第八章

對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類局麻藥物的分析11/2/20221pharmaceuticalanalysis-仁濟(jì)藥學(xué)11/2/20222pharmaceuticalanalysis理想的局麻藥具備條件：①麻醉作用強(qiáng)，吸收快，作用時(shí)間長(zhǎng)②無(wú)明顯毒性，安全范圍大③選擇性作用于神經(jīng)組織，穿透神經(jīng)組織能力強(qiáng)④性質(zhì)穩(wěn)定⑤作用可復(fù)性局部麻醉藥11/2/20223pharmaceuticalanalysis

苯佐卡因阿索方新阿索方普魯卡因-190411/2/20225pharmaceuticalanalysis二、局部麻醉藥的結(jié)構(gòu)類型對(duì)氨基苯甲酸酯類①普魯卡因苯環(huán)上有其它基團(tuán)取代，空間位阻增大而使酯基水解慢，局麻作用增強(qiáng)。②苯環(huán)氨基引入烷基，局麻作用增強(qiáng)；苯環(huán)氨基以烷氧基取代，保持局麻作用。丁卡因乙氧卡因氯普魯卡因羥普魯卡因11/2/20226pharmaceuticalanalysis③側(cè)鏈碳鏈改變，可使麻醉作用延長(zhǎng)，穩(wěn)定性增加。④羧酸酯中的氧被硫置換，脂溶性增大，起效快。徒托卡因二甲卡因硫卡因11/2/20227pharmaceuticalanalysis2.酰胺類

甲哌卡因（卡波卡因）羅哌卡因丙胺卡因三甲卡因布比卡因利多卡因Isogramine生物堿11/2/20228pharmaceuticalanalysis鹽酸普魯卡因芳伯氨基酯鍵,易水解脂烴胺Cl－反應(yīng)11/2/202210pharmaceuticalanalysis對(duì)乙酰氨基酚酰胺鍵，易水解雜質(zhì)對(duì)氨基酚潛在芳伯氨基酚羥基酰胺類藥物11/2/202212pharmaceuticalanalysis結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與理化性質(zhì)：具有芳伯氨基或潛在的芳伯氨基可用重氮化－偶合反應(yīng)鑒別、亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量，可與芳醛發(fā)生縮合反應(yīng)，易氧化變色酯鍵或酰胺鍵易水解11/2/202214pharmaceuticalanalysis具脂烴胺側(cè)鏈，弱堿性可與生物堿沉淀試劑發(fā)生沉淀反應(yīng)進(jìn)行鑒別或非水堿量法測(cè)定含量重金屬離子（如酚羥基）的反應(yīng)UV、IR11/2/202215pharmaceuticalanalysis第二節(jié)鑒別試驗(yàn)（Identification）

重氮化—偶合反應(yīng)與重金屬離子反應(yīng)水解產(chǎn)物的反應(yīng)制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)UV、IR11/2/202216pharmaceuticalanalysis（一）重氮化—偶合反應(yīng)

（diazotization-couplingmethod）具有芳伯氨基或潛在的芳伯氨基HCl橙黃→↓猩紅色11/2/202217pharmaceuticalanalysisHClOH－橙黃猩紅~重氮鹽偶氮化合物11/2/202218pharmaceuticalanalysis鹽酸普魯卡因ChP（2000）[鑒別]（1）本品顯芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）取供試品約50mg，加稀鹽酸1m1，必要時(shí)緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。

11/2/202220pharmaceuticalanalysis對(duì)乙酰氨基酚ChP（2000）[鑒別]（2）取本品約0.1g，加稀鹽酸5m1，置水浴中加熱40分鐘，放冷；取0.5m1，滴加亞硝酸鈉試液5滴，搖勻，用水3ml稀釋后，加堿性β-萘酚試液2m1，振搖，即顯紅色。

11/2/202221pharmaceuticalanalysisNa2CO3溶解黃色藍(lán)紫色（三）與重金屬離子反應(yīng)與銅離子反應(yīng)——芳酰胺11/2/202223pharmaceuticalanalysis鹽酸利多卡因，在酸性溶液中與氯化鈷試液反應(yīng)，生成亮綠色的Co鹽沉淀鹽酸利多卡因的水溶液加硝酸酸化，再加硝酸汞試液煮沸，顯黃色；對(duì)氨基苯甲酸酯類藥物顯紅色或橙黃色，可與之區(qū)別11/2/202224pharmaceuticalanalysis鹽酸普魯卡因ChP（2000）[鑒別]（2）取本品約0.1g，加水2ml溶解后，加10％氫氧化鈉溶液1ml，即生成白色沉淀；加熱，變?yōu)橛蜖钗铮焕^續(xù)加熱，產(chǎn)生的蒸氣，能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色；熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀。

11/2/202226pharmaceuticalanalysis苯佐卡因ChP（2000）[鑒別]（2）取本品約0.1g，加氫氧化鈉試液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘試液，加熱，即生成黃色沉淀，并發(fā)生碘仿的臭氣。

11/2/202227pharmaceuticalanalysis

（五）制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)三硝基苯酚衍生物

鹽酸利多卡因ChP（2000）三硝基苯酚利多卡因黃色沉淀，熔點(diǎn)為228～232℃，熔融時(shí)同時(shí)分解。鹽酸布比卡因ChP（2000）衍生物熔點(diǎn)為194℃11/2/202228pharmaceuticalanalysis（六）UV

對(duì)于R——COX型化合物的吸收光譜當(dāng)X=-OH或-OR時(shí)λmax基本值為230nm，p-NH2+58nm,p-NHCH3+73nm

具有芳環(huán)取代有發(fā)色團(tuán)-C=O，助色團(tuán)-OH、-NHR11/2/202230pharmaceuticalanalysis（七）IR

普魯卡因普魯卡因胺

COO(CH2)2NEt2CONH(CH2)2NEt2νC=016921640酯νC-01271、1170、1115—酰胺II吸收帶δN-H1645（胺基）1540酰胺III吸收帶νC-N—1280

二乙胺鹽νN+-H25852645伯胺、酰胺νNH2

3315、32003100～350011/2/202231pharmaceuticalanalysis典型化學(xué)鍵的紅外特征吸收峰峰位（cm-1）歸屬基團(tuán)或化學(xué)鍵3750-3000羥基氨（胺）基3300-3000苯環(huán)烯炔1900-1650羰基1670-1500苯環(huán)

1300-1000酯羧酸1000-650苯環(huán)

11/2/202232pharmaceuticalanalysis第三節(jié)雜質(zhì)檢查（DetectionImpurities

）鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查11/2/202233pharmaceuticalanalysis五、含量測(cè)定

（Assay

）亞硝酸鈉滴定法非水溶液滴定法紫外分光光度法比色法熒光法HPLC11/2/202234pharmaceuticalanalysis1.原理具芳伯氨基的藥物（具游離芳伯氨基的藥物和具潛在芳伯氨基的藥物）在酸性溶液中與亞硝酸鈉定量反應(yīng)，生成重氮鹽，用永停法或外指示劑法指示反應(yīng)終點(diǎn)

（一）亞硝酸鈉滴定法1:211/2/202235pharmaceuticalanalysis具潛在芳伯氨基的藥物水解或還原11/2/202236pharmaceuticalanalysis（1）加入適量KBr加速反應(yīng)

在鹽酸存在下，重氮化反應(yīng)的機(jī)理為：

2.主要測(cè)定條件NaNO2+HCl→HNO2+NaClHNO2+HCl→NOCl+H2O11/2/202237pharmaceuticalanalysis11/2/202238pharmaceuticalanalysis（1）K1（2）K2

∵K1≈300K2加入KBr，可增大被測(cè)溶液中NO+的濃度，所以能加快重氮化反應(yīng)速度11/2/202239pharmaceuticalanalysis（2）酸的種類及其濃度在不同酸中重氮化反應(yīng)的速度為：HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3綜合考慮，采用鹽酸（過(guò)量）11/2/202240pharmaceuticalanalysis①重氮化反應(yīng)速度加快；②重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定；③防止生成偶氮氨基化合物，而影響測(cè)定結(jié)果加入過(guò)量鹽酸：11/2/202241pharmaceuticalanalysis鹽酸量也不能過(guò)多芳伯胺/鹽酸1:2.5-6

(摩爾比)偶氮氨基化合物11/2/202242pharmaceuticalanalysis（3）室溫條件下滴定高溫下，重氮反應(yīng)快

10～30℃溫度過(guò)高，重氮鹽分解11/2/202243pharmaceuticalanalysis滴定管尖端插入液面下2/3處，滴定液一次大部分放下，近終點(diǎn)時(shí)方改為慢速滴定，將管尖提出液面再緩緩滴定至終點(diǎn)（4）滴定速度：先快后慢快速滴定法11/2/202244pharmaceuticalanalysis（1）永停滴定法ChP（2000）、BP（1998）3.指示終點(diǎn)的方法原理：（電極為鉑－鉑電極系統(tǒng)）終點(diǎn)前溶液中無(wú)亞硝酸，線路無(wú)電流通過(guò)，電流計(jì)指針指零終點(diǎn)時(shí)溶液中有微量亞硝酸，電極即起氧化還原反應(yīng)，線路中遂有電流通過(guò)，電流計(jì)指針突然偏轉(zhuǎn)，并不再回復(fù)，即為滴定終點(diǎn)11/2/202245pharmaceuticalanalysis永停滴定法（附錄ⅦA）用作重氮化法的終點(diǎn)指示時(shí)，調(diào)節(jié)R1使加于電極上的電壓約為50mV。取供試品適量，精密稱定，置燒杯中，除另有規(guī)定外，可加水40ml與鹽酸溶液（1→2）15ml，而后置電磁攪拌器上，攪拌使溶解，再加溴化鉀2g，插入鉑—鉑電極后，將滴定管的尖端插入液面下約2/3處，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，隨滴隨攪拌，至近終點(diǎn)時(shí)，將滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，繼續(xù)緩緩滴定，至電流計(jì)指針突然偏轉(zhuǎn)，并不再回復(fù)，即為滴定終點(diǎn)。11/2/202246pharmaceuticalanalysis

KI—淀粉糊劑或試紙2NaNO2+2KI+4HCl→2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O

原理：滴定到達(dá)終點(diǎn)后，稍過(guò)量的NaNO2在酸性溶液中氧化KI，析出的I2，遇淀粉即顯藍(lán)色（2）外指示劑法11/2/202247pharmaceuticalanalysis脂烴胺側(cè)鏈、芳氨基，具弱堿性

直接在水溶液中滴定有困難，但在非水溶劑中滴定滴定終點(diǎn)突躍明顯

（二）非水溶液滴定法原理適用對(duì)象：鹽酸利多卡因鹽酸丁卡因腎上腺素類11/2/202248pharmaceuticalanalysis滴定液高氯酸滴定液溶劑冰醋酸冰醋酸+醋酐醋酐指示劑結(jié)晶紫指示液+醋酸汞條件消除HX干擾加入Ac2O——增加堿性，終點(diǎn)突躍明顯,

否則改用電位法指示終點(diǎn)

11/2/202249pharmaceuticalanalysis對(duì)乙酰氨基酚

在稀堿溶液中，于257nm處有最大吸收，在CH3OH-H2O混合溶劑中λmax244nm其紫外吸收光譜特征，可用于其原料及其制劑的含量測(cè)定。

USP多采用標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法而ChP則采用吸收系數(shù)法715λmax257（三）紫外分光光度法11/2/202250pharmaceuticalanalysis對(duì)乙酰氨基酚

USP（24）對(duì)照法

標(biāo)準(zhǔn)品溶劑溶解稀釋供試品溶劑溶解以溶劑為空白在λmax處測(cè)A，計(jì)算即得Ax/AR×CR11/2/202251pharmaceuticalanalysis鹽酸普魯卡因注射液ChP（2000）可同時(shí)測(cè)定鹽酸普魯卡因及其降解產(chǎn)物對(duì)氨基苯甲酸

離子抑制色譜法內(nèi)標(biāo)法定量（四）HPLC法11/2/202252pharmaceuticalanalysis*方法與含量計(jì)算:對(duì)照品溶液(濃度C對(duì))+

內(nèi)標(biāo)

進(jìn)樣(圖1)供試品溶液(濃度C樣)+

內(nèi)標(biāo)