ICS65020

B65.

中華人民共和國林業行業標準

LY/T2350—2014

松褐天牛攜帶松材線蟲的PCR檢測

技術規范

TechnicalregulationfordetectingBursaphelenchusxylophilusfrom

PinesawerMonochamusalternatusHoebPCRamlification

y(p)yp

2014-08-21發布2014-12-01實施

國家林業局發布

LY/T2350—2014

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由全國林業有害生物防治標準化技術委員會歸口

(SAC/TC522)。

本標準負責起草單位華南農業大學

:。

本標準參加起草單位國家林業局森林病蟲害防治總站江西省贛州市林業有害生物防治檢疫局

:、。

本標準主要起草人王新榮孫思朱孝偉王永孔祥超宋玉雙黃敬怡任路路馬偉杰陳晨賴福勝

:、、、、、、、、、、。

Ⅰ

LY/T2350—2014

松褐天牛攜帶松材線蟲的PCR檢測

技術規范

1范圍

本標準規定了松褐天牛Monochamusalternatus成蟲攜帶松材線蟲Bursaphelenchus

(Hope)[

xylophilus檢測技術的一般原則和技術要求

(SteineretBuhrer)Nickle]PCR。

本標準適用于利用技術定性檢測攜帶松材線蟲的松褐天牛

PCR。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規格和試驗方法

GB/T6682—2008

動物源性飼料中馬驢源性成分定性檢測方法方法

GB/T21107—2007、PCR

3術語和定義

下列術語和定義適用于本文件

。

31

.

松褐天牛MonochamusalternatusHope

又名松墨天牛屬昆蟲綱鞘翅目天牛科墨天牛屬

,(Insecta),(Coleoptera),(Cerambycidae),

Monochamus是松樹的一種重要蛀干害蟲又是松材線蟲的主要傳播媒介松褐天牛成蟲中后胸攜

(),,。

帶較多松材線蟲松褐天牛成蟲形態圖和脫翅松褐天牛成蟲中后胸示意圖參見附錄

。A。

32

.

松材線蟲Bursaphelenchusxylophilus

松材線蟲隸屬于線蟲綱滑刃目滑刃亞目滑刃總科

(Nematoda),(Aphelenchida),(Aphelenchina),

滑刃科傘滑刃亞科傘滑刃屬

(Aphelenchoidoidea),(Parasitaphelenchidae),(Bursaphelenchinae),

Bursahelenchus是引起松樹枯萎死亡的直接原因也是本標準所要檢測的目標

(p),,。

33

.

聚合酶鏈式反應polymerasechainreactionPCR

;

聚合酶鏈式反應是體外酶促合成特異片段的一種方法由高溫變性低溫退火及適溫延伸

,DNA,、

等幾步反應組成一個周期循環進行使目的得以迅速擴增具有特異性強靈敏度高操作簡便

,,DNA,、、

和省時等特點參見中的規定

。GB/T21107—20073.1。

34

.

引物primer

一段短核苷酸序列其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點在聚合反應時刺激合成一條與模板

。,,

互補的的序列

DNA。

35

.

內部轉錄間隔區internaltranscribedspacer