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A80..

中華人民共和國國家標準

GB/T27819—2011

化學品體外哺乳動物細胞轉化試驗方法

Chemicals—Testmethodofinvitromammaliancelltransformation

2011-12-30發布2012-08-01實施

中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布

中國國家標準化管理委員會

GB/T27819—2011

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準與歐盟委員會法規歐洲議會和歐盟理事會關于化學品注冊評估許可和限制

440/2008:、、

的第號法規的測試方法法規的方法年體外哺乳動物細胞轉化試

(REACH)1907/2006B.21(2008)《

驗英文版技術性內容一致

》()。

本標準作了下列結構和編輯性修改

:

增加了范圍一章

———;

計量單位改成我國法定計量單位

———。

本標準由全國危險化學品管理標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC251)。

本標準起草單位中國疾病預防控制中心職業衛生與中毒控制所北京市疾病預防控制中心中國

:、、

化工經濟技術發展中心

。

本標準主要起草人穆效群李朝林王曉兵熊曉燕趙素娟吳維皚

:、、、、、。

Ⅰ

GB/T27819—2011

化學品體外哺乳動物細胞轉化試驗方法

1范圍

本標準規定了化學品體外哺乳動物細胞轉化試驗的試驗原則試驗方法試驗數據和報告

、、。

本標準可以作為化學品的致癌作用的替代檢測方法

。

2試驗原則

哺乳動物細胞培養試驗系統可用于檢測化學品引起的表型改變這種改變與其在體內系統的惡性

,

轉化有關廣泛使用的細胞株包括大鼠細胞主要觀察細胞的形態

。C3H10T1/2、3T3、SHE、Fischer,、

在軟瓊脂中轉化灶的形成或錨著獨立性的改變該系統還用于檢測細胞暴露于化學品后的其他一些生

。

理和形態學改變但應用不廣泛目前尚無任何體外試驗檢測終點被證實與癌癥發生機制有明確關系

,。。

某些檢測系統可以檢出促癌劑通過測定受試物對克隆形成能力克隆形成率或培養細胞的生長率的

。()

影響可反映其細胞毒性的大小故可通過計算染毒與毒性作用的相關性評價細胞毒性但由于有些試驗

,,

需要延長培養時間或更換培養皿因此有時細胞毒性數據不能用于計算轉化率

,,。

3試驗方法

31試驗準備

.

311細胞

..

很多細胞株和原代細胞都可作為受試細胞應根據所選擇的轉化試驗方法選擇適宜的細胞種類

,。

試驗前研究者應保證受試細胞接觸致癌物后會產生相應的表型改變本實驗室還應有記錄表明這種表

,,

型改變是有效可靠的

、。

312培養基液

..()

所用培養基和實驗條件應適合細胞轉化試驗

。

313受試物

..

在細胞染毒前受試物應與培養基混合均勻也可用適當的溶劑先溶解或制成懸浮液培養基中溶

,,。

劑的終濃度不應對細胞活性生長率或轉化率造成影響

、。

314代謝活化

..

細胞應分別在有無適宜代謝活化系統存在的條件下染毒當所用細胞類型自身具備代謝活化能力

、;

時則應考慮其活化特點是否適合受試物的化學特性

,。

32試驗條件

.

321陰性對照和陽性對照

..

每個試驗中均應分別選用一個直接作用的化合物和一個需要代謝活化的化合物作為陽性對照