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文檔簡介
磺胺嘧啶鈉藥物代謝動力學參數測定新鄉醫學院三全學院任衍開一、實驗目的1.掌握磺胺類藥物血漿藥物濃度的測定方法2.掌握藥物半衰期的計算方法3.了解藥物血漿半衰期測定及計算的臨床意義二、實驗原理1.多數藥物在體內按一級動力學規律消除,靜脈注射后,如以血漿藥物濃度的對數值為縱坐標,時間為橫坐標,其時量關系常呈直線。
2.藥物血漿半衰期(halflife,T1/2)為:Ke=2.303(logC1-logC2)/t2-t1二、實驗原理3.呈色原理:
磺胺類藥物在酸性溶液中,與亞硝酸鈉起重氮反應,生成重氮鹽。此重氮鹽在堿性溶液中與酚類化合物起偶聯反應,生成橙紅色的偶氮化合物。偶氮化合物的顯色深淺與磺胺的濃度有關。
三、實驗動物家兔(體重2.5Kg左右)四、實驗器材和藥品1.器材:分光光度計、離心機、兔手術臺、手術器械、動脈夾、動脈插管、磅秤、注射器、移液管、離心管、試管等
分光光度計離心機四、實驗器材和藥品2.藥品:20%磺胺嘧啶鈉溶液、1%肝素鈉溶液、
0.02%磺胺嘧啶鈉溶液(標準液)、7.5%三氯醋酸溶液、0.5%亞硝酸鈉溶液、0.5%麝香草酚溶液、20%NaOH溶液、20%烏拉坦溶液、蒸餾水五、實驗步驟(一)動物基本操作(二)測定液和標準液的配制(三)比色管的配制(四)比色與計算(一)動物基本操作(血液標本的采集)1.抓取家兔1只,稱重,用20%烏拉坦溶液5mL/kg行耳緣靜脈麻醉,然后固定于手術臺上。2.氣管插管手術區剪毛,沿正中線剪開頸部皮膚,鈍性分離皮下組織及肌肉,找出并游離氣管,穿線備用。確定甲狀軟骨的位置,在其下3——4環裝軟骨處切一倒“T”形切口,插管固定。(一)動物基本操作(血液標本的采集)3.游離頸總動脈:分開肌肉層后,找出一側頸總動脈并分離約2~3cm左右,在其下穿線兩根線備用。(一)動物基本操作4.全身肝素化:耳緣靜脈注射肝素5ml。線1結扎遠心端,待血管充盈后,動脈夾夾閉近心端遠心端剪一“V”形口,動脈插管,線2結扎固定(二次固定)5.動脈插管(肝素潤洗)(一)動物基本操作6.取血:打開動脈夾取空白血樣2ml置于用肝素浸過的試管中待用;然后由耳緣靜脈注射20%磺胺嘧啶鈉溶液2ml/kg,于給藥后10min及40min各取血2ml,分別置于同上試管中待用(二)測定液和標準液的配制測定液的配制:用1ml注射器抽取上述血液各0.2ml,置于已盛有5.8ml
7.5%三氯醋酸溶液的玻璃試管中,充分搖勻,然后以1500r/min,離心5min待用。標準液的配制:取0.02%磺胺嘧啶鈉溶液0.2ml,加入已裝有5.8ml
7.5%三氯醋酸溶液試管中,搖勻待用。成分空白管(mL)標準管(mL)測定管(mL)給藥前給藥10min給藥40min測定液//1.51.51.5標準液/1.5///蒸餾水1.5////0.5%NaNO2
0.50.50.50.50.50.5%麝香草酚1.01.01.01.01.0(三)各比色管的配制蒸餾水0.02%NaSD②1組標本各取0.2ml加入2組①2組各試管先加三氯乙酸5.8ml③2組測定液各取1.5ml清液加入3組④加0.5mlNaNO2⑤加1ml麝香草酚
標本(1組)
測定液(2組)
比色液(3組)空白管標準管給藥前藥后10′藥后40′取13支試管分別用記號筆標記(四)比色與計算用722型分光光度計進行比色,選波長520nm,以空白管調“0”點,讀出標準管及各測定管光密度,并記錄。
六、實驗結果標準管測定管給藥前給藥后10min給藥后40min光密度值1.各比色管的光密度值六、實驗結果2.計算Ke及T1/2Ke=2.303(logC1-logC2)/t2-t1CNaSD=C標/OD標×(OD給藥后-OD給藥前)
七、注意事項1.麻醉時一定把握好速度。2.每次取血之前要先將殘血放掉。3.各盛血的試管及動脈插管
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