1、高中生物選修一生物技術實踐知識點總結1、有氧發酵：醋酸發酵無氧發酵：酒精發酵孚L酸發酵2、酵母菌是兼性厭氧菌型微生物真菌酵母菌的生殖方式：出芽生殖（主要）分裂生殖孢子生殖3、在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖。C6H2Q+6Q+6CQ+12fO+能量4、在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發酵。C6H.2QT2QF5O卅2CO+能量5、20C左右最適宜酵母菌繁殖酒精發酵時一般將溫度控制在18C-25C6、在葡萄酒自然發酵的過程中，起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌在發酵過程中，隨著酒精濃度的提高，紅葡萄皮的色素也進入發酵液，使葡萄酒呈現深紅色7、醋酸菌是單細胞細菌（原核生物），代謝

2、類型是異養需氧型，生殖方式為二分裂9、當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸。QH12Q+2Qt2CH3COOH-2CQ+2fOC2H5O卅Qtchcoohh?o10、控制發酵條件的作用醋酸菌對氧氣的含量特別敏感醋酸菌最適生長溫度為32C有兩條途徑生成醋酸：直接氧化和以酒精為底物的氧化。11、實驗流程：挑選葡萄t沖洗t榨汁t酒精發酵t果酒（t醋酸發酵t果醋）12、酒精檢驗：果汁發酵后是否有酒精產生，可以用重鉻酸鉀來檢驗。在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應呈現灰綠色。先在試管中加入發酵液2mL,再滴入物質的量濃度為3mol/L的f

3、SQ3滴，振蕩混勻，最后滴加常溫下飽和的重鉻酸鉀溶液3滴，振蕩試管，觀察顏色堯氣口13、使用該裝置制酒時，應該關閉充氣口；制醋時，應該充氣口連接-氣泵，輸入氧氣。溫度是酵母菌生長和發酵的重要條件。20C左右最適合酵母1菌的繁殖。因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長溫度為32C，因此要將溫度控制在3035C。課題二腐乳的制作1、多種微生物參與了豆腐的發酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌。代謝類型是異養需氧型。生殖方式是孢子生殖。營腐生生活。2、原理：毛霉等微生物產生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂

4、肪水解為甘油和脂肪酸。3、實驗流程：讓豆腐上長出毛霉t加鹽腌制t加鹵湯裝瓶t密封腌制5、將豆腐切成3cmX3cmX1cm的若干塊。所用豆腐的含水量為70%左右，水分過多則腐乳不易成形。*毛霉的生長：條件：將豆腐塊平放在籠屜內，將籠屜中的控制在1518C,并保持一定的濕度。來源：1.來自空氣中的毛霉孢子，2.直接接種優良毛霉菌種加鹽腌制：將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中，同時逐層加鹽，隨著層數的加高而增加鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。加鹽腌制的時間約為8天左右。-用鹽腌制時，注意控制鹽的用量：鹽的濃度過低，不足以抑制微生物的生長，可能導致豆腐腐敗變質；鹽的濃度過高會影響腐乳的口味食鹽的

5、作用：1.抑制微生物的生長，避免腐敗變質2.析出水分，使豆腐變硬，在后期制作過程中不易酥爛3.調味作用，給腐乳以必要的咸味.鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右。酒的作用：1.防止雜菌污染以防腐.酒精含量越高，對蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長；酒精含量過低，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗，難以成塊。香辛料的作用：1.調味作用2.殺菌防腐作用3.參與并促進發酵過程防止雜菌污染：用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用沸水消毒。裝瓶時，操作要迅速小心。整齊地擺放好豆腐、加入鹵湯后，要用膠條將瓶口密封。封瓶時，最好將瓶口通過酒精燈的火焰，防止瓶口被污染。課題三制作泡菜制作泡菜所用微生物是孚L酸菌，其代謝

6、類型是異養厭氧型。在無氧條件下，將糖分解為乳酸。酶分裂方式是二分裂。反應式為：GH12Q'2C3H6Q+能量含抗生素牛奶不能生產酸奶的原因是抗生素殺死乳酸菌。常見的乳酸菌有孚L酸鏈球菌和乳酸桿菌。乳酸桿菌常用于生產酸奶。亞硝酸鹽為白色粉末，易溶于水，在食品生產中用作食品添加劑。膳食中的亞硝酸鹽一般不會危害人體健康，亞硝酸鹽被吸收后隨尿液排出體外，但在適宜pH、溫度和一定微生物作用下形成致癌物質亞硝胺。亞八硝酸鹽一.測定亞硝酸鹽含量的方法是：比色法原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對基苯磺酸發生重氮化反應后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料，與已知濃度的標準顯色液發酵時間（

7、d）目測比較，估算泡菜中亞硝酸鹽含量。課題一微生物的實驗室培養培養基：人們按照微生物對營養物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養基質，是進行微生物培養的物質基礎。培養基按照物理性質可分為液體培養基和固體培養基。在液體培養基中加入凝固劑瓊脂（凝固劑）后，制成瓊脂固體培養基。微生物在固體培養基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落。根據菌落的特征可以判斷是哪一種菌。液體培養基應用于工業或生活生產，固體培養基應用于微生物的分離和鑒定。按照培養基的用途，可將培養基分為選擇培養基和鑒定培養基。選擇培養基是指在培養基中加入某種化學物質，以抑制不需要的微生物生長，促進所需要的微生物的生長。鑒別培養基是根據微生物

8、的特點，在培養基中加入某種指示齊域化學藥品配制而成的，用以鑒別不同類別的微生物。培養基的化學成分包括水、無機鹽、碳源、氮源（生長因子）等。培養基還要滿足微生物生長對PH特殊營養物質以及氧氣的要求。例如，培養孚L酸桿菌時需要在培養基中添加維生素，培養霉菌時須將培養基的pH調至酸性，培養細菌是需要將pH調至中性或微堿性，培養厭氧型微生物是則需要提供無氧的條件無菌技術:消毒與滅菌的區別消毒指使用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內部一部分對人體有害的微生物（不化學灼包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法(對于一些不耐高溫的液體)還有藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。

9、滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物，包括芽孢和孢子。滅菌方法有燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法：接種環、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法； 玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法，所用器械是干熱滅菌箱； 培養基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。 表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法，所用器械是紫外燈。制作牛肉膏蛋白胨固體培養基(1)方法步驟：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。(2) 倒平板操作的步驟：倒平板操作的討論為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養基。平板冷凝后，為什么要將平板倒置？答：平板冷凝后，皿蓋上會凝結

10、水珠，將平板倒置，既可以防止培養基表面的水分過度地揮發，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養基，造成污染。在倒平板的過程中，如果不小心將培養基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養微生物嗎？為什么？答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養基上滋生，因此最好不要用這個平板培養微生物。純化大腸桿菌(1)微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2) 平板劃線法是通過接種環在瓊脂固體培養基表面連續劃線的操作。(3) 稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面，進行培養。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。(4) 用平板劃線法和

11、稀釋涂布平板法接種的目的是：使聚集在一起的微生物分散成單個細胞,而能在培養基表面形成單個的菌落，以便于純化菌種。(5) 平板劃線操作的討論1. 為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環？在劃線操作結束時，仍然需要灼燒接種環嗎？為什么？答：操作的第一步灼燒接種環是為了避免接種環上可能存在的微生物污染培養物；每次劃線前灼燒接種環是為了殺死上次劃線結束后，接種環上殘留的菌種。劃線結束后灼燒接種環，能及時殺死接種環上殘留的菌種，避免細菌污染環境和感染操作者。2. 在灼燒接種環之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？答：以免接種環溫度太高，殺死菌種。3. 在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是

12、從上一次劃線的末端開始劃線？答：劃線后，線條末端細菌的數目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。(1) 對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法。 臨時保藏方法：將菌種接種到試管的固體斜面培養基上，4C的冰箱中保藏(2) 對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法，放在-20C的冷凍箱中保存。(3) 確定培養基制作是否合格的方法將未接種的培養基在恒溫箱中保溫12天，無菌落生長，說明培養基的制備是成功的，否則需要重新制備。課題二土壤中分解尿素的細菌的分離與計數土壤中的細菌之所以能分解尿素，是因為他們能合

13、成脲酶(2)選擇性培養基在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養基，稱作選擇培養基。(3)配制選擇培養基的依據培養基中不加入有機物可以選擇培養自養微生物；培養基中不加入氮元素，可以選擇培養能固氮的微生物；加入高濃度的食鹽可選擇培養金黃色葡萄球菌等。統計菌落數目(1)測定微生物數量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數。(2)稀釋涂布平板法統計樣品中活菌的數目的原理一般設置3個平板，選擇菌落數在30300的平板進行計數，并取平均值。統計的菌落數往往比活菌的實際數目低，因此，統計結果一般用菌落數而不是活菌數來表示。如何從平板上的菌落數推測出每克樣品中的菌

14、落數？統計某一稀釋度下平板上的菌落數，最好能統計3個平板，計算出平板菌落數的平均值每克樣品中的菌落數=(C/V)*M其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(ml),M代表稀釋倍數課題三分解纖維素的微生物的分離纖維素與纖維素酶(1) 棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產物，木材、作物秸稈等也富含纖維素。(2) 纖維素酶是一種復合酶，一般認為它至少包括三種組分，即Ci酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。纖維素最終被水解成葡萄糖，為微生物的生長提供營養。纖維素分解菌的篩選(1) 篩選方法：剛果紅染色法。能

15、夠通過顏色反應直接對微生物進行篩選。(2) 剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色復合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發生這種反應。我們就可以通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌。分離分解纖維素的微生物的實驗流程土壤取樣T選擇培養（此步是否需要，應根據樣品中目的菌株數量的多少來確定）T梯度稀釋T將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養基上T挑選產生透明圈的菌落一種是先培養微生物，再加入剛果紅進行顏色反應，另一種是在倒平板時就加入剛果紅。菊花的組織培養植物組織培養的基本過程細胞分化：在生物個體發育過程中，細胞在形態、結構和生理功能上出現穩定性差異

16、的過程。離體的植物組織或細胞，在培養了一段時間以后，會通過細胞分裂，形成愈傷組織，愈傷組織的細胞排列疏松而無規則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態的薄壁細胞。由高度分化的植物組織或細胞產生愈傷組織的過程，稱為植物細胞的脫分化，或者叫做去分化。脫分化產生的愈傷組織繼續進行培養，又可以重新分化成根或芽等器官，這個過程叫做再分化。再分化形成的試管苗，移栽到地里，可以發育成完整的植物體。植物細胞工程影響植物組織培養的條件材料：植物的種類、材料的年齡和保存時間的長短等都會影響實驗結果。菊花組織培養一般選擇未開花植物的莖上部新萌生的側枝作材料。選取生長旺盛嫩枝進行組培的是嫩枝生理狀態好，容易誘導脫分化和再分

17、化。營養：離體的植物組織和細胞，常用的培養基是MS培養基。激素：植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素。環境條件：PH溫度、光等環境條件。不同的植物對各種條件的要求往往不同。進行菊花的組織培養，一般將pH控制在5.8左右，溫度控制在1822C,并且每日用日光燈照射12h.4、操作流程配制MS固體培養基：配制各種母液：將各種成分按配方比例配制成的濃縮液（培養基母液）。外植體的消毒外植體：用于離體培養的植物器官或組織片段。放入體積分數為70%的酒精中搖動23次，持續67s，立即將外植體取出，在無菌水中清洗。放入質量分數為0.1%的氯化汞溶液中12min。取出后，在無

18、菌水中至少清洗3次，漂洗消毒液。注意：對外植體進行表面消毒時，就要考慮藥劑的消毒效果，又要考慮植物的耐受能力。接種：接種過程中插入外植體時形態學上端朝上，每個錐形瓶接種78個外植體。培養：應該放在無菌箱中進行，并定期進行消毒，保持適宜的溫度（1822C）和光照（12h）移栽栽培專題二月季的花藥培養被子植物花粉的發育要經歷小孢子四分體時期、單核期和雙核期等階段。產生花粉植株的兩種途徑通過花藥培養產生花粉植株（即單倍體植株）一般有兩種途徑，一種是花粉通過胚狀體階段發育為植物，另一種是花粉在誘導培養基上先形成愈傷組織，再將其誘導分化成植株。這兩種途徑之間并沒有絕對的界限，主要取決于培養基中激素的種類

19、及其濃度配比。注意：無論哪種產生方式，都要先誘導生芽，再誘導生根胚狀體：植物體細胞組織培養過程中，誘導產生的形態與受精卵發育成的胚非常類似的結構，其發育也與受精卵發育成的胚類似，有胚芽、胚根、胚軸等完整結構，就像一粒種子，又稱為細胞胚。影響花藥培養的因素誘導花粉能否成功及誘導成功率的高低，受多種因素影響，其中材料的選擇與培養基的組成是主要的影響因素親本的生理狀況：選擇月季的初花期，選擇完全未開放的花蕾。在單核期，細胞核由中央移向細胞一側的時期，花藥培養成功率最高選擇花藥時，一般要通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發育期，確定花粉發育時期的最常用的方法是醋酸洋紅法。但是，某些植物的花粉細胞核

20、不易著色，需采用焙花青-鉻磯法，這種方法能將花粉細胞核染成藍黑色材料的消毒接種和培養：在剝離花藥時，要盡量不損傷花藥（否則接種后容易從受傷部位長生愈傷組織），同時還要徹底去除花絲，不需要光照幼小植株形成后才需要光照一般經過2030天培養后，會發現花藥開裂，長出愈傷組織或形成胚狀體。植物組織培養技術與花藥培養技術的相同之處是：培養基配制方法、無菌技術及接種操作等基本相同。兩者的不同之處在于：花藥培養的難度大。專題4酶的研究與應用知識點課題1果膠酶在果汁生產中的作用由水果制作果汁要解決兩個主要問題：一是果肉的出汁率低，耗時長；二是榨取的果汁渾濁、黏度高，容易發生沉淀。1、植物細胞壁以及胞間層的主要

21、組成成分有纖維素和一果膠_。2、果膠是植物細胞壁以及胞間層的主要組成成分之一，它是由半乳糖醛酸聚合而成的一種高分子化合物，不溶于水。果膠酶的作用是能夠將果膠_分解成可溶性的_半乳醛酸，瓦解植物的細胞壁及胞間層，并且使果汁變得澄清。3、果膠酶是一類酶總稱，包括_果膠分解酶、多聚半乳糖醛酸酶、果膠酯酶等。5、影響酶活性的因素包括：溫度、PH、酶的抑制劑等。蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖微生物和藻類大量繁殖，造成水（1）加酶洗衣粉是指含酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有維素酶四類。普通洗衣粉中含磷，含磷的污水排放可能導致CL14NaCl濃廈(mol/L)C分體污染，加酶洗衣粉可以減少對環境的污染。提取D

22、NA的溶解性原理包括哪些方面？DNA在不同濃度NaCI溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精。在0.14mol/L時溶解度最小；較高濃度可使DNA溶解；0.14mol/L可使DNA析出。在溶解細胞中的DNA時，人們通常選用2moI/LNaCI溶液；將DNA子析出的方法是向溶有DNA的NaCI溶液中緩慢注入蒸餾水，以稀釋NaCI溶液。酒精是一種常用有機溶劑，但DNA卻不能溶于酒精（特別是95%冷卻酒精），但細胞中蛋白質可溶于酒精。在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺呈現藍色。專題六植物有效成分的提取課題一植物芳香油的提取芳香油的提取方法：蒸餾、壓榨、萃取等。水蒸氣蒸餾法：原理：水蒸汽可將揮發性較強的芳香油

23、攜帶出來形成油水混合物，冷卻后水油分層。不足：有些原料不適宜于水中蒸餾，如柑橘、檸檬等易焦糊，有效成分容易水解。通常用壓榨法萃取法：原理：芳香油易溶于有機溶劑，溶劑揮發后得到芳香油。如石油醚、酒精、乙醚等。不足：有機溶劑中的雜質影響芳香油的品質玫瑰精油的提取0.1g/mL氯化鈉溶液：促使油水混合物（乳濁液）中油和水的分離。無水硫酸鈉：吸收油層中的水分。實驗步驟：采集玫瑰花：采集盛花期（5月中上旬）的玫瑰花，清水清洗瀝干。 裝入蒸餾原料：稱取50g玫瑰花放入蒸餾瓶，添加200mL蒸餾水。 安裝蒸餾裝置：按照從左向右、自下到上次序安裝水蒸氣蒸餾裝置。 加熱蒸餾：控制蒸餾時間和速度（12滴/秒），獲得乳白色乳濁液；拆卸裝置。 分離油層：向乳濁液加入NaCI溶液后，利用分液漏斗分離出上面的油層。 除去水分：向油層中加入無水硫酸鈉，24h后過濾，得到玫瑰油。注意事項：蒸餾時間不能過短，溫度不能過高。橘皮精油的提取橘皮精油的主要成分：檸檬烯，主要分布在橘皮中。石灰水：防止壓榨時滑脫，提高出油率，降低壓榨液黏稠度，過濾不堵塞篩眼。小蘇打、硫酸鈉：促進油和水的分離（用量分別為橘皮質量的0.25%和5%）。實驗步驟：橘皮的處理：將新鮮橘皮用清水清洗瀝干。 石灰水浸泡：用78%