浙江省2022年高三選修三大題專項突破

1新冠肺炎是由新冠病毒感染引起的呼吸道傳染病，研究表明新冠病毒侵染的關(guān)鍵是病毒表面的S蛋白與

人體細胞表面ACE2特異結(jié)合。請回答下列問題：

(1)為及時確診，科學(xué)家研制了基因檢測試劑盒，其機理為：分離待測個體細胞的總RNA,在酶

的作用下得到相應(yīng)的DNA,再利用技術(shù)擴增將樣本中微量的病毒信息放大，最后以熒光的方式

讀取信號。這種方法也會出現(xiàn)假陰性現(xiàn)象，請分析其中的原因（答出一點即可）。

(2)預(yù)防新冠肺炎的有效措施是接種疫苗，核酸疫苗已成為疫苗研發(fā)的新領(lǐng)域。與DNA疫苗（通過抗原蛋白

基因在動物細胞中表達引起機體免疫應(yīng)答）相比，1nRNA疫苗的安全性更有優(yōu)勢。這是因為1nRNA不需要

進入細胞核，無的風(fēng)險，且易水解，不會遺傳給子細胞。

(3)單克隆抗體在新冠肺炎的預(yù)防和治療中具有光明的前崇，相較千從動物血清中分離所需抗體，單克隆抗

體具有等特點。生產(chǎn)抗新冠病毒單克隆抗體的過程，祈要用到動物細胞工程中的技術(shù)和

技術(shù)。

2為了改善黃瓜的品質(zhì)，科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將一種甜蛋白基因成功導(dǎo)入黃瓜細胞，得到了轉(zhuǎn)基因黃

瓜。

(1)甜蛋白基因所在DNA與Ti質(zhì)粒通常具有相同的＿，以便被剪切后在DNA連接酶作用下形成重組

質(zhì)粒，導(dǎo)入到用一處理的農(nóng)桿菌中。

(2)若選用原生質(zhì)體作為受體細胞，獲取原生質(zhì)體時，將的葉片放入經(jīng)滅菌后的酶液，振蕩酶解

3小時，酶解后過濾出大組織塊，濾液中是酶和原生質(zhì)體混合物，將濾液通過方法分離出原生質(zhì)體。

然后測定該原生質(zhì)體的活性，可采用的方法有（答出2點即可）。

(3)若選用黃瓜葉片作為受體細胞，篩選含正組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌去侵染（填“受傷的”或“完好的＇）黃瓜葉片。

(4)盡量選擇性狀優(yōu)良，細胞全能性表達充分的＿＿＿黃瓜進行克隆。

3．草甘麟是一種廣譜高效的滅生性除草劑它通過與EPSPS（葉綠體中的一種酶）結(jié)合抑制EPSPS的作用，

阻斷芳香族氨基酸的合成，從而引起細胞死亡。為了提高普通棉花對草甘麟的抗性，科學(xué)家通過轉(zhuǎn)基因的

方法獲得轉(zhuǎn)基因抗草甘麟棉花植株。請回答下列問題：

(1)方法一葉綠體基因工程：科學(xué)家通過轉(zhuǎn)基因的方法將某外源EPSPS基因轉(zhuǎn)入棉花植株的葉綠體中，使

其產(chǎn)生更多的EPSPS,使得轉(zhuǎn)基因棉花對草甘麟的抗性可達5ffilna1/L（比野生型棉花高10倍）。體外擴增

EPSPS基因常采用PCR技術(shù)，其原理是。將外源基因?qū)肴~綠體福穿過膜（具體名稱），

科研人員為將EPSPS基因?qū)肴~綠體，利用壓縮氣體產(chǎn)生的動力，將EPSPS基因包裹在鋁粉粒子表面成

功打入葉綠體中。EPSPS基因?qū)氤晒螅欠褓x予了棉花對草甘麟的預(yù)期抗性，還需要對轉(zhuǎn)基因棉花進

行的鑒定操作是。

(2)方法二細胞核基因工程：獲取目的基因，將獲取的三個抗草甘麟基因GlO插入質(zhì)粒，重組質(zhì)粒的部分

結(jié)構(gòu)（箭頭表示轉(zhuǎn)錄方向）如圖所示。GlO插入質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒的。將消毒后的棉花胚與含重

組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌在培養(yǎng)基上共培養(yǎng)，目的是。將共同培養(yǎng)后的棉花胚轉(zhuǎn)入含有營養(yǎng)物以及

的培養(yǎng)基中脫菌、誘導(dǎo)培養(yǎng)和篩選，從而得到轉(zhuǎn)基因抗草甘麟棉花植株。

(3)從生物安全角度分析，葉綠體基因工程與細胞核基因工程相比，安全性更高的原因是。

4回答下列與克隆技術(shù)有關(guān)的問題：

(1)通過組織培養(yǎng)技術(shù)，把植物細胞培養(yǎng)成，通過人工種皮包裝得到類似于胚珠發(fā)育而成的人工種

子，其內(nèi)含有的人工胚乳能夠為人工種子的萌發(fā)生長提供所需的物質(zhì)，因此應(yīng)含有、礦質(zhì)元素和

等幾類物質(zhì)。

(2)通過克隆技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因植株通常使用法將目的基因?qū)胨拗骷毎蠼?jīng)組織培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因

植株。宿主細胞一般要選用具有優(yōu)良性狀、較高的、全能性表達充分及易被侵染等特點的植物材

料。為獲得脫毒苗，可以選取植物的進行組織培養(yǎng)。

(3)通過克隆技術(shù)獲得動物器官，可以從中獲取胚胎干細胞，經(jīng)特定的方法培養(yǎng)后獲得所需器官；

要使貼壁生長的胚胎干細胞從瓶壁上脫落，可用酶處理。

5．科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)，組織培養(yǎng)過程中易發(fā)生變異，特別是通過愈傷組織過程獲得的植株變異頻率更高。科

學(xué)家利用這一點，對某一不具有抗鹽性的野生型植株進行培養(yǎng)，通過組織培養(yǎng)技術(shù)，可篩選獲得該植物的

抗鹽突變體。

(1)相對于植物組織培養(yǎng)中的途徑，通過愈傷組織產(chǎn)生的胚胎發(fā)生途徑和器官發(fā)生途徑形成的植株

變異率高，更有利千突變體的篩選。

(2)為培育該抗鹽突變體，可將已消毒的外植體在合適的培養(yǎng)基中進行，產(chǎn)生肉哏可見的愈傷組織

后將其放在搖床上，通過液體懸浮培養(yǎng)可分散成，這種細胞的特點是。

(3)將收集到的這種細胞在液體培養(yǎng)條件下，經(jīng)過培養(yǎng)基中成分的誘導(dǎo)，可發(fā)生類似經(jīng)過卵裂、分

化、器官發(fā)生和形態(tài)建成而發(fā)育成胚的過程。將形成的胚狀體進一步轉(zhuǎn)移到加入培養(yǎng)基

中，可篩選出抗鹽突變體。

(4)植物細胞在長期培養(yǎng)中，培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力會下降的原因可能有（答

出2點給分）。

6回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問題：

(1)將野外采集的某植物葉片經(jīng)消毒處理后，去除下表皮，再將其置千經(jīng)—處理的較高滲透壓的混合酶液中

以獲得原生質(zhì)體，去除下表皮的目的是使酶液，保證酶解充分。植物原生質(zhì)體的獲取過程中一般使

用（填”相同或“不同”)濃度的甘露醇溶液。

(2)為培育抗蟲的轉(zhuǎn)基因植物，將含抗蟲基因的DNA和質(zhì)粒用酶處理后形成重組質(zhì)粒，將重組質(zhì)粒導(dǎo)

入上述植物原生質(zhì)體。原生質(zhì)體培養(yǎng)過程中，原先形的原生質(zhì)體再生細胞壁后形狀會明顯改變，

在液體培養(yǎng)基適宜環(huán)境的誘導(dǎo)下分化為，最后再生出完整的植株。

(3)為了檢猁抗蟲基因是否存在千該轉(zhuǎn)基因植物的不同組織細胞中，某同學(xué)用PCR方法進行鑒定。在鑒定

時應(yīng)分別以該植物不同組織細胞中的作為PCR模板。

A.mRNA

B總、RNA

C.DNA

D.mRNA或DNA

7紫杉醇是紅豆杉屬植物產(chǎn)生的一種復(fù)雜的次生代謝產(chǎn)物，對多種癌癥都有一定的療效。最初用于研究和

臨床試驗的紫杉醇都是從紅豆杉樹皮中提取。從36株60年生大樹的樹皮中才能提取到約lg翠郵，可治療

一個癌癥患者。一些地方通過伐樹生產(chǎn)紫杉醇，使野生資源遭受到了極大的戒壞，保護其野生資源和擴大

藥源已成為當(dāng)前急需解決的矛盾。

(1)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)紫杉醇的抗癌機理是：紫杉醇能和微管蛋白聚合體相互作用，促進微管聚合并

使之穩(wěn)定，阻礙紡錘體的形成，從而阻礙

(2)利用植物組織培養(yǎng)，讓細胞產(chǎn)生紫杉醇是一條理想的途徑。此培養(yǎng)方法的原理是。

(3)由千植物細胞壁的存在，植物的＿—_有一定的難度，可用＿—－處理該細胞，獲得球形的原生質(zhì)體，通

過對原生質(zhì)體的培養(yǎng)，獲得能產(chǎn)生紫杉醇的＿。

(4)在獲得原生質(zhì)體的過程中，常常在＿＿＿滲透壓溶液中，目的是

8．中國科學(xué)院神經(jīng)科學(xué)研究所利用CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)（如圖所示）和胚胎工程技術(shù)構(gòu)建了一批敲除

關(guān)鍵基因BMALl的生物節(jié)律紊亂克隆猴，作為抗失呡治療研究的動物模型。CRISPR-Cas9基因編輯系統(tǒng)

由向?qū)NA和Cas9蛋白組成，向?qū)NA識別并結(jié)合靶基因DNA,Cas9蛋臼切斷雙鏈DNA形成兩個末

端。這兩個末端通過“斷裂修復(fù)”重新連接時通常會有個別堿基對的插入或缺失，從而實現(xiàn)基因敲除。請回

答：

C已9識

;iInIII“-:工皿曰

斷菜修復(fù)u

舊片心二二二二二三飛＝

躍丕插入

盧I)基因編輯系統(tǒng)導(dǎo)入稱猴受精卵福要借助技術(shù)。向?qū)NA識別靶基因DNA時遵循原則，

Cas9蛋白切斷靶基因DNA形成的兩個末端重新連接時所必需的一種酶是。可利用技術(shù)

檢測胚胎細胞是否成功敲除了稱猴的BMALI基因。

(2)利用該技術(shù)還可以在染色體DNA上定點插入目的基因基本過程如下：向細胞內(nèi)導(dǎo)入基因編輯系統(tǒng)時，

同時導(dǎo)入含目的基因的DNA修復(fù)模板，修復(fù)模板能與切斷后形成的末端序列互補配對，并作為合成新鏈

的模板這樣修復(fù)后就會在原來DNA上“插入“一個目的基因，此時參與修復(fù)的除上述酶以外還有酶。

(3)如果對Cas9蛋白進行修飾改變使它在向?qū)NA的介導(dǎo)下只能識別結(jié)合靶基因的部位，

但不具備切斷DNA的功能，那么就能阻止靶基因開始轉(zhuǎn)錄，從而使基因沉默。

(4)這一研究成果表明，我國正式開啟了批量標(biāo)準(zhǔn)化構(gòu)建疾病克隆猴模型的新時代。克隆猴被用千人類遺傳

學(xué)和生理學(xué)研究所具有的突出優(yōu)點是

9回答與轉(zhuǎn)基因雷公藤培育過程有關(guān)的問題：

(l)將含酶的混合液在55°C水浴鍋中活化，0.22μm微孔濾膜滅菌。取雷公藤懸浮細胞，

加入酶混合液，黑暗條件下培養(yǎng)以分離原生質(zhì)體。

(2)原生質(zhì)體的活力檢測采用臺盼藍染色法（臺盼藍可穿透死細胞的細胞膜，使死細＇胞中的DNA著色，但無

法進入活細胞內(nèi)），原生質(zhì)體活力的計算方法為：占該視野下原生質(zhì)體總數(shù)的百分比。

(3)由于原生質(zhì)體來源千黑暗條件下培養(yǎng)的雷公藤懸浮細胞，因此其細胞中不含。將原生質(zhì)體與含

的植物表達載體質(zhì)粒混合，在黑暗條件下完成轉(zhuǎn)化后，再用激光作掃描光源的顯微鏡觀察，統(tǒng)計

發(fā)出綠色熒光的原生質(zhì)體數(shù)占觀察到的所有原生質(zhì)體數(shù)的百分比，以此確認原生質(zhì)體的轉(zhuǎn)化效率。

(4)將轉(zhuǎn)化后的原生質(zhì)體進行培養(yǎng)，重新長出細胞壁，形成胚性細胞。此時，應(yīng)該培養(yǎng)基中甘露醇

濃度，以利千胚性細胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細胞團，然后形成再生植株。再生植株需去除處理并進行鍛

煉后才能移種大田。

10回答下列與轉(zhuǎn)基因植物培育相關(guān)問題：

(1)從基因文庫中選擇釣取某種抗病蛋白A的基因的方法有：利用核酸探針采用技術(shù)，使得在適當(dāng)條

件下，該探針與互補的目的基因片段形成雙鏈從而篩選出來；或者將基因文庫中的所有基因進行表達，然

后利用作為探針采用抗原－抗體雜交技術(shù)，找出能與探針特異性結(jié)合的表達產(chǎn)物，進而獲得與之對應(yīng)

的目的基因。

(2)由千植物細胞壁的存在，望組DNA導(dǎo)入細胞具有一定的難度。在較高滲透壓的甘露醇溶液環(huán)境下用

—處理根尖、葉片等可以獲得球形的原生質(zhì)體。原生質(zhì)體的培養(yǎng)需考慮原生質(zhì)體的—--、培養(yǎng)基的

、滲透壓、溫度和PH等因素的影響。

(3)將重組DNA用＿．~法導(dǎo)入原生質(zhì)體。原生質(zhì)體再生成細胞壁后培養(yǎng)得到的細胞具有一細胞的特征，

經(jīng)培養(yǎng)基中成分的誘導(dǎo)，可從單細胞依次到細胞團、球形胚、心形胚和＿，最后再生出完整的植株。

11植物原生質(zhì)體分離所需酶的保存要求較高，為了解決這個問題，采用13%CPW洗液沖洗蝸牛消化道，

獲取含消化酶的混合液，該混合液可直接用千柜關(guān)實驗。

(l)含蝸牛消化酶的混合液能用千去除細胞壁，原因是蝸牛是一種動物，它的消化液中含有

(2)用該混合液處理會對細胞造成一定的傷害，原因是。為減輕對細胞的傷害，隔要控制好

處理＿。

(3)植物原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)結(jié)合技術(shù)，可以克服遠源雜交不親和，從而培養(yǎng)優(yōu)質(zhì)的-多倍體植

物。植物原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)結(jié)合一技術(shù)，從而實現(xiàn)使外源基因表達和原有基因一的作物新品種。

12回答基因工程與植物細胞工程有關(guān)的問題：

為改良二倍體棉花的性狀，育種工作者對棉花栽培種進行了多途徑品種改良。

(1)為節(jié)約生產(chǎn)成本和減少農(nóng)藥使用造成的生態(tài)破壞，育種工作者開展抗蟲棉的研究，從蘇云金芽泡桿菌中

提取抗蟲蛋白基因，通過技術(shù)對其進行擴增，擴增后的目的基因與運載體拼接，運載體箭含有多

個限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點、標(biāo)記基因及基因。利用棉花離體莖尖為受體與利用棉花愈傷組

織為受體相比，可以不經(jīng)過愈傷組織再分化產(chǎn)生莖的過程，從而縮短獲得轉(zhuǎn)基因植物的周期。

(2)在棉花與某一具有優(yōu)良性狀的野生種（二倍體）遠緣雜交實驗中，獲得一高度不育的雜種株，可通過

技術(shù)繁育該植株，該植株（是或否）為二倍體。可用處理該植株幼苗使其可育。

(3)為克服遠緣雜交存在的問題育種工作者可通過原生質(zhì)體融合技術(shù)來實現(xiàn)不同來源的重新組合。

13回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問題。

(1)用植物葉片分離原生質(zhì)體時，要先用70％乙醇和5％次氯酸鈉進行處理，再用適宜濃度的

甘露醇溶液使細胞處千狀態(tài)，有利于酶分解細胞壁，減少原生體損傷。

(2)先將目的基因插入農(nóng)桿菌的T-DNA,接著讓和植物原生質(zhì)體共同培養(yǎng)，可以實現(xiàn)目的基

因向原生質(zhì)體的轉(zhuǎn)移和整合。再生細胞壁后，在含有的培養(yǎng)基上篩選獲得具有抗性的細

胞，并通過液體懸浮培養(yǎng)，獲得一定數(shù)量具有特征的單細胞，經(jīng)誘導(dǎo)發(fā)生類似受

精卵經(jīng)過卵裂、分化、和形態(tài)建成而發(fā)育成胚狀體，然后再發(fā)育成憲整植株。

(3)常利用莖尖進行植物克隆，一方面莖尖細胞相較葉肉細胞具有更高的，另一方

面，由千＿，易獲得脫毒苗。

14培育抗鹽品種是提高沿海灘涂和鹽堿地南利用率、緩解糧食短缺的有效途徑。回答下列問題：

(1)為獲得大擬的抗鹽基因可通過技術(shù)進行擴增，也可將其連接到上并導(dǎo)入大腸桿菌，然后通

過大腸桿菌的繁殖進行擴增。

(2)若通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育抗鹽植株，外植體和農(nóng)桿菌共培養(yǎng)后，須將外植體轉(zhuǎn)移到添加有抗生素的培養(yǎng)

基中進行多次繼代培養(yǎng)，添加的抗生素是農(nóng)桿菌中（填“有”或“沒有＂）對應(yīng)抗性基因的抗生素；

上述操作完成后，還須將外植體轉(zhuǎn)移至含有某種選擇藥物的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)基中添加“某種選擇藥物”

的目的是＿。

(3)若利用植物細胞培養(yǎng)技術(shù)，則在培養(yǎng)基中要依次加入一（填“濃度由低到高”、

“濃度由高到低”或濃度不變”)的NaCl溶液，最終誘發(fā)和篩選出抗鹽突變體細胞，并進一步培養(yǎng)至再生植

株。若在試管苗期間判斷是否誘發(fā)產(chǎn)生抗鹽基因并轉(zhuǎn)錄，司利用帶標(biāo)記的抗鹽基因特殊片段與從試管苗中

提取的＿A＿進行分子雜交。

(4)為快速繁殖該抗鹽植株，可將帶腋芽的莖段插入生芽培養(yǎng)基誘導(dǎo)形成叢狀苗，分株后再移至添加了生長

素濃度—一＿的MS培養(yǎng)基中生根形成完整植株。選用帶腋芽的莖段進行組織培養(yǎng)是因為腋芽具有＿＿＿0

15．乙型腦炎病毒(JEV)是一種RNA病毒，可引起腦實質(zhì)廣泛病變引發(fā)神經(jīng)系統(tǒng)疾病。

構(gòu)建轉(zhuǎn)基因母牛乳腺反應(yīng)器可以在牛奶中獲得蛋白疫苗，也可以通過改造猩猩的腺病毒獲得重組病毒疫苗。

腺病毒可以侵入許多不同類型的細胞，導(dǎo)致一系列疾病，但在被改造成疫苗之后不能在細胞內(nèi)復(fù)制，安全

性提高。如圖是制備兩種JEV疫苗的主要流程，

請回答以下問題：

巳嘐巨芒

匠三巴細胞

“臣嗜雪扭笸

(1)圖中PCR過程需要酶，過程＠科研人員常用技術(shù)來激活重組

細胞，過程?需要對代孕母牛進行處理。

(2)雌奶牛胚胎干細胞培養(yǎng)過程中需加入來抑制分化促進分裂。為了檢測乳汁

中是否含有蛋白疫苗，可用方法在分子水平進行檢溯。

(3)以下有關(guān)腺病毒重組疫苗的敘述，錯誤的是（A．改造成疫苗的腺病毒含有JEV的部分遺傳信息

B．人類細胞膜上沒有猩猩腺病毒受體C．腺病毒相當(dāng)千基因工程中的運載體D接種后人體也會神墻產(chǎn)生針

對腺病毒的抗體）

(4)構(gòu)建重組病毒疫苗時通常使用來自猩猩的腺病毒，而不是直接使用人類腺病毒。請分析可能原因。

16如圖為某一科研機構(gòu)培育純合的轉(zhuǎn)基因抗除草劑玉米的過程圖，據(jù)此回答：

懸浮培養(yǎng)秋水仙素

懇浮培養(yǎng)秋水仙索

玉米花粉一卡愈傷組織戶單細胞一夕胚狀體一卡幼苗修抗除，飛劑玉米

抗除萃劑基因--2

(1)培育該轉(zhuǎn)基因抗除草劑玉米的核心環(huán)節(jié)是。如果抗除草劑基因的堿基對序列未知，可以

中獲得目的基因。

(2)采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入抗除草劑基因時，將農(nóng)桿菌與單細胞混合培養(yǎng)一段時間后，在培養(yǎng)基中應(yīng)加入

，以便在培養(yǎng)植物細胞的同時去除農(nóng)桿菌。

(3)在將單細胞培養(yǎng)成幼苗前，要配制有適當(dāng)營養(yǎng)物質(zhì)和植物生長調(diào)節(jié)劑的含瓊脂的培養(yǎng)基，倒在

滅菌試管中凝固成(A.固體B液體．C．半固體）。

(4)欲在組培階段篩選出抗除草劑的植物細胞，最簡便的方法是

(5)經(jīng)過組織培養(yǎng)得到的幼苗常移至草炭土中，再逐漸降低環(huán)境中的進行鍛煉，砓后移至

土中定植。

(6)為了提高育種的成功率，應(yīng)該盡址選擇性狀優(yōu)良、的玉米品種。

l.(l)逆轉(zhuǎn)錄PCR擴增后的DNA含景較低、試劑盒靈敏度不夠高(2)整合到宿主細胞染色體基因組中RNA

酶(3)特異性強、靈敏度高，可大晉制備動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合

2.(1)限制性核酸內(nèi)切酶識別序列氯化鈣(2)消毒過濾離心染色法，滲透吸水或失水(3)受傷的(4)基因型

3.(l)DNA的復(fù)制葉綠體雙層用5mmol/L的草甘賸噴灑轉(zhuǎn)基因煙草植株檢測其抗件

(2)復(fù)制通過農(nóng)桿伯將目的基因?qū)朊藁毎欢舛鹊牟莞拭?/p>