1、課題1 菊花的組織培養 通過必修課的學習，我們已經了解到大多綠色開花植物都是靠種子來繁殖的。那么，有沒有不用種子來培育植物的方法呢？ 營養繁殖扦插嫁接壓條 植物組織培養是在人工培養基上，離體培養植物的器官、組織、細胞和原生質體，并使其生長、增殖、分化以及再生植株的技術。 1.熟悉植物組織培養的基本過程；2.理解細胞分化的概念及離體植物細胞的脫分化和再分化；3.通過聯系農業生產實際，培養學生活學活用，理論聯系實際的能力。植物組織培養概念：在無菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細胞，培養在人工配置的培養基上，給予適宜的培養條件，誘導其產生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。 又稱：植物離

2、體培養（一）植物組織培養的基本過程： 植物組織培養的基本過程 外植體 愈傷組織 芽、根 植物體 脫分化 再分化 植物組織 愈傷組織 長出叢芽 生根 移栽成活 將來自已分化組織的已停止分裂的細胞從植物體部分的抑制性影響下解脫出來，恢復細胞的分裂活性。脫分化經脫分化的組織或細胞在一定的培養條件下可有轉變為各種不同細胞類型的能力。再分化植物細胞全能性的表達2.培養基的配制(MS培養基) 大量元素、微量元素、有機物、植物激素（生長素、細胞分裂素 ）（二）影響植物組織培養的因素 1.外植體的選取 不同植物的組織培養難度 同一種植物的不同組織培養難度（ 材料的年齡、保存時間）a、植物激素使用順序對分化的影

3、響使用順序結果先生長素，后細胞分裂素有利于細胞分裂但不分化先細胞分裂素，后生長素 細胞既分裂也分化 同時使用分化頻率提高b、植物激素使用量對分化的影響生長素/細胞分裂素比值結果比值高時比值低時比值適中促根分化，抑芽形成 促芽分化，抑根形成 促進愈傷組織生長 4. 消毒在培養的整個過程中，都需要是一個無菌環境 菊花組織培養的條件： pH=5.8 溫度控制在1822 每日光照12h3. 環境條件 pH、溫度、光照等條件也很重要。（一）制備MS固體培養基 MS培養基包括20多種營養成分，實驗室一般使用4保存配制好的培養基母液來制備1、配制各種母液無機物中大量元素濃縮10倍，微量元素濃縮100倍，常溫

4、保存激素類、維生素類以及用量較小的有機物一般可按1mg/ml的質量濃度單獨配制成母液用母液配制培養基時，需要根據各種母液的濃縮倍數，計算用量2、配制培養基 配制培養液 調PH培養基的分裝 3、滅菌 分裝好的培養基連同其他器械一起進行高壓蒸汽滅菌1、選材：菊花莖段，取生長旺盛的嫩枝（二）外植體消毒2、消毒流水沖洗 酒精處理消毒液處理（三）接種 污染的主要來源是空氣中的細菌和孢子，接種室消毒是至關重要的。用70的酒精噴霧使空氣消毒，酒精或新潔爾滅搽洗工作臺并用紫外線照射20分鐘1、接種室消毒2、無菌操作要求 操作要在酒精燈火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼燒滅菌，接種后立即蓋好瓶蓋。3、材

5、料的切取和接種（四）培養接種后的錐形瓶最好放在無菌箱中培養，培養期間應定期消毒培養溫度控制在18-22每日用日光燈光照12h（五）移栽 移栽生根的菊花試管苗之前，應先打開培養瓶的封口膜，讓試管苗在培養間生長幾日1、打開封口膜2、清洗轉移 用流水清洗根部的培養基，將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環境下生活一段時間3、移栽幼苗長壯后，移栽到土壤中（六）栽培 幼苗移栽后，每天觀察并記錄幼苗的生長情況，適時澆水、施肥，直至開花1、培養基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）2、外植體的消毒（酒精、氯化汞）3、接種的無菌操作（酒精、酒精燈灼燒）4、無菌箱中的培養；5、移栽到消過毒的環境中生存一段時間。在整個操作過程中

6、，是如何來實現無菌環境的？本課題內容小結菊花組織培養基礎知識實驗操作植物體的組織培養影響組織培養的因素細胞分化細胞全能性組織培養過程營養激素環境條件MS固體培養基制備外植體消毒接種培養移栽栽培1.下列關于愈傷組織的說法中不正確的是( )A.愈傷組織的細胞能夠進行細胞分裂B.用葉培養形成的愈傷組織細胞能夠進行光合作用C.培養愈傷組織的培養基中應含有有機養料 D.人們可以從愈傷組織中提取所需物質B2.植物組織培養過程中的脫分化是指( )A.植物體的分生組織通過細胞分裂產生新細胞B.未成熟的種子經過處理培育出幼苗的過程C.植物的器官、組織或細胞，通過離體培養產生愈傷組織的過程D.取植物的枝芽培育成一株新植物的過程CD3.胡蘿卜的韌皮部細胞通過組織培養，能發育成新的植株。下列有關的敘述中，不正確的是（ ）A說明高度分化的植物細胞具有全能性 B植物細胞的全能性得以表達要離開母體C新植株的形成是細胞分裂和分化的結果 D高度分化的動物細胞也具有全能4.植物細胞表現出全能性的必要條件是( )A.導入其他植物細胞的基因B