括三個基本步驟，即