1、斜面4支，空氣、手指皮膚、細菌分離培養物（上次實驗平板）器材準備醫學微生物學實驗綜合性實驗三空氣細菌學檢查結果分析手指皮膚細菌學檢查結果分析空氣的細菌學檢查組號采樣時間(min)采樣地點菌落形成單位(CFU)1152153154155156157158159151015CFU /m3 50,000NAT 86N(直徑7cm平板）N：平板上的菌落數 A：平板面積(38.5cm2)T：采樣時間(15分鐘) CFU：colony forming unit WHO推薦的醫院各部門空氣細菌標準級別cfu/m3適用范圍級區10器官移植、心血管、矯形等外科手術室，保護性隔離室，灌注或配制注射液實驗室級區20

2、0無菌室、手術室、供應室、嬰兒室、中心滅菌單位、術后恢復室、早產兒及產房、重癥監護病房級區200500一般病房、治療室、放射室、衣帽室、按摩室、盥洗室、手術室浴室我國公共場所空氣衛生細菌學標準（GB96639673-1996，GB16153-1996,平皿直徑9cm）撞擊法cfu/m3沉降法個/皿適用范圍10001035星級賓館、飯店1500202星級以下賓館和非星級帶空調賓館、飯店250030普通飯店、招待所、酒吧、茶座、咖啡廳、圖書館、博物館、美術館、飛機客艙400040音樂廳、影劇院、錄像廳（室）、游藝廳、舞廳、理發店、美容院（店）、游泳館、體育館、醫院候診室、候機室、旅客列車車廂、輪船

3、客艙、飯館（餐廳）700075展覽館、商場（店）、書店、候車室、候船室手指皮膚細菌學檢查結果分析第1格為洗手前：+ 第2格為洗手后 常規(甲、丙)洗手方法：? 標準(乙、丁)洗手方法：?第3格為消毒后：？第4格空白對照：-醫學微生物學實驗綜合性實驗一膿汁和糞便標本中病原菌的檢測（三）菌落特征觀察P11細菌純培養P10油鏡使用方法（講解）膿汁和糞便標本檢驗（錄像）細菌的純培養 Pure Cultures膿汁標本在普通平板上有黃色、白色兩種菌落，菌落的色素是脂溶性的，是細菌本身的顏色。菌落直徑2mm左右、圓形、隆起、表面光滑、濕潤、邊緣整齊、不透明。37培養24小時 糞便標本在伊紅美藍平板上，有紫

4、黑色、淡粉紅色兩種菌落，菌落顏色是水溶性的，不是細菌本身的顏色，顏色的產生是因為大腸埃希菌分解乳糖產酸，酸使伊紅與美藍結合，形成紫黑色具有金屬光澤、大而隆起、不透明的菌落；菌落直徑23mm。致病菌不分解乳糖，菌落呈伊紅的顏色，很淡的粉紅色，半透明，直徑12mm。37培養24小時 斜面接種分工甲普通平板黃色菌落1支斜面 乙普通平板白色菌落1支斜面 丙伊紅美藍平板紫黑菌落1支斜面 丁伊紅美藍平板粉紅菌落1支斜面 斜面正面上2/3作標記：組號、黃色、白色、紫黑、粉紅。選擇平板上相同的菌落數多的、典型的、容易挑取的單菌落。在平皿底部玻璃上，畫個大圈選取菌落，得到同組同學認可，才能挑取。畫圈選菌落畫圈選

5、菌落甲黃色丙紫黑乙白色丁粉紅接種環套住菌落輕刮取菌斜面接種法 Streak Slant Method甲黃色, 乙白色。丙紫黑, 丁粉紅。標記：組號，顏色細菌接種在斜面培養基的表面。生物安全警告接種環接種斜面一次，可產生幾十個微生物氣溶膠顆粒。氣溶膠粒徑100um沉降很快,50um在0.4s內擴散開,5um通過呼吸道直接到達肺泡。Pike博士對實驗室感染統計分析結果發現，不明原因的感染高達82%，大多數是氣溶膠在空氣中擴散引起的。實驗時應坐著，在火焰周圍1020厘米內操作，保持安靜、有序，盡量少說話、少走動，以免感染病原菌。奧林巴斯 CX21型 生物顯微鏡開關與調整光強開或關之前，必須將亮度調整

6、旋鈕按箭頭相反方向轉動到最小位置，以免損壞燈泡。電源開關撥到側為開，撥到側為關閉。按箭頭方向轉動亮度調整旋鈕變亮，相反方向轉動則變暗。聚焦從顯微鏡的側面觀察，按箭頭方向轉動粗調旋鈕，使物鏡盡可能接近標本。一邊看目鏡，一邊慢慢逆箭頭方向轉動粗調旋鈕， 使載物臺下降。看到標本以后，用微調旋鈕來正確對焦。10倍物鏡的工作距離（WD，從物鏡到標本的 距離）為10.5mm。 油鏡的WD為0.13mm。調整聚光鏡位置和孔徑光闌用聚光鏡上下移動旋鈕，將聚光鏡轉到最上面。在孔徑光闌環上刻有物鏡倍率（10倍，100倍等），觀察時將與使用物鏡相對應的倍率放到正面。轉換物鏡旋轉物鏡轉盤，將希望使用的物鏡（10倍、1

7、00倍）轉到標本的上方。100倍浸油物鏡使用方法油鏡放入光路之前，一定要在標本的觀察部位上加一滴浸油。旋轉物鏡轉盤，使油鏡進入光路，用微調旋鈕對好焦距。如果浸油內有氣泡，會影響觀察，可稍微旋轉物鏡轉盤，使油鏡來回通過12次浸油，排除油內氣泡。香柏油折射率n=1.515空氣的折射率n=1.000玻璃的折射率n=1.520油浸鏡的原理光線 滴加香柏油可使光線更多進入物鏡,避免光線通過折射率低的空氣而散失,以提高物鏡的分辨率,使物象明亮清晰。 放大倍數：目鏡10倍物鏡90或100倍。奧林巴斯 CX21型 生物顯微鏡（實驗柜內，每人一臺）注意：只能橫放，不得豎放。顯微鏡油鏡的使用P1310物鏡標本位置

8、滴加香柏油100油鏡浸泡油中,幾乎與標本接觸（工作距離0.13mm）細調節調焦，觀察物像記錄結果關閉電源。油鏡處理：擦鏡紙拭去香柏油 擦鏡紙沾少許乙醇和乙醚（7:3）混合液擦拭擦鏡紙擦拭油鏡。顯微鏡罩上防塵罩 橫放在實驗柜內。(順德校區）實驗臺兩側的電源插座，只能插入一個插頭，請選擇離你最近的電源插座。（校本部）實驗臺中間，三個位的插座，中間那位插孔沒有電，不能使用，只能用兩側的插座。 醫學微生物學實驗綜合性實驗三、一空氣、手指皮膚的細菌學檢查結果分析膿汁和糞便標本中病原菌的檢測菌落特征觀察P11細菌純培養P10油鏡使用方法（講解）膿汁標本檢驗 （錄像）腸道致病菌的分離鑒定（錄像）思考題在微生物學實驗中,怎樣才能避免雜菌的污染?空氣的衛生標準規定如何?你的實驗結果說明了什么問題?怎樣從醫務人員手指上分離和鑒定金黃