人類輔助生殖技術應用概述詳解演示文稿現在是1頁\一共有56頁\編輯于星期三優選人類輔助生殖技術應用概述現在是2頁\一共有56頁\編輯于星期三適應證男方因素宮頸因素免疫因素女方排卵障礙不明原因性不孕步驟夫精人工授精臨床妊娠率10-15%現在是3頁\一共有56頁\編輯于星期三2010-5-15中山大學附屬第一醫院促排卵治療誘發排卵有排卵障礙的情況下以誘發單個卵泡或少數卵泡的發育為目的超排卵在可控制的范圍內誘發多卵泡發育和成熟為ART奠定基礎治療的對象很多本身有正常的排卵功能現在是4頁\一共有56頁\編輯于星期三2010-5-15中山大學附屬第一醫院IUI中促排卵的作用授精時間更精確糾正排卵障礙提供更多可用的卵子現在是5頁\一共有56頁\編輯于星期三適應證輸卵管盆腔因素子宮內膜異位癥排卵障礙經促排卵治療無效嚴重少弱畸精癥無精癥反復IUI失敗免疫性不孕常規體外受精-胚胎移植（invitrofertilization-embryotransfer,IVF-ET）現在是6頁\一共有56頁\編輯于星期三步驟藥物促排卵經陰道穿刺取卵體外授精胚胎培養胚胎移植胚胎冷凍新鮮周期失敗后解凍胚胎移植常規體外受精-胚胎移植

invitrofertilization-embryotransfer,IVF-ET現在是7頁\一共有56頁\編輯于星期三GnRH激動劑：達必佳，達菲林GnRH拮抗劑：加尼瑞克，思則凱Gn：重組FSH：果納芬，普麗康尿源性FSH：麗申寶，福特蒙尿源性FSH和LH：賀美奇，HMG主要藥物現在是8頁\一共有56頁\編輯于星期三促排卵方案-短效長方案GnRH-a0.1mgqd月經第二十天黃體中期GnRH-a0.05mgqdGn14-21天垂體達降調節標準主導卵泡達18mm時注射HCG，36hr后取卵現在是9頁\一共有56頁\編輯于星期三促排卵方案-長效長方案月經第二十天黃體中期GnRH-a1.3mg單次注射Gn14-21天垂體達降調節標準主導卵泡達18mm時注射HCG，36hr后取卵現在是10頁\一共有56頁\編輯于星期三促排卵方案-拮抗劑方案Gn主導卵泡達18mm時注射HCG，36hr后取卵月經第2-3天啟動促排5-6天加拮抗劑現在是11頁\一共有56頁\編輯于星期三ART臨床治療風險

穿刺并發癥血栓栓塞

妊娠相關并發癥

其它風險現在是12頁\一共有56頁\編輯于星期三經陰道穿刺取卵術并發癥嚴重并發癥（0.5%-1.5%）陰道出血>100ml0.8%盆腔感染0.6%盆腔膿腫卵巢扭轉盆腔出血卵巢過度刺激綜合征現在是13頁\一共有56頁\編輯于星期三取卵術后卵巢改變非常脆容易撕裂通過測定Hb和Hct的變化，推測通常取卵術后平均出血量232±130mL避免在卵巢內橫向擺動現在是14頁\一共有56頁\編輯于星期三卵巢過度刺激綜合征

（ovarianhyperstimulationsyndrome,OHSS）

-促排卵最嚴重的醫源性并發癥

-正常妊娠中罕見

*發生率:-輕度：

8–23%

-重度：3.5-8%COH-輕中度：7.3%-重度：

4.2%現在是15頁\一共有56頁\編輯于星期三病理及臨床表現體液外滲毛細血管通透性增加胸水、腹水、心包積液、全身水腫低血容量血液濃縮高凝狀態腎灌注減少少尿、無尿電解質紊亂血栓形成氮質血癥腹脹、惡心、嘔吐咳嗽、氣促現在是16頁\一共有56頁\編輯于星期三卵巢過度刺激綜合征

（ovarianhyperstimulationsyndrome,OHSS）臨床表現卵巢體積顯著增大血液濃縮，腹腔積液，胸腔積液少尿電解質紊亂血栓形成、ARDS及多器官功能衰竭現在是17頁\一共有56頁\編輯于星期三OHSS分度分類卵巢大小癥狀輕度5-10cm1級：腹脹不適2級：1級癥狀+惡心、嘔吐及/或腹瀉中度>10cm3級：2級癥狀+超聲確定腹水4級：3級癥狀+腹水、胸水的臨床表現和呼吸困難重度>12cm5級：4級癥狀+血液濃縮，血粘度增加、低血容量，腎灌注減少及少尿現在是18頁\一共有56頁\編輯于星期三OHSS分度根據OHSS發生的時間，又分為早發型OHSS和晚發型OHSS早發型發生在HCG后3～7天，其發生與卵巢對促性腺激素的反應性有關，并且被外源性HCG激發晚發型HCG后12～17天，多伴有多胎妊娠，系內源性HCG所致晚發型OHSS程度往往比早發型嚴重現在是19頁\一共有56頁\編輯于星期三體外授精-胚胎移植的實驗室步驟現在是20頁\一共有56頁\編輯于星期三實驗室儀器設備實驗室質控體外授精胚胎培養胚胎移植胚胎冷凍胚胎解凍體外授精-胚胎移植的實驗室步驟現在是21頁\一共有56頁\編輯于星期三A、顯微操作系統B、程序冷凍儀及液氮罐C、CO2濃度測試儀和溫度測試儀D、電子天平，超純水儀和滲透壓儀E、冰箱F、空氣凈化設備G、CO2和N2，混合氣體氣瓶實驗室的儀器和設備現在是22頁\一共有56頁\編輯于星期三1、顯微鏡A、相差顯微鏡B、體視鏡C、倒置顯微鏡D、熒光顯微鏡實驗室的儀器和設備現在是23頁\一共有56頁\編輯于星期三IVF工作站實驗室的儀器和設備現在是24頁\一共有56頁\編輯于星期三CO2培養箱：實驗室的儀器和設備ThermoK-systemG-185Cook?MINCBenchtopIncubator現在是25頁\一共有56頁\編輯于星期三1、質量控制：溫度：23±3℃濕度：30～60%氣壓：≥10Pa塵埃：百級（配子操作區），萬級（胚胎實驗室），十萬級（更衣室，取精室）可揮發有機物（VOC）：＜0.5ppm振動，光照及噪音：胚胎培養實驗室的質量控制和管理現在是26頁\一共有56頁\編輯于星期三2、管理：A、按功能和清潔度分區B、實驗室禁止吃，喝，抽煙以及使用化妝品C、培養箱和溫臺的監測D、冰箱的監測E、液氮罐的監測胚胎培養環境的質量控制和管理現在是27頁\一共有56頁\編輯于星期三實驗室禁止使用酒精等可揮發性有機物和紫外照射可用蒸餾水擦拭臺面可用專用洗滌劑擦拭可能會被污染的臺面或者區域可使用吸塵器吸走灰塵培養箱的清潔和消毒實驗室的清潔現在是28頁\一共有56頁\編輯于星期三1、溫度和濕度：37.0±0.1℃，>90%2、pH：7.1≤

pHi≤7.2，7.2≤pHe≤7.43、氣體：CO2和O24、滲透壓：270～290mOsm/kg胚胎培養系統現在是29頁\一共有56頁\編輯于星期三培養基的基本組成水：99%無機鹽：維持培養基的滲透壓和酸堿度碳水化合物：提供胚胎發育的能量氨基酸：促進胚胎體內外發育維生素：調控細胞代謝激素和生長因子：促進胚胎發育大分子物質：維持膠體滲透壓，中和毒素抗氧化劑：減少氧自由基對胚胎的損傷螯合劑：螯合重金屬離子抗生素：防止污染胚胎培養系統現在是30頁\一共有56頁\編輯于星期三培養液配制和平衡胚胎培養系統現在是31頁\一共有56頁\編輯于星期三現在是32頁\一共有56頁\編輯于星期三單氣培養：CO2(5-6%)，O2(21%)和N2(74%)三氣培養：CO2(5-6%)，O2(5%)和N2(90%)優勢：更接近生理狀態（2-8%O2）單氣培養和三氣培養現在是33頁\一共有56頁\編輯于星期三1、精子的形態結構精子和卵子精子形態精子變態示意圖現在是34頁\一共有56頁\編輯于星期三2、卵子的形態結構卵母細胞顆粒細胞復合體GV期MI期MII期現在是35頁\一共有56頁\編輯于星期三異常卵母細胞現在是36頁\一共有56頁\編輯于星期三1、常規體外授精體外授精精卵混合精卵結合現在是37頁\一共有56頁\編輯于星期三2、卵胞質內單精子注射（ICSI）現在是38頁\一共有56頁\編輯于星期三人胚胎體外發育現在是39頁\一共有56頁\編輯于星期三異常受精單原核多原核三原核無原核現在是40頁\一共有56頁\編輯于星期三胚胎發育階段：卵裂球的數目胚胎形態學評分：胚胎的碎片評分：卵裂期評分標準8-1-18-2-18-2-3現在是41頁\一共有56頁\編輯于星期三1期：囊胚腔小于胚胎體積的一半2期：囊胚腔大于胚胎體積的一半3期：完全囊胚，囊胚腔與胚胎體積相等囊胚的發育階段1期2期3期現在是42頁\一共有56頁\編輯于星期三4期5期6期4期：擴張囊胚，囊胚腔大于胚胎，透明帶變薄5期：孵化囊胚，胚胎部分孵出6期：完全孵化囊胚現在是43頁\一共有56頁\編輯于星期三胚胎移植數目：35歲以下第一周期：2個35歲以上或者第二周期以上：3個單胚胎移植：胚胎移植現在是44頁\一共有56頁\編輯于星期三胚胎移植管裝載胚胎移植管空氣空氣胚胎培養基現在是45頁\一共有56頁\編輯于星期三1、精子冷凍：2、卵子冷凍：3、胚胎冷凍：4、生殖組織冷凍：配子和胚胎的冷凍及復蘇現在是46頁\一共有56頁\編輯于星期三程序化冷凍（慢速冷凍）玻璃化冷凍（快速冷凍）冷凍方法現在是47頁\一共有56頁\編輯于星期三Slowcooling-0.3°C/min慢速冷凍法將胚胎放入含有一定濃度的冷凍保護劑處理后，慢速降溫（0.2~3℃/min）,在這個過程中，隨著細胞外溫度的逐漸降低和細胞外冰晶的形成，細胞以一種平衡的方式逐步脫水。直到溫度降至-150℃，至于液氮保存。現在是48頁\一共有56頁\編輯于星期三Vitrification

-50.000°C/min1sec.玻璃化冷凍法采用更高濃度的冷凍保護劑處理細胞，快速降溫，使細胞內外的液體均達到玻璃化狀態現在是49頁\一共有56頁\編輯于星期三玻璃化冷凍過程（兩步平衡法）在不同濃度的冷凍液中進行平衡ESVS現在是50頁\一共有56頁\編輯于星期三2.裝管3.投入液氮，在液氮罐中保存。現在是51頁\一共有56頁\編輯于星期三冷凍前置入冷凍液后0min置入冷凍液后4min置入冷凍液后8min現在是52頁\一共有56頁\編輯于星期三囊胚冷凍前人工皺縮皺縮前皺縮后現在是53頁\一共有56頁\編輯于星期三控制性超排卵B超監測下取卵體外受精和胚胎培養胚胎活檢對活檢的細胞進行檢測選擇胚胎移植入宮腔植入前遺傳學診斷(PGD)現在是54頁\一共有56頁\編輯于星期三常染色體隱性遺傳病β-thalassaemiaCysticfibro