1、人教版高中生物必修三知識點梳理重點題型（常考知識點）鞏固練習傳統發酵技術的應用 【學習目標】1、理解并掌握制作果酒、果醋的原理和制作過程。2、理解制作腐乳的基本原理，知道制作腐乳的實驗流程。3、掌握制作泡菜的基本原理和方法。4、測定食品加工中可能產生的有害物質?！疽c梳理】要點一、與傳統發酵技術有關微生物的總結比較 比較項目酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物學分類真核生物原核生物真核生物原核生物代謝類型異養兼性厭氧型異養需氧型異養需氧型異養厭氧型繁殖方式適宜條件下出芽生殖分裂生殖孢子生殖分裂生殖適宜溫度2030351518室溫發酵條件前期需氧，后期厭氧一直需氧一直需氧厭氧生產應用釀酒釀醋制作腐乳制作泡

2、菜、酸奶要點詮釋：由于醋酸菌和乳酸菌都屬于原核生物，因此在利用這兩類微生物室，其環境中一定不要加入青霉素等抗生素。要點二、果酒和果醋的制作1、果酒制作與果醋制作的比較果酒制作果醋制作制作原理菌種酵母菌醋酸菌反應式有氧呼吸：C6H12O6+6H2O+ 6O26CO2+12H2O+能量無氧呼吸：C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量有氧呼吸，缺少糖：C2H5OH+O2CH3COOH+H2O發酵條件適宜溫度20左右3035對酸性環境耐酸性環境耐酸發酵時間10 d12 d7 d8 d對氧的需求前期需要氧，后期不需氧一直需氧2、操作流程3、裝置設置（1）各部分的作用：充氣口：在醋酸發酵時連接充氣泵

3、進行充氣。 排氣口：排出酒精發酵時產生的CO2。出料口：是用來取樣的。要點詮釋：因為果酒制作初期需要氧，果醋整個制作過程都需氧，所以需要帶開關的充氣口，以調控對氣體的需求。 在果酒制作過程中會產生CO2，所以要有排氣口。 實驗過程中要取樣檢測，所以要有出料口的設計。（2）該裝置的使用方法：充氣管口插至瓶底近底部；排氣管口離發酵液一段距離，外部要彎曲，并盡量保證管口向下；酒精發酵時要關閉充氣口，醋酸發酵時，充氣口連接充氣泵，不斷泵入空氣。4、果汁發酵后酒精的檢驗 根據對照實驗的原則，在單一變量的前提下，用酸性的重鉻酸鉀檢測發酵液中生成酒精的方法： （1）對照組試管中加入2mL 的酒精，實驗組試管

4、中加入2mL發酵液，再分別加入物質的量濃度為3 molL的H2SO4 3滴，振蕩混勻，最后滴加常溫下飽和的重鉻酸鉀溶液3滴，振蕩，觀察。（標準對照）（2）先分別在試管中加入發酵前后的果汁，再滴人物質的量濃度為3 molL的H2SO4 3滴，振蕩混勻，最后滴加常溫下飽和的重鉻酸鉀溶液3滴，振蕩，觀察。（自身對照）5、實驗注意事項項目說明材料的選擇與處理選擇新鮮的葡萄，榨汁前先將葡萄進行沖洗，除去枝梗，以防葡萄汁流失及污染。防止發酵液被污染（1）榨汁機和發酵瓶等都需要清洗干凈，且發酵瓶進行消毒；（2）清洗葡萄是要先清洗后去枝梗；（3）發酵瓶排氣管用曲頸管，不用直管。發酵條件的控制（1）葡萄汁裝入發

5、酵瓶時，要留有大約l3的空間。目的先讓酵母菌進行有氧呼吸，快速繁殖，耗盡O2后再進行酒精發酵，防止發酵過程中產生的CO2造成發酵液的溢出；（2）釀制葡萄酒的過程中，將溫度嚴格控制在1825，時間控制在10 d12 d左右，可通過出料口對發酵的情況進行及時的監測；（3）制作葡萄醋的過程中，將溫度嚴格控制在3035，時間控制在7 d8 d左右，并注意適時通過充氣口充氣。要點詮釋：果酒、果醋制作中原料的消毒：（1）榨汁前葡萄的沖洗，應先沖洗再去枝梗，因為在去梗的同時會使一些微生物侵入果實內部，給消毒帶來一定的困難。另外對于果酒的自然發酵，沖洗不要反復進行，因為其他雜菌和酵母菌被洗去的機會是均等的，如

6、果沖洗次數過多，會使酵母菌數量減少，使發酵周期加長，產品的酒精含量下降。 （2）一般選用70的酒精，并不是酒精的濃度越高效果越好，因為濃度過高會使細菌周圍形成一層菌膜，酒精不易進入細菌體內；70的酒精可以迅速進入細菌體內，使體內的蛋白質變性，將細菌消滅。要點三、腐乳的制作1、制作原理、需要菌種、制作過程項目腐乳制作菌種青霉菌、酵母菌、曲霉、毛霉等多種微生物參與，主要是毛霉。菌種來源利用空氣中的毛霉孢子制作原理 腐乳的制作是利用豆腐坯上培養的多種微生物分泌的相關酶的作用，將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸，糖分解發酵成乙醇和其他醇類及形成有機酸，同時輔料中

7、的酒類和各種香辛料等也共同參與作用，合成復雜的酯類，最后形成腐乳所特有的色、香、味等，品質細膩、柔軟可口。實驗流程讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制2、腐乳制作的注意事項（1）影響腐乳品質的條件：水、鹽、酒、溫度、發酵時間等項目腐乳制作水的控制含水量約70%。用含水量過高的豆腐制腐乳，不易成形。鹽的控制用鹽腌制時，若鹽的濃度過低，不足以抑制微生物生長，可能導致豆腐腐敗變質；若鹽的濃度過高，會影響腐乳的口味。酒的控制酒的含量應控制在12左右。酒精含量過高，腐乳成熟的時間會延長；酒精含量過低，不足以抑制微生物生長，可能導致豆腐腐敗。溫度控制溫度控制在1518，該溫度不適于細菌、酵母菌和曲霉

8、的生長，從而保證發酵時間和腐乳的風味。密封腌制常溫下密封腌制6個月，就可以吃到味道鮮美的豆腐乳了。香辛料具有調味和殺菌的作用，也會影響腐乳的風味或質量。（2）防止雜菌污染用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗涮干凈后要用沸水消毒等。裝瓶時，操作要迅速小心。加放鹵湯后，用膠條將瓶口密封。封瓶時，最好將瓶口通過酒精燈的火焰，防止瓶口被污染。要點四、制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量1、實驗原理【生物技術實踐專題：傳統發酵技術的應用 417466 制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量 】（1）泡菜的制作原理：利用乳酸菌等微生物在無氧條件下進行發酵產生乳酸、乳酸積累會抑制其他雜菌的生長。在此過程中同時有亞硝酸鹽的產生（2） 亞硝酸鹽

9、提取的亞硝酸鹽提取試劑：氯化銨緩沖液（pH9.69.7）、硫酸鋅溶液（120g/L）、氫氧化鈉（20g/L）、氫氧化鋁乳液；氫氧化鈉硫酸鋅為蛋白質沉淀劑，以除去雜質，獲得較純的亞硝酸鹽溶液；氫氧化鋁乳液能吸附泡菜汁液中的雜質和色素，使泡菜汁液脫色后變得澄清透明，以便進行后續的顯色反應。（3）測定亞硝酸鹽含量和比色的原理 顯色試劑：乙酸(或鹽酸）， 對氨基苯磺酸溶液， N-1-萘基乙二胺溶液 在酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮反應 重氮反應的產物與N-1-萘基乙二胺結合形成玫瑰紅色產物將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準液進行目測比色或光電比色，可以大致估算或精確計算出泡菜中亞硝酸鹽的含

10、量。要點詮釋： 亞硝酸鹽為白色粉末，易溶于水，在食品生產中用作食品添加劑（一般用作防腐劑）。 分布：在自然界中，亞硝酸鹽分布廣泛。據統計，蔬菜中亞硝酸鹽的平均含量約為4 mgkg，咸菜中亞硝酸鹽的平均含量在7 mgkg以上，而豆粉中的平均含量可達10 mgkg。 對人體的影響：膳食中的亞硝酸鹽一般不會危害人體健康，但是，當人體攝入總量達到0.3 g0.5 g時，會引起中毒；當攝入總量達到3 g時，會引起死亡。膳食中的絕大部分亞硝酸鹽在人體內以“過客”的形式隨尿排出，只有在特定條件下（適宜pH、溫度和一定的微生物作用），才會轉變成致癌物質亞硝胺。亞硝胺具有致癌、致畸等作用。 新鮮蔬菜放置時間過長

11、會變質的原因：放置時間長的蔬菜中的硝酸鹽易被滋生的硝酸鹽還原菌還原成亞硝酸鹽而危害健康。 亞硝酸鹽與食鹽的比較：亞硝酸鹽為白色粉末，顏色與食鹽非常相似，味道咸澀，是有毒物質，它有縮短煮肉時間的作用，在適宜溫度、pH和一定微生物的作用下形成亞硝胺引發癌癥。食鹽為白色晶體，味道咸，常做調味品。在日常生活中最好將炊具、食品與亞硝酸鹽分開放置，避免誤食。2、實驗設計 （1）泡菜的制作及測定亞硝酸鹽含量的實驗流程示意圖（如下圖所示）： 要點詮釋：泡菜的制作：按照清水與鹽的質量比為4l的比例配制鹽水。將鹽水煮沸冷卻。將經過預處理的新鮮蔬菜混合均勻，裝入泡菜壇內，裝至半壇時，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，繼續

12、裝至八成滿，再徐徐注入配制好的鹽水，使鹽水沒過全部菜料，蓋好壇蓋。向壇蓋邊沿的水槽中注滿水，以保證壇內乳酸菌發酵所需的無氧環境。在發酵過程中要注意經常補充水槽中的水。發酵時間長短受室內溫度的影響。 （2）亞硝酸鹽含量的測定（3）泡菜腌制過程中乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽的變化。發酵時期乳酸菌乳酸亞硝酸鹽發酵初期少（以不產酸的大腸桿菌和酵母菌活動為主，同時還有一部分硝酸鹽還原菌活動）少增加（硝酸鹽還原菌的活動，亞硝酸鹽含量有所增加）發酵中期最多（其他細菌的活動受到抑制，只有乳酸菌活動強烈）積累、增多，PH下降下降（由于硝酸鹽還原菌受到抑制，同時形成的亞硝酸鹽又被分解，因而亞硝酸鹽含量下降）發酵后期減少

13、（由于乳酸的積累，酸度繼續增強，乳酸菌活動也受到抑制）繼續增多，PH繼續下降下降至相對穩定（硝酸鹽還原菌完全被抑制）要點詮釋：乳酸菌屬于原核生物，它是能通過發酵將糖類轉化成乳酸的細菌的總稱，常見的有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌，目前已發現乳酸菌有59種，所以乳酸菌不是一個種群，而是一類生物。在泡菜發酵初期，主要以不產酸的大腸桿菌和酵母菌活動為主，同時還有一部分硝酸鹽還原菌在活動。該時期產生了厭氧環境，乳酸菌才開始活動。發酵中期，由于乳酸菌產生了大量乳酸，其他細菌活動受到抑制，只有乳酸菌活動強烈。此期乳酸菌數量達到高峰，乳酸的量繼續積累。發酵后期，由于乳酸的積累，酸度繼續增長，乳酸菌活動也受到抑制，乳酸

14、菌數量下降?！镜湫屠}】類型一：果酒、果醋的制作原理和操作方法例1、 （2015 江蘇高考）圖為蘋果酒的發酵裝置示意圖,下列敘述錯誤的是（ ）A. 發酵過程中酒精的產生速率越來越快B. 集氣管中的氣體是酵母菌無氧呼吸產生的 CO2C. 發酵過程中酵母種群呈“J冶型增長D. 若發酵液表面出現菌膜,最可能原因是發酵瓶漏氣【答案】ABC【解析】發酵時間越長，酒精濃度越高，會對酵母菌發酵起抑制作用，后期發酵速率會變慢，A錯誤。發酵瓶中會留有部分空氣，集氣管中的二氧化碳并非全部由無氧呼吸產生，B錯誤。由于原料等因素的影響，酵母菌成S型曲線增長，C錯誤。若酵液出現菌膜，應為好氧細菌，可推測原因是發酵瓶漏氣

15、，D正確?！军c評】本題重在考查對果酒制作原理及方法的掌握。【舉一反三】：【變式一】在適宜的溫度條件下，在如下圖所示裝置中都加入干酵母（內有活酵母菌），其中適于產生酒精的裝置是（ ） 【答案】A【解析】注意題干中所暗示的條件，仔細審題就會發現此題是讓你說明，酵母菌在什么條件下會產生酒精。這就要求我們首先要弄清發酵的條件：（1）要有葡萄糖、水和酵母菌；（2）必須在密封的條件下（無氧條件下），如果有氧，酵母菌進行有氧呼吸，產生CO2和H2O。這兩個條件缺一不可【變式二】下列關于果醋的制作，錯誤的是（ ） A果醋的制作需用醋酸菌，醋酸菌是一種好氧菌，所以在制作過程中需通氧氣 B醋酸菌是一種嗜溫菌，溫度

16、要求較高，一般在50左右 C醋酸菌能將果酒變成果醋 D當氧氣、糖源充足時，醋酸菌可將葡萄糖氧化成醋酸【答案】B【解析】本題考查果醋的制作原理和條件控制。制作果醋所用菌種為醋酸菌，其原理是氧氣、糖源充足時，醋酸菌直接將葡萄糖氧化為乙酸；而在糖源不足、氧氣充足的條件下可將乙醇氧化為乙醛，再進一步氧化為乙酸，在整個發酵過程中，必須保證供應充足的氧氣，因此A、C、D正確。而醋酸菌適宜的生長溫度為3035。溫度為50時，會影響醋酸菌的活性。因此答案選B。【變式三】在家庭中用鮮葡萄制作果酒時，正確的操作是（ ）A讓發酵裝置接受光照 B給發酵裝置適時排氣C向發酵裝置通入空氣 D酵母菌裝置放在45【答案】B【

17、解析】果酒用的酵母菌。酵母菌兼性厭氧細菌。要出果酒之時是酵母菌無氧呼吸的時候，產生酒精和二氧化碳。產生氣體就要排出。酒精發酵最佳溫度18-25，最好是弱酸性環境。果醋溫度控制在30-35，需要的是醋酸菌。類型二：腐乳的制作原理和過程例2、（2015 江蘇高考）關于“腐乳的制作”實驗,下列敘述錯誤的是（ ）A. 將腐乳坯堆積起來會導致堆內溫度升高,影響毛霉生長B. 腐乳坯若被細菌污染,則腐乳坯表面會出現黏性物C. 勤向腐乳坯表面噴水,有利于毛霉菌絲的生長D. 裝壇階段加入料酒,可有效防止雜菌污染【答案】C【解析】毛霉生長需要適宜的溫度和水分，將腐乳柸堆積起來，毛霉呼吸作用等會使溫度升高，影響其生

18、長，勤噴水又會改變濕度，導致雜菌滋生，故C錯誤。【點評】本題主要考查影響腐乳制作的相關知識?！九e一反三】：【變式一】下列關于腐乳制作過程中的操作，不正確的是（ ） A先將豆腐切成塊放在消毒的籠屜中，保持溫度在1518。并具有一定濕度 B將長滿毛霉的豆腐放在瓶中，并逐層加鹽，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些 C鹵湯中酒的含量一般控制在12左右 D鹵湯中香辛料越多，口味越好【答案】D類型三：泡菜的制作原理和實驗操作和泡菜中亞硝酸鹽含量的測定例3、某人利用乳酸菌制作泡菜因操作不當泡菜腐爛。下列原因中正確的是（ ） 罐口密閉缺氧，抑制了乳酸菌的生長繁殖 罐口封閉不嚴，氧氣抑制了乳酸菌的生長繁殖 罐口封閉不嚴

19、，氧氣抑制了其他腐生菌的生長和繁殖 罐口封閉不嚴促進了需氧腐生菌的生長和繁殖A B C D【答案】B【解析】乳酸菌是異養厭氧型微生物，所以罐口封閉不嚴，氧氣會抑制了乳酸菌的生長繁殖，但是對其他需氧型的微生物是有利的，所以罐口封閉不嚴促進了需氧腐生菌的生長和繁殖，最后導致泡菜腐爛?！窘馕觥勘绢}考查泡菜的制作原理?！九e一反三】：【變式一】分析材料回答下面的問題： 泡菜制作是以乳酸發酵為主，同時利用食鹽的高滲透壓作用，兼有蛋白質分解的微生物發酵過程的冷加工方法，對蔬菜的營養成分、色香味的保存十分有利。 千百年來，泡菜不但以其酸鮮純正、脆嫩芳香、清爽可口、回味悠長的特點吸引眾多食客，還因其開胃口、促消

20、化、解葷腥、增食欲的功效為世人所接受。 泡菜的制作工藝如下：選料預處理配制調料腌制。泡菜的制作看上去很簡單，但要泡出色香味形俱佳、營養衛生的泡菜應該掌握原料性質、選擇容器、制備鹽水、搭配調料、裝壇等技術。如調料是泡菜風味形成的關鍵，泡菜壇的選擇亦關乎泡菜的制作成敗。 （1）制作泡菜所利用的乳酸菌，從其結構分析，屬于哪類生物？ （2）請用反應式表示乳酸發酵的原理。 （3）制作泡菜的壇子必須密封，試說明其道理。 （4）泡菜制作過程中為什么會產生亞硝酸鹽？ （5）為什么在泡菜制作后期亞硝酸鹽含量會下降？ （6）試討論腌制泡菜的過程中應注意的問題及原因?！敬鸢浮浚?）屬于原核生物。 （2）C6H2O6

21、2C3H6O3 (乳酸)+能量。 （3）保證壇內乳酸菌發酵所需要的無氧條件。 （4）泡菜發酵初期，由于亞硝酸鹽還原菌的活動，蔬菜中的硝酸鹽被還原成亞硝酸鹽。 （5）乳酸菌產生大量乳酸，抑制硝酸鹽還原菌的活動，同時形成的亞硝酸鹽又被分解，因此亞硝酸鹽含量下降。（6）需要控制腌制的時間、溫度和食鹽的用量。溫度過高、食鹽用量不足10、腌制時間過短都容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加?！窘馕觥勘绢}考查了泡菜制作原理和實驗操作。從結構上講，參與泡菜發酵的微生物乳酸菌屬于原核生物，因乳酸菌為嚴格厭氧的微生物，所以泡菜壇必須密封，雖然密封但在發酵初期還是有酵母菌活動，在泡菜鹽水表面形成一層白膜。泡菜發酵

22、初期由于硝酸鹽還原菌的作用，蔬菜中的硝酸鹽還原成亞硝酸鹽。到發酵后期由于乳酸菌產生大量的乳酸抑制了硝酸鹽還原菌的作用，因此亞硝酸鹽含量下降。溫度過高、食鹽用量不足或發酵時間過短都會造成大量細菌繁殖，產生亞硝酸鹽，所以制作泡菜時要嚴格控制時間、溫度和食鹽用量。例4、下列關于測定亞硝酸鹽含量的操作，錯誤的是（ ） A質量濃度為4 mgmL的對氨基苯磺酸溶液呈酸性 B對氨基苯磺酸溶液和N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽溶液，應避光保存 C質量濃度為5gmL的亞硝酸鈉溶液應保持弱堿性環境 D制備樣品處理液，加入氫氧化鋁乳液的目的是中和氫氧化鈉【答案】D【解析】亞硝酸鹽遇到對氨基苯磺酸溶液和N-1-萘基乙二胺鹽酸

23、鹽溶液時會呈現玫瑰紅色。根據玫瑰紅色的深淺確定亞硝酸鹽的含量。選項內容指向，聯系分析結論A對氨基苯磺酸溶液和N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽溶液都呈酸性正確B耍保持其穩定性這兩種鹽溶液都應避光正確C亞硝酸鈉標準液的配制過程中應加入NH4Cl緩沖液，保持弱堿性環境以免形成亞硝酸揮發正確D加入氫氧化鋁乳液的目的是吸附樣品濾液中的雜色，使濾液變得無色透明錯誤 【點評】亞硝酸鹽含量測定的步驟比較復雜，所用試劑比較多。配制操作要求嚴格，因此要全面理解實驗。分類、分條目識記各溶劑的作用及操作注意事項?！九e一反三】：【變式一】下列關于測定亞硝酸鹽含量的原理的敘述，不正確的是（ ） A亞硝酸鹽經一定方式顯色反應后呈玫

24、瑰紅色 B顯色反應后亞硝酸鹽的理化性質沒有發生改變 C不同濃度的亞硝酸鹽顯色深淺不同 D樣品液顯色后，通過與已知濃度的標準液比色，可大致估算出樣品液中亞硝酸鹽的含量【答案】B人教版高中生物必修三知識點梳理重點題型（?？贾R點）鞏固練習【鞏固練習】單項選擇題：1. （2014 江蘇高考）某同學設計了如圖所示的發酵裝置，下列有關敘述正確的是A.該裝置可阻止空氣進入，用于果酒發酵B.該裝置便于果酒發酵中產生的氣體排出C.去除彎管中的水，該裝置可滿足果醋發酵時底層發酵液中大量醋酸菌的呼吸D.去除彎管中的水后，該裝置與巴斯德的鵝頸瓶作用相似2. 利用果汁制作果醋的原理是（ ） A醋酸菌將乙醇還原為醋酸

25、B醋酸菌將乙醇氧化為醋酸 C醋酸菌將乙醇分解為CO2、水和醋酸 D醋酸菌直接將乙醇氧化為醋酸，不需其他中間轉化過程3.用酵母菌釀酒時，向原料中輸入足量的空氣，酵母菌與酒精的量分別會（ ） A死亡、增多 B增多、不再產生 C增多、增多 D死亡、不再產生4.下列微生物中，體內不含有氧呼吸酶且為原核生物的是（ ） A醋酸桿菌 B酵母菌 C乳酸菌 D固氮菌5.夏天食品易腐爛，這是空氣中微生物在食品中大量生長繁殖的結果。而放入冰箱貯藏的食品，其腐爛速度則慢得多，對這一現象最合理的解釋是（ ） A低溫下，食品本身的代謝速度減慢 B低溫下，微生物的代謝速度減慢 C隔絕空氣，微生物和食品的代謝速度減慢D缺乏光

26、照，微生物的合成速度減慢6. 果酒變酸、酸奶的制作、腐乳外部致密的一層“皮”，與其相關的微生物分別是（ ） A醋酸菌、乳酸菌、毛霉 B乳酸菌、毛霉、醋酸菌 C醋酸菌、酵母菌、毛霉 D酵母菌、醋酸菌、乳酸菌7. 下列關于果醋制作的說法正確的是（ ） A醋酸菌是好氧菌，在制作過程中要一直打開發酵瓶 B在制作葡萄醋的過程中，溫度應嚴格控制在1825 C當糖源不足時，醋酸菌先將酒精轉變成乙醛，再將乙醛轉變為醋酸D醋酸菌在糖源和氧氣充足時，能將葡萄糖分解成醋酸和二氧化碳8. 在測定亞硝酸鹽含量的實驗中，制備樣品處理液時加入氫氧化鋁的目的是（ ） A調整pH B提取亞硝酸鹽 C使濾液色素脫色 D緩沖劑9.

27、 在泡菜的制作過程中，不正確的是（ ）。 A按照清水與鹽的質量比為41的比例配制鹽水 B按照清水與鹽的質量比為5l的比例配制鹽水 C鹽水入壇前要煮沸冷卻，以防污染 D在壇蓋邊沿的水槽中要注滿水，以保證壇內的無氧環境10.（2014 海南高考） 下列敘述錯誤的是A.醋酸菌在無氧條件下利用乙醇產生醋酸B.酵母菌在無氧條件下利用葡萄汁產生酒精C.泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸發酵D.腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶11. 將適量酵母放入5葡萄糖溶液中搖勻后，等量分裝到下列錐形瓶中，放置在相同的適宜溫度環境條件下培養。10 d后，產生酒精最多的是（ ） 非選擇題1. （2015 廣東高考）泡菜是

28、我國的傳統食品之一，但制作過程中產生的亞硝酸鹽對人體健康有潛在危害。某興趣小組準備參加“科技創新大賽”，查閱資料得到圖11。（1）制作泡菜時，泡菜壇一般用水密封，目的是_。乳酸發酵第一階段的產物是_。（2）據圖11，與第3天相比，第8天后的泡菜更適于食用，因為后者_；pH值呈下降趨勢，原因是_。（3）該小組得到一株“優選”乳酸菌（亞硝酸鹽還原酶活力比普通乳酸菌高5倍），擬參照資料的實驗方案和食鹽濃度（4%-10%），探究與普通乳酸菌相比用“優選”乳酸菌制作泡菜過程中亞硝酸鹽含量的高低，并確定其最適條件。請你設計一個實驗結果記錄表，并推測實驗結論。2. 在啤酒生產過程中，發酵是重要環節。生產過程

29、大致如下：將經過滅菌的麥芽汁充氧，接入啤酒酵母菌菌種后輸入發酵罐。初期，酵母菌迅速繁殖，糖度下降，酒精濃度漸漸上升，泡沫不斷增多。當糖度下降到一定程度后，結束發酵。最后分別輸出有形物質和啤酒。根據上述過程，回答以下問題：（1）該過程表明啤酒酵母異化作用的特點是 （2）初期，酵母菌迅速繁殖的主要方式是 （3）酒精主要是啤酒酵母菌進行 作用產生的代謝產物。（4）經測定酵母菌消耗的糖中，98.5%形成了酒精和其它發酵產物。其余1.5%則用于 （5）請寫出由麥芽糖葡萄糖酒精的反應方程式。 3.回答下列關于腐乳制作的問題：（1）腐乳是豆腐經微生物發酵后制成的食品。多種微生物參與了該發酵過程，其中起主要作

30、用的微生物是 ，其產生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質水解為 和 ；其產生的 能將豆腐中的脂肪水解為 和 。（2）發酵完成后需加鹽腌制，加鹽還可以抑制 生長。（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多種香辛料配置而成的鹵湯。鹵湯具有一定的防腐作用外，還能使腐乳具有獨特的 。4.農村中泡菜的制作方法：將新鮮的蔬菜經過整理、清潔后，放入徹底清洗并用白酒擦拭過的泡菜壇中，泡菜壇一般是兩頭小中間大的陶器，壇口有壇沿，凡裂縫的菜壇不能用。然后加入鹽水、香料及一些“陳泡菜水”，密封后置于陰涼處，最適環境溫度為2832。有時制作的泡菜會“咸而不酸”或“酸而不成”，前者是用鹽過多，后者用鹽過少。在實驗室或工廠生產泡菜，還要

31、跟蹤檢測泡菜腌制過程中產生的亞硝酸鹽含量。 （1）用白酒擦拭泡菜壇的目的是_。 （2）菜壇要密封的原因是_。若菜壇有裂縫，可能會出現的結果是_。 （3）若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是_。 （4）加入一些“陳泡菜水”的作用是_。 （5）制作泡菜的過程中，有機物的干重如何變化?菜壇內有機物的種類如何變化？【答案與解析】一、單選題1【答案】ABD【解析】該裝置中注水的彎曲部分可阻止空氣進入，能用于果酒發酵，A正確；果酒發酵產生的CO2可溶解在彎管的水中，進一步通過水排出，B正確；醋酸菌是好氧菌，因沒有通入無菌空氣，去除彎管中的水后也不能滿足底層發酵液中醋酸菌的呼吸需求，C錯誤；去除彎管中的

32、水后，該裝置的彎管部分也能防止空氣中的微生物進入，與巴斯德的鵝頸燒瓶作用類似，D正確。2【答案】B【解析】 醋酸菌是嚴格好氧菌，存氧氣充足、糖源充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸。，3【答案】B 【解析】酵母菌在有氧的條件下，進行分裂生殖快速繁殖，但無氧呼吸被抑制，因而酒精不再產生。4【答案】C 【解析】酵母菌屬于真核生物，同氮菌和醋酸桿菌都屬于有氧呼吸生物，體內含有有氧呼吸酶系統。5【答案】B 【解析】腐爛的直接原因是微生物的繁殖，低溫條件下，酶活性降低，其代謝速度減慢，腐爛變慢。6【答案】A【解析】果酒變酸是由于醋酸菌將乙醇轉化成了乙

33、醛，繼而轉化成乙酸的緣故；酸奶的制作需要乳酸菌；腐乳外部的“皮”是毛霉的菌絲形成的。 7【答案】C【解析】當糖源充足時，醋酸菌能把葡萄糖分解成醋酸；當糖源不足時，醋酸菌先將酒精轉變成乙醛，再將乙醛轉變為醋酸。8【答案】C【解析】 加入氫氧化鋁的目的是通過氫氧化鋁的絮狀沉淀吸附色素使濾液澄清。9【答案】B10【答案】A【解析】醋酸菌是好氧型細菌，能在氧氣充足的情況下將乙醇轉化為醋酸，A錯誤；酵母菌在無氧條件下利用葡萄糖產生酒精，B正確；泡菜利用的是乳酸菌的發酵，C正確；腐乳的制作中利用毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶，D正確；因此答案為A。11【答案】B 【解析】裝置A和B都可以把酵母菌發酵過程中產

34、生的CO2及時地排出，但裝置B每隔12 h充氣一次，可以促進酵母菌的繁殖，有利于酒精的發酵。裝置C開始時可以促進酵母菌的繁殖，但密閉條件下產生的CO2積聚使發酵液的酸性增加，影響或抑制酵母菌的發酵作用。故裝置B產生的酒精最多。二、非選擇題：1【答案】（1）隔離氧氣，為乳酸菌提供無氧環境。（2分） 丙酮酸（2分）、還原氫（少量能量）（2分）（2）亞硝酸鹽含量低 （2分） 乳酸菌無氧呼吸，產生的乳酸含量逐漸增加（2分）（3）實驗結果記錄表：（6分） 實驗結論預測：“優選”乳酸菌制作泡菜過程中亞硝酸鹽含量低于普通乳酸菌組?！窘馕觥浚?）泡菜的原理是利用乳酸菌無氧環境生成乳酸，所以制作過程中要隔離氧氣

35、。（2）由圖可知，第三天時亞硝酸鹽含量最高，在第八天之后，亞硝酸鹽含量減少，亞硝酸鹽對人的身體有害，因此，在亞硝酸鹽含量低的時間食用為宜。隨著無氧呼吸的進行，乳酸的含量越來越多，所以PH值逐漸降低。（3）根據題意，設計的實驗要探究在4%-10%鹽濃度的環境下，普通酵母菌和“優選”乳酸菌的發酵效果，選定自變量（鹽濃度）和因變量（乳酸菌含量），做出表格即可。2【答案】（1）既能進行有氧呼吸又能進行無氧呼吸（2）出芽生殖 （3）無氧呼吸 （4）自身的生長繁殖（5）C12H22O11+H2O2C6H12O6，C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量3【答案】（1）毛霉 肽 氨基酸 脂肪酶 甘油 脂

36、肪酸（2）微生物（3）風味【解析】（1）發酵過程中起作用的微生物有多種，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉產生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質水解成多肽和氨基酸，產生的脂肪酶能夠將豆腐中的脂肪水解為甘油和脂肪酸。（2）發酵過程中加鹽腌制，不僅可以調制風味，而且能夠抑制雜菌等其他微生物（3）腐乳制作后期加入鹵湯，鹵湯不僅可以防腐，還可以使腐乳具有獨特的風味（或香味）。4【答案】（1）消毒 （2）乳酸菌為厭氧微生物，密封后造成缺氧環境氧氣將導致乳酸菌不能正常生長，而一些雜菌大量繁殖，泡菜會變質 （3）鹽過多，抑制了乳酸菌的發酵 （4）提供乳酸菌菌種 （5）有機物的干重減少，種類增加

37、【解析】乳酸菌為嚴格厭氧菌，其生命活動需保持無氧環境，產生的乳酸能有效抑制其他雜菌生長，新鮮蔬菜為它提供了培養基，有機物為其生命活動中獲得能量提供原料，故發酵過程中有機物的干重會減少，種類增加。人教版高中生物必修三知識點梳理重點題型（?？贾R點）鞏固練習微生物的培養和應用 【學習目標】1、掌握培養基的分類、組成、功能及配制。2、掌握無菌技術的內容和無菌操作技術。3、研究培養基對微生物的選擇作用4、掌握分離、純化特定微生物的研究思路和方法，掌握從土壤中分理處能夠分解尿素的細菌并進行技術的操作過程?！疽c梳理】要點一、微生物的實驗室培養1、培養基：（1）培養基的配制原則目的要明確（根據微生物的種類

38、、培養目的等）。如培養基可由簡單的無機物組成，生產用培養則可加入化學成分不明確的天然物質，而分類鑒定培養基必須加入已知化學成分的物質。 營養要協調。注意各種營養物質的濃度和比例。pH要適宜。各種微生物適宜生長的pH范圍不同。如細菌、放線菌和真菌生長的最適pH分別為：6.57.5、7.58.5和5.06.0。（2）培養基的種類和用途劃分標準培養基種類特點用途物理性質液體培養基不加凝固劑工業生產半固體培養基加凝固劑，如瓊脂觀察微生物的運動、分類、鑒定固體培養基微生物分離、鑒定、活菌計數、保藏菌種化學成分天然培養基含化學成分不明確的天然物質工業生產合成培養基培養基成分明確（用化學成分已知的化學物質配

39、成）分類、鑒定用途選擇培養基培養基中加入某種化學物質，以抑制不需要的微生物的生長、促進所需要的微生物的生長培養、分離出特定微生物鑒別培養基根據微生物的代謝特點，在培養基中加入某種指示劑或化學藥品鑒別不同種類的微生物（3）選擇培養基和鑒別培養基應用實例類型實例選擇培養基在培養基中加入青霉素，分離得到酵母菌和霉菌。（青霉素，可抑制細菌，放線菌的生長）。培養基中加入高濃度食鹽用于分離得到金黃色葡萄球菌。以尿素作為唯一氮源的培養基用于分離分解尿素的細菌。不添加氮源的培養基用于分離固氮微生物培養基放在高溫環境中培養只能得到耐高溫的微生物鑒別培養基伊紅一美藍培養基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有，

40、菌落呈黑色，并帶有金屬光澤）（4）培養基中的營養要素營養要素含義作用主要來源碳源凡能提供所需碳元素的營養物質構成生物體細胞的物質和一些代謝產物，有些是異養生物的能源物質無機碳源：CO2、NaHCO3等；有機碳源：糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等氮源凡提供所需氮元素的營養物質合成蛋白質、核酸以及含氮的代謝產物無機氮源：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽；有機氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨等生長因子某些微生物生長必不可少的微量有機物一般是酶和核酸的組成成分維生素、氨基酸、堿基等水在生物體內含量很高，在低等生物體內含量更高不僅是優良的溶劑而且可維持生物大分子結構的穩定無機鹽為微生物提供除碳、氮以外的各種重要元素，

41、包括大量元素細胞內的組成成分，生理調節物質；某些化能自養菌的能源，酶的激活劑要點詮釋：微生物最常用的碳源是糖類，尤其是葡萄糖；最常用的氮源是銨鹽、硝酸鹽。 對異養微生物來說。含C、H、O、N的化合物既是碳源又是氮源。 有些培養基不需要添加生長因子，生物自己能合成；而絕大多數微生物培養需要加入生長因子，原因是它們缺乏合成這些物質所需要的酶或合成能力有限。2、無菌技術（1）無菌技術的概念 在微生物培養中，獲得純凈培養物的關鍵是防止外來雜菌的入侵，其主要技術是無菌操作。無菌技術是指通過一定物理、化學的手段，防止實驗室培養物被外來微生物污染，保持微生物的純培養的技術，其中包括在微生物的分離、轉接、保存

42、等過程中防止其他微生物污染的手段。無菌技術主要圍繞如何避免雜菌污染展開的，主要包括以下幾方面： 對實驗操作的空間，操作者的手和衣著，進行清潔和消毒。 將用于微生物培養的器皿、接種用具和培養基等進行滅菌。 為避免周圍環境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近或接種箱內進行。 應避免已經滅菌處理的材料用具與周圍其他物品相接觸。（2）滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物，包括芽孢和孢子。方法見下表：灼燒滅菌法干熱滅菌法高壓蒸汽滅菌法滅菌物品金屬物等可直接灼燒的物品耐高溫的、需要保持干燥的物品均可用此法一般應用接種工具玻璃器皿培養基等注意：滅菌所依據的原理基本上都是使菌體內的蛋白質和

43、核酸發生變性，從而達到殺菌的效果。（3）消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部一部分對人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。 煮沸消毒法：在100煮沸5 min6 min可以殺死微生物細胞和一部分芽孢。 巴氏消毒法：在7075煮30 min或在80煮15 min。可以殺死牛奶中的微生物，并且使牛奶的營養成分不被破壞。 化學藥劑消毒：使用化學藥劑進行消毒，如用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源等。 紫外線消毒。要點二、制備牛肉膏蛋白胨固體培養基及純化大腸桿菌1制備牛肉膏蛋白胨固體培養基的一般步驟：計算稱量溶化滅菌倒平板。 （1）培養基需冷卻至50左右時開始倒平板 原因：瓊脂是一種多糖，

44、在98以上熔化，在44以下凝固，倒平板時高于50則會燙手，低于50時若不能及時操作，瓊脂會凝固。 估計培養基溫度的方法：培養基從滅菌鍋中取出冷卻一段時間后用手觸摸，感覺上以剛不燙手為準。 （2）平板倒置原因：平板皿蓋上會凝結水珠，培養基表面的溫度也較高，平板倒置后，既可使培養基表面的水分更好地揮發，又可防止皿蓋上的水珠落入培養基，造成污染。 （3）注意事項：倒平板時不要將培養基濺在皿蓋與皿底之間，否則此培養基不能用來培養微生物。 2純化大腸桿菌 可以選用下述方法，在牛肉膏蛋白胨固體培養基上純化大腸桿菌。（1）平板劃線法：通過接種環在瓊脂固體培養基表面連續劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培

45、養基的表面（如圖所示）。在數次劃線后培養，可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體，這就是菌落。培養基表面平行或分區劃線劃線時要注意： 幾次灼燒接種環及目的： a取菌種之前灼燒的目的：殺死接種環上原有的微生物。 b每次劃線之前灼燒的目的：殺死上次劃線后接種環上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端，使每次劃線菌種數目減少。 c劃線結束灼燒的目的：殺死接種環上殘留的菌種，避免細菌污染環境和感染操作者。從第二次以后的劃線操作總是從上一次劃線末端開始，能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐漸減少，最終得到由單個細菌繁殖而來的菌落。（2）稀釋涂布平板法：將菌液進行一系列的梯度稀釋

46、，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面，進行培養。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個的菌落。 稀釋涂布平板的操作比較復雜，且各個細節均需保證“無菌”，應特別注意： 酒精燈與培養皿的距離要合適。 吸管頭不要接觸任何其他物體。 吸管要在酒精燈火焰周圍使用。要點三、土壤中分解尿素的細菌的分離與計數【微生物的培養和應用 未發布 】1. 實驗原理（1）以尿素為唯一氮源的選擇培養基篩選尿素分解菌；有些微生物能產生并分泌脲酶，降解環境中的尿素做為其生長的氮源。（2）尿素分解菌的鑒定酸堿指示劑法酚紅作為酸堿指示劑被添加到了培養基中，其變色范

47、圍是pH6.48.2，在酸性情況下呈黃色，堿性情況下呈紅色（3）液體稀釋涂布平板法測定微生物活菌數目2.培養基 LB全營養細菌培養基配方：蛋白胨、酵母提取物、氯化鈉、瓊脂糖尿素培養基配方：葡萄糖、NaCl 、K2HPO4 、尿素、瓊脂糖、酚紅要點詮釋：瓊脂糖和瓊脂一樣都是作為凝固劑來使用的，不要誤以為是和葡萄糖一樣提供碳源的。只是因為瓊脂里還含有含氮的物質會對實驗的結果造成影響。3.實驗流程 要點四、分解纖維素的微生物的分離1.纖維素酶的作用機理 纖維素纖維二糖葡萄糖 纖維素酶是一種復合酶，由三種酶組成：C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖

48、，只有在這三種酶的協同作用下，纖維素才能被徹底水解成葡萄糖。2.纖維素分解菌的篩選（1）篩選原理 纖維素+剛果紅紅色復合物，剛果紅不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發生這種反應。（2）篩選方法：剛果紅染色法。 在含有纖維素的培養基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅纖維素的復合物就無法形成，培養基中就會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈。這樣，我們就可以通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌。3.分離分解纖維素的微生物的實驗設計 分離分解纖維素的微生物的實驗流程示意圖如下圖所示：土壤取樣選擇培養梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養基上挑選產生透

49、明圈的菌落【典型例題】類型一：培養基的配制和微生物的營養例1、（2014 全國大綱卷）某同學在 = 1 * GB3 、 = 2 * GB3 、 = 3 * GB3 三種條件下培養大腸桿菌，這三種條件是： = 1 * GB3 以葡萄糖為碳源的培養基，不斷補充培養基，及時去除代謝產物 = 2 * GB3 以葡萄糖為碳源的培養基，不補充培養基，不去除代謝產物 = 3 * GB3 以葡萄糖和乳糖為碳源的培養基，不補充培養基，不去除代謝產物根據培養結果繪制的一段時間內菌體數的對數隨時間變化的趨勢圖如下：假設三種培養基中初始總糖量相等，則 = 1 * GB3 、 = 2 * GB3 、 = 3 * GB3

50、 三種條件依次對應的趨勢圖是A.甲、乙、丙 B.乙、丙、甲C.丙、甲、乙D.丙、乙、甲【答案】C【解析】以葡萄糖為碳源的培養基，不補充培養基，不除去代謝產物，隨著營養物質的消耗和次級代謝產物的積累，大腸桿菌的生長環境不斷惡化，生存阻力增大，因此種群數量達到穩定期后會出現衰亡期，故甲圖對應，反之丙圖則對應；若培養基里加入葡萄糖和乳糖，大腸桿菌先利用葡萄糖，葡萄糖消耗完以后，大腸桿菌會經過短期的調整，誘導合成乳糖苷酶，接著繼續分解利用乳糖，最后衰亡，因此乙圖對應，故選C答案。【點評】本題考查微生物種群數量變化的相關實驗?！九e一反三】：【變式一】（2015 江蘇卷）做“微生物的分離與培養”實驗時,下

51、列敘述正確的是（ ）A. 高壓滅菌加熱結束時,打開放氣閥使壓力表指針回到零后,開啟鍋蓋B. 倒平板時,應將打開的皿蓋放到一邊,以免培養基濺到皿蓋上C. 為了防止污染,接種環經火焰滅菌后應趁熱快速挑取菌落D. 用記號筆標記培養皿中菌落時,應標記在皿底上【答案】D【解析】高壓滅菌加熱后，先切斷電源，使滅菌鍋溫度降至100攝氏度以下，壓力表的指針歸零，再打開鍋蓋，A錯誤。倒平板時，培養皿打開縫隙即可，不能完全打開，B錯誤。接種環需冷卻后再挑取菌落，C錯誤。類型二：無菌操作技術和接種技術例2、細菌培養過程中分別采用了高壓蒸氣、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理，這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌 ( )A

52、接種針、手、培養基 B高壓鍋、手、接種針C培養基、手、接種針 D接種針、手、高壓鍋【答案】C【解析】高壓蒸汽滅菌鍋是滅菌的一個設備，通常用于培養基的滅菌。用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法。火焰灼燒，可以迅速徹底地滅菌，適用于微生物的接種工具，如接種環。微生物培養過程中的無菌操作包括消毒和滅菌兩大類，分別又有各種不同的方法。對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒；將用于微生物培養的器皿、接種用具和培養基等器具進行滅菌?！军c評】此題考查學生對無菌技術的掌握?！九e一反三】：【變式一】下列操作與滅菌無關的是（ ） A接種前用火焰灼燒接種環 B接種前用酒精擦拭雙手 C將平板倒置，放入培養箱中培

53、養 D接種在酒精燈的火焰旁完成【答案】C【變式二】培養基、培養皿、接種環、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次是（ ） 化學消毒 灼燒滅菌 干熱滅菌 紫外線滅菌 高壓蒸汽滅菌 巴氏消毒法 A B C D 【答案】A【變式三】關于平板劃線操作正確的是（ ） A使用已滅菌的接種針、培養皿，在操作過程中不再滅菌 B打開含菌種的試管，需通過火焰滅菌，取出菌種后，需馬上塞上棉塞 C將沾有菌種的接種環迅速伸入平板內，劃三至五條平行線即可 D最后將平板倒置，放在培養箱中【答案】D【解析】在平板劃線時，已滅過菌的接種針在每次劃線后，都必須用灼燒滅菌法滅菌，以防雜菌污染，A錯；盛有菌種的試管在

54、打開或重新塞棉塞前，都需通過火焰灼燒滅菌，B錯；在劃線過程中，培養皿蓋應打開一條縫隙，進行接種，接種完畢后，迅速蓋上培養皿蓋，以防止雜菌污染，C錯；平板凝固后，須將平板倒置。類型三：利用選擇培養基篩選菌株的實驗方法和步驟例3、探究如何從土壤中分離自生固氮菌與計數。 實驗原理 農田的表層土壤中，自生固氮菌的含量比較多。將用表層土壤制成的稀泥漿，接種到無氮培養基上進行培養。在這種情況下。只有自生固氮菌才能生長繁殖。用這種方法，可以將自生固氮菌與其他細菌分離開來。 材料用具 農田的表層土壤、無氮培養基、牛肉膏蛋白胨培養基、盛9 mL無菌水的大試管若干。無菌移液管、無菌涂布器、無菌培養皿、盛90 mL

55、無菌水的錐形瓶、酒精燈、恒溫箱。 方法步驟 （1）倒平板。分別將無氮培養基、牛肉膏蛋白胨培養基倒平板，應在_操作。 （2）制備土壤稀釋液。取土樣10 g加入盛有90 mL無菌水的錐形瓶中，充分搖勻。用無菌移液管吸取上清液1 mL，轉至9 mL無菌水的大試管中，依次稀釋到107倍稀釋度。為實現無菌操作，試管口和移液管應在離火焰_cm處。 （3）涂布。按照由107103稀釋度的順序分別吸取0.1 mL進行平板涂布，每個稀釋度下，無氮培養基應至少涂布_個平板，牛肉膏蛋白胨培養基涂布_個平板。 （4）培養放人恒溫箱內，在適宜溫度條件下培養3 d4 d。一般每隔_小時統計一次，選取_時的記錄作為結果，這

56、樣可以防止_。 （5）細菌的計數。當菌落數目穩定時，選取菌落數在_的平板進行計數。如果測試的平均值為50，則每克樣品中的菌落數是_。（稀釋度是105） （6）預期結果。相同稀釋度下，牛肉膏蛋白胨平板上的菌落數_（填“多于”或“少于”）無氮培養基上的數目。理由是_?！敬鸢浮浚?）酒精燈火焰旁 （2）12 （3）3 1 （4）24 菌落數目穩定 因培養時間不足而導致遺漏菌落的數目 （5）30300 5107 （6）多于 無氮培養基上可以生存和繁殖的只是土壤中的固氮菌，而牛肉膏蛋白胨培養基上幾乎允許土壤中所有菌類的生存【解析】考查微生物的分離及計數。要分離自生固氮菌，采用選擇培養基分離的方法，缺乏氮

57、源的培養基可用來分離自生固氮微生物，而其他微生物因缺乏氮源不能生長。實驗步驟一般是：配制無氮培養基滅菌倒平板系列稀釋涂布平板培養觀察并計數。實驗中要注意無菌操作和設計對照實驗等?！军c評】本題考查微生物分離實驗中對照實驗的設計。【舉一反三】：【變式一】用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數，在對應稀釋倍數為106的培養基中，得到以下幾種統計結果，正確的是（ ） A涂布了2個平板，統計的菌落數是230 B涂布了2個平板，統計的菌落數是215和260，取平均值238 C涂布了3個平板，統計的菌落數分別是2l、212和256，取平均值163 D涂布了3個平板，統計的菌落數分別是210、240和25

58、0，取平均值233【答案】D 【解析】 在設計實驗時，一定要涂布至少3個平板，作為重復組，才能增強實驗的說服力與準確性，所以A、B不正確。C項雖涂布了3個平板，但是，其中1個平板的計數結果與另兩個相差太遠，說明在操作過程中可能出現了錯誤，因此，不能簡單用3個平板的計數值來求平均值。人教版高中生物必修三知識點梳理重點題型（?？贾R點）鞏固練習【鞏固練習】單項選擇題：1自然界中存在著許多微生物，它們是自然界中不可缺少的生物。下列有關自然界中各種微生物的敘述，正確的是（ ） A所有微生物在細胞結構上都無成形的細胞核 B只有附著在豆科植物根部的微生物才能進行生物固氮 C所有微生物在生態系統中均屬于分解

59、者D維生素是某些微生物生長和發育所必需的生長因子2下列有關微生物營養物質的敘述中，正確的是（ ） A是碳源的物質不能同時是氮源 B凡是碳源都能提供能量 C除水以外的無機物只提供無機鹽 D有些無機氮源也能提供能量3下列操作與滅菌無關的是（ ） A接種前用火焰灼燒接種環 B培養皿等放在高壓蒸汽鍋中進行處理 C培養基在50時擱置斜面 D接種在酒精燈的火焰旁完成4所有細菌都具有的特征是（ ） A都是異養生物 B僅在有水條件下繁殖 C僅在有氧條件下生長 D生存溫度都超過805牛奶、玻璃吸管、接種環、培養基、空氣的滅菌方式依次是（ ） 灼燒滅菌 巴氏消毒 干熱滅菌 紫外線消毒 高壓蒸汽滅菌 A B C D

60、6高溫滅菌的原理是（ ） A每種微生物生長的最適溫度都是一定的 B微生物對于高溫環境不適應 C高溫破壞了細胞內的蛋白質、核酸，影響其生命活動 D高溫降低了環境中氧的濃度7在涂布平板操作時錯誤的是（ ） A將涂布器在酒精燈火焰上灼燒，直至燒紅 B取少量菌液滴加在培養基表面 C將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻810 s再用 D涂布時可轉動培養皿，使涂布均勻8下列有關培養基配制原則表述正確的是（ ） A任何培養基都必須加入碳源、氮源、礦質元素、水及生長因子 B碳源和氮源必須具有一定比例，碳元素的含量最多，其次為氮元素 C微生物的生長除受營養因素影響外，還受pH、氧、滲透壓的影響