食品衛(wèi)生六沙門氏菌檢驗(yàn)二第1頁/共12頁一、實(shí)驗(yàn)器材（每組的量，由班長分發(fā)）賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基試管：5支/組對照培養(yǎng)基試管（不加賴氨酸）：1支/組尿素瓊脂培養(yǎng)基斜面：3支/組蛋白胨水培養(yǎng)基試管：6支/組

余下的作為空白實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：（尿素）瓊脂培養(yǎng)基融化后冷至50℃～55℃，加入經(jīng)過濾除菌的尿素溶液（10ml尿素溶液/100ml培養(yǎng)基），分裝于滅菌試管內(nèi)（約3～4ml/管），放成斜面。第2頁/共12頁二、實(shí)驗(yàn)步驟首先標(biāo)記挑取的可疑菌落產(chǎn)H2S是“＋”還是

“

－

”1.賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)挑取可疑菌落，接種賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基試管（包括對照培養(yǎng)基），每人接種一支，36℃±1℃，培養(yǎng)18h～24h2.尿素酶試驗(yàn)挑取可疑菌落，接種三支尿素瓊脂斜面，36℃±1℃，培養(yǎng)24h3.吲哚試驗(yàn)挑取可疑菌落，蛋白胨水試管每人接種一支，36℃±1℃，培養(yǎng)1d～2d第3頁/共12頁三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)賴氨酸脫羧酶陽性者由于產(chǎn)堿，培養(yǎng)基應(yīng)呈紫色；陰性者因葡萄糖產(chǎn)酸，培養(yǎng)基變?yōu)辄S色。對照管應(yīng)為黃色2.尿素酶試驗(yàn)?zāi)蛩孛戈栃哉哂捎诋a(chǎn)堿，培養(yǎng)基變?yōu)榧t色。3.吲哚試驗(yàn)（蛋白胨水試管）加入數(shù)滴乙醚，搖動，靜置；沿管壁徐徐加入歐-波試劑（吲哚試劑）數(shù)滴，在乙醚和培養(yǎng)物之間產(chǎn)生紅色環(huán)狀物為陽性反應(yīng)。第4頁/共12頁第5頁/共12頁第6頁/共12頁

反應(yīng)序號A2：補(bǔ)做甘露醇和山梨醇試驗(yàn)，按下表判定結(jié)果：反應(yīng)序號Bl：補(bǔ)做ONPG。若ONPG（＋），為大腸埃希氏菌，若ONPG（－），為沙門氏菌。同時，沙門氏菌應(yīng)為賴氨酸（＋），但甲型副傷寒沙門氏菌為賴氨酸（－）。7第7頁/共12頁賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)從左往右依次為對照、陽性（紫）、陰性（黃）沙門氏菌常用生化試驗(yàn)第8頁/共12頁三糖鐵TSI沙門氏菌常用生化試驗(yàn)UreaseTest尿素酶試驗(yàn)：urea尿素ammonia氨第9頁/共12頁Indoltest吲哚試驗(yàn)tryptophan色氨酸→indole吲哚→玫瑰吲哚↑Kovac'sreagent吲哚試劑

（對二甲基氨基苯甲醛）-+E.coli蛋白胨水試管第10頁/共12頁中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)GB4789.4-2003凍肉、蛋品、乳品及其他加工食品鮮肉、鮮蛋、鮮乳或其他未經(jīng)加工的食品前增菌法25g＋BPW225mL36℃±1℃一般4h，干蛋品18h～24h10mL＋MM（或TTB）100mL10mL＋SC100mL直接增菌法25g＋滅菌生理鹽水25mL檢樣勻液25mL＋MM（或TTB）100mL檢樣勻液25mL

＋SC100mLBSDHL（或HE、WS、SS）TSI（排除A/AH2S－結(jié)果），靛基質(zhì)，尿素，KCN，賴氨酸H2S＋靛－尿－KCN－賴＋（或一項不符）沙門氏菌血清學(xué)試驗(yàn)甘露醇山梨醇H2S＋靛＋尿－KCN－賴＋H2S－靛－尿－KCN－賴＋/－非如左述的各種反應(yīng)結(jié)果沙門氏菌血清學(xué)試驗(yàn)ONPG－沙門氏菌非沙門氏菌42℃18h～24h36℃±1℃18h～24h42℃18h～24h36℃±1℃18h～24h