ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T27644—2011

禽皰疹病毒2型熒光PCR檢測方法

Protocolofreal-timePCRfordetectingGallidHepersVirus2

2011-12-30發布2012-04-01實施

中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布

中國國家標準化管理委員會

中華人民共和國

國家標準

禽皰疹病毒2型熒光PCR檢測方法

GB/T27644—2011

*

中國標準出版社出版發行

北京市朝陽區和平里西街甲號

2(100013)

北京市西城區三里河北街號

16(100045)

網址

:

服務熱線

/p>

年月第一版

20123

*

書號

:155066·1-44332

版權專有侵權必究

GB/T27644—2011

前言

本標準按照的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由中華人民共和國農業部提出

。

本標準由全國動物防疫標準化技術委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標準起草單位中華人民共和國深圳出入境檢驗檢疫局揚州大學河南農業大學

:、、。

本標準主要起草人詹愛軍劉文博王新衛盧體康花群義陳書琨秦智鋒陳兵高小博

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T27644—2011

禽皰疹病毒2型熒光PCR檢測方法

1范圍

本標準規定了禽皰疹病毒型熒光檢測的操作方法

2PCR。

本標準適用于禽皰疹病毒型的鑒定及其流行病學調查診斷檢疫和監測

2、、。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規格和試驗方法

GB/T6682

3縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

Ct值每個反應管內的熒光信號量達到設定的閾值時所經歷的循環數

:。

DNA脫氧核糖核酸

:deoxyribonucleicacid。

dNTP三磷酸脫氧核糖核苷含有

:deoxy-ribonucleosidetriphosphate。dCTP、dGTP、dATP、

四種脫氧核糖核苷

dTTP。

EDTA乙二胺四乙酸

:ethylenediaminetetraaceticacid。

GHV2禽皰疹病毒型馬立克氏病病毒血清型

:GallidHepersVirus22(1)。

MD馬立克氏病

:Marek’sDisease。

PBS磷酸鹽緩沖生理鹽水

:phosphatebelancedsolution。

PCR聚合酶鏈式反應

:polymerasechainreaction。

Real-timePCR實時熒光聚合酶鏈反應

:Real-timepolymerasechainreaction。

Taq酶耐熱聚合酶

:ThermusaquaticuspolymeraseDNA。

4試劑

41試劑級別除另有規定本方法試驗用水應符合規定的二級水所用化學試劑均為分

.:,GB/T6682,

析純

。

42禽皰疹病毒型熒光檢測試劑盒保存組成及使用注意事項參見附錄

.2PCR,-20℃,A。

43引物和探針序列產物長度

.(142bp)

上游引物

:5’CCACCACCTCCCATCTGTAC3’

下游引物

:5’GACAAGGCTGAGCGTAAACC3’

探針其端和端分別標記

TaqMan:5’ACACGGCTCGGTAACAGGACACAATG3’,5’3’FAM

和或或

BHQ(Ta