學必求其心得，業必貴于專精學必求其心得，業必貴于專精PAGE1學必求其心得，業必貴于專精PAGE第一節基因工程的原理（時間：30分鐘滿分：50分）考查知識點及角度難度及題號基礎中檔稍難基因工程的基本工具1、2、47基因工程的一般程序3、56、89一、選擇題(共7小題，每小題4分，共28分）1．下列關于限制酶的說法正確的是 ()。A．限制酶廣泛存在于各種生物中,微生物中很少分布B．一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列C．不同的限制酶切割DNA后都會形成黏性末端D．限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氫鍵解析此題主要考查限制酶的有關知識.限制酶主要是從原核生物中分離純化出來的，并不是廣泛存在于各種生物中;一種限制酶能識別雙鏈DNA的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，DNA分子經限制酶切割后會形成黏性末端或平末端.答案B2．用基因工程技術可使大腸桿菌合成人的蛋白質.下列敘述不正確的是()。A．常用相同的限制性內切酶處理目的基因和質粒B．DNA連接酶和RNA聚合酶是構建重組質粒必需的工具酶C．可用含抗生素的培養基檢測大腸桿菌中是否導入了重組質粒D．導入大腸桿菌的目的基因不一定能成功表達解析基因工程中限制性內切酶和DNA連接酶是構建重組質粒必需的工具酶；質粒作為載體必須具有標記基因；導入的目的基因不一定能夠表達成功,還要進行修飾或處理。答案B3．利用外源基因在受體細胞中表達，可生產人類所需要的產品.下列選項中能說明目的基因完成了在受體細胞中表達的是 ()。A．棉花二倍體細胞中檢測到細菌的抗蟲基因B．大腸桿菌中檢測到人胰島素基因及mRNAC．山羊乳腺細胞中檢測到人生長激素DNA序列D．酵母菌細胞中提取到人干擾素蛋白解析在基因工程中，判斷外源基因是否“表達”常用的方法是看有無目的基因產物產生.答案D4．DNA連接酶的重要功能是 (）.A．DNA復制時母鏈與子鏈之間形成氫鍵B．黏性末端互補堿基之間形成氫鍵C．將兩DNA片段之間的縫隙連接起來D．A、B、C都不正確解析DNA連接酶的作用是恢復被限制酶切開了的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。答案C5．要檢測目的基因是否成功插入了受體DNA中,需要用基因探針,基因探針是指 ()。A．用于檢測疾病的醫療器械B．用放射性同位素或熒光分子等標記的DNA分子C．合成β。球蛋白的DNAD．合成苯丙羥化酶的DNA片段解析基因探針是指已知的DNA片段(實際上是單鏈),為便于對雜交的結果進行檢測，需要對其作放射性同位素或熒光分子標記。答案B6．下列有關基因工程的敘述正確的是 ()。A．限制酶只在獲得目的基因時才用B．重組載體的構建是在細胞內完成的C．質粒都可作為載體D．蛋白質的結構可為合成目的基因提供資料解析如果以質粒為載體,首先要用一定的限制酶切割質粒，使質粒出現一個切口，露出黏性末端，然后用同一種限制酶切割目的基因，使其產生相同的黏性末端,所以載體的切割也要用到限制酶.重組質粒的形成是在生物體外完成的。只有具備符合相關條件的質粒才能作為載體。答案D7．關于DNA重組技術中基本工具的敘述，正確的是 (）。A．限制性內切酶的作用部位是特定的兩個核苷酸之間的氫鍵B．目的基因經限制性內切酶切割后一定會形成黏性末端C．DNA連接酶用來連接兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵D．質粒DNA分子上一定含有抗四環素基因解析限制酶的作用部位是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵，而不是氫鍵。被限制酶切開后的DNA可以形成黏性末端，也可能形成平末端。有的質粒上可能含有一些其他抗性基因。答案C二、非選擇題（共2小題，共22分)8．（10分）為擴大可耕地面積，增加糧食產量，黃河三角洲等鹽堿地的開發利用備受關注。我國科學家應用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。(1)獲得耐鹽基因后，構建重組DNA分子所用的限制性內切酶作用于圖中的________處,DNA連接酶作用于____________處(填a或b）。(2)將重組DNA分子導入水稻受體細胞的常用方法有農桿菌轉化法和________法。(3）為了確定耐鹽轉基因水稻是否培育成功,既要用放射性同位素標記的____________作探針進行分子雜交檢測，又要用____________的方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性.解析本題綜合考查了基因工程的工具和基因工程的一般程序.限制性內切酶的切點選擇很嚴格，只會切斷某段特定DNA序列中的某個特定位點——磷酸二酯鍵，而DNA連接酶可以將該鍵連接起來。重組DNA分子導入水稻受體細胞的常用方法除了農桿菌轉化法外,還有基因槍法和花粉管通道法.轉基因是否成功，可測定是否有轉基因產物產生，也可通過改變條件觀察植物性狀的變化來加以確定。答案(1）aa(2）基因槍(或花粉管通道）（3)耐鹽基因（目的基因）一定濃度鹽水澆灌（移栽到鹽堿地中)9．(12分)（實際應用題）下圖為重組DNA分子構建的示意圖，回答以下問題：（1)圖中,數字1、2、3、4代表______________,過程A、B和C所需要的工具分別是______________、______________和____________。(2）寫出結構5、6和7的名稱。5．________;6。________;7。________。(3)進行A過程和B過程使用的工具必須是___________________________，它們均從________中分離和提純。（4)圖中整個操作環境是 （）.A．細胞內B．細胞外C．細胞內和細胞外（5)結構5主要來自于________(生物),在基因工程中所起的作用是____________________________________________________________________________.解析根據圖解可知,結構5、6、7分別代表質粒、含有目的基因的DNA片段和重組質粒，過程A和B表示用同一種限制酶對質粒和外源DNA片段進行切割。在此判斷的基礎上，對三種基本工具的相關問題做出解答。答案（1)限制酶的切割位點限制酶限制酶DNA連接酶(2）質粒含有目的基因的外源DNA片段重組質粒（3）同一種限制酶原核生