1、中國科技論文在線中國科技論文在線- FORMTEXT Determination of loganin in Pterocephalus hookeri FORMTEXT TAN De, FORMTEXT GU Rui, FORMTEXT ZHANG Yi, FORMTEXT MENG Xianli, FORMTEXT LAI Xianrong(College of Ethnic Medicine, Chengdu University of TCM, Chengdu 611137)Abstract: FORMTEXT Objective： To establish a method of H

2、PLC for determination the contents of loganin in Pterocephalus hookeri . Method: The separation column was a Welchrom C18 column(4.6 mm250 mm,5 m), the mobile phase was acetonitrile-warter (1288), the flow rate was 1 mLmin-1 and the detection wavelength was 240 nm. Result: The loganin had a good lin

3、er relationship at the range of 0.06g1.2g. The average spotting recovery was 97.03%, and RSD was 1.41%. Conclusion: The method is simple , accurate , better specificity and suitable for its assaying. Key words: FORMTEXT Tibetan material medical；Pterocephalus hookeri；loganin；HPLC引言翼首草又名榜孜毒烏，為川續斷科植物匙葉

4、翼首草Pterocephalus hookeri (C. B. Clarke) Heck的干燥全草，系大宗藏藥材1，2000年被西藏紅十字會列為一級瀕危藏藥2。翼首草具有解毒除瘟，清熱止痢，祛風通痹之功效；主治外感發熱，風濕熱痹等癥，臨床用于治療類風濕性關節炎。目前主要通過測定游離三萜皂苷元齊墩果酸和熊果酸來控制翼首草藥材的質量3,4，尚未見翼首草藥材或其制劑中對其它化合物含量測定的相關報道。馬錢苷是翼首草中重要的化學成分5，具有抗炎、抗氧化等作用6,7。建立馬錢苷的含量測定方法，對翼首草藥材及其制劑質量標準完善具有重要的意義。本實驗在確定了測定方法后，分別對20批不同產地來源翼首草藥材中馬錢

5、苷的含量進行了測定。一級標題儀器、試劑與藥材儀器、試劑與藥材島津 LC -2010A HT（四元泵，自動進樣器，紫外檢測器），LCsolution化學工作站；UPT- = 1 * ROMAN I-10T型優普PUT系列超純水器；AS10200超聲波清洗器（天津奧特賽斯儀器有限公司）。馬錢苷對照品由中國藥品生物制品檢驗所提供（批號111640-200604）；乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。藥材原植物經成都中醫藥大學民族醫藥學院張藝研究員鑒定為川續斷科植物匙葉翼首花P. hookeri (C. B. Clarke) Heck。藥材分為全草、地上部分（葉、花葶、花）和地下部分（根及根

6、莖）。方法與結果色譜條件與系統適應性試驗Welchrom C18柱（ 4.6250mm，5m）；流動相乙腈-水（12：88）；檢測波長240 nm；柱溫30；流速1 mLmin-1。理論塔板數以馬錢苷計不低于8000對照品溶液的制備取馬錢苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL 含馬錢苷60 g的溶液，即得。供試品溶液的制備取本品粉末(過三號篩)約0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入80%甲醇50 ml，超聲處理(功率250 W,頻率50 kHz)30 min后離心20 min（3000rmin-1），取上清液經微孔濾膜(0.45 m)濾過，即得。線性關系考察分別吸取對照品溶液1 L

7、、2 L、5 L、10 L、20 L進樣測定，以馬錢苷峰面積積分值為縱坐標，馬錢苷對照品的量為橫坐標，繪制標準曲線，其回歸方程為：y=1250745x，r=0.9999。馬錢苷在0.06 g1.2 g范圍內與峰面積呈良好的線性關系。精密度試驗取馬錢苷對照品溶液5 L進樣5次，峰面積RSD為0.84 。穩定性試驗 取供試品溶液在0h、1 h、2 h、4 h、12 h分別進樣5 L，記錄峰面積，RSD為0.43%（n=5），表明馬錢苷在12 h內穩定。重復性試驗 精密稱取同一批藥材粉末0.5 g，同2.3項下方法制備供試品溶液，進樣分析，計算馬錢苷含量，其RSD為1.07%。加樣回收率試驗 精密稱

8、取6份已知含量的藥材粉末0.25 g，置于100 mL圓底燒瓶中，精密加入馬錢苷對照品溶液（1mgmL-1）0.5 mL，同2.3項下方法制備供試品溶液。結果平均加樣回收率為97.03%，RSD為1.41%，見表1。表1 馬錢苷加樣回收率編號取樣量/g樣品中量/mg加入量/mg測得量/mg回收率/%平均值/%RSD/%10.24880.47770.50000.955195.4897.031.4120.25080.48150.50000.963596.3930.25090.48170.50000.973298.2940.24900.47810.50000.960196.4050.24990.47

9、980.50000.969597.9460.25100.48190.50000.970397.68樣品的測定 按上述方法分別對15批翼首草自采藥材（樣品115）和5批商品藥材（樣品1620）進行了測定，外標法計算馬錢苷的含量。色譜圖見圖1，結果見表2。圖1 對照品和樣品的色譜圖表2 翼首草中馬錢苷的測定結果（n=2）編號藥材來源地下部分馬錢苷含量（mg/g）地上部分馬錢苷含量（mg/g）藥材全草馬錢苷含量（mg/g）1康定縣新都橋鎮日阿宗巴0.390.270.312康定縣塔公鄉山坡草甸0.320.730.493道孚縣八美鎮草甸灌叢24道孚縣八美鎮雪瓦村附近0.470.330.405道孚縣八美鎮

10、少烏農場嘎子橋0.440.560.456道孚縣八美鎮龍燈草原北口0.060.030.027爐霍縣仲仁達鄉林邊草甸0.440.690.628爐霍縣雅德鄉林邊草甸0.281.000.419甘孜縣下雄鄉灌叢草甸0.411.670.8810甘孜縣絨壩岔鄉青稞地邊0.840.960.7711德格縣錯阿鄉流石坡地0.350.100.1712石渠縣牧場高山草甸713若爾蓋縣唐克鄉11.391.331.2414若爾蓋縣唐克鄉21.571.571.5015若爾蓋多瑪山牧場0.811.221.0516甘孜州藏醫院0.7817青海省藥材市場卓瑪藏蒙藥材所1.341.041.1818西藏樣毛加藥材收購站1.6419西

11、藏卓瑪藥材收購站0.991.411.3420西藏俄吾藥材收購點0.57討論測定方法的選擇本研究考察了供試品溶液制備方法中提取方法、提取溶媒、溶媒用量和提取時間等因素，結果表明，用80%甲醇50mL超聲提取30min即可將馬錢苷基本提取完全。本方法操作簡便，可以準確測定翼首草藥材中馬錢苷的含量。本文建立了翼首草中馬錢苷的含量測定方法，為全面的控制翼首草原藥材質量提供了參考和借鑒中國藥典2010年版翼首草項下采用HPLC法測定齊墩果酸和熊果酸的含量，旨在通過測定二者的含量控制翼首草藥材中三萜皂苷的含量。參考藥典條件研究表明：翼首草地上與地下部位齊墩果酸和熊果酸含量差異較大，藥材地下部分游離皂苷元的

12、含量普遍低于藥典規定指標。課題組通過市場調查發現，各批次藥材中地上部分與地下部分重量比例差異大。由于傳統用藥經驗認為翼首草根及根莖較好，因此含根莖較多的藥材價格高。綜上分析可知，僅以游離皂苷元評價翼首草藥材質量可能不夠全面，可考慮選用馬錢苷作為指標，與齊墩果酸、熊果酸含量測定互補，客觀反映翼首草藥材質量。藥材中馬錢苷成分含量分析 從表2可知，各批次藥材因產地不同，全草中馬錢苷含量差異較大，即使在較小的區域范圍內，其含量也表現出較大的變化（如36號樣），其原因值得深入探討。多數藥材地上部分馬錢苷含量較地下部分含量高，但其含量比例不具規律性。參考文獻 (References) FORMTEXT 1

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