1、發(fā)酵工程:以微生物、動植物細胞為生物作用劑進行工業(yè)化生產(chǎn)的工程，包含發(fā)酵工藝和發(fā)酵設(shè)施。主要研究內(nèi)容：菌種選育與建立、大規(guī)模培育基和空氣的滅菌、大規(guī)模細胞培育過程、細胞生長和產(chǎn)物形成動力學、生物反響器的優(yōu)化設(shè)計和操作、發(fā)酵產(chǎn)品的分別純化過程中的技術(shù)問題等.發(fā)酵工程原理：指導發(fā)酵產(chǎn)品研究與開發(fā)，發(fā)酵工廠設(shè)計與建設(shè)以及發(fā)酵生產(chǎn)實踐的理論。初級代謝:是很多生物都擁有的生物化學反響,蛋白質(zhì)、核酸的合成等，均稱為初級代謝.初級代謝產(chǎn)物：指微生物經(jīng)過代謝活動所產(chǎn)生的、自己生長和生殖所必需的物質(zhì)，如氨基酸、多糖等。次級代謝：微生物以初級代謝產(chǎn)物為前提合成的對微生物自己的生命活動沒有明確功能的物質(zhì)的過程。自然

2、選育：不經(jīng)過人工辦理，利用菌種的自然突變而進行菌種挑選的過程。雜交育種：將兩個基因型不一樣的菌株經(jīng)符合使遺傳物質(zhì)從頭組合，分別和挑選擁有新性狀的菌株.誘變育種：利用物理、化學等誘變劑辦理平均而分別的微生物細胞群，在促進其突變率明顯提升的基礎(chǔ)上，采納簡易、高效的挑選方法，從中精選出少量切合目的的突變株，以供科學實驗或生產(chǎn)實踐使用。原生質(zhì)體交融育種：兩個親本的原生質(zhì)體在高滲條件下混淆，由聚乙二醇作為助融劑，使它們相互凝集，發(fā)生細胞交融,接著兩個親本基因組由接觸到互換，進而實現(xiàn)遺傳重組。前體：某些化合物加入發(fā)酵培育基中,能直接被微生物在生物合成過程中聯(lián)合到產(chǎn)物中去，而自己構(gòu)造并無顯然變化，產(chǎn)物的產(chǎn)量

3、卻因前體的加入而有較大的提升。克制劑：某些化合物能夠克制特定代謝門路的進行，使另一種代謝門路活躍，獲取人們所需產(chǎn)物的累積。如生產(chǎn)甘油加克制劑亞硫酸鈉，它與代謝過程中的乙醛生成加成物。這樣使乙醇代謝門路中的乙醛不可以成為NADH(復原型輔酶I)的受氫體，而使NADH在細胞中累積，進而激活磷酸甘油脫氫酶的活性,使磷22酸二羥基丙酮代替乙醛作為NADH2的受氫體而復原為磷酸甘油,其水解后即形成甘油。促進劑：指那些既不是營養(yǎng)物質(zhì)又不是前體,但卻能提升產(chǎn)量的增添劑，如加巴比妥鹽能使利福霉素單位增添，并能使鏈霉菌推延自溶，延伸分泌期。滅菌：用化學或物理的方法殺滅或除掉物料及其器皿中所有的生命體。消毒是指殺

4、死病原微生物的過程。分批滅菌：培育基置于發(fā)酵罐中加熱,達到預約溫度后保持一段時間，再冷卻到發(fā)酵所需溫度的滅菌。連續(xù)滅菌：在發(fā)酵罐外連續(xù)不停地進行加熱、保持和冷卻，同時把滅完菌的培育基通入已滅過菌的發(fā)酵罐的滅菌方式。對數(shù)殘留定律：在微生物死亡過程中的任一時刻，活菌數(shù)的減少速率與該時刻殘留的活菌數(shù)成正比，這就是微生物死亡的對數(shù)殘留定律。微分式為：dN/d=kN；積分式為：=（2,303/k)log(N/Ns）N開00始滅菌時的活菌數(shù)Ns滅菌結(jié)束時殘留菌數(shù).單種法：一個種子灌接種一只發(fā)酵罐的接種方法。雙種法:用兩只種子灌接種一只發(fā)酵罐的接種方法。倒種法：從一只發(fā)酵罐中倒出適合的，適當?shù)陌l(fā)酵液給另一個

5、發(fā)酵罐做種子的方法。生長關(guān)系型：產(chǎn)物生成與菌體生長之間有平行的準量關(guān)系.這樣的產(chǎn)品或為菌體自己或初級代謝產(chǎn)物。部分生長關(guān)系型：菌體生長出現(xiàn)兩個頂峰,第一個生長頂峰與產(chǎn)物合成無平行的準量關(guān)系，第二個生長頂峰與產(chǎn)物合成有平行的準量關(guān)系.非生長關(guān)系型：細胞生長與產(chǎn)物合成無平行的準量關(guān)系,只與菌體的總量相關(guān)。大多半次級代謝產(chǎn)物屬于這一類。凝集：是在中性鹽作用下,因為雙電層排擠電位的降低，而使膠體系統(tǒng)不穩(wěn)固的現(xiàn)象。絮凝：在某些高分子絮凝劑存在下,鑒于架橋作用,使膠粒形成粗大的絮凝團的過程，是一種以物理的會合為主的過程.怎樣從一個菌種獲取另一個菌種(如從生產(chǎn)菌種獲取缺點型）:誘變劑辦理:采納輻射、化學試劑

6、等要素辦理細菌。裁減野生型：抗生素法或菌絲過濾法。檢出缺點型：用一個培育皿即可檢出,有夾層培育法和限量增補培育法；在不一樣培育皿上分別進行比較和檢出的有逐一撿出法和影印檢出法。判定缺點型：可借生長譜法進行。怎樣從土壤中挑選芽孢桿菌（微生物)？采樣-預辦理-增殖培育-純種分別-菌落第擇-初篩-復篩-野生菌株-性能判定（生產(chǎn)性能試驗、毒性試驗、菌種判定）-菌種收藏采樣用取樣鏟，將表層5cm左右的浮土除掉，取5-25cm處的土樣1025g，裝入預先準準備好的塑料袋內(nèi)扎好、編號并記錄地址、土壤土質(zhì)、植被名稱、時間及其余環(huán)境條件.懸液稀釋預辦理從土壤中分別芽孢桿菌時，因為芽孢擁有耐高溫特征,100很難殺

7、死，要在121才能完全死亡。分別：培育基營養(yǎng)成分、PH、選擇性克制劑；培育:注意溫度、PH、氧氣需求及培育時間;菌落第擇：鋪菌法、復印法；復篩：生長速率、底物耗費、產(chǎn)物合成的測定.菌種收藏原理、常用方法原理：菌種收藏主假如依據(jù)菌種的生理生化特色,人工創(chuàng)建條件，使孢子或菌體的生長代謝活動盡量降低,以減少其變異。一般能夠經(jīng)過保持培育基營養(yǎng)成分在最低水平，缺氧狀態(tài),干燥和低溫，使菌種處于休眠狀態(tài)，克制其生殖能力。常用方法：（1）斜面冰箱收藏法：三個月.（2）白臘油封存法:六個月。（3）沙土管收藏法:產(chǎn)孢子或芽孢的微生物.（4)真空冷凍干燥收藏法：需要必定設(shè)施，要求比較嚴格.（5）液氮超低溫收藏法:往

8、常在微生物孢子或營養(yǎng)細胞培育物中加入20的甘油,將其保存在液氮或-80冰箱中，可收藏數(shù)年而不死。培育基主要營養(yǎng)成份及其生理功能培育基的成分：分為碳源、氮源、生長因子、無機鹽及微量元素、水和能源。碳源，細胞及其產(chǎn)物的碳架構(gòu)造和能量的根源。氮源:主要用于構(gòu)成菌體細胞物質(zhì)(如氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸等）和含氮代謝物等的氮素根源。生長因子:微生物代謝必不行少且不可以用簡單的碳源或氮源自行合成。無機鹽元素：P、S、Ca、Mg、Na、K、Fe、Cl等.P：核酸、ATP輔酶、代謝中間體的構(gòu)成成分。在代謝門路的調(diào)理方面，起側(cè)重要作用。S：蛋白質(zhì)、輔酶、生物素、谷光甘肽等構(gòu)成成分。是含硫氨基酸的構(gòu)成成分和某些輔酶的

9、活性基。Fe：細胞色素、過氧化氫酶的構(gòu)成成分.Mg、Ca:酶的輔基、激活劑。K、Na：調(diào)理浸透壓.微量元素：Zn、Co、Mn、Cu等,主假如酶的輔基和激活劑。水分：是營養(yǎng)物質(zhì)，因為走開水生命活動即停止；參加代謝活動，如水解與合成多糖、蛋白質(zhì)等均有水參加反響；是環(huán)境條件,很多反響需要在水中進行;是細胞物質(zhì)的連續(xù)相.能源:為微生物供給生長代謝所需的能源。微生物依據(jù)其生理類群的不一樣，其能源物質(zhì)也不一樣，有時能源物質(zhì)是獨立于碳源以外的。發(fā)酵工業(yè)中常用碳源及其優(yōu)弊端常用的碳源：糖類、油脂、有機酸、低碳醇、烴類。在特別狀況下（如碳源困窮時），蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物或氨基酸等也可被某些菌種作為碳源使用。(1）糖類

10、：a：速效碳源，如葡萄糖等。長處:易于利用.弊端：高濃度會造成克制,利用過程中產(chǎn)酸速度快，使pH降落.可是過多的葡萄糖會過分加快菌體的呼吸，致使影響某些酶的活性，進而克制微生物的生長和產(chǎn)物的合成。b.長效碳源，如淀粉等，長處是長效，邊糖化邊利用，不會造成高濃度克制,且價錢較廉價。弊端是增大培育基的粘度且有些微生物不擁有淀粉酶和糖化酶，不可以利用這種碳源。（2）油脂：長處是高復原態(tài)能源和碳源，同時也是消沫劑。弊端是脂肪的分解利用，可造成有機酸累積，使培育液pH降落.（3）有機酸鹽：如乙酸鹽等，也可做速效碳源，弊端是成本較高，利用后pH上漲。（4）醇類：如乙醇，低濃度是可被少量微生物作碳源,弊端是

11、成本高。5）烴類:石油微生物的碳源，其余微生物一般不可以利用。最近幾年來跟著石油工業(yè)的發(fā)展，微生物工業(yè)的碳源也有所擴大，一些烴類物質(zhì)已用于發(fā)酵工業(yè)中。怎樣使培育基有一個適合的PH緩沖能力？生理酸性、堿性鹽和pH緩沖劑的加入和搭配，以使pH值在發(fā)酵過程中不易超出必定范圍。（在微生物的生長、代謝過程中會產(chǎn)生惹起培育基pH改變的代謝產(chǎn)物，如不及時調(diào)理，就會克制甚至殺死其自己，因此在設(shè)計培育基時，就要考慮培育基成分對pH的調(diào)理能力。培育基主要無機鹽及其生理功能P：核酸、ATP輔酶、代謝中間體的構(gòu)成成分.在代謝門路的調(diào)理方面，起側(cè)重要作用，有益于糖代謝的進行，能促進微生物的生長。S：蛋白質(zhì)、輔酶、生物素

12、、谷光甘肽等構(gòu)成成分。硫存在于細胞的蛋白質(zhì)中，是含硫氨基酸的構(gòu)成成分和某些輔酶的活性基；Fe：細胞色素、過氧化氫酶的構(gòu)成成分，是菌體有氧氧化必不行少的元素。Mg、Ca：酶的輔基、激活劑。K、Na:調(diào)理浸透壓。與保持細胞的浸透壓相關(guān),是微生物發(fā)酵培育基的必需成分。Cl:在一般微生物中不擁有營養(yǎng)作用，但對一些噬鹽菌來講是實用的。開發(fā)一個菌株的培育基配方：1。研究思路與原則:A）先要認識該菌的營養(yǎng)種類和生態(tài)種類.B）確立培育基的種類和劃定培育條件的范圍。C）進行培育基成分與培育條件的選擇:（a）要依據(jù)供試菌的營養(yǎng)需要,包含生長需要和合成產(chǎn)物的需要。(b)比率范圍，如C：N比。(c)培育基物態(tài)。（d）

13、pH緩沖能力。(e）培育溫度。（f)溶氧.(g）原料價錢、根源、加工方式。2。研究方案設(shè)計:（A）選擇因子與水平,先選因子后選水平(B）選擇適合的正交表，或許響應(yīng)面方法，如爬坡法.（C）填寫表格，配制培育基，準備培育條件。（D）成立查驗指標與方法。3.操作及注意事項：搖瓶規(guī)格要一致，培育基要正確。不可以染菌.種子液要混勻,加量要正確。查驗結(jié)果要正確。4.計算與剖析：確立培育基配方與環(huán)境條件控制指標。5.考證試驗與適合調(diào)整分批滅菌的簡要步驟分批滅菌的操作重點a）配料：將培育基在配制罐中配好后,經(jīng)過專用管道輸入發(fā)酵罐中。b）升溫階段:開動攪拌系統(tǒng)，先用夾套或蛇管預熱（尾氣開)，當溫度升溫到9010

14、0時，停止攪拌，三路進氣，同時三路排氣。升溫過程應(yīng)盡可能快一些,以利于營養(yǎng)物質(zhì)的保持。c)保溫階段：溫度達到預約溫度后，關(guān)小進汽、排汽閥門，依據(jù)罐溫變化狀況調(diào)理各路進汽與排汽量，使罐溫保持在預約滅菌溫度之上12度范圍內(nèi)。d)冷卻階段：滅菌時間達到后，封閉所有與發(fā)酵罐直接相通的閥門，立刻引入無菌空氣保壓,開攪拌、排氣閥,引入冷卻水冷卻。典型空氣除菌的工藝流程：采氣-前置過濾器-空壓機-儲氣管-冷卻器-油水分別器-加熱器-總過濾器-分過濾器-發(fā)酵罐采氣：高度每上漲10米，含菌數(shù)降落一個數(shù)目級，所以最好采集必定高度的空氣。前置過濾：除掉大顆粒沙土、纖維等雜物，以防損害空壓機。c）空壓機：這是一個空氣

15、驅(qū)動設(shè)施，需要的能耗很大。d）儲氣罐：除去來去式空壓機產(chǎn)生的氣流脈沖.冷卻器：空氣經(jīng)冷卻后才能通入發(fā)酵罐。油水分別器：冷卻后的空氣溫度低于漏點后，即有水滴析出。g）加熱器：經(jīng)過加溫使相對濕度降下來。總過濾器：為過濾除菌的主要設(shè)施，分過濾器：為了保險起見，還要進行一次過濾.則空氣的無菌度、溫度、濕度即可達到要求。常用的滅菌方法及其適應(yīng)性怎樣（1）化學滅菌：一些化學藥劑能使微生物中的蛋白質(zhì)、酶及核酸發(fā)生反響而擁有殺菌作用.常用的化學藥劑有甲醛、氯、高錳酸鉀等。化學滅菌法不用于培育基的滅菌。但染菌后的培育基能夠用化學藥劑辦理。(2）射線滅菌：利用紫外線、高能電磁波或放射性物質(zhì)產(chǎn)生的射線進行滅菌的方法

16、。最但紫外線的穿透力低，所以僅用于表面消毒和空氣的消毒.微波滅菌設(shè)施的盛行，為滅菌供給了新的選擇.3）干熱滅菌：干熱滅菌常用的干熱條件為在160下保溫1h：干熱滅菌不如濕熱滅菌有效。一些要求保持干燥的實驗用具和資料（如培育皿、接種針等）能夠用于熱滅菌，濕熱滅菌:濕熱滅菌即利用飽和水蒸氣進行滅菌。簡單使蛋白質(zhì)凝結(jié)而殺火各樣微生物，同時，蒸汽的價錢便宜，根源方便，滅菌成效靠譜。所以培育基滅菌、發(fā)酵設(shè)施及管道的滅菌，廣泛采納濕熱滅菌。（5）過濾除菌:過濾除菌即利用過濾方法截留微生物，達到除菌的目的。只合用于澄清流體的除菌。怎樣判斷菌種的質(zhì)量。A)pH;B)菌體形態(tài)（染色鏡檢:形態(tài)均一，染色均一，深色

17、較健康。如:酵母菌，絲狀真菌邊沿的圓滑完好程度,假如在液態(tài)培育中假如分支許多則比較健康)、濃度（需要在小的范圍內(nèi)顛簸）;C）培育基外觀、氣味（憑經(jīng)驗來看）；D)產(chǎn)物含量、酶活力；E)無雜菌生長關(guān)系型、部分生長關(guān)系型、非生長關(guān)系型發(fā)酵1)生長關(guān)系型：產(chǎn)物生成與菌體生長之間有平行的準量關(guān)系。產(chǎn)物直接根源于產(chǎn)能的初級代謝（自己生殖所必需的代謝）,菌體生長與產(chǎn)物形成不分開。氯霉素、桿菌肽等次級代謝產(chǎn)物的發(fā)酵也屬此類。（2）部分生長關(guān)系型：菌體生長出現(xiàn)兩個頂峰,第一個生長頂峰與產(chǎn)物合成無平行的準量關(guān)系,第二個生長頂峰與產(chǎn)物合成有平行的準量關(guān)系.這種產(chǎn)品有丙酮丁醇、丙酸、延胡索酸、谷氨酸等。(3）非生長關(guān)

18、系型：細胞生長與產(chǎn)物合成無平行的準量關(guān)系，只與菌體的總量相關(guān).產(chǎn)物的形成和初級代謝是分開的。大多半次級代謝產(chǎn)物屬于這一類.如多半抗生素、色素、毒素、超量分泌的維生素等。分批發(fā)酵、補料分批發(fā)酵、連續(xù)發(fā)酵分批發(fā)酵：指在一封閉培育系統(tǒng)內(nèi)含有初始限制量的基質(zhì)的發(fā)酵方式。在這一過程中，除了氧氣、消泡劑及控制pH的酸或堿外,不再加入任何其余物質(zhì)。發(fā)酵過程中培育基成分減少，微生物獲取生殖。長處:（1）操作簡單、操作惹起染菌的概率低；(2)設(shè)施一次性投資低；(3)一般不會產(chǎn)生菌種老化和變異等問題。弊端：(1）產(chǎn)物濃度低、提取濃縮比率大,耗能多;（2)非生產(chǎn)時間較長、設(shè)施利用率低。發(fā)酵過程從移種后開始,一般分為

19、：延滯期、對數(shù)期、穩(wěn)固期及衰滅期，也有分為：阻滯期、加快期、對數(shù)期、減速期、靜止期和死亡期，一般發(fā)酵不一樣意進入衰滅期。分批發(fā)酵的分類對實踐的指導意義：假如生產(chǎn)的產(chǎn)品是生長關(guān)系型，則宜采納有益于細胞生長的培育條件，延伸與產(chǎn)物合成相關(guān)的對數(shù)生長久；假如產(chǎn)品是非生長關(guān)系型,則宜縮短對數(shù)生長久,并快速獲取足夠量的菌體細胞后延伸穩(wěn)固期，以提升產(chǎn)量。補料分批發(fā)酵:是指在分批發(fā)酵過程中,間歇或連續(xù)地補加新鮮培育基的發(fā)酵方式，但不拿出發(fā)酵液.長處：（1）使發(fā)酵系統(tǒng)中保持很低的基質(zhì)濃度，節(jié)氣及攪拌；(2）和連續(xù)發(fā)酵比無菌條件要求較低；（3）與連續(xù)發(fā)酵比較罕有菌種老化和變異等問題；（4）產(chǎn)物濃度高,濃縮比小，提

20、取成本低。弊端：(1）存在必定的非生產(chǎn)時間;（2)和分批發(fā)酵比,流加新鮮培育基增添了染菌的概率;（3）后期保持高供氧率會顯然增添發(fā)酵成本。連續(xù)發(fā)酵:是培育基料液連續(xù)輸入發(fā)酵罐，并同時放出含有產(chǎn)品的同樣體積發(fā)酵液,使發(fā)酵罐內(nèi)料液量保持恒定，微生物在近似恒定狀態(tài)下生長的發(fā)酵方式。長處：(1）能保持低基質(zhì)濃度;(2)能夠提升設(shè)施利用率和單位時間的產(chǎn)量；(3）便于自動控制.弊端：（1)菌種發(fā)生變異的可能性較大；（2)要求嚴格的無菌條件；(3）發(fā)酵液中產(chǎn)物濃度低，濃縮比大。泡沫怎樣控制：(1)預防泡沫的形成：A選擇不產(chǎn)泡沫的培育基成分；控制泡沫的方法：A機械消沫：釘、耙、離心式消沫器；B選擇適合的滅菌條

21、件B消沫劑消沫；;C選育不產(chǎn)泡沫的菌株；（2)溶氧不足怎樣辦理溶氧濃度對發(fā)酵的影響：1、厭氧發(fā)酵：溶氧濃度0，有害；以無機或有機氧化物作為呼吸鏈的電子最后受體。2、好氧發(fā)酵:必定的溶氧濃度是必需的；以氧氣作為呼吸鏈的電子最后受體。當dc/dt0，供小于需時,采納以下舉措：供氧方面:A提升罐壓（可能會影響菌的代謝）；B增添通肚量（即增添通氣速率)；C通入純氧；D增添攪拌功率（改良罐內(nèi)液體的混淆和循環(huán)）；需氧方面：A降低培育溫度（即供氧方程的推進力);B補水稀釋培育液（控制菌體量,使發(fā)酵液中有較高的氧濃度）。發(fā)酵過程中，一旦溶氧電極探測到發(fā)酵液中的溶氧低于設(shè)定值，一般會采納報警的形式提示操作人員注

22、意并采納上述一種或幾種舉措,假如為自動控制,一般上位時機自動調(diào)理轉(zhuǎn)速以保證發(fā)酵液中溶氧的正常水平.發(fā)酵過程中溶氧常常會成為限制性要素，所以，需要操作人員隨時注意溶氧能否正常。影響超濾的要素有哪些，怎樣提升明濾速度？要素：膜雙側(cè)的壓力差，膜面流速,料液粘度，溫度，溶質(zhì)的擴散系數(shù)和料液濃度。方法：流速增大，溫度高升,料液濃度降低，錯流操作。發(fā)酵過程中怎樣保持pH的穩(wěn)固發(fā)酵過程中培育液的pH值是微生物在必定環(huán)境條件下代謝活動的綜合指標,是一項重要的發(fā)酵參數(shù).它對菌體的生長和產(chǎn)品的累積有很大的影響.所以，一定掌握發(fā)酵過程中pH的變化規(guī)律，及時監(jiān)測并加以控制，使它處于最正確的狀態(tài).只管多半微生物能在34

23、個pH單位的pH范圍內(nèi)生長，可是在發(fā)酵工藝中，為了達到高生長速率和最正確產(chǎn)物形成，一定使pH在很窄的范圍內(nèi)保持恒定。pH對發(fā)酵過程的影響:（1)微生物生長和產(chǎn)物合成的最適pH:大多半細菌；霉菌和酵母菌3-6；放線菌7-8;微生物生長階段和產(chǎn)物合成階段的最適pH一般不一樣，這不單與菌種的特征相關(guān)，也取決于產(chǎn)物的化學性質(zhì)。(2）發(fā)酵過程中pH的變化規(guī)律。生長階段：pH上漲或降落;生產(chǎn)階段:pH比較安穩(wěn)；自溶階段:pH上漲。pH的影響主假如影響酶的活性和膜的透性。惹起各樣酶活力改變,影響菌對基質(zhì)的利用速度和細胞構(gòu)造，致使影響菌體生長和產(chǎn)物合成.影響菌體細胞膜電荷狀況，惹起膜的浸透性的變化，進而影響菌

24、對營養(yǎng)的汲取和代謝產(chǎn)物的形成.最適pH的選擇：原則：有益于菌體生長和產(chǎn)物的合成，以獲取較高的產(chǎn)量。一般依據(jù)實驗結(jié)果確立。最適pH與菌株，培育基構(gòu)成，發(fā)酵工藝相關(guān).應(yīng)按發(fā)酵過程的不一樣階段分別控制不一樣的pH范圍。pH的控制：A在基礎(chǔ)培育基配方中考慮到pH的緩沖能力；B經(jīng)過補料調(diào)pH，如加糖、硫酸銨，可使pH降落；加尿素、氨水可使pH上漲。C加酸堿調(diào)理pH.怎樣判斷發(fā)酵終點：依據(jù)不一樣的發(fā)酵目的和怎樣獲取最正確經(jīng)濟效益來確立，詳細的指標有菌絲形態(tài),產(chǎn)物濃度，濾速，PH值，培育基外觀，粘度等,發(fā)酵終點要綜合這些要素考慮。產(chǎn)物濃度為首要考慮,需要進行及時化驗菌形及菌體形態(tài)，經(jīng)過鏡檢防備菌體自溶,菌體

25、自溶前的跡象：氨基氮高升，PH高升，菌絲碎片增加,粘度增大，過濾速度降低。濾速由培育基內(nèi)粘度決定，是加工需要泡沫及培育基外觀為表現(xiàn)觀察,作為參照，PH值一般到終點時PH一般上漲即變酸作為參照.怎樣依據(jù)雜菌的種類判斷可能的污染源:（1）雜菌的檢出（a)顯微鏡鏡檢（檢出形態(tài)差異大的雜菌）；(b）平板檢查法(依菌落不一樣,檢出雜菌）;(c）肉湯檢查法（只好檢出細菌雜菌）。（2）染菌原由的剖析（a）種子帶菌（可追憶)；（b)培育基滅菌不完全（芽孢桿菌）；（c）空氣系統(tǒng)帶菌（球菌）；（d）泡沫冒頂（有跡可循）；(e）夾套及蛇管穿孔（加壓檢測）；（f)操作不慎.（3）染菌后的辦理（a）種子罐染菌：倒掉；(

26、b)發(fā)酵罐染菌：先期（加新料滅菌)；中期(偏離雜菌最適生長條件）；后期（放罐）。污染噬菌體怎樣判斷辦理：（1）污染噬菌體的發(fā)現(xiàn)和檢查：(a）發(fā)酵液變稀；(b)出現(xiàn)噬菌斑;(c）電鏡發(fā)現(xiàn)噬菌體。(2)出現(xiàn)噬菌體污染后的辦理（a)滅菌放罐；（b)清理生產(chǎn)環(huán)境;（c)調(diào)動生產(chǎn)菌株；(d）停產(chǎn)整改；(e）選育抗噬菌體菌株.怎樣提升過濾速度。1。選擇適合的預辦理方法對發(fā)酵液進行預辦理。2.加入助濾劑，助濾劑是一種不行壓縮的多孔微粒，它能使濾餅松散，濾速增大.3.加入一些反響劑,它們相互作用,或和某些溶解性鹽類發(fā)生反響生成不溶解的積淀(GaSO4，AlPO4等).生成的積淀能防備菌絲體粘結(jié)，使菌絲擁有塊狀

27、構(gòu)造，積淀自己也能夠作為助濾劑，而且還可以使膠狀物和懸浮物（大多為蛋白）凝結(jié)。4。加入酶制劑,分解粘性多糖等物質(zhì).工業(yè)上常用的膜過程有哪些，各自的合用性怎樣？透析是以膜雙側(cè)的濃度差為傳質(zhì)推進力，從溶液中分別出小分子物質(zhì)的過程。在生物分別中主要用于蛋白質(zhì)的脫鹽。反浸透：在高于溶液浸透壓的壓力作用下，只有溶液中的水透過膜,而所有溶液中大分子、小分子有機物級無機鹽所有被截留住；壓力差往常為0。1MPa用于海水淡化，藥物濃縮，純水制造。微濾和超濾都是利用膜的篩分性質(zhì)，以壓差為傳質(zhì)推進力，主要用于截留固體微粒和高分子溶質(zhì)。微濾寬泛用于細胞、菌體等的分別和濃縮.超濾合用于1-50nm的生物大分子的分別,如

28、蛋白質(zhì)、病毒等。電滲析：利用分子的荷電性質(zhì)和分子大小的差異進行分別的膜分別法，可用于小分子電解質(zhì)的分別和溶液的脫鹽。以鏈霉素提取為例,簡述離子互換操作過程？吸附：適合稀釋中性吸附濾液，用鈉型弱酸型樹脂吸附;漂洗：用碳酸溶液在加壓下進行漂洗樹脂；洗脫:用0.1molL-1molL酸梯度鹽酸自鈉型弱酸型樹脂上洗脫鏈霉素；洗脫后樹脂為氫型，再轉(zhuǎn)型為鈉型可持續(xù)提取。影響離子互換速度的要素有哪些，這些要素是怎樣影響的？顆粒大小：顆粒減小有益于互換速度的提升；交聯(lián)度:交聯(lián)度越低樹脂越易膨脹，在樹脂內(nèi)部擴散就越簡單。溫度：跟著溫度的高升離子交速度提升;離子的化合價：離子的化合價越高，離子與樹脂骨架之間的庫倫

29、引力越大，所以擴散速度就愈小；離子的大小：小離子與樹脂骨架的碰撞較少,互換速度比較快；攪拌速度：當液膜控制時，必定范圍內(nèi)增添攪拌速度會使互換速度增添；溶液濃度：當C0。001molL時一般為外擴散控制；當0。001molLC0.01molL時,濃度增添時，互換速度也按比率增添；當C0。01molL時,濃度再增添，互換速度就增添得較慢當濃度再持續(xù)增添，互換速度達到極限值后就不再增大，此時已轉(zhuǎn)變成內(nèi)擴散控制。怎樣選擇適合的萃取溶劑：（1）要選擇分派系數(shù)大的溶劑；（2）利用相像相容的特征，選擇對欲提溶質(zhì)選擇性溶解的萃取溶劑;(3）要最大限度的分別欲提溶質(zhì)和雜質(zhì)，則是分別要素（)越大越好；（4）要獲取

30、好的分別成效,不單要求分別要素高，還要求原溶劑和溶劑互溶性小，最好為互不相容;(5）原溶劑和溶劑互溶性小，最好為互不相容；（6）不產(chǎn)生乳化現(xiàn)象。（7)溶劑的毒性要低，溶劑可分為低毒性;中等毒性；強毒性。（8）防火防爆，閃點高，安全性好；（9)價廉易得.常有超臨界萃取工藝原理？超臨界萃取典型過程是由萃取階段和分別階段組合而成。在萃取階段，超臨界流體將所需組分從原猜中提拿出來。在分別階段，經(jīng)過變化某個參數(shù)或其余方法，使萃取組分從超臨界流體中分別出來，并使萃取劑循環(huán)使用。能夠把超臨界萃取的典型過程分為三類：等溫法、等壓法和吸附汲取法.（1）等溫法：經(jīng)過變化壓力而使萃取組分從超臨界流體中分別出來；（2）等壓法：利用溫度的變化來實現(xiàn)溶質(zhì)與萃取劑的分別;(3）吸附法:采納可吸附溶質(zhì)而不吸附萃取劑的吸附劑使二者分別。柱色層分別的裝置及其操作:裝置有:蠕動泵、層析柱、檢測器和部分采集器。操作：裝柱、加樣、洗脫。A。蠕動泵：增添層析柱中的壓力,使流動相有一個較大且平均的流速。B。層析柱：往常用玻璃柱或帶有玻璃察看窗的金屬柱。柱的進口端應(yīng)有進料散布頭；柱底端有支持固定相的玻璃棉或砂孔玻璃板；高徑比為2030;出口管應(yīng)盡量短。C.裝柱：將層析劑與不超出層析劑用量的一份緩沖液調(diào)成漿料,而后將漿料慢慢邊加邊攪拌