1、第一章 緒論填空題1. 生物技術(shù)制藥的特征 高技術(shù) 、高投入 、 高風(fēng)險(xiǎn) 、高收益 、長(zhǎng)周期 。2. 生物藥物廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域，按功能用途可分為三類(lèi)，分別是 治療藥物 、 預(yù)防藥物 、 診斷藥物 。3.現(xiàn)代生物藥物已形成四大類(lèi)型：一是應(yīng)用DNA重組技術(shù)制造的 基因重組多肽、蛋白質(zhì)類(lèi)治療劑 ；二是 基因藥物 ；三是來(lái)自動(dòng)物植物和微生物的 天然生物藥物 ；四是 合成與部分合成的生物藥物；4.生物技術(shù)的發(fā)展按其技術(shù)特征來(lái)看，可分為三個(gè)不同的發(fā)展階段， 傳統(tǒng)生物技術(shù)階段 ； 近代生物技術(shù)階段 ； 現(xiàn)代生物技術(shù)階段 。5.生物技術(shù)所含的主要技術(shù)范疇有 基因工程； 細(xì)胞工程 ； 酶工程 ； 發(fā)酵工程

2、； 蛋白質(zhì)核酸工程 和 生化工程 ；選擇題1.生物技術(shù)的核心和關(guān)鍵是（ A ） A 細(xì)胞工程 B 蛋白質(zhì)工程 C 酶工程 D 基因工程2. 第三代生物技術(shù)（ A ）的出現(xiàn)，大大擴(kuò)大了現(xiàn)在生物技術(shù)的研究范圍A 基因工程技術(shù) B 蛋白質(zhì)工程技術(shù) C 海洋生物技術(shù) D細(xì)胞工程技術(shù)3.下列哪個(gè)產(chǎn)品不是用生物技術(shù)生產(chǎn)的（ D ）A 青霉素B 淀粉酶C 乙醇D 氯化鈉4. 下列哪組描述（ A ）符合是生物技術(shù)制藥的特征A高技術(shù)、高投入、高風(fēng)險(xiǎn)、高收益、長(zhǎng)周期B高技術(shù)、高投入、低風(fēng)險(xiǎn)、高收益、長(zhǎng)周期C高技術(shù)、低投入、高風(fēng)險(xiǎn)、高收益、長(zhǎng)周期D高技術(shù)、高投入、高風(fēng)險(xiǎn)、低收益、短周期5. 我國(guó)科學(xué)家承擔(dān)了人類(lèi)基因

3、組計(jì)劃（ C ）的測(cè)序工作A10% B5% C 1% D 7%名詞解釋1.生物技術(shù)制藥采用現(xiàn)代生物技術(shù)可以人為的創(chuàng)造一些條件，借助某些微生物、植物或動(dòng)物來(lái)生產(chǎn)所需的醫(yī)學(xué)藥品，稱(chēng)為生物技術(shù)制藥。2.生物技術(shù)藥物一般說(shuō)來(lái)，采用DNA重組技術(shù)或其它生物新技術(shù)研制的蛋白質(zhì)或核酸來(lái)藥物稱(chēng)為生物技術(shù)藥物。3.生物藥物生物技術(shù)藥物是重組產(chǎn)品概念在醫(yī)藥領(lǐng)域的擴(kuò)大應(yīng)用，并與天然藥物、微生物藥物、海洋藥物和生物制品一起歸類(lèi)為生物生物藥物。簡(jiǎn)答題1.生物技術(shù)藥物的特性是什么？生物技術(shù)藥物的特征是：（1）分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜（2）具有種屬差異特異性（3）治療針對(duì)性強(qiáng)、療效高（4）穩(wěn)定性差（5）免疫原性（6）基因穩(wěn)定性（7）體

4、內(nèi)半衰期短（8）受體效應(yīng)（9）多效應(yīng)和網(wǎng)絡(luò)效應(yīng)（10）檢驗(yàn)特殊性2.簡(jiǎn)述生物技術(shù)發(fā)展的不同階段的技術(shù)特征和代表產(chǎn)品？（1）傳統(tǒng)生物技術(shù)的技術(shù)特征是釀造技術(shù)，所得產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)較為簡(jiǎn)單，屬于微生物的初級(jí)代謝產(chǎn)物。代表產(chǎn)品如酒、醋、乙醇，乳酸，檸檬酸等。（2）近代生物技術(shù)階段的技術(shù)特征是微生物發(fā)酵技術(shù)，所得產(chǎn)品的類(lèi)型多，不但有菌體的初級(jí)代謝產(chǎn)物、次級(jí)代謝產(chǎn)物，還有生物轉(zhuǎn)化和酶反應(yīng)等的產(chǎn)品，生產(chǎn)技術(shù)要求高、規(guī)模巨大，技術(shù)發(fā)展速度快。代表產(chǎn)品有青霉素，鏈霉素，紅霉素等抗生素，氨基酸，工業(yè)酶制劑等。（3）現(xiàn)代生物技術(shù)階段的技術(shù)特征是DNA重組技術(shù)。所得的產(chǎn)品結(jié)構(gòu)復(fù)雜，治療針對(duì)性強(qiáng)，療效高，不足之處是穩(wěn)定性差

5、，分離純化工藝更復(fù)雜。代表產(chǎn)品有胰島素，干擾素和疫苗等。3.生物技術(shù)在制藥中有那些應(yīng)用?生物技術(shù)應(yīng)用于制藥工業(yè)可大量生產(chǎn)廉價(jià)的防治人類(lèi)重大疾病及疑難癥的新型藥物，具體體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：（1）基因工程制藥，利用基因工程技術(shù)可生產(chǎn)出具有生理活性的肽類(lèi)和蛋白質(zhì)類(lèi)藥物，基因工程疫苗和抗體，還可建立更有效的藥物篩選模型，改良現(xiàn)有發(fā)酵菌種，改進(jìn)生產(chǎn)工藝，提供更準(zhǔn)確的診斷技術(shù)和更有效的治療技術(shù)等。隨著基因技術(shù)的發(fā)展，應(yīng)用前景會(huì)更廣闊。（2）細(xì)胞工程和酶工程制藥該技術(shù)的發(fā)展為現(xiàn)代制藥技術(shù)提供了更強(qiáng)大的技術(shù)手段，使人類(lèi)可控制或干預(yù)生物體初次生代謝產(chǎn)物和生物轉(zhuǎn)化等過(guò)程，使動(dòng)植物能更有效的滿足人類(lèi)健康方面的需求。

6、（3）發(fā)酵工程制藥發(fā)酵工程制藥的發(fā)展主要體現(xiàn)在對(duì)傳統(tǒng)工藝的改進(jìn)，新藥的研制和高效菌株的篩選和改造等。第二章 基因工程制藥填空題1.基因工程藥物制造的主要步驟是： 目的基因的獲得 ； 構(gòu)建DNA重組體； 構(gòu)建工程菌 ； 目的基因的表達(dá) ； 產(chǎn)物的分離純化 ； 產(chǎn)品的檢驗(yàn) 。2.目的基因獲得的主要方法是 反轉(zhuǎn)錄法 、 反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法 和 化學(xué)合成法。3.基因表達(dá)的微生物宿主細(xì)胞分為2大類(lèi)。第一類(lèi)為 原核細(xì)胞 ，目前常用的主要有 大腸桿菌、 枯草芽孢桿菌 、 鏈霉素 ；第二類(lèi)為 真核細(xì)胞，常用的主要有 酵母、 絲狀真菌 。4.基因工程菌在傳代過(guò)程中經(jīng)常出現(xiàn)質(zhì)粒不穩(wěn)定性的現(xiàn)象，質(zhì)粒不穩(wěn)定分為

7、分裂不穩(wěn)定性 和 結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定性 ；基因工程菌的不穩(wěn)定性至少維持 25 代以上。5.基因工程菌的培養(yǎng)方式主要有 分批培養(yǎng) ； 補(bǔ)料分批培養(yǎng) ； 連續(xù)培養(yǎng) ； 透析培養(yǎng) 和 固定化培養(yǎng) ；6.高密度發(fā)酵一般是制培養(yǎng)液中工程菌的濃度在 50g DCW/L 以上，理論上的最高值可達(dá) 200g DCW/L 。7.影響高密度發(fā)酵的因素有 培養(yǎng)基 ； 溶氧濃度 ； PH ； 溫度和 代謝副產(chǎn)物 。8.基因工程藥物的分離純化一般不應(yīng)超過(guò)5個(gè)步驟，包括 細(xì)胞破碎 ； 固液分離 ； 濃縮與初步純化 ； 高度純化 和 成品加工 。9.在基因工程藥物分離純化過(guò)程中，分離細(xì)胞碎片比較困難，可用 離心 ； 膜過(guò)濾 和 雙

8、水相分配 的方法，使細(xì)胞碎片分配在一相，目標(biāo)藥物分配在另一相從而達(dá)到初步分離的目的。10. 人工化學(xué)合成DNA新形成的核苷酸鏈的合成方向是 3 5 ，合成的DNA 5末端是 磷酸酯鍵， 3 末端是 -OH 選擇題1、凝膠過(guò)濾法是依賴(lài)（A ）來(lái)分離蛋白組分。A、分子大小 B、帶電狀態(tài) C、分子質(zhì)量 D、解離狀態(tài)2、在工程菌發(fā)酵過(guò)程中，選用那種糖會(huì)對(duì)lac啟動(dòng)子有阻遏作用。（A ）A、甘油 B、葡萄糖 C、甘露糖 D、飴糖3. 可用于醫(yī)藥目的的蛋白質(zhì)和多肽藥物都是由相應(yīng)的（ B ） 合成的A RNA B 基因 C 氨基酸 D 激素4. 用反轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因，首先必須獲得（D）A tRNA B c

9、DNA C rRNA D mRNA 5.那一類(lèi)細(xì)菌不屬于原核細(xì)胞（ C ）A 大腸桿菌 B 枯草芽孢桿菌C 酵母D 鏈霉菌6.基因工程菌的生長(zhǎng)代謝與（ D ）無(wú)關(guān)A 碳源 B RNA聚合酶C 核糖體 D產(chǎn)物的分子量7.基因工程菌的穩(wěn)定性至少要維持在（B ）以上A 20 B 25 C 30 D 408.基因工程菌的高密度發(fā)酵過(guò)程中，目前普遍采用（ A ）作為發(fā)酵培養(yǎng)基的碳源A 葡萄糖B 蔗糖C 甘油 D甘露醇9. 基因工程藥物多為胞內(nèi)產(chǎn)物，分離提取時(shí)需破碎細(xì)胞?；瘜W(xué)破碎法是常用的方法，但（ D ）不是化學(xué)破碎細(xì)胞的方法。A 滲透沖擊B 增溶法C 脂溶法D 酶溶法10 下列那種色譜方法是依據(jù)分子篩

10、作用來(lái)純化基因工程藥物（C）A 離子交換色譜 B 親和色譜C 凝膠色譜 D氣相色譜名詞解釋1.基因工程技術(shù)也可稱(chēng)為DNA重組技術(shù)，將所要重組對(duì)象的目的基因插入載體、拼接、轉(zhuǎn)入新的宿主細(xì)胞，構(gòu)建工程菌，實(shí)現(xiàn)遺傳物質(zhì)的重新組合，并使目的基因在工程菌內(nèi)進(jìn)行復(fù)制和表達(dá)的技術(shù)。2.基因工程藥物利用DNA重組技術(shù)生產(chǎn)出來(lái)的藥物被稱(chēng)為基因工程藥物。 3.基因表達(dá)基因表達(dá)是指結(jié)構(gòu)基因在生物體中的轉(zhuǎn)錄、翻譯以及所有加工過(guò)程。 3.高密度發(fā)酵一般是指培養(yǎng)液中工程菌的菌體濃度在 50g DCW/L 以上的發(fā)酵過(guò)程，理論上的最高值可達(dá) 200g DCW/L。簡(jiǎn)答題1.簡(jiǎn)述基因工程生產(chǎn)藥品的優(yōu)點(diǎn)（1）利用基因工程技術(shù)可

11、大量生產(chǎn)過(guò)去難以獲得的生理活性蛋白和多肽，為臨床使用建立有效的保障；（2）可以提供足夠數(shù)量的生理活性物質(zhì)，以便更深入的進(jìn)行研究，從而擴(kuò)大這些物質(zhì)的應(yīng)用范圍；（3）可以挖掘更多的內(nèi)源性生理活性物質(zhì)；（4）可對(duì)內(nèi)源性生理活性物質(zhì)的不足之處進(jìn)行改造；（5）可獲得新型化合物，擴(kuò)大藥物篩選來(lái)源。2. 根據(jù)真核基因在原核細(xì)胞中表達(dá)的特點(diǎn)，表達(dá)載體必須具備那些條件？表達(dá)載體必須具備下列條件：（1）能夠獨(dú)立的復(fù)制；（2）具有靈活的克隆位點(diǎn)和方便的篩選標(biāo)記，以利于外源基因的克隆、鑒定和篩選；（3）應(yīng)具有很強(qiáng)的啟動(dòng)子，能為大腸桿菌的RAN聚合酶所識(shí)別；（4）應(yīng)具有阻遏子（5）應(yīng)具有很強(qiáng)的終止子（6）所產(chǎn)生的mRN

12、A必須具有翻譯的起始信號(hào)。3.簡(jiǎn)述影響目的基因在大腸桿菌中表達(dá)的因素影響目的基因在大腸桿菌中表達(dá)的因素：（1）外源基因的劑量（2）外源基因的表達(dá)的表達(dá)效率（3）表達(dá)產(chǎn)物的穩(wěn)定性（4）細(xì)胞的代謝負(fù)荷（5）工程菌的培養(yǎng)條件4.為了提高基因工程菌的質(zhì)粒穩(wěn)定性，可采用那些主要方法？為了提高基因工程菌的質(zhì)粒穩(wěn)定性，可采?。海?）選擇合適的宿主菌；（2）選擇合適的載體；（3）選擇壓力；（4）分階段控制培養(yǎng)；（5）控制培養(yǎng)條件；（6）固定化技術(shù)。5.影響基因工程菌培養(yǎng)工藝的主要因素有那些？主要因素有：（1）培養(yǎng)基的影響（2）接種量的影響（3）溫度的影響（4）溶解氧的影響（5）誘導(dǎo)時(shí)機(jī)的影響（6）誘導(dǎo)表達(dá)程序

13、的影響（7）PH的影響6.建立基因工程藥物分離純化工藝時(shí)，應(yīng)該考慮那些因素？應(yīng)考慮下列因素：（1）含目的的產(chǎn)物的初始物料的特點(diǎn)；（2）物料中雜質(zhì)的種類(lèi)和性質(zhì)；（3）目的產(chǎn)物特性；（4）產(chǎn)品的質(zhì)量要求7.基因工程技術(shù)生產(chǎn)的目標(biāo)產(chǎn)物是多肽和蛋白質(zhì)類(lèi)化合物，這些產(chǎn)品有什么特點(diǎn)？（1）目的產(chǎn)物在初始物料中含量低（2）含目的產(chǎn)物的初始物料組成復(fù)雜（3）目的產(chǎn)物的的穩(wěn)定性差，對(duì)酸堿熱等外界因素敏感；（4）種類(lèi)繁多（5）產(chǎn)品的質(zhì)量要求9.分離純化基因工程藥物常用的色譜方法有那些？它們的原理是什么？分離純化基因工程藥物常用的色譜方法有：離子交換色譜，疏水色譜，親和色譜和凝膠過(guò)濾色譜； 離子交換色譜，以離子交換

14、劑為固定相，依據(jù)流動(dòng)相中的組分離子和交換劑上的平衡離子進(jìn)行可擬交換時(shí)的結(jié)合力大小的差別而進(jìn)行分離的一種色譜方法；疏水色譜，利用蛋白質(zhì)表面的疏水區(qū)域與固定相上疏水性基團(tuán)相互作用力的差異對(duì)蛋白質(zhì)組分進(jìn)行分離的色譜方法；親和色譜：利用固定化配體與目的蛋白質(zhì)之間非常特異的生物親和力進(jìn)行吸附，這種結(jié)合既是特異的又是可逆的，改變條件可以使這種結(jié)合解除的原理分離純化蛋白質(zhì)；凝膠過(guò)濾色譜，是以多孔性凝膠填料為固定相，按分子大小對(duì)溶液中各組分進(jìn)行分離的液相色譜方法。10. 影響高密度發(fā)酵的因素有那些？（1）培養(yǎng)基為滿足菌體生長(zhǎng)和外源蛋白表達(dá)的需求，常需投入幾倍于生物量的基質(zhì)，為了達(dá)到理想的效果，需要對(duì)培養(yǎng)基的營(yíng)

15、養(yǎng)物質(zhì)的配比進(jìn)行優(yōu)化。（2）溶氧濃度溶解氧的濃度過(guò)高或過(guò)低都會(huì)影響細(xì)菌的代謝，因而對(duì)菌體生長(zhǎng)和產(chǎn)物表達(dá)影響很大。要保持適宜的溶氧濃度，需要確定發(fā)酵罐的通氣量和攪拌速度。（3）PH在高密度發(fā)酵的過(guò)程中，PH的改變會(huì)影響細(xì)胞的表達(dá)和基因產(chǎn)物的表達(dá)，因此一定要考慮細(xì)菌的最適PH范圍。（4）溫度溫度是影響細(xì)菌生長(zhǎng)和調(diào)控細(xì)胞代謝的重要因素。較高的溫度有利于細(xì)菌的生長(zhǎng)，提高菌體的生物量。（5）代謝副產(chǎn)物大腸桿菌在發(fā)酵過(guò)程中都會(huì)產(chǎn)生一些有害的代謝副產(chǎn)物，這些副產(chǎn)物積累到一定量會(huì)抑制菌體的生長(zhǎng)和蛋白的表達(dá)，可通過(guò)填加某些物質(zhì)如氨基酸可減輕某些有害物質(zhì)如乙酸的抑制作用。第七章 發(fā)酵工程技術(shù)概論填空題1. 發(fā)酵工

16、業(yè)的生產(chǎn)水平取決于三個(gè)要素，分別是 生產(chǎn)菌種 、 發(fā)酵工藝 和 發(fā)酵設(shè)備。2.發(fā)酵工程產(chǎn)品開(kāi)發(fā)的關(guān)鍵是篩選到高效菌株，一般優(yōu)良菌種的選育方法主要有 自然選育 、 誘變育種 和 原生質(zhì)體融合 。3.微生物誘變育種導(dǎo)致遺傳物質(zhì)DNA結(jié)構(gòu)上發(fā)生變化，通常用 物理 、 化學(xué) 、 生物 等因素進(jìn)行對(duì)微生物的誘變。4.誘變育種的機(jī)制是導(dǎo)致微生物DNA的微細(xì)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，主要分為 微小損傷突變 、 染色體畸變即大損傷突變 、 染色體組突變 三種類(lèi)型。5.誘變育種使用的物理誘變劑主要有 紫外線 、 X射線 、 -射線 、 快中子 、 -射線 、 超聲波 、 -射線 ，其中以 紫外線 應(yīng)用最廣。6.發(fā)酵的基本過(guò)

17、程分為 菌種 、 種子制備 、 發(fā)酵 、 產(chǎn)物提取 。7.在制備大量微生物菌體或其代謝產(chǎn)物時(shí)，可采用不同的發(fā)酵方式。微生物的發(fā)酵方式可分為 分批發(fā)酵 、 補(bǔ)料分批發(fā)酵 、 連續(xù)發(fā)酵 。7.發(fā)酵產(chǎn)物的提取方法一般有 吸附法 、 沉淀法 、 溶劑萃取法 、離子交換法。8.用人工方法來(lái)誘發(fā)突變是加速基因突變的重要手段,突變部位一般發(fā)生在 染色體,因此突變后性狀能穩(wěn)定的遺傳.9.在發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)中使用的碳源有 糖類(lèi) 、 脂肪 、 有機(jī)酸 、 碳水化合物 .10.在發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)中,過(guò)去是直接假如酸或堿來(lái)控制發(fā)酵液的PH值,現(xiàn)在常用 生理酸性（NH4）2SO4 和 堿性物質(zhì)氨水 來(lái)控制。選擇題1. 傳統(tǒng)的微

18、生物發(fā)酵工程不能生產(chǎn)下列哪個(gè)產(chǎn)品（D）A 葡萄酒 B 乙醇C 醬D 青霉素2. 發(fā)酵生產(chǎn)使用的菌種必須以休眠狀態(tài)保存，一般保存溫度范圍是（A ）A 0-4 B 5-10 C 10-15 D 15-203. 發(fā)酵一般在不銹鋼制的釜式反應(yīng)罐內(nèi)進(jìn)行，菌種的接種量一般為（ C）A 1-5% B 5-10% C5-20% D10-30%4. 那種發(fā)酵方式可以為微生物提供較穩(wěn)定的生活環(huán)境（C ）A 分批發(fā)酵 B 補(bǔ)料分批發(fā)酵C 連續(xù)發(fā)酵 5. 發(fā)酵培養(yǎng)基中需要的氮源分為速效氮源和遲效氮源。（ B ）是速效氮源A 黃豆餅粉 B 玉米漿 C 花生餅粉 D 棉子餅粉6. 發(fā)酵產(chǎn)物的提取常用的四種方法是（B ）A

19、 吸附法 沉淀法 結(jié)晶法 離子交換法 B吸附法 沉淀法 溶劑萃取法 離子交換法C吸附法 沉淀法 膜分離法 離子交換法D吸附法 沉淀法 溶劑萃取法 過(guò)濾法7.鏈霉素抗生素合成基因組的典型特征是（D ）A 高G-C堿基組成，含量高達(dá)90%；三聯(lián)體密碼子的第三個(gè)堿基的G,C比例極高B高A-T堿基組成，含量高達(dá)70%；三聯(lián)體密碼子的第三個(gè)堿基的G,C比例極高C高G-C堿基組成，含量高達(dá)70%；三聯(lián)體密碼子的第三個(gè)堿基的A,T比例極高D高G-C堿基組成，含量高達(dá)70%；三聯(lián)體密碼子的第三個(gè)堿基的G,C比例極高8.發(fā)酵生產(chǎn)中培養(yǎng)基的成分是(B )A 碳源氮源和水 B碳源氮源無(wú)機(jī)鹽微量元素和水C碳源硫源無(wú)機(jī)

20、鹽和水 D碳源氮源堿土金屬元素和水9. 下列那種熱不是發(fā)酵過(guò)程中散失熱能的因素（A）A 生物熱 B 蒸發(fā)熱 C 輻射熱 D 顯熱10 微生物都有都有各自的最適PH,大多數(shù)微生物生長(zhǎng)的PH范圍是( C )A 1-7 B 2-5 C 3-6 D 9-10名詞解釋發(fā)酵工程又稱(chēng)為微生物工程，是利用微生物制造工業(yè)原料與工業(yè)產(chǎn)品，并提供服務(wù)的技術(shù)。誘變劑能誘發(fā)基因突變并使突變率提高到超過(guò)自發(fā)突變水平的物理化學(xué)因子都稱(chēng)為誘變劑。簡(jiǎn)答題1. 發(fā)酵工程發(fā)展大體上可分為四個(gè)階段，簡(jiǎn)述各階段的技術(shù)內(nèi)容，代表人物和主要產(chǎn)品第一階段：20世紀(jì)以前時(shí)期，人類(lèi)利用傳統(tǒng)的微生物發(fā)酵技術(shù)來(lái)生產(chǎn)葡萄酒、酒、醋，醬、奶酪等，生產(chǎn)規(guī)

21、模小，主要憑經(jīng)驗(yàn)控制生產(chǎn)過(guò)程。代表人物巴斯德。第二階段，1900-1940年期間，微生物培養(yǎng)技術(shù)不斷進(jìn)步，有力的推動(dòng)了發(fā)酵工業(yè)的快速發(fā)展，能排除培養(yǎng)體系中的有害微生物，能進(jìn)行大規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)發(fā)酵過(guò)程。代表產(chǎn)品是丙酮、丁醇，甘油，乳酸，檸檬酸等。第三階段，發(fā)酵工業(yè)大發(fā)展時(shí)期。 能對(duì)微生物進(jìn)行深層培養(yǎng)，可采用純種發(fā)酵，無(wú)菌操作技術(shù)成熟，生產(chǎn)規(guī)模巨大，生產(chǎn)過(guò)程能有效控制，相應(yīng)的采用較復(fù)雜的工藝和設(shè)備。代表產(chǎn)品如青霉素，鏈霉素，紅霉素，氨基酸等。代表人物是發(fā)現(xiàn)青霉素的英國(guó)科學(xué)家Fleming.第四階段 基因工程等高新技術(shù)應(yīng)用階段?，F(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展是人們加深了對(duì)微生物代謝產(chǎn)物合成的遺傳學(xué)與調(diào)節(jié)機(jī)制的了

22、解，為更好的應(yīng)用提供了前提條件。DAN雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的建立，質(zhì)粒中遺傳物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)，DNA限制酶和連接酶的應(yīng)用，為人類(lèi)控制生物體生物代謝過(guò)程提供了強(qiáng)大的工具，使發(fā)酵技術(shù)能為人類(lèi)提供需要的產(chǎn)品。代表產(chǎn)品胰島素，干擾素等， 人物如沃森、克里克等。2. 簡(jiǎn)述培養(yǎng)基對(duì)發(fā)酵的影響微生物的生長(zhǎng)需要一定的營(yíng)養(yǎng)，不同的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求有很大的差異，培養(yǎng)基的成分和配比合適與否，對(duì)產(chǎn)生菌的生長(zhǎng)發(fā)育，發(fā)酵單位的增長(zhǎng)，有相當(dāng)大的影響，同時(shí)還會(huì)影響到提取工藝和產(chǎn)品質(zhì)量。微生物的生長(zhǎng)需要較多供給有機(jī)碳架的碳源，構(gòu)成含氮物質(zhì)的氮源，還有無(wú)機(jī)鹽類(lèi)，微量元素和水分等。碳源是構(gòu)成微生物細(xì)胞和各種代謝產(chǎn)物碳架的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，同時(shí)碳源在

23、微生物的代謝過(guò)程中被氧化、釋放出能量，并以ATP的形式貯存于細(xì)胞內(nèi)，供給微生物生命活動(dòng)所需的能量。碳源是構(gòu)成菌體細(xì)胞的物質(zhì)，同時(shí)也是細(xì)胞合成氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸、酶類(lèi)及含氮代謝產(chǎn)物的成分，選擇氮源需要注意氮源促進(jìn)菌體生長(zhǎng)、繁殖和合成產(chǎn)物間的關(guān)系。無(wú)機(jī)鹽和微量元素是構(gòu)成菌體原生質(zhì)的成分，可維持酶的活性，可調(diào)節(jié)細(xì)胞的滲透壓和PH，參與產(chǎn)物的合成等。水是必需的物質(zhì)，它既是構(gòu)成菌體細(xì)胞的主要成分，又是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)傳遞的介質(zhì)，對(duì)微生物的生長(zhǎng)繁殖和產(chǎn)物合成有很重要的作用。3. 簡(jiǎn)述溫度對(duì)發(fā)酵的影響，如何控制溫度可提高目標(biāo)產(chǎn)物的產(chǎn)率？在發(fā)酵過(guò)程中，菌體的生長(zhǎng)和產(chǎn)物的合成均溫度有密切關(guān)系，一般最適生長(zhǎng)溫度和最適生

24、產(chǎn)溫度往往不一致。在具體控制過(guò)程中，究竟選擇哪個(gè)溫度，需要視在微生物生長(zhǎng)階段和產(chǎn)物合成階段中哪一矛盾是主要而定，另外，溫度還會(huì)影響微生物代謝的途徑和方向。在理論上，整個(gè)發(fā)酵過(guò)程中不應(yīng)只選一個(gè)培養(yǎng)溫度，而應(yīng)該根據(jù)發(fā)酵的不同階段選擇不同的培養(yǎng)溫度。在生長(zhǎng)階段，應(yīng)選擇最適生長(zhǎng)溫度；在產(chǎn)物分泌階段，應(yīng)選擇最適生產(chǎn)溫度。這樣變溫發(fā)酵所得產(chǎn)物的產(chǎn)量是比較理想的。但在工業(yè)發(fā)酵過(guò)程中，由于發(fā)酵液的體積很大，升降溫度都比較的困難，所以在整個(gè)發(fā)酵過(guò)程中，往往采用一個(gè)比較適合的培養(yǎng)溫度，使得到的產(chǎn)物產(chǎn)率最高。4. 簡(jiǎn)述溶氧對(duì)發(fā)酵的影響，如何控制溶氧濃度可提高目標(biāo)產(chǎn)物的產(chǎn)率？大部分工業(yè)微生物需要在有氧環(huán)境中生長(zhǎng)，培養(yǎng)

25、這類(lèi)微生物需要采取通氣發(fā)酵，適量的溶解氧可維持其呼吸代謝和代謝產(chǎn)物的合成。，對(duì)決大多數(shù)發(fā)酵來(lái)說(shuō)，供氧不足會(huì)造成代謝異常，降低產(chǎn)物產(chǎn)量。因此，保證發(fā)酵液中溶氧和加速氣相、液相和微生物之間的物質(zhì)傳遞對(duì)于提高發(fā)酵的效率是至關(guān)重要的。發(fā)酵液的溶氧濃度，是由供氧和需氧兩方面多決定的，也就是說(shuō)當(dāng)發(fā)酵的供氧量大于需氧量，溶氧濃度就上升，反之就下降。因此要控制好溶氧濃度需要從這兩方面入手。在供氧方面主要是設(shè)法提高氧傳遞的推動(dòng)力和液相體積氧傳遞系數(shù)的值，如可調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速或通氣速率來(lái)控制供氧；發(fā)酵液的需氧量受菌體濃度的影響最為明顯，發(fā)酵液的攝氧率隨菌濃增加而按一定比例增加，但是氧的傳遞速率隨菌濃的增加呈對(duì)數(shù)減少。

26、因此可通過(guò)控制最合適菌體濃度來(lái)控制需氧量。在工業(yè)生產(chǎn)中還可通過(guò)調(diào)節(jié)溫度，液化培養(yǎng)基，中間補(bǔ)水，填加表面活性劑來(lái)改善溶氧水平。5. 簡(jiǎn)述PH對(duì)發(fā)酵的影響，如何控制PH可提高目標(biāo)產(chǎn)物的產(chǎn)率發(fā)酵培養(yǎng)基的PH對(duì)微生物的生長(zhǎng)具有非常明顯的影響，也是影響發(fā)酵過(guò)程中各種酶活的重要因素，由于PH不當(dāng)，可能?chē)?yán)重影響微生物的生長(zhǎng)和產(chǎn)物的合成，因此對(duì)微生物發(fā)酵來(lái)講，有最適生長(zhǎng)PH和最適生產(chǎn)PH。在了解發(fā)酵過(guò)程中的最適PH的要求后，就要采取各種方法來(lái)控制。首先要使培養(yǎng)基在發(fā)酵過(guò)程中的PH變化在合適的范圍內(nèi)，一般控制培養(yǎng)基PH變化的能力有限，在不能滿足要求的前提下，可在發(fā)酵過(guò)程中直接加堿或酸性物質(zhì)的方法來(lái)控制。6. 簡(jiǎn)

27、述抗生素生物合成基因的特點(diǎn)？抗生素合成基因的特點(diǎn)是：（1）抗生素合成基因的一個(gè)典型特點(diǎn)是高G-C堿基組成，含量達(dá)70%；三聯(lián)體密碼子中的第三個(gè)堿基的G-C比例極高；（2）對(duì)已克隆的抗生素合成基因進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)他們大多處在一個(gè)基因簇中；（3）抗生素合成基因除定位在染色體上外，還發(fā)現(xiàn)定位在質(zhì)粒上。7. 利用基因工程如何提高抗生素的產(chǎn)量？利用基因工程可通過(guò)以下方法提高抗生素的產(chǎn)量：（1）增加參與生物合成限速階段基因的拷貝數(shù)；（2）通過(guò)調(diào)節(jié)基因的作用；（3）增加抗性基因；8. 基因工程在抗生素生產(chǎn)中有那些應(yīng)用？通過(guò)基因工程明確抗生素合成基因的典型特點(diǎn)和克隆的方法，解析合成基因的結(jié)構(gòu)，深入了解微生物的生

28、長(zhǎng)代謝過(guò)程，更有效的控制抗生素的生產(chǎn)，為人類(lèi)的健康提供更多更有效的產(chǎn)品，主要體現(xiàn)在以下幾方面：（1）提高抗生素的產(chǎn)量（2）改善抗生素的組分（3）改進(jìn)抗生素的生產(chǎn)工藝；（4）產(chǎn)生雜合抗生素，提供新的藥物來(lái)源（5），用組合生物合成方法合成復(fù)雜化合物9. 發(fā)酵工程的研究?jī)?nèi)容包括那些？發(fā)酵工程的內(nèi)容包括：菌種的培養(yǎng)和選育、菌的代謝和調(diào)節(jié)、培養(yǎng)基滅菌、通氣攪拌、溶氧、發(fā)酵條件的優(yōu)化、發(fā)酵過(guò)程各種參數(shù)與動(dòng)力學(xué)、發(fā)酵反應(yīng)器的設(shè)計(jì)和自動(dòng)控制、產(chǎn)品的分離純化和精制等。10.理想的發(fā)酵罐應(yīng)該具有那些特點(diǎn)？（1）制造發(fā)酵罐的材料穩(wěn)定性好，對(duì)微生物無(wú)毒性（2）密封性良好（3）良好的傳質(zhì)傳熱和混合性能（4）內(nèi)壁平整光滑

29、，連接接口無(wú)死角死腔；（5）能自動(dòng)控制且控制精確度高論述題根據(jù)生物技術(shù)制藥的特點(diǎn),在國(guó)內(nèi)外的發(fā)展現(xiàn)狀,分析該制藥技術(shù)在我國(guó)的發(fā)展前景.第三章 動(dòng)物細(xì)胞制藥填空1、動(dòng)物與微生物、植物細(xì)胞培養(yǎng)生長(zhǎng)條件最明顯的區(qū)別是動(dòng)物細(xì)胞需要 貼壁生長(zhǎng) 生長(zhǎng)。2、生產(chǎn)用動(dòng)物細(xì)胞為 原代 細(xì)胞、 二倍休 細(xì)胞系、 轉(zhuǎn)化 細(xì)胞系 以及 工程 細(xì)胞系。3、按我國(guó)和美國(guó)FDA的規(guī)定，用于生產(chǎn)的工程細(xì)胞必須建立 原始細(xì)胞庫(kù) 和 工作細(xì)胞庫(kù) 兩個(gè)細(xì)胞庫(kù)。4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)基的不同分為 液體培養(yǎng) 和 固體培養(yǎng) 。5、從生產(chǎn)實(shí)際看，動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)主要可以分為懸浮培養(yǎng)、 貼壁培養(yǎng) 和貼壁-懸浮培養(yǎng)。選擇題1人胚成纖維細(xì)

30、胞約可以培養(yǎng)（C ）代。A 30 B 40 C 50 D 602動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)新買(mǎi)的玻璃器材在使用前必須先（ A ）。 A 泡酸 B 清洗 C 消毒 D 刷洗3動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的最適PH為（ D ）。A 6.5-6.8 B 6.8-7.0 C4目前衛(wèi)生部對(duì)生物工程的產(chǎn)品一般要求純度在（ C ）以上。 A 95% B 97% C 98% D 99%5.將構(gòu)建好載體導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞最常用有方法是( D )。 A 細(xì)胞融合法和微細(xì)胞介導(dǎo)法。 B 原生質(zhì)介導(dǎo)法和染色體介導(dǎo)法 C 顯微注射法和基因槍法 D 磷酸鈣沉淀法和電穿孔法6. 攪拌的作用在于使罐內(nèi)物料充分混合，有利于營(yíng)養(yǎng)物和氧的傳遞，但在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中攪

31、拌速度一般控制在（ D ）r/min. A.400 B 40 C 60 D 1007.將蛋白質(zhì)分子與其它相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)分開(kāi)最常用的方法是（ A ）。 A 透析 B 親和層析 C 高壓液相層析 D 離心名詞解釋灌流式操作 ： 當(dāng)細(xì)胞和培養(yǎng)基一起加入反應(yīng)器后，在細(xì)胞增長(zhǎng)和產(chǎn)物形成過(guò)程中，不斷地將部分條件培養(yǎng)基取出，同時(shí)不斷地補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基。 分批式操作將細(xì)胞和培養(yǎng)基一次性加入反應(yīng)器內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，細(xì)胞不斷增長(zhǎng)，產(chǎn)物不斷形成，最后將條件培養(yǎng)基取出，培養(yǎng)結(jié)束的方法。半連續(xù)操作 細(xì)胞工程 組織培養(yǎng)： 將組織或細(xì)胞從機(jī)體取出，在體外模擬機(jī)體體內(nèi)的生理?xiàng)l件進(jìn)行培養(yǎng)，使之生存和生長(zhǎng)。貼壁細(xì)胞: 生長(zhǎng)須有貼

32、附的支持物表面，自身分泌或培養(yǎng)基中提供的貼附因子才能在該表面上生長(zhǎng)。兩種形態(tài)：成纖維細(xì)胞型和上皮細(xì)胞型簡(jiǎn)答題1 植物細(xì)胞及微生物相比動(dòng)物細(xì)胞有那些生理特點(diǎn)？2 無(wú)血清培養(yǎng)基有何優(yōu)點(diǎn)？（1）提高重復(fù)性（2）減少微生物污染（3）供應(yīng)充足穩(wěn)定（4）產(chǎn)品易純化（5）避免血清因素對(duì)細(xì)胞的毒性（6）減少血清中蛋白對(duì)生物測(cè)定的干擾3，包埋或微囊培養(yǎng)法有何優(yōu)點(diǎn)？（1）細(xì)胞可獲得保護(hù)，避免了剪切力的損害。（2）可以獲得較高的細(xì)胞密度。（3）當(dāng)控制微囊膜的孔徑后，可使產(chǎn)品濃縮在微囊中，從而有利于下游產(chǎn)品的純化。（4）可采用多種生物反應(yīng)器進(jìn)行在規(guī)模培養(yǎng)。4理想的動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器必須具備哪些基本要求？（1） 制造生

33、物反應(yīng)器所用材料必須無(wú)毒。（2） 生物反應(yīng)器的結(jié)構(gòu)必須使之具有良好的傳質(zhì)、傳熱和混合的性能；（3） 密封性能良好；（4） 對(duì)培養(yǎng)環(huán)境中多種物理化學(xué)參數(shù)能自動(dòng)檢測(cè)和調(diào)節(jié)控制，控制的精度高，而且能保持環(huán)境質(zhì)量的均一； （5） 可長(zhǎng)期連續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)； （6） 容器加工制造時(shí)要求內(nèi)表面光滑，無(wú)死角，以減少細(xì)胞或微生物的沉積；（7） 拆裝、連接和清潔方便，能耐高壓蒸汽消毒，便于維修； （8） 設(shè)備成本盡可能低；5灌流式操作有何優(yōu)點(diǎn)？（1）細(xì)胞處于較穩(wěn)定的良好環(huán)境，營(yíng)養(yǎng)條件較好，有害代謝廢物濃度較低。（2）可極大地提高細(xì)胞密度。（3）產(chǎn)品在罐內(nèi)停留時(shí)間短，可及時(shí)收留在低溫下保存，有利于產(chǎn)品質(zhì)量。（4）培養(yǎng)基的比

34、消耗率低，加之產(chǎn)品質(zhì)量的提高，生產(chǎn)成本明顯降低。第四章 抗體制藥填空1Ig分子是由 二硫鍵 連接起來(lái)的 4條（兩對(duì)） 條多肽鏈構(gòu)成的。2單克隆抗體制備時(shí)對(duì)動(dòng)物的免疫方法分為 體內(nèi)免疫 和 體外免疫 。3一般來(lái)說(shuō)PEG的 相對(duì)分子質(zhì)量 和 濃度 越大，細(xì)胞的融合率越高。1.Ig分子的抗原結(jié)合部位是由（ B ）共同構(gòu)成。A VL和CL區(qū) B VL和VH的CDR區(qū) C VL和CH區(qū) D VH和 CL區(qū)2.制備單克隆抗體時(shí)一般采用與（ D ）供體同一品系的動(dòng)物進(jìn)行免疫。A 淋巴細(xì)胞 B肝細(xì)胞 C脾細(xì)胞 D骨髓瘤細(xì)胞3. 生物藥物檢驗(yàn)要求（ D ）。A 要求有理化檢驗(yàn)指標(biāo) B 生物活性指標(biāo) C 藥代動(dòng)力

35、學(xué)指標(biāo) D理化指標(biāo)和生物活性指標(biāo)缺一不可4.下列不屬于基因產(chǎn)品液態(tài)保存的方法是（ B ） A 低溫保存 B 低濃度保存 C 在穩(wěn)定pH條件下保存 D 加保護(hù)劑保存5.目前預(yù)防乙型肝炎使用的生物制品屬于（ A ）。A疫苗 B菌苗 C類(lèi)毒素 D血液制品單克隆抗體 由單細(xì)胞經(jīng)分裂增殖而形成細(xì)胞群，即單克隆。單克隆細(xì)胞將合成針對(duì)一種抗原決定簇的抗體，稱(chēng)為單克隆抗體。 多克隆抗體 病原微生物含有多種抗原決定簇的抗原物質(zhì)，因此這些抗體制劑也是多種抗體的混合物，故稱(chēng)多克隆抗體。 抗體 是指能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合具有免疫功能的球蛋白。免疫球蛋白 將具有抗體活性及化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白統(tǒng)稱(chēng)為免疫球蛋白 改形

36、抗體 Ig 分子中參與構(gòu)成抗原結(jié)合部位的區(qū)域是H和L鏈V區(qū)中的互補(bǔ)決定區(qū)（CDR區(qū)），而不是整個(gè)可變區(qū)。 H和L鏈各有三個(gè)CDR，其它部分稱(chēng)框架區(qū)。用鼠源單抗的CDR序列替換人Ig 分子中CDR序列，則可使人的Ig 分子具有鼠源單抗的抗原結(jié)合特異性?？上庖咴葱浴５谖逭?植物細(xì)胞工程制藥填空1與動(dòng)物細(xì)胞和微生物細(xì)胞相比，植物細(xì)胞具有 細(xì)胞壁 、液泡 和 質(zhì)體 。2植物細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)分為 靜止 和 振蕩 。3植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)物的生長(zhǎng)主要取決于 生長(zhǎng)素和 分裂素 的比例。4大多數(shù)植物細(xì)胞的培養(yǎng)基中的氮都是以 NH4+ 和 NO3- 形式提供的。5常用的對(duì)植物組織培養(yǎng)的表面滅菌劑是 次氯酸鈣 、

37、 次氯酸鈉 和 氯化汞 。6植物培養(yǎng)細(xì)胞重量的增加主要取決于 對(duì)數(shù)期 ，而次級(jí)代謝產(chǎn)物的累積則主要在 穩(wěn)定期 。解釋次級(jí)代謝作用 由特異蛋白質(zhì)調(diào)控產(chǎn)生的內(nèi)源化合物的合成,代謝及分解作用的綜合過(guò)程. 次級(jí)代謝產(chǎn)物 除了核酸、核苷、核苷酸、氨基酸、蛋白質(zhì)及糖類(lèi)以外，具有如下特征的成分成為次級(jí)代謝產(chǎn)物：有明顯的分類(lèi)學(xué)區(qū)域界限；其合成需在一定的條件下才能發(fā)生；缺乏明確的生理功能；是生命的多余成分。繼代培養(yǎng) 由最初的外植體上切下的新增殖的組織，培養(yǎng)一代稱(chēng)為“第一代培養(yǎng)”，連續(xù)多代的培養(yǎng)就稱(chēng)為繼代培養(yǎng)。植物激素 是植物代謝過(guò)程中形成的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)，在極低濃度（小于1微摩時(shí)即能調(diào)節(jié)植物的生育過(guò)程，并能從合成

38、部位轉(zhuǎn)運(yùn)到作用部位而發(fā)揮作用。 固體培養(yǎng) 是在培養(yǎng)基中加入一定量的凝固劑，經(jīng)加熱溶解后，分別裝入培養(yǎng)的容器，冷卻后凝結(jié)成固體培養(yǎng)基。簡(jiǎn)答1 影響植物次級(jí)代謝產(chǎn)物產(chǎn)生和累積的主要因素有哪些？影響次級(jí)代謝產(chǎn)物產(chǎn)生和累積的因素主要有：（1）、生物條件：外植體、季節(jié)、休眠、分化等；（2）、物理?xiàng)l件：溫度、光（光照時(shí)間、光強(qiáng)、光質(zhì)）、通氣（氧氣）、酸度和滲透壓；（3）、化學(xué)條件：無(wú)機(jī)鹽、碳源、物質(zhì)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、維生素、氨基酸、核酸、抗生素、天然物質(zhì)和前體等；（4）、工業(yè)培養(yǎng)條件：培養(yǎng)罐類(lèi)型、通氣、攪拌和培養(yǎng)方式。2.各種植物細(xì)胞培養(yǎng)的生物反應(yīng)器的特點(diǎn)是什么？（1）機(jī)械攪拌式生物反應(yīng)器；優(yōu)點(diǎn)是：反應(yīng)器內(nèi)的溫

39、度、PH值、溶氧及營(yíng)養(yǎng)物濃度較其他反應(yīng)器更易控制；缺點(diǎn)是：攪拌產(chǎn)生的剪切力對(duì)細(xì)胞造成傷害、抑制植物細(xì)胞生長(zhǎng)和次級(jí)代謝物產(chǎn)生。（2）鼓泡塔生物反應(yīng)器；優(yōu)點(diǎn)：操作不易染菌，提供了較高的熱量和質(zhì)量傳遞，放大相對(duì)容易；缺點(diǎn)是：流體流動(dòng)形式難以確定，混合不均，缺乏有關(guān)反應(yīng)器內(nèi)的非牛頓流體的流動(dòng)與傳遞的數(shù)據(jù)。（3）氣升式生物反應(yīng)器；優(yōu)點(diǎn)：在低剪切力下達(dá)到較好的混合和較高的氧傳遞效果，運(yùn)動(dòng)部件不易染菌，操作費(fèi)用低；缺點(diǎn)：高密度培養(yǎng)時(shí)混合不夠均勻；（4）轉(zhuǎn)鼓式生物反應(yīng)器；優(yōu)點(diǎn)：在高密度培養(yǎng)時(shí)有較高的氧傳遞效率，缺點(diǎn)：難于大規(guī)模操作，放大困難。（5）固定化細(xì)胞生物反應(yīng)器；優(yōu)點(diǎn)：在一定程度上克服了植物細(xì)胞遺傳和生

40、理特性的不穩(wěn)定，細(xì)胞大小的不一致性、高產(chǎn)細(xì)胞系的低產(chǎn)率等植物細(xì)胞培養(yǎng)中的突出難題，提高產(chǎn)物的產(chǎn)率。缺點(diǎn)：固定化細(xì)胞培養(yǎng)的先決條件是細(xì)胞代謝產(chǎn)物必須分泌到胞外，3.植物組織的固體培養(yǎng)有何缺點(diǎn)？（1）外植體或愈傷組織僅有一部分與培養(yǎng)基接觸，造成培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度差，導(dǎo)致生長(zhǎng)的不平衡；（2）外植體的基部插入培養(yǎng)基中，因此該處呈現(xiàn)氣體交換不暢，阻礙了組織呼吸作用的正常進(jìn)行，同時(shí)也堆積生長(zhǎng)過(guò)程中排出的有害物質(zhì)。（3）容易出現(xiàn)極化現(xiàn)象，導(dǎo)致細(xì)胞群體的不均勻。（4）在培養(yǎng)過(guò)程中需要檢測(cè)的一些生理特殊化指標(biāo)不方便。4植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的主要方法及其特點(diǎn)是什么？（1）成批培養(yǎng)法 最適于植物細(xì)胞培養(yǎng)的是氣升式

41、反應(yīng)器。兩步培養(yǎng)法，使用兩個(gè)反應(yīng)器第一個(gè)用于細(xì)胞生物量的累積，第二個(gè)用于次級(jí)代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)。（2）半連續(xù)培養(yǎng)法在反應(yīng)器中投料和接種培養(yǎng)一段時(shí)間后，將部分培養(yǎng)液和新鮮培養(yǎng)液進(jìn)行交換的培養(yǎng)方法。是一種具有定時(shí)進(jìn)出裝置的成批培養(yǎng)系統(tǒng)。（3）連續(xù)培養(yǎng)法 生產(chǎn)能力較高，但技術(shù)條件要求苛刻。（4）固定化培養(yǎng)法 固定化的優(yōu)點(diǎn)是細(xì)胞位置固定，易于獲得高密度細(xì)胞群體和維持細(xì)胞間的物理化學(xué)梯度，利于細(xì)胞組織化，易于控制培養(yǎng)條件及獲得次級(jí)代謝產(chǎn)物。5植物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基由哪些主要成分組成？植物細(xì)胞或組織培養(yǎng)基常含有無(wú)機(jī)鹽、碳源、有機(jī)氮源、植物生長(zhǎng)激素、維生素等成分。（1）無(wú)機(jī)鹽 有大量元素和微量元素，30毫克每升為

42、界限，大量有氮、硫、磷、鉀、鎂、鈣、氯、鈉。微量有鐵、錳、碘、鉬、銅、鋅。（2）碳源 常用碳源為碳水化合物、肌醇、甘油、乳糖和半乳糖。天然提取物如椰子乳、對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)和培養(yǎng)也有重要意義。（3）植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑 常見(jiàn)的植物激素有生長(zhǎng)素、分裂素、赤霉素、脫落酸、乙烯。（4）有機(jī)氮源 常用蛋白質(zhì)水解物或各種氨基酸，有機(jī)氮源對(duì)細(xì)胞的早期生長(zhǎng)有利，氨基酸的加入是為了代替或增加氮源的供應(yīng)。（5）維生素 通常是維生素自養(yǎng)型，但大多數(shù)不能滿足需要第六章 酶工程制藥填空1酶的固定化方法為 載體結(jié)合法 、 交聯(lián)法 和 包埋法 。2，酶的載體結(jié)合法根據(jù)結(jié)合形式的不同分為 物理吸附法、離子結(jié)合法和 共價(jià)結(jié)合法 。3目前工業(yè)常的酶一般是以 微生物 為主要來(lái)源。4篩選產(chǎn)酶菌的方法主要包括以下 菌樣采集 。 菌種的初篩 、 純化 復(fù)篩 、和生產(chǎn)性能鑒定等步驟。5酶在醫(yī)藥領(lǐng)域有應(yīng)用主要包括 疾病診斷、 疾病治療、 藥物生產(chǎn) 和 分析檢測(cè) 四個(gè)方面的運(yùn)用。6在固定化細(xì)胞中應(yīng)用最多，最有效的方法是 包埋法 。7酶和細(xì)胞的固定化載體主要有 吸附載體 、 包埋載體和 交聯(lián)載體 三類(lèi)。8選擇酶和細(xì)胞固定化方法時(shí)應(yīng)考慮 應(yīng)用的安全性 、