紫外-可見分光光度法物質吸收紫外光區和可見光區的電磁波而產生的吸收光譜稱為紫外-可見吸收光譜。

概念利用紫外-可見吸收光譜，通過被測物質在紫外-可見光區的特定波長處或一定波長范圍內的單色光輻射的吸光度，進行定性和定量分析的方法，稱為紫外-可見分光光度法。光的吸收定律（朗伯-比爾定律）

原理當單色光穿過被測物質溶液時，在一定的濃度范圍內，被該物質吸收的光量（吸光度）與該物質的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比。關系式式中，A為吸光度；T為透光率；E為吸收系數；c為溶液濃度；L為液層厚度。

原理關系式指單位濃度、單位液層厚度時的吸光度。常使用百分吸收系數（）簡便易行：本法使用的儀器設備均不復雜，價格較低廉，操作簡單，易于普及；準確度較高：本法相對誤差在2%~5%之間，適用于對測定結果的準確度有較高要求的試樣的分析；靈敏度高：本法靈敏度可達10-7~10-4g/ml，適用于低濃度試樣的測定；專屬性較差：本法通常不受一般雜質的干擾，但對結構相近的有關物質缺乏選擇性。

特點供試品溶液的吸光度讀數在0.3~0.7之間為宜。測定供試品的吸光度后應減去空白讀數，或由儀器自動扣除空白讀數后，再計算含量。一般選擇吸光度最大的波長作為測定波長，選擇的溶劑不干擾測定。

注意事項當溶液的pH值對測定結果有影響時，應將供試品溶液的pH值和對照品溶液的pH值調成一致。對照品比較法由光的吸收定律（朗伯-比爾定律）可得下列關系：供試品溶液的濃度供試品溶液的吸光度對照品溶液的濃度對照品溶液的吸光度對照品比較法藥物的實際測得量可按下式計算供試品初次稀釋體積供試液的稀釋倍數對照品比較法原料藥供試品溶液的吸光度對照品溶液的濃度對照品溶液的吸光度供試品初次稀釋體積供試液的稀釋倍數供試品的取樣量對照品比較法片劑供試品片粉的取樣量對照品比較法注射劑供試品的取樣體積注射劑的標示量

片劑含量計算示例標示量為30mg精密稱定總質量為3.8611g研細細0.6528g甲醇約70ml水浴中超聲15分鐘,溶解加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過續濾液10ml,加甲醇稀釋至刻度，搖勻在310nm的波長處測定吸光度為0.560取格列喹酮對照品精密稱定甲醇溶解并定量稀釋制成濃度為0.112mg/ml的對照品溶液測定吸光度為0.571標示量的90.0%~110.0%片劑含量計算示例AX為0.56001對照品溶液的吸光度AR為0.57102供試品初次稀釋體積V為100ml03對照品溶液的濃度CR為0.112mg/ml04供試品片粉的取樣量W為0.6528g0510片供試品的總重W10為3.8611g06已知標示量為30mg/片07片劑含量計算示例精密量取續濾液10ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，所以供試液的稀釋倍數D為50除以10。吸收系數法由光的吸收定律（朗伯-比爾定律）可推導出供試品溶液中被測成分的濃度計算公式：供試品溶液的濃度供試品溶液的吸光度為百分吸收系數液層厚度（吸收池的光路長度）濃度換算因數（系將g/100ml換算成g/ml）吸收系數法由光的吸收定律（朗伯-比爾定律）可推導出供試品溶液中被測成分的濃度計算公式：供試品初次稀釋體積供試液的稀釋倍數吸收系數法原料藥供試品溶液的吸光度液層厚度供試品初次稀釋體積供試液的稀釋倍數供試品的取樣量吸收系數法片劑供試品片粉的取樣量吸收系數法注射劑供試品的取樣體積注射劑的標示量

片劑含量計算示例標示量為5mg精密稱定總質量為1.4422g稱取細粉0.3041g乙醇約75ml加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過續濾液5ml,加甲醇稀釋至刻度，搖勻在243nm的波長處測定吸光度為0.401標示量的90.0%~110.0%百分吸收系數為385振搖30分鐘,溶解片劑含量計算示例吸光度A為0.40101初次稀釋體積V為100ml02片粉的取樣量W為0.3041g0320片供試品的總重W20為1.4422g04潑尼松龍的百分吸收系數為