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文檔簡介
(優(yōu)選)艾滋病樣品采集處理當(dāng)前第1頁\共有21頁\編于星期六\10點樣品的采集艾滋病檢測最常用的樣品是血液,包括血清、血漿和全血。唾液或尿液有時也可作為測試樣品。常用樣品的采集方法如下:(一)血清樣品采集:用一次性注射器(或真空采血管)抽出一定量靜脈血,一般為5mL,放入一次性塑料試管,室溫下自然放置1-2小時,待血液凝固和血塊收縮后再用3000rpm離心15分鐘,吸出血清備用。當(dāng)前第2頁\共有21頁\編于星期六\10點(二)抗凝血樣品采集:用加有抗凝劑的真空采血管或用一次性注射器抽取靜脈血,轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管,反復(fù)輕搖,分離血漿和血細胞備用。應(yīng)根據(jù)實驗要求選用適當(dāng)?shù)目鼓齽?,如CD4+/CD8+T淋巴細胞測定可選用K3EDTA或肝素或枸櫞酸鈉,HIV病毒分離、核酸定性/定量檢測可選用K3EDTA或枸櫞酸鈉。因為肝素是Taq酶的強抑制劑,會使核酸檢測出現(xiàn)假陰性結(jié)果。如需進行病毒RNA測定,采集的抗凝血應(yīng)在4-8小時以內(nèi)分離血漿。
當(dāng)前第3頁\共有21頁\編于星期六\10點(三)采樣注意事項1、采集樣品應(yīng)按臨床采血技術(shù)規(guī)范操作(試劑盒說明書有特殊要求除外)。2、采集標(biāo)本時應(yīng)注意安全,直接接觸HIV感染者或艾滋病病人血液和體液的操作應(yīng)戴雙層乳膠手套。建議采用真空采血管及蝶形針具,以免直接接觸血液。3、進行靜脈抽血時,一定要保證足夠的光線,而且采血人員應(yīng)背靠墻壁,后面不能有人員走動。以防抽血時碰撞,造成意外刺傷。當(dāng)前第4頁\共有21頁\編于星期六\10點4、不要把用過的銳利器具(針頭)傳遞給別人;5、對用過的針頭不要用手去重新蓋上針套;不要用手從一次性注射器上移去針頭;不要用手彎曲、折斷或處置用過的針頭;6、用過的注射器及針頭直接放到可防止銳利器物刺穿的專門容器中,統(tǒng)一進行高溫消毒,115℃,30分鐘,然后深埋處理;當(dāng)前第5頁\共有21頁\編于星期六\10點7、其它廢棄物(酒精棉球、手套)要在作高溫焚燒處理;8、不要將銳利廢棄物(針頭)同其它廢棄物(酒精棉球)混在一起;9、不要將銳利廢棄物放在兒童可以接觸到的地方;10、用肥皂和水認真洗手;11、采樣人員要帶乳膠手套、穿隔離衣,避免直接接觸體液;12、處理廢棄物的人必須戴厚質(zhì)乳膠手套;當(dāng)前第6頁\共有21頁\編于星期六\10點
樣品的保存
用于抗體檢測的血清或血漿樣品應(yīng)存放于-20℃以下,短期(1周)內(nèi)進行檢測的樣品可存放于2-8℃。
用于抗原和核酸檢測的血漿和血細胞樣品應(yīng)凍存于-20℃以下,進行病毒RNA檢測的樣品如需保存3個月以上應(yīng)置于-80℃。用于CD4+/CD8+T淋巴細胞測定的樣品不能長期保存,樣品采集時間超過48h則不可檢測。當(dāng)前第7頁\共有21頁\編于星期六\10點樣品的運送
實驗室間傳遞的樣品應(yīng)為血清或血漿,除特殊情況外一般不運送全血。應(yīng)采用WHO提出的三級包裝系統(tǒng):第一層容器:裝樣品,要求防滲漏。樣品應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi),試管上應(yīng)有明顯的標(biāo)記,標(biāo)明樣品的編號或受檢者姓名、種類和采集時間。在試管的周圍應(yīng)墊有緩沖吸水材料,以免碰碎。隨樣品應(yīng)附有送檢單,送檢單應(yīng)與樣品分開放置。當(dāng)前第8頁\共有21頁\編于星期六\10點樣品的運送
第二層容器:要求耐受性好、防滲漏、容納并保護第一層容器,可以裝若干個第一層容器。將試管裝入專用帶蓋的容器內(nèi),容器的材料要易于消毒處理。
第三層容器:放在一個運輸用外層包裝內(nèi),應(yīng)易于消毒。在第三層容器外面要貼標(biāo)簽(數(shù)量,收、發(fā)件人)。當(dāng)前第9頁\共有21頁\編于星期六\10點當(dāng)前第10頁\共有21頁\編于星期六\10點當(dāng)前第11頁\共有21頁\編于星期六\10點三層包裝的優(yōu)點:減少包裝受損和泄漏的可能性減少可能造成傳染的暴露提高運輸效率當(dāng)前第12頁\共有21頁\編于星期六\10點樣品的運送血清和血漿樣品應(yīng)在28℃條件下由專人運送。用于CD4+/CD8+T淋巴細胞測定的樣品應(yīng)在室溫下1823℃運送。每一包裝的體積以不超過50ml為宜。運送感染性材料必須有記錄。如分離血漿仍有困難,可直接將抗凝血-20℃以下凍存,采用冰壺冷藏運輸,避免凍融。
當(dāng)前第13頁\共有21頁\編于星期六\10點樣品的運送特殊情況下如需對個別樣品進行復(fù)測,可以用特快專遞形式投寄,但必須按三級包裝系統(tǒng)將盛樣品的試管包扎好,避免使用玻璃容器,以保證不會破碎和溢漏。
當(dāng)前第14頁\共有21頁\編于星期六\10點注意事項:樣品管應(yīng)為螺旋口的塑料管(1.5ml),檢查有無破損,將螺旋蓋旋緊,防止樣品滲漏。血清樣品量至少應(yīng)大于500μl。禁止使用扳蓋式Eppendorf管。
建議第一層:螺旋口的塑料管(1.5ml)
第二層:血清盒。5份或5份以下可以使用一次性乳膠手套(每個手指放一個)第三層:冰瓶(內(nèi)置冰塊)
禁止第二層使用封口塑料袋
送檢單內(nèi)容應(yīng)填寫完備,包括婚姻狀況和文化程度等。詳見附表2。其中送檢人群一欄基本參照附表4人群分類填寫。其中獻血員指“無償獻血員”。有償獻血員歸入“有償供血(漿)者”。當(dāng)前第15頁\共有21頁\編于星期六\10點注意事項送檢標(biāo)本應(yīng)使用真實姓名和地址,不采用匿名制。標(biāo)本采集時應(yīng)盡量避免溶血,因紅細胞破裂可釋放過氧化物酶活性物質(zhì)干擾立可讀方法的結(jié)果,可造成假陽性;長菌的標(biāo)本同樣的道理易產(chǎn)生假陽性??鼓煌耆臉?biāo)本因纖維蛋白元的干擾而造成假陽性,建議盡量不用抗凝血尤其是用肝素抗凝劑。標(biāo)本在冰箱中保存時間過長易導(dǎo)致血清IgG聚合,使間接法的試劑本底加深,一般血清置4℃冰箱5天內(nèi)完成測試。
當(dāng)前第16頁\共有21頁\編于星期六\10點樣品的接收含有感染性樣品的包裹必須在具有處理感染源設(shè)備的實驗室內(nèi)由經(jīng)過培訓(xùn)的、穿戴防護衣的工作人員打開,用后的包裹應(yīng)進行消毒。核對樣品與送檢單,檢查樣品管有無破損和溢漏。如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的樣品移出,對樣品管和盛器消毒,同時報告有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)和專家。
當(dāng)前第17頁\共有21頁\編于星期六\10點樣品的接收檢查樣品的狀況,記錄有無嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況。如果污染過重或者認為樣品不能被接受,則應(yīng)將樣品安全廢棄。并要將樣品情況立即通知送樣人。打開標(biāo)本容器時要小心,以防內(nèi)容物潑濺。樣品處理時若內(nèi)容物有可能濺出,則應(yīng)在生物安全柜中戴手套進行。同時應(yīng)戴口罩、防護眼鏡,以防皮膚或粘膜污染。當(dāng)前第18頁\共有21頁\編于星期六\10點樣品的接收因特殊臨床治療導(dǎo)致自發(fā)熒光的樣品不可用于熒光方法測試。
接收樣品時應(yīng)填寫樣品接收單。并注明樣品狀況,送檢單有無缺項,確認后交接雙方簽字,一式兩份。當(dāng)前第19頁\共有21頁\編于星期六\10點初篩陽性復(fù)檢單填寫注意事項送檢標(biāo)本量不得少于300微升,送檢標(biāo)本時必須同時附有送檢單。送檢單應(yīng)采用省疾病預(yù)防控制中心統(tǒng)一下發(fā)的送檢單格式,包括婚姻狀況和文化程度。送檢樣本管壁上必須有受檢人的姓名,并與送檢單上的姓名保持完全一致。對于確實無法獲得姓名的特殊標(biāo)本,樣本管上的編號必須與送檢單上的編號一致。
當(dāng)前第20頁\共有21頁\編于星期六\10點初篩陽性復(fù)檢單填寫注意事項送檢單上的各項信息要盡可能詳細,要有姓名、性別、年齡(不得擅自改為出生年月)、地址、送檢人群、國籍或民族、職業(yè)、婚姻狀況、文化程度。特別是S/CO≥6的強陽性
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