1、關于葉綠素熒光及分析技術第一張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月光合作用與葉綠素熒光第二張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第三張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第四張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第五張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第六張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第七張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月在光合膜上，有2到10%的吸收光能以PSII熒光的形式釋放出來。而PSI發射的熒光量很小并且是恒定的，這里沒有進行考慮。 活體狀態下，葉綠素熒光幾乎全部來源于PS II的Chla（包括天線Chl a），活體葉綠素熒光提供的快速信息僅僅

2、反映了PS II對激發能的利用和耗散情況. 光合作用過程的各個步驟密切偶聯，因此任何一步的變化都會影響到PS II從而引起熒光變化，也就是說通過葉綠素熒光幾乎可以探測所有光合作用過程的變化.第八張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第九張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月JUNIOR PAM（Pulse Amplitude Modulated Fluorescence，PAM）基礎調制葉綠素熒光儀第十張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第十一張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月JUNIOR PAM的主要操作過程暗適應葉夾光適應葉夾第十二張，PPT共三十九頁，創作于2022

3、年6月調制葉綠素熒光技術作為測定植物光合作用最簡便有效的技術，在國際生物學界多個領域得到了非常廣泛的應用，如研究植物脅迫、衰老、篩選突變體等。PAM技術與熒光淬滅的飽和脈沖分析結合是目前測定植物光合作用的標準技術第十三張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第十四張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月葉綠素熒光儀工作原理 第十五張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月調制技術：用于激發熒光的測量光具有一定的調制（開/關）頻率，檢測器只記錄與測量光同頻的熒光，因此調制熒光儀允許測量所有生理狀態下的熒光，包括背景光很強時。飽和脈沖技術，打開一個持續時間很短（一般小于1 s）的強光關閉所有的

4、電子門（光合作用被暫時抑制），從而使葉綠素熒光達到最大。飽和脈沖（Saturation Pulse, SP）可被看作是光化光的一個特例。光化光越強，PS II釋放的電子越多，PQ處累積的電子越多，也就是說關閉態的電子門越多，F越高。當光化光達到使所有的電子門都關閉（不能進行光合作用）的強度時，就稱之為飽和脈沖。第十六張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月Saturation Pulse Method of Quenching Analysis第十七張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月JUNIOR PAM技術參數 測量光源：藍色LED，標準強度0.1 mol m-2 s-1 PAR。光

5、化光源：藍色LED，光強范圍01500 mol m-2 s-1PAR（光纖與樣品間的距離為1 mm時）。飽和脈沖光源：藍色LED，最大飽和閃光強度3000 mol m-2 s-1PAR。遠紅光源：LED，730 nm。微光纖：長40cm，直徑1.5 mm。測量參數：Fo、Fm、Fv/Fm、Ft、Fm、Fo、qP、qN、NPQ和rETR等第十八張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月暗適應中熒光的增加由暗適應和光適應下葉片光化學淬滅由最大到最小引起的（Fm-Fo和Fm-Fo）。光適應中熒光量的降低由不產生光化學淬滅和達到最大光化學淬滅（Fm-Fm和Fo-Fo）的光淬滅引起的。在飽和脈沖光發射之

6、前，在Fm和Fo之間的區域內，誘導曲線上熒光的水平為F，它表示PS反應中心的關閉程度。第十九張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月 JUNIOR PAM測量參數 相對熒光產量（Relative Fluorescence Yields）暗適應下測定的參數Fm：關閉所有PS反應中心的高光強脈沖激發的最大熒光值。Fm= Fo + Fv。Fo ：固定熒光或初始熒光產量，也稱基礎熒光。代表不參與PS 光化學反應的光能輻射部分，是PS 反應中心處于完全開放時的熒光產量，它與葉綠素濃度有關。 Fv ：可變熒光產量，代表可參與PS 光化學反應的光能輻射部分，反映了PS 原初電子受體QA 的還原情況。Fo

7、維持PS反應中心打開的低光強激發的最小熒光值。第二十張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月光適應下需要測定的參數Fo：光處理中的最小熒光值：在中，Fo熒光在飽和脈沖之后發出，暗適應是PS受到遠紅光激發快速轉運光系統間的電子，因此開啟PS反應中心。 Fo=1/(1/Fo-1/Fm+1/Fm)Fm：飽和光脈沖誘導期PS反應中心暫時關閉時的最大熒光值。F：F值是光處理期間打飽和脈沖光之前熒光曲線上的點的取值。第二十一張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第二十二張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第二十三張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第二十四張，PPT共三十九頁，創作于20

8、22年6月JUNIOR PAM測量參數continued 熒光淬滅系數（Fluorescence Quenching Coefficients）Fv/Fm和Y() PS最大光化學消耗和有效光化學消耗Y()衡量激發能用于光化學的量。 qp和qL 非光化學淬滅的參數這兩個參數都是衡量PS反應中心那部分能量的。qp建立在單個的PS天線分子的概念上，而qL假設天線分子之間彼此聯系，更接近于葉片內真實情況。這兩個參數的測定不需要使用暗適應樣品進行熒光測定，Fo按照Oxborough和Baker(1997)方法經過計算得到。qN和NPQ 非光化學淬滅的參數這兩個參數都與類囊體基質中依賴pH和玉米黃素產生過

9、程的激發能的非光化學淬滅相關。與以前的熒光系數比較，qN和NPQ的計算總要測定樣品暗適應和光適應條件下的熒光。Y(NO)和Y(NPQ) 參與非光化學淬滅的能量對于集合光合天線分子，Y（NPQ）可以定量激發能通過光保護機制散失的能量：其他非光化學能量稱為Y(NO)。最后，光化學和非光化學耗能之和為1：Y()+Y(NPQ)+Y(NO)=1第二十五張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月相對電子傳遞速率（Relative Electron Transport Rate, ETR） 根據ETR=PARETR-FactorPPS2/PPPSY()計算。光合激發輻射 （Photosynthetic ac

10、tive radiation，PAR ）為計算ETR，WinControl-3使用JUNIOR PAM內部脈沖激發輻射裝置得到PAR值。在其他光照條件下，不使用PAR帶入ETR計算。光曲線 (Light Curve)測量程序指暴露在光強持續增加的活化光下的測定程序。通常，每個光強的時間間隔對于光合反應完全達到平衡太短。因此，將這中光曲線稱為“快速光曲線”（Rapid Light Curves， RLC），它說明當前光合的狀態，不能和經典光合光相應曲線相混。JUNIOR PAM測量參數continued 第二十六張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月JUNIOR PAM測量參數continued 第二十七張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第二十八張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第二十九張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第三十張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第三十一張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第三十二張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第三十三張，PPT共三十九頁，創作于2022年6月第三十四