發酵染菌及其防治工業發酵染菌和其防治專家講座第1頁染菌對發酵影響1發酵異?，F象及染菌原因分析2雜菌污染路徑和防治4雜菌污染判斷與處理3發酵染菌及其防治工業發酵染菌和其防治專家講座第2頁1、什么叫發酵染菌?

在發酵過程中，生產菌以外其它微生物侵入了發酵液，從而使發酵過程失去了真正意義上純種培養。

菌種培養過程操作不妥培養基滅菌不徹底發酵設備（如發酵罐、管道）密封不嚴空氣除菌不凈2、造成發酵染菌可能路徑有哪些？工業發酵染菌和其防治專家講座第3頁

染菌仍是發酵工業致命傷。輕者影響產率、產物提取收得率和產品質量；嚴重者造成生產失敗，浪費大量原材料，造成嚴重經濟損失，而且擾亂生產秩序，破壞生產計劃。碰到連續染菌，尤其是又找不到染菌原因，未有防治辦法時，往往會影響人們情緒和生產主動性，造成無法估量危害。3、染菌會對發酵工業造成哪些不良影響？工業發酵染菌和其防治專家講座第4頁4、在現有科學條件下能否做到徹底不染菌？

據報道，國外抗生素發酵平均染菌率為2%-5%，國內抗生素發酵、青霉素發酵染菌率2%，鏈霉素、紅霉素和四環素發酵染菌率約為5%，谷氨酸發酵噬菌體感染率1-2%。

當前要做是要提升生產技術水平，強化生產過程管理，把握好各個易染菌步驟，盡可能預防發酵染菌發生；而且一旦發生染菌，要能盡快找出其污染原因，并采取對應有效辦法，把發酵染菌造成損失降低到最小。5、既然染菌不可防止，哪我們應該怎樣做？工業發酵染菌和其防治專家講座第5頁污染雜菌不一樣種類1不一樣階段染菌2不一樣染菌原因3不一樣染菌程度4染菌對發酵影響工業發酵染菌和其防治專家講座第6頁不一樣雜菌種類對發酵影響

在抗生素發酵過程中，青霉素發酵污染細短產氣桿菌比粗大桿菌危害更大;鏈霉素發酵污染細短桿菌、假單孢桿菌和產氣桿菌比污染粗大桿菌更有危害；谷氨酸發酵最怕噬菌體污染。工業發酵染菌和其防治專家講座第7頁發酵過程危害最大雜菌種類青霉素發酵鏈霉素發酵四環素發酵谷氨酸發酵檸檬酸發酵細短產氣桿菌細短桿菌、假單孢桿菌雙球菌、芽孢桿菌、莢膜桿菌噬菌體青霉菌不一樣雜菌種類對發酵影響

工業發酵染菌和其防治專家講座第8頁對整個發酵過程危害極大。嚴重干擾生產菌生長繁殖。干擾生產菌代謝，影響產物生成。影響相對較小。不一樣生產階段染菌對發酵影響種子培養期染菌發酵后期染菌發酵前期染菌發酵中期染菌工業發酵染菌和其防治專家講座第9頁將造成染菌范圍不停擴大，使生產蒙受重大損失。使發酵大面積染菌。普通不具延續性，使單個（批）發酵罐發酵失敗。染菌幾率較大。不一樣染菌原因對發酵影響種子帶菌設備滲漏空氣帶菌培養基或設備滅菌不徹底工業發酵染菌和其防治專家講座第10頁

染菌程度越嚴重，即在發酵罐內雜菌數量就多，對發酵危害也就越大。但當生產菌在發酵過程已經有大量繁殖，并已在發酵液中占優勢，假如污染極少許雜菌，此時對發酵不會帶來太大影響。不一樣染菌程度對發酵影響工業發酵染菌和其防治專家講座第11頁發酵異?，F象及染菌原因分析溶解氧異常改變1排出CO2異常改變2設備滲漏方面原因分析3空氣除菌不凈方面原因分析4染菌原因分析工業發酵染菌和其防治專家講座第12頁溶解氧異常改變

當雜菌是好氣性微生物時，溶解氧改變是在較短時間內下降，直至靠近于零，且在長時間內不能回升；

當雜菌是非好氣性微生物，而生產菌因為受污染而抑制生長，使耗氧量降低，溶解氧升高。工業發酵染菌和其防治專家講座第13頁

好氣性發酵排出氣體中CO2含量與糖代謝相關。對于特定發酵過程，工藝確定后，排出氣體中CO2

含量改變是有規律。染菌后，培養基中糖消耗發生改變，引發排氣中CO2含量異常改變，如雜菌污染時，糖耗加緊，CO2含量含量增加，噬菌體污染后，糖耗減慢，CO2含量降低。所以，可依據CO2含量異常改變判斷染菌。排氣CO2異常改變工業發酵染菌和其防治專家講座第14頁

還能夠依據其它一些異常現象，如菌體生長不良、PH值異常改變、發酵過程中泡沫異常增多、發酵液顏色異常改變、代謝產物含量異常下跌、發酵周期異常拖長、發酵液粘度異常增加等判斷染菌。其它異常現象工業發酵染菌和其防治專家講座第15頁

總結發酵染菌經驗教訓，主動采取必要辦法，預防生產過程中再次染菌，把發酵染菌控制在生產前。防患于未然是發酵生產過程中控制染菌污染最主要辦法。分析目標染菌原因分析工業發酵染菌和其防治專家講座第16頁

從兩表中能夠看出，因為不一樣廠家生產工藝、技術管理水平好壞不一樣，而使各種染菌原因百分率有所不一樣，其中尤以設備滲漏和空氣帶菌而染菌較為普遍且嚴重。值得注意是，不明原因染菌分別達20.0%和35.13%。這表明，當前分析染菌原因水平還有待于深入提升。

工業發酵染菌和其防治專家講座第17頁雜菌種類染菌原因分析耐熱芽孢桿菌球菌、無芽孢桿菌等不耐熱菌淺綠色菌落雜菌霉菌酵母菌填表

培養基或設備滅菌不徹底

種子帶菌/空氣除菌不徹底設備或冷卻盤管滲漏無菌室滅菌不徹底或無菌操作不妥糖液滅菌不徹底或糖液放置時間過長依據染上雜菌種類能夠初步判斷染菌原因工業發酵染菌和其防治專家講座第18頁

因為發酵罐需要經受溫度升降改變，使用久了難免會出現夾層盤管細微腐蝕而出現滲漏，造成染菌發生。滲漏原因

當設備滲漏時，往往每批染菌發生時間逐步提前。染菌特點設備滲漏方面原因工業發酵染菌和其防治專家講座第19頁空氣過濾系統方面原因

進風口、生產環境、空氣過濾器（濾芯滅菌要徹底，過濾介質要定時檢驗更換）。原因分析

空氣過濾系統帶菌會使發酵罐批批染菌、罐罐染菌，此時就要對空氣過濾系統進行無菌樣檢測。染菌特點工業發酵染菌和其防治專家講座第20頁雜菌污染判斷及處理染菌檢驗和判斷雜菌污染挽救及處理工業發酵染菌和其防治專家講座第21頁染菌檢驗和判斷

發酵過程是否染菌應以無菌試驗結果為依據進行判斷。在發酵生產過程中，怎樣及早發覺雜菌污染并及時采取辦法加以處理，是防止染菌造成嚴重經濟損失主要伎倆。所以，生產上要求能準確、快速檢驗出雜菌污染。當前慣用于檢驗是否染菌無菌試驗方法主要有以下四種：檢驗判斷目標意義工業發酵染菌和其防治專家講座第22頁無菌試驗方法1、顯微鏡檢驗法（鏡檢法）2、肉湯培養法3、平板劃線培養或斜面培養檢驗法4、發酵過程異?，F象觀察法

無菌試驗時，假如肉湯連續三次發生變色反應（由紅色變為黃色）或產生混濁，或平板培養連續三次發覺有異常菌落出現，即可判斷為染菌。工業發酵染菌和其防治專家講座第23頁注意事項1、無菌試驗肉湯或培養平板應保留并觀察至本批（罐）放罐后12h，確認為無雜菌后才能棄去。2、無菌試驗期間應每6h觀察一次無菌試驗樣品，方便能及早發覺染菌。

無菌試驗方法工業發酵染菌和其防治專家講座第24頁處理：應經滅菌后棄之，并對種子罐、管道等進行仔細檢驗和徹底滅菌處理：營養成份消耗不多，應快速重新滅菌；另處，補充必要營養成份，重新接種進行發酵。雜菌污染挽救及處理種子培養期染菌發酵前期染菌工業發酵染菌和其防治專家講座第25頁處理：能夠加入適當殺菌劑或抗生素以及正常發酵液，以抑制雜菌生長速度；產品含量若達一定值，只要明確是染菌也可放罐。處理：空罐加熱滅菌后至120℃以上、30min后，才能使用。也可用甲醛熏蒸或甲醛溶液浸泡12h以上等方法進行處理。發酵后對設備處理發酵中、后期染菌工業發酵染菌和其防治專家講座第26頁雜菌污染路徑和防治種子帶菌及其防治空氣帶菌及其防治設備滲漏或“死角”造成染菌及其防治生產原料滅菌不徹底造成染菌操作不妥造成染菌及其防治噬菌體染菌及其防治工業發酵染菌和其防治專家講座第27頁原因分析種子帶菌及其防治種子保留種子培養基種子換代及接種種子培養設備工業發酵染菌和其防治專家講座第28頁1．檢驗發生污染所用保藏菌種。2．檢驗發生污染種子罐接種所用三角瓶等器皿。3．檢驗對三角瓶、棉花塞、培養基等所進行滅菌操作。4．檢驗天菌鍋工作情況，校核溫度表和壓力表。滅菌鍋工作時鍋內空氣務必排盡。5．檢驗無菌室無菌情況，尤其是接種箱。檢驗接種箱所用殺菌熏劑。6．檢驗操作人員操作技術。7．對雜菌或噬菌體進行微生物檢驗。防治辦法工業發酵染菌和其防治專家講座第29頁原因分析空氣帶菌及其防治

要杜絕無菌空氣帶菌，就必須從空氣凈化工藝和設備設計、過濾介質選取和裝填、過濾介質滅菌和管理等方面完善空氣凈化系統。空氣凈化系統造成染菌，占總染菌18．9％。壓縮機粗過濾器貯罐冷卻器冷卻器旋風分離器絲網分離器加熱器過濾器工業發酵染菌和其防治專家講座第30頁1．油滲透空氣：改用無油潤壓縮機。2．列管式冷卻器穿孔。3．過濾介質松動，空氣走短路。4．過濾介質被水潤濕。5．過濾介質老化.防治辦法壓縮機粗過濾器貯罐冷卻器冷卻器旋風分離器絲網分離器加熱器過濾器工業發酵染菌和其防治專家講座第31頁設備滲漏設備滲漏或“死角”造成染菌及其防治

設備滲漏主要是指發酵罐、補糖罐、冷卻盤管、管道閥門等，因為化學腐蝕（發酵代謝所產生有機酸等發生腐蝕作用）、電化學腐蝕（如氧溶解于水，使金屬不停失去電子，加緊腐蝕作用）、磨濁攤口金屬與原料中泥沙之間磨損、加工制作不良等原因形成微小漏孔后發生滲漏染菌。工業發酵染菌和其防治專家講座第32頁

生產上常把不能徹底滅菌部位稱為“死角”。實際過程中，“死角”包含了發酵設備或連接管道某一部位和培養基或其它物料某一部分等。

死角工業發酵染菌和其防治專家講座第33頁

因為存在溫差（內冷卻水溫、外滅菌溫），溫度急劇改變，或發酵液pH低、化學腐蝕嚴重等原因。原因分析

生產上可采取仔細清洗，檢驗滲漏，或降低冷卻水中CL-1含量等辦法加以防治防治辦法1、盤管滲漏染菌及防治工業發酵染菌和其防治專家講座第34頁

受攪拌與通風影響，易磨蝕穿孔。管中空氣流速不一致，靠近空氣進口處流速最大，離進口處距離越遠流速越小。原因分析

采取頻繁更換空氣分布管或認真洗滌等辦法。防治辦法2、空氣分布管“死角”染菌及防治工業發酵染菌和其防治專家講座第35頁原因分析3、發酵罐滲漏染菌及防治發生局部化學腐蝕或磨蝕，產生穿孔滲漏。罐焊接處等周圍輕易積集污垢。發酵罐制作不良。發酵罐封頭上各個接口。發酵罐修補焊接位置不妥。工業發酵染菌和其防治專家講座第36頁圖5-3不銹鍋襯里破裂形成“死角”圖5-4發酵罐底部培養基沉積污垢形成圖5發酵罐支撐件加強板形成“死角”染菌

工業發酵染菌和其防治專家講座第37頁1、采取罐內壁涂刷防腐涂料、加強清洗并定時鏟除污垢等是有效消除染菌辦法。2、采取不銹鋼或復合鋼可有效克服此弊端并注意清洗是能夠防止染菌。防治辦法工業發酵染菌和其防治專家講座第38頁原因分析4、管路安裝或管路配置不合理形成“死角”1、經常將一些管路聚集到一條總管路上。

2、管路大多采使用方法蘭連接。但常會發生諸如墊圈大小不配套、法蘭不平整、安裝未對中、法蘭與管子焊接不好、受熱不均勻使法蘭翹曲以及密封面不平等現象，從而形成“死角”而染菌。工業發酵染菌和其防治專家講座第39頁采取單獨排氣、排水和排污管可有效預防染菌發生。法蘭加工、焊接和安裝要符合滅菌要求盡可能降低或取消連接法蘭等辦法。防治辦法工業發酵染菌和其防治專家講座第40頁圖5-5滅菌時蒸汽不易通達“死角”及其消除方法圖5-6法蘭連接不妥造成“死角”染菌工業發酵染菌和其防治專家講座第41頁原因分析

采取加工精度高、材料好閥門可降低這類染菌發生。防治辦法5、管件滲漏形成染菌及防治

當前生產上使用閥門不能完全滿足發酵工程工藝要求，是造成發酵染菌主要原因之一?；毓I發酵染菌和其防治專家講座第42頁原因分析生產原料滅菌不徹底造成染菌淀粉質原料，在升溫過快或混合不均勻時輕易結塊，使團塊中心部位“夾生”，蒸汽不易進入將雜菌殺死培養基中諸如麩皮、黃豆餅一類固形物含量較多，在投料時濺到罐壁或罐內各種支架上，輕易形成堆積，這些堆積物在滅菌過程因為傳熱較慢，一些雜菌也不易被殺滅。工業發酵染菌和其防治專家講座第43頁1、升溫前先經過攪