高二生物動物細胞融合與單克隆抗體課件第一頁，共二十三頁，2022年，8月28日

1970年，有兩位科學家做了一個人—

鼠細胞融合實驗，以證明細胞膜上的蛋白

質分子是運動的。那么，如何實現人—鼠

細胞的融合，以及動物細胞融合后還有什

么用途呢？這就是今天我們這節課學習的

內容。第二頁，共二十三頁，2022年，8月28日②動植物細胞在結構上有何區別？這與它們雜交

或融合過程有什么影響？③植物體細胞雜交誘導原生質體融合常用的方法有

哪些？離心、振動、電激等物理方法；PEG等化學方法動物細胞無細胞壁，動物細胞融合過程中不須去

除細胞壁和再生出細胞壁。①植物體細胞雜交最終得到的是完整的植物個體，動物細胞融合后能形成雜種動物個體嗎？不能，只能得到雜交細胞第三頁，共二十三頁，2022年，8月28日⑤為什么要用滅活的病毒？病毒一般對生物體是有傷害的。⑥動物細胞融合有什么意義？突破了有性雜交方法的局限，使遠源雜交成為

可能。仙臺病毒物理或化學方法喪失感染活性保留融合活性④動物細胞融合能利用上述兩類方法嗎？還有其他

方法嗎？能，還可以利用滅活的病毒（生物方法）進行誘導第四頁，共二十三頁，2022年，8月28日細胞膜的流動性物理法：離心、振動、電激化學法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活的病毒也稱細胞雜交，指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程。第五頁，共二十三頁，2022年，8月28日滅活的病毒病毒表面含有

的糖蛋白和一些酶

能夠與細胞膜上的

糖蛋白發生作用，

使細胞互相凝聚，

細胞膜上的蛋白質

分子和脂質分子重

新排布，細胞膜打

開,細胞發生融合。兩個核的融合是在

雜種細胞第一次有

絲分裂時進行的動物

細胞

A誘導，融合雜種細胞AB有絲分裂（膜融合、

質融合）（核融合）多核體動物細胞B注意：動物細胞的融

合也需要把多個兩種

細胞放在一起，讓它

們隨機融合后，再從

中篩選雜交細胞第六頁，共二十三頁，2022年，8月28日⑴意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠

緣雜交（種間、屬間、科間、動植物之間）

成為可能。形成具有兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞⑵應用：成為研究細胞遺傳、細胞免疫、

腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。第七頁，共二十三頁，2022年，8月28日比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合過程原理細胞融合的過程誘導方法用途細胞膜的流動性、

細胞的全能性細胞膜的流動性去除細胞壁后

誘導原生質體融合使細胞分散后

誘導細胞融合物理、化學方法物理、化學、生物方法（滅活的病毒）獲得雜種植株主要用于制備單克隆抗體細胞融合，

植物組織培養細胞融合第八頁，共二十三頁，2022年，8月28日1、什么是抗體？抗體是由何種細胞產生的？2、抗體是如何產生的？3、一個Ｂ淋巴細胞(漿細胞)能分泌多種抗體嗎？第九頁，共二十三頁，2022年，8月28日4、一種抗原侵入機體之后，引起機體免疫反應產生的抗體只有一種嗎？用純制的抗原多次接種于適當的成年健康動物，則激其產生免疫應答，血清中含有大量特異性抗體，又稱抗血清或免疫血清。特異性差、純度低、產量低、反應不夠靈敏5、簡述獲得抗體的傳統途徑？這種方法獲得的抗體有什么缺陷？第十頁，共二十三頁，2022年，8月28日⑴B淋巴細胞受抗原刺激后，可以產生特異

性抗體。

⑵每一個Ｂ淋巴細胞只分泌一種特異性抗體。

⑶在體外，一個Ｂ淋巴細胞是不可能

無限增殖的。第十一頁，共二十三頁，2022年，8月28日由單個B淋巴細胞經過無性繁殖（克?。纬苫蛐拖嗤募毎?，這一細胞群所產生的化學性質單一、特異性強的抗體稱為單克隆抗體。第十二頁，共二十三頁，2022年，8月28日提示2：

我們所學的哪種細胞是可以無限增殖的？提示3：

有什么方法能使B細胞產生抗體的能力和

腫瘤細胞無限增殖能力同時具備呢？提示1：

僅用細胞培養技術可行嗎？第十三頁，共二十三頁，2022年，8月28日一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體

骨髓瘤細胞（癌細胞）能無限增殖雜種細胞動物細胞培養技術動物細胞融合單克

隆抗體1、設計方案：（二）、單克隆抗體的制備1975年英國科學家米爾斯坦和柯勒的實驗

（在1984年獲諾貝爾獎）第十四頁，共二十三頁，2022年，8月28日產生抗體無限增殖動物細胞培養利用B淋巴細胞

的功能利用骨髓瘤細胞

的特性利用

技術將兩種細胞融合獲得具有B淋巴細胞和骨髓瘤細胞特性的雜交瘤細胞利用

技術大量培養

雜交瘤細胞動物細胞融合第十五頁，共二十三頁，2022年，8月28日閱讀教材，思考下列問題：2.單克隆抗體制備過程誘導其融合的方法有哪些？融合后培養液中有幾種細胞怎樣篩選出雜交瘤細胞？雜交瘤細胞有何優點？注射抗原的目的是什么為何要進行克隆化培養和專一抗體檢測，多次篩選？大量增殖雜交瘤細胞獲得單克隆抗體的方法是什么？第十六頁，共二十三頁，2022年，8月28日動物細胞融合技術B、BB、B瘤、瘤瘤、瘤（一選）選擇性培養基：只有雜交瘤細胞才能存活獲得產生相應抗體的B淋巴細胞注射抗原融合篩選的培養基克隆注射到小鼠腹腔體外培養（二選）（克隆化培養和抗體檢測）：選能產生所需專一抗體的雜交瘤細胞第十七頁，共二十三頁，2022年，8月28日B淋巴細胞骨髓瘤細胞誘導融合B-B細胞B-瘤細胞瘤-瘤細胞選擇培養雜交瘤細胞（B-瘤細胞）克隆化培養抗體檢測雜交瘤細胞體外培養小鼠腹腔內增殖單克隆抗體第一次篩選第二次篩選經免疫的小鼠提取第十八頁，共二十三頁，2022年，8月28日細胞融合和動物細胞培養雜交瘤細胞具有兩個親本的特性，即能迅速大量增殖，又能足夠數量的特異性抗體。第十九頁，共二十三頁，2022年，8月28日與常規抗體相比，單克隆抗體特異性

強，靈敏度高，產量高，優越性十分明顯。第二十頁，共二十三頁，2022年，8月28日

“生物導彈”＝抗癌細胞的單克隆抗體+放射性同位素+化學藥物或細胞毒素。②作為診斷試劑：準確識別各種抗原物質，并與特異性結合。優點：準確、高效、簡易、快速①在基礎理論研究中具有重要意義③用于運載藥物：制成“生物導彈”治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療第二十一頁，共二十三頁，2022年，8月28日A鞏固練習1、

科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融

合，得到雜交細胞，經培養可產生大量的單

克隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是（）

A.經過免疫的B淋巴細胞B.沒經過免疫的T淋巴細胞C.經過免疫的T淋巴細胞D.沒經過免疫的Ｂ淋巴細胞第二十二頁，共二十三頁，2022年，8月28日4、

單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B

淋巴細胞誘導融合后，要用特定培養基篩選出

雜交瘤細胞，在這種培養基上不能存活增殖的