1、優選文檔優選文檔PAGEPAGE8優選文檔PAGE血清-淀粉酶（AMS）測定實驗原理AMS測定采用酶動向比色測定法。所用底物為4,6-亞乙基-,D-麥芽七糖苷-對硝基苯酚（EPSG7）。樣品中淀粉酶分解底物EPSG7，生成對硝基苯酚（PNP），在405nm處比色，吸光度的上升速率與樣品中-淀粉酶的活力成正比。252亞乙基GG2PNP5EPS-G75H2O-淀粉酶2亞乙基G42G3PNP亞乙基G34GPNP-葡萄糖苷酶2G2PNP2G3PNPG4PNP14H2O5PNP14G（反響式中PNP：對硝基苯酚；G：葡萄糖）2.標本收集與辦理：2.1病人準備：無特別要求。2.2標本種類：血清、肝素或ED

2、TA辦理的血漿、尿液。2.3血清分別血清或血漿應在收集后趕忙分別出來。未酸化的尿液，隨機或限時收取。標本存放：不要用嘴吸取標本或對標本吹氣，省得唾液污染標本唾液中的淀粉酶使結果高升。血清淀粉酶在2025牢固一個星期，防備微生物降解作用；在28時牢固一個月。尿液樣品在28可牢固10天，在1525可牢固2天。對于尿液，酸性pH值可使淀粉酶的穩定性減弱，因此，儲蓄前pH值應調至大體7.0。標本運輸：常溫條件下運輸標本拒收標準：細菌污染、溶血的不能夠做測定。實驗資料：6.1AMS測定試劑盒（試劑1664ml試劑2616ml）試劑組成試劑1：GOODS緩沖液pH7.1100mmol/L氯化鈉50mmol

3、/L氯化鎂10mmol/L-葡萄糖苷酶23KU/L試劑2：EPSG73mmol/L試劑準備：試劑為即用式。試劑牢固性與儲藏：原試劑避光保存于28，若無污染，可牢固至無效期。試劑有效期為24個月。變質指示：當試劑有濁度時，表示有細菌污染則試劑不能夠使用。注意事項：唾液和皮膚中含有-淀粉酶，應防備用嘴吸取試劑，防備皮膚接觸試劑。試劑中含疊氮鈉，避免接觸皮膚及粘膜。6.2校準品：拜會生化檢驗校準品和質控品.SOP文件6.3質控品：拜會生化檢驗校準品和質控品.SOP文件儀器：奧林巴斯AU2700生化解析儀操作步驟8.1項目基本參數：拜會生化檢驗奧林巴斯AU2700生化解析儀項目測定參數.SOP文件8.

4、2儀器操作步驟：拜會生化檢驗奧林巴斯AU2700生化解析儀操作規程.SOP文件檢驗結果的判斷與解析質量控制：在每一批標本中都應把非定值血清水平I與II質控做為未知標本進行解析，以2S為質控警告限，3S為失控限，繪制質控圖，判斷可否在控。質控規則參見生化室室內質控操作規程.SOP文件。計算方法：無需手工計算，在37每個標本的結果儀器自動以U/L報告。手工測定計算方法為：-淀粉酶(U/L)=A/minF反響整體積（ml）1000F=毫摩爾消光系數樣品體積（ml）比色杯光徑注：1000IU/ml到U/L的變換系數PNP在405nm處的毫摩爾消光系數：9.90參照值范圍血清或血漿16-108U/L隨機

5、尿液100-1200U/L參照值因性別、年齡、飲食和地域的不同樣而有所差別。依照好的實驗室經驗，每個實驗室應建立自己的參考值。臨床意義：-淀粉酶是將淀粉降解為麥芽糖的水解酶類。人體內的-淀粉酶本源于多種器官：胰淀粉酶由胰腺產生并釋放到腸道中，唾液淀粉酶由唾液腺合成并分泌到唾液中。血液中的淀粉酶由腎臟除去并經尿液排泄。因此，尿液淀粉酶活性上升反響了血清淀粉酶活性的高升。檢測血清、尿液中-淀粉酶活力主要用于診斷胰腺功能凌亂和監測并發癥的發展。急性胰腺炎發患病人在腹痛開始后的幾小時內，血液淀粉酶活力高升，約12小時后達到峰值；并最少在5天后活力回復至參照范圍內。由于多種非胰腺疾病如腮腺炎、腎功能不全

6、等也會引起淀粉酶的高升，因此-淀粉酶對胰腺功能凌亂的診斷特異性不高。因此，為了確診急性胰腺炎，還應進行脂肪酶檢測操作性能14.1線性范圍：32400U/L14.2精美度：精美度的評估是依照NCCLS介紹的標準方7，AU2700批內不精美度小于5%，總不精美度小于10%。用于解析的質控血清和數據辦理吻合以上的NCCLS的規則。批內精美xsCV批間精美x度(U/L)(U/L)(%)度(U/L)s(U/L)CV(%)n=20n=20樣品11842.001.08樣品11801.821.01樣品23982.670.67樣品23833.740.97樣品38414.960.59樣品38177.480.921

7、4.3方法學比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時對100個樣品進行AMY活力檢測，將檢測結果作方法學比較，其統計結果以下：y=1.00 x+1.00U/L；r=0.998。14.4矯捷度：本試劑的檢測限為3U/L。14.5病人結果可報告范圍：32400U/L高出范圍結果辦理：本法線性上限為2400U/L。如樣品測定值高出上限時，應將樣品用0.9氯化鈉溶液作1：稀釋，重新測定，結果乘以11。病危報警值的辦應該血清AMS300U/L時，在經過復查等確認手段辦理后應及時向臨床主管醫生報告。方法限制性17.1本法線性上限為2400U/L。如樣品測定值高出上限時，應將樣品用0.9氯化鈉

8、溶液作1：10稀釋，重新測定，結果乘以11。17.2攪亂物質：當樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，甘油三酯濃度11.3mmol/L時沒有觀察到干擾。即使極低濃度的血紅蛋白都會對檢測產生攪亂。拯救措施：當儀器發生故障時，迅速聯系儀器廠家進行維修。參照文件：1.Friedman,R.B.andofDiseasesonClinicalLaboratoryTests,2ndEdition,AACCPress,Washington,DC,1989.2.Blair,H.E.,Genzyme,USPatentPending.3.Tietz,N.W.(Ed),ClincialGuidetoLaboratoryTests,2ndEdition,W.B.Saunders,1990.Winkelman,J.W.,ClinicalChemistry,Principles&Technciques,2ndEdition,Harper&Row,943-949;1974.NCCLS,InterferenceTestinginClincialChemistry,EP7-P,1986.6.Young,D.S.,EffectsofDrugsonClincialLaboratoryTests,4thEdition,AACCPre