...wd......wd......wd...PCR引物設計流程詳解本文目的：復制出IL-4基因片段查找基因序列進入NCBI主頁，下拉選框選擇Nucleotide，在搜索欄輸入要查找的目的基因，即IL-4，點擊搜索2、在搜索結果選擇靈長類〔Homosapiens〕在靈長類IL-4基因中選擇需要的mRNA序列查看基因的相關信息外顯子區域CDs區域點擊FASTA格式，并將序列保存到文檔使用primerpremier5.0設計引物建設新文件，將所得的序列復制進輸入框內點擊搜索按鈕，搜索引物設置引物設計參數〔因為在之前查找基因序列的時候獲知，外顯子區域分別為：1-200、201-248、249-425、426-618，又知在引物設計時引物位置最好跨越一個內含子，PCR產物長度通常為100-150bp，故設定上游引物位置為201-248，下游引物位置為249-425，產物長度為100-150bp〕4、確認條件后，顯示搜索結果雙擊選中得分最高的引物查看引物情況〔上圖為上游引物情況，以以下圖為下游引物情況〕將設計的上下游引物復制出來，保存到文檔中使用oligo6.0對設計的引物進展評價建設新文件，將從cnki上獲得的cDNA復制進輸入框，并點擊accept接收接收后顯示出該序列的相關信息點擊edit按鈕錄入用primer設計的上游引物，每一次輸入新數據后都需要點擊accept按鈕接收同理，錄入下游引物分析上下游引物二聚體形成情況分析上下游引物發卡形成情況分析上下游引物GC%檢測上下游引物與PCR模板其它位置錯配情況分析PCR整體情況引物特異性檢驗〔primerblast〕進入NCBI主頁，并選擇blast選擇primerblast在輸入框內輸入模板序列和上下游引物，并設定比照數據庫，點擊getprimer進展比照查看blast結果Blast結果顯示，盡管IL-4與其它基因有相似區，但是引物的3’端沒有完全互補。故設計的引物能特異性的擴增出目的基因愛人者，人恒愛之；敬人者，人恒敬之；寬以濟猛，猛以濟寬，政是以和。將軍額上能跑馬，宰相肚里能撐船。最高貴的復仇是寬容。有時寬容引起的道德震動比懲罰更強烈。君子賢而能容罷，知而能容愚，博而能容淺，粹而能容雜。寬容就是忘卻，人人都有痛苦，都有傷疤，動輒去揭，便添新創，舊痕新傷難愈合，忘記昨日的是非，忘記別人先前對自己的指責和謾罵，時間是良好的止痛劑，學會忘卻，生活才有陽光，才有歡樂。不要輕易放棄感情，誰都會心疼；不要沖動下做決定，會懊悔一生。也許只一句分手，就再也不見；也許只一次主動，就能挽回遺憾。世界上沒有不爭吵的感情，只有不肯包容的心靈；生活中沒有不會生氣的人，只有不知原諒的心。感情不是游戲，誰也傷不起；人心不是鋼鐵，誰也疼不起。好緣分，憑的就是真心真意；真感情，要的就是不離不棄。愛你的人，舍不得傷你；傷你的人，并不愛你。你在別人心里重不重要，自己可以感覺到。所謂華美的轉身，都有旁人看不懂的情深。人在旅途，肯陪你一程的人很多，能陪你一生的人卻很少。誰在默默的等待，誰又從未走遠，誰能為你一直都在這世上，別指望人人都對你好，對你好的人一輩子也不會遇到幾個。人心只有一顆，能放在心上的人畢竟不多；感情就那么一塊，心里一直裝著你其實是難得。動了真情，情才會最難割；付出真心，心才會最難舍。你在誰面前最蠢，就是最愛誰。其實戀愛就這么簡單，會讓你智商下降，完全變了性格，越來越不果斷。所以啊，不管你有多聰明，多有手段，多富有攻擊性，真的愛上人時，就一點也用不上。這件事情告訴我們。誰在你面前很聰明，很有手段，誰就真的不愛你呀。遇到你之前，我以為愛是驚天動地，愛是轟轟烈烈抵死纏綿；我以為愛是蕩氣回腸，愛是熱血沸騰幸福滿滿。我以為愛是窒息瘋狂，愛是炙熱的火炭。婚姻生活牽手走過酸甜苦辣溫馨與困難，我開場懂得愛是經得起平淡。愛人者，人恒愛之；敬人者，人恒敬之；寬以濟猛，猛以濟寬，政是以和。將軍額上能跑馬，宰相肚里能撐船。最高貴的復仇是寬容。有時寬容引起的道德震動比懲罰更強烈。君子賢而能容罷，知而能容愚，博而能容淺，粹而能容雜。寬容就是忘卻，人人都有痛苦，都有傷疤，動輒去揭，便添新創，舊痕新傷難愈合，忘記昨日的是非，忘記別人先前對自己的指責和謾罵，時間是良好的止痛劑，學會忘卻，生活才有陽光，才有歡樂。不要輕易放棄感情，誰都會心疼；不要沖動下做決定，會懊悔一生。也許只一句分手，就再也不見；也許只一次主動，就能挽回遺憾。世界上沒有不爭吵的感情，只有不肯包容的心靈；生活中沒有不會生氣的人，只有不知原諒的心。感情不是游戲，誰也傷不起；人心不是鋼鐵，誰也疼不起。好緣分，憑的就是真心真意；真感情，要的就是不離不棄。愛你的人，舍不得傷你；傷你的人，并不愛你。你在別人心里重不重要，自己可以感覺到。所謂華美的轉身，都有旁人看不懂的情深。人在旅途，肯陪你一程的人很多，能陪你一生的人卻很少。誰在默默的等待，誰又從未走遠，誰能為你一直都在這世上，別指望人人都對你好，對你好的人一輩子也不會遇到幾個。人心只有一顆，能放在心上的人畢竟不多；感情就那么一塊，心里一直裝著你其實是難得。動了真情，情才會最難割；付出真心，心才會最難舍。你在誰面前最蠢，就是最愛誰。其實戀愛就這么簡單，會讓你智商下降，完全變了性格，越來越不果斷。所以啊，不管你有多聰明，多有手段，多富有攻擊性，真的愛上人時，就一點也用不上。這件