Lambda25

構造簡介、關鍵指標核查方法及故障排除案例紫外可見分光光度計是用于測量和記錄待測物質對紫外光、可見光的吸光度及另外可見吸收光譜,進行定性、定量以及結構分析的儀器。其基本結構主要有五個部分:

光源、單色器、吸收池、檢測器和信號指示系統，

如圖31所示。紫外-可見分光光度計的構造Lambda25內部構造圖1光譜掃描功能：用于定性分析

2時間驅動功能：用于研究物質吸光度隨時間變化

3波長編程功能：可同時測2-8個點的吸光度

4濃度測定功能：用于定量分析

儀器功能關鍵指標核查：500nm處的光度噪聲基線平直度波長準確度波長重復性光度準確度吸收池的配套性雜散光目錄紫外可見分光光度計的光度噪聲直接影響儀器的信噪比。它是限制分析檢測濃度下限的主要因素。測試方法：冷態開機，預熱半小時后，試樣和參比比色皿均為空氣，Td時間驅動方法，設置縱座標為A，吸光度為0、光譜帶寬2nm、波長500nm、掃描時間60S（書上寫1h)，響應時間2s，1.500nm處的光度噪聲目前全世界生產廠商給出的整機光度噪聲都是指在500nm處的光度噪聲，而日常使用是要在不同波長處使用,所以只給出500nm處的光度噪聲是不能滿足要求的。因此提出了基線平直度的概念，它決定了紫外可見分光光度計在各個波長下的分析檢測濃度的下限。基線平直度是指每個波長上的光度噪聲，是各個波長上主要分析誤差來源之一。測試方法：冷態開機預熱半小時后，試樣和參比比色皿均為空氣，全波長慢速或中速掃描，在全波長范圍內，找出峰-峰值中最大的一點，為儀器的基線平直度。2.基線平直度氘燈是最常用來檢測紫外可見分光光度計的波長準確度的標準燈。氘燈的特征波長有486nm、581nm、656.1nm。通常選用656.1nm。特別注意：一、光譜帶寬大于2nm以上的儀器不能用儀器上的氘燈檢測波長準確度，因為656.1nm這根特征譜線很尖銳，容易產生誤差；二、儀器廠商不能只用氘燈來檢測波長準確度，因為可見區的波長準確度好不能完全代替紫外區的波長準確度好。測試方法：把可見燈關了，scan-設置680-450nm、吸光度為0、光譜帶寬2nm、掃描速度：中。將實際測量的486、656.1nm附近的值與理論值相減，則得儀器的波長準確度。3.波長準確度波長重復性一般取波長準確度的三次測試結果中最大值與最小值作為波長重復性。測試方法：把可見燈關了，scan-設置658-654nm速度30間隔0.1nm，縱座標EE，smooth2，連續掃描10次，看偏差。(EE是樣品倉能量,ER是參比能量)4.波長重復性光度準確度表示方法有兩種，一是吸光度準確度或吸光度誤差，用△A表示。二是透射比準確度或透射比誤差，用△T表示。國際上絕大多數采用前者表示。重鉻酸鉀酸性溶液和堿性鉻酸鉀溶液通常可作為紫外可見分光光度計光度準確度檢測的標準物質。硫酸銅標準溶液適用于檢測可見波段內的光度準確度。亦可用中性濾光片來檢測。測試方法：鉻酸鉀于105度烘2h到恒重。干燥器中冷卻半小時。稱0.0400g鉻酸鉀，并加入0.05mol/L的氫氧化鉀溶液到1000ml。在溫度為25度，厚度10mm的石英比色皿中測定其透射比，參比空白溶液為0.05mol/L的氫氧化鉀溶液。一般選擇430nm處的透射比和吸光度值。在規定的波長處，連續測10個吸光度或透射比讀數。取平均值實際吸光度與透射比與平均值之差，即為光度準確度。5.光度準確度-15.光度重復性一般選定一個標準樣品，由同一操作者進行3-5次測試。具體做法：冷態開機，即關機2小時后開機，預熱半小時，對樣品進行光譜掃描。然后在譜圖上選擇幾個特征吸收峰，檢查在選定的測量次數內，各個峰值的最大值與最小值之差即為光度重復性。6.比色皿配套性石英吸收池裝蒸餾水220nm處，將一個吸收池的透射比調至100%，測量其他池的透射比值，其差值為吸收池的配套性。6.雜散光測試碘化鈉標準溶液和亞硝酸鈉標準溶液是雜散光測試必備的標準溶液。10g/l的NaI測試220nm處的雜散光。50g/l的NaNO2標準溶液測試340nm處的雜散光。兩個點必須都要測試。P186儀器冷態開機，預熱半小時，如用濾光片法測試，參比為空氣。如用濾光液來測試，則參比為溶劑。NaI、NaNO2溶液，則參比為水。設置縱坐標為T%，橫坐標為波長(nm)。用濾光液時，試樣比色皿中裝濾光液，參比中裝溶劑，將波長調到相應的波長上，aI220nmNaNO2340nm故障排除儀器故障實例

儀器癥狀

1、開機預熱30分鐘后打開軟件,波長不在650nm處,而是在380nm左右.重復開機可能會好。

2、基線遠離檢定規程之最低要求。

3、測試過程中吸光度嚴重不準。初步判斷是電機缺潤滑油（光源電機、濾光片電機、光柵電機共三個）.最有可能的是濾光片的電機里面要加潤滑油.在工程師指導下自查如下：

1：點擊Application中manucontrol在第一格輸入波長250nm,然后點擊其他任意空格中，觀察光源的馬達是否轉動；再輸入350nm，同樣觀察。若都轉動。

2、再依次輸入900、800、600、480、400、360nm，這時應觀察濾光片和光柵馬達是否轉動。

3、然后打開樣品倉，用一張白紙置于樣品倉前，設0nm（意為全部光透過）。觀察兩光斑是否大小相似。

4、把樣品倉和光路密封罩蓋好，設置580nm過一會打開密封罩，觀察出射狹縫處色帶。自查過程中：反復幾次觀察濾光片是否轉動，在800-900nm處有時不轉。一開始幾次0nm處無光斑，打開光路密封罩看，光譜偏離狹縫約一厘米處。后開關機幾次后出現光斑表現正常。后掃基線平直度0.001。1.光源鏡電機拆除超聲波清