病原生物與免疫學實驗實驗室規則一.進入實驗室必須穿護士服,不必需的物品不要攜帶入室，嚴禁在實驗室進食、飲水。

二.保持實驗室的安靜和秩序,實驗要嚴肅認真。三.如有傳染性材料的污染,及時報告老師。四.實驗過程中有儀器和器材的損壞要報告老師并登記。五.實驗后的材料要放到指定的位置。六.離開實驗室前,要用肥皂洗手,接觸過傳染性強的實驗材料要用0.1%的新潔爾滅泡手1-2分鐘七.值日生要作好值日工作,關好水,電,門窗,作好實驗記錄本的登記方可離開實驗室。抗原抗體反應Ab-Agreactions實驗目的掌握血型鑒定實驗、免疫膠體金技術實驗的操作及結果的正確觀察、判斷；熟悉血型鑒定實驗、免疫膠體金技術實驗的原理；了解血型鑒定實驗、免疫膠體金技術實驗的用途。抗原抗體反應的基礎

basisofAb-Agreaction抗原抗體反應的特點

charactersofAb-Agreaction特異性

Specificity

抗原抗體反應的特點

charactersofAb-Agreactions可逆性reversibility凝集反應

Agglutinationreactions在一定濃度的電解質環境中，顆粒性抗原（紅細胞、細菌、乳膠顆粒等）和相應抗體反應能夠產生肉眼可見的凝集塊。直接凝集(directagglutination)間接凝集（indirectagglutination）間接凝集抑制試驗(inhibition

of

indirectagglutination)直接凝集

directagglutination----ABO血型的鑒定

identificationofABObloodtype概述overview血型系統Bloodgroupsystem

1901年發現的人類第一個血型系統----ABO血型系統發現者----

奧地利細菌學家KarlLandsteinerABO血型系統的發現DiscoveryofABObloodtype【實驗原理】

Experiment’smechanism

血型是指紅細胞的血型，是根據紅細胞膜外表面存在的特異性抗原（鑲嵌于紅細胞膜上的糖蛋白和糖脂）來確定的，這種抗原或凝集原是由遺傳決定的YYY+【實驗器材】

Experiment’sequipments

1：載玻片、采血針、牙簽2：抗A和抗B單克隆抗體、碘伏、棉簽。【操作步驟】

Experiment’sMethods1.在潔凈的玻片兩端用記號筆分別標上A、B，然后在A端滴一滴抗A單克隆抗體，B端滴一滴抗B單克隆抗體；2.用碘伏消毒手指；3.取無菌采血針，采血；4.用牙簽一端蘸取少量血液，置于抗A單克隆抗體攪勻，換取另一根牙簽蘸取少量血液，置于抗B單克隆抗體攪勻；5.輕輕轉動玻片，使其充分混勻，靜置數分鐘后，觀察結果。注意：兩次取血的牙簽一定不能混用。（單克隆抗體+被檢者紅細胞）被檢者血型抗A抗B

＋－－＋＋＋－－A【實驗結果】Experiment’sresultsBABO【實驗結果】Experiment’sresults

免疫標記技術

immunolabelingtechniques簡介免疫標記技術是指用熒光素、酶、放射性同位素等對抗體或抗原進行標記，然后再通過檢測標記物來觀察抗原抗體反應的實驗技術。分類

classification

免疫膠體金技術

膠體金試紙條診斷是采用膠體金免疫層析技術研制而成，該技術是90年代初在免疫滲濾技術的基礎上建立的一種簡易快速的免疫學檢測技術，最先用于人絨毛膜促性腺激素（HCG）的測定和乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）等檢測。膠體金（Colloidalgold）是氯金酸（HAuCl4）的水溶膠，氯金酸在還原劑的作用下，聚合成特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩定的膠體狀態。膠體金標記的原理：膠體金在堿性條件下帶負電荷，與蛋白質分子的正電荷基團藉靜電吸引而形成牢固結合。膠體金標記技術（Immunogoldlabelingtechnique）是以膠體金作為示蹤標記物應用于抗原抗體反應的一種新型免疫標記技術。膠體金試紙條診斷技術的原理以硝酸纖維素膜為載體，利用了微孔膜的毛細血管作用，滴加在膜條一端的液體慢慢向另一端滲移，通過抗原抗體結合，并利用膠體金呈現顏色（紅色）反應，檢測抗原/抗體。最常用的是雙抗夾心法檢測抗原膠體金試紙條示意圖檢測線質檢線吸收墊樣品墊硝酸纖維素膜連接墊（膠體金墊）背襯（底板）【實驗原理】

Experiment’smechanism原理圖膠體金標記的鼠抗人α—hCG抗體抗人β—hCG抗體抗鼠IgG抗體hCG【操作步驟】

Experiment’sMethods1.待測樣品、檢測試紙和其它檢測材料等在室溫后檢測2.將測試紙有箭頭的一端插入尿液標本容器中，5秒鐘后取出平放，5分鐘內觀察結果注意：測試