1、1注射劑的無菌保證注射劑的無菌保證與工藝研究與工藝研究 2藥品管理法與藥品生產藥品管理法與藥品生產 2001年年2月月28日修訂的日修訂的藥品管理法藥品管理法第十條，第十條，經修訂后明確要求：經修訂后明確要求：“藥品必須按照（原法規：工藝規程）國家藥品藥品必須按照（原法規：工藝規程）國家藥品標準和國務院藥品監督管理部門批準的生產工標準和國務院藥品監督管理部門批準的生產工藝進行生產，藝進行生產，。改變影響藥品質量的生產工。改變影響藥品質量的生產工藝的，必須報原批準部門審核批準。藝的，必須報原批準部門審核批準。” 生產工藝的源頭：藥品研發中經工藝研究與驗生產工藝的源頭：藥品研發中經工藝研究與驗證獲

2、得的申報工藝證獲得的申報工藝3目目 錄錄4 不通過人體固有的保護屏障，直接不通過人體固有的保護屏障，直接進入血液進入血液 起效快、安全性要求高。起效快、安全性要求高。無菌無菌嚴格控制熱原及雜質嚴格控制熱原及雜質5 歷史的教訓：歷史的教訓：1970-1975年，美國因輸液污染導致敗血癥年，美國因輸液污染導致敗血癥400多起，但問題產品全部通過了無菌檢查。多起，但問題產品全部通過了無菌檢查。2006年，安徽華源的年，安徽華源的“欣氟欣氟”事件：滅菌事件：滅菌工藝與無菌檢查工藝與無菌檢查6 方法本身是否經過充分驗證方法本身是否經過充分驗證05版藥典的新版藥典的新要求。要求。 檢測結果有無代表性。檢測

3、結果有無代表性。 抽檢，樣本數一般為抽檢，樣本數一般為20/批。批。 樣本數、污染率及通過無菌檢查（取不到污染樣本數、污染率及通過無菌檢查（取不到污染樣）的概率遵循二項式定律（泊松分布）樣）的概率遵循二項式定律（泊松分布）通過無菌檢查的概率通過無菌檢查的概率P=(1-q)n式中：式中：q為批產品污染率為批產品污染率 n為樣本數為樣本數無菌檢查的局限性無菌檢查的局限性7計計 算算 實實 例例 假設當某批藥品的假設當某批藥品的實際染菌率為實際染菌率為5%5%時，時，如果根據通常取樣的數量為如果根據通常取樣的數量為20支，則該支，則該批藥品通過無菌檢查的概率批藥品通過無菌檢查的概率 P=(1-q)n

4、=（1-0.05）20 =0.359 即有即有35.9%35.9%的可能性，該批藥品將會被判的可能性，該批藥品將會被判定為無菌。定為無菌。 8無菌檢查特性數據表無菌檢查特性數據表編號編號污染污染率率通過無菌檢查的概率通過無菌檢查的概率n=1n=2n=4n=10n=15n=20n=30001595908160463621090816635211231585725220944208064411141577.6422.36560.1%5%中國藥典現取樣數為：中國藥典現取樣數為：20，如污染率為，如污染率為5%，從曲線，從曲線得，檢出概率為得，檢出概率為64%。9如何保證注射劑如何保證注射劑無菌合格呢

5、？無菌合格呢？10質量控制的三種模式質量控制的三種模式 檢驗控制質量檢驗控制質量（Quality by Test） 不夠全面不夠全面 生產控制質量生產控制質量（Quality by Manufacture） 將質控延伸到生產環節將質控延伸到生產環節 設計控制質量設計控制質量（Quality by Design，QbD） 全方位的控制、發展的方向全方位的控制、發展的方向 三者互為補充，后者包括前者三者互為補充，后者包括前者 11保證注射劑無菌的措施保證注射劑無菌的措施 研究階段研究階段 研究設計出符合無菌要求的產品（包括合研究設計出符合無菌要求的產品（包括合適的劑型、滅菌工藝、包裝材料）適的劑型

6、、滅菌工藝、包裝材料）前提與源頭前提與源頭 生產階段生產階段 批產后應嚴格按照研究驗證后的工藝進行批產后應嚴格按照研究驗證后的工藝進行生產生產12 D值（微生物的耐熱參數）：在一定溫度值（微生物的耐熱參數）：在一定溫度下，將微生物殺滅下，將微生物殺滅90%所需的時間，以所需的時間，以分鐘為單位。一般小于分鐘為單位。一般小于1分鐘。分鐘。 F0值：產品在值：產品在121下的標準滅菌時間。下的標準滅菌時間。 滅菌率滅菌率L：某溫度下滅菌：某溫度下滅菌1分鐘所對應的分鐘所對應的F0值。值。13Z=10時，不同溫度下的滅菌時，不同溫度下的滅菌率和所相當的滅菌時間率和所相當的滅菌時間溫度（溫度（）滅菌率

7、滅菌率L L滅菌時間滅菌時間（分鐘）（分鐘）1211.001.001200.7941.2591150.2513.9841100.07912.6001050.02540.0001000.008125.0014 濕熱滅菌法：將物品置于滅菌柜內利用濕熱滅菌法：將物品置于滅菌柜內利用高壓飽和蒸汽、過熱水噴淋等手段使微高壓飽和蒸汽、過熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋白質、核酸發生變性而生物菌體中的蛋白質、核酸發生變性而殺滅微生物的方法。殺滅微生物的方法。 濕熱滅菌法通常分為過度殺滅法和殘存濕熱滅菌法通常分為過度殺滅法和殘存概率法兩種。概率法兩種。15過度殺滅法過度殺滅法 F0不低于不低于12 適用于熱穩

8、定性好的產品適用于熱穩定性好的產品 以徹底殺滅任何污染的微生物為實以徹底殺滅任何污染的微生物為實現無菌的手段現無菌的手段 無菌保證值不小于無菌保證值不小于616殘存概率法殘存概率法 滅菌過程滅菌過程8 F012分鐘分鐘 適用于熱穩定性不很好的產品適用于熱穩定性不很好的產品 通過控制工藝過程的微生物污染和滅通過控制工藝過程的微生物污染和滅菌工藝參數使產品無菌菌工藝參數使產品無菌 無菌保證值不小于無菌保證值不小于617其它濕熱滅菌工藝其它濕熱滅菌工藝 F0值低于值低于8的滅菌工藝的滅菌工藝 熱穩定性很差的產品熱穩定性很差的產品 以無菌生產工藝為基礎，滅菌是提高無菌以無菌生產工藝為基礎，滅菌是提高無

9、菌保證水平的輔助手段保證水平的輔助手段 不計算不計算F0值，污染概率不大于值，污染概率不大于0.1% 除血液制品外，發達國家的大容量注射劑除血液制品外，發達國家的大容量注射劑很少采用此類工藝很少采用此類工藝 小容量注射劑也較少采用小容量注射劑也較少采用18 SALSAL （無菌保證水平）（無菌保證水平） ：產品經滅菌后：產品經滅菌后微生物殘存概率的負對數。微生物殘存概率的負對數。國際上規定，濕熱滅菌法的國際上規定，濕熱滅菌法的SAL不得低于不得低于6。 SAL SAL F F0 0/D/D121121lgNlgN0 0 N N0 0：滅菌前的染菌量滅菌前的染菌量 SAL除了和除了和F0 0 有

10、關，還與染菌量（有關，還與染菌量（N N0 0）及及所染菌的耐熱參數（所染菌的耐熱參數（D D121121）有關。有關。19F0和和SAL的關系：的關系： F0=8 N0=100 SAL 8/18/1lg100lg100 =6 D121=1時時 注意：注意：污染菌在不同的產品中的耐熱性可能污染菌在不同的產品中的耐熱性可能不同，故驗證時應采用實際的藥液。不同，故驗證時應采用實際的藥液。 eg: 嗜熱脂肪芽孢桿菌（常規嗜熱脂肪芽孢桿菌（常規D值在值在1.5-3.0分分鐘）在復方氨基酸注射液中的鐘）在復方氨基酸注射液中的D值為值為0.8分鐘分鐘左右，在左右，在30的葡萄糖溶液中的的葡萄糖溶液中的D值

11、為值為2.2分分鐘。鐘。20無菌保證水平應用實例無菌保證水平應用實例1 假定假定N0為為100cfu/瓶，瓶，D值為值為1分鐘，要達分鐘，要達到到SAL不小于不小于6，滅菌，滅菌F0值應達到多少？值應達到多少？相當于相當于115 下滅菌多少分鐘？下滅菌多少分鐘？F0=（SALlgN0）D =（6+ lg100）1= 8分鐘。分鐘。換算成換算成115 下的下的F0 /L115=8/0.25=32分鐘。分鐘。殘存概率法有效的基礎：殘存概率法有效的基礎： N0100， D 1。21 某輸液采用某輸液采用110，30分鐘的滅菌程序，起始污分鐘的滅菌程序，起始污染微生物仍為染微生物仍為100cfu/瓶，

12、瓶，D值為值為0.5分鐘，經計分鐘，經計算此時的無菌保證值和殘存微生物污染的概率算此時的無菌保證值和殘存微生物污染的概率為：為：SAL= F0/D - lgN0 = L110t /D - lg100 = 0.0830/0.5-2 = 2.8殘存微生物的概率為殘存微生物的概率為10-2.80.158通過無菌檢查的概率為通過無菌檢查的概率為(1-0.158)20=96.9%。無菌檢查的結果不能保證產品的無菌檢查的結果不能保證產品的SAL符合要求符合要求（ 6）。）。無菌保證水平應用實例無菌保證水平應用實例222無菌保證無菌保證理化指標理化指標滅菌和化學指標的平衡點？滅菌和化學指標的平衡點？23工藝

13、選擇的考慮要點工藝選擇的考慮要點 無菌產品必須達到規定的無菌保證水平。不得無菌產品必須達到規定的無菌保證水平。不得以理化性質等硬指標來壓無菌的軟指標。以理化性質等硬指標來壓無菌的軟指標。 可最終滅菌產品一定要首選最終滅菌方式，以可最終滅菌產品一定要首選最終滅菌方式，以保證產品的無菌特性。保證產品的無菌特性。 無菌制造工藝的基本特征是：無菌制造工藝的基本特征是：低安全低安全+高成本。高成本。應盡可能避免采用。應盡可能避免采用。 當滅菌可能會造成副產物等問題時，盡可能從當滅菌可能會造成副產物等問題時，盡可能從工藝上創造條件，使滅菌成為可行。工藝上創造條件，使滅菌成為可行。24國食藥監注國食藥監注2

14、008720087號通知號通知 08年年1月月10日國家局發布了化學藥品注射劑基日國家局發布了化學藥品注射劑基本技術要求。本技術要求。 國家局已受理但尚未批準注冊的化學藥品注射國家局已受理但尚未批準注冊的化學藥品注射劑應參照劑應參照技術要求技術要求進行研究。進行研究。 已經批準注冊的化學藥品注射劑也應參照已經批準注冊的化學藥品注射劑也應參照技技術要求術要求進行相關研究（完善滅菌工藝等），進行相關研究（完善滅菌工藝等），并在申報再注冊時提供相關研究資料。并在申報再注冊時提供相關研究資料。25劑型選擇的合理性劑型選擇的合理性 要權衡考慮各劑型的無菌保證水平、雜質的控要權衡考慮各劑型的無菌保證水平、

15、雜質的控制水平、工藝的可行性、臨床使用的方便等。制水平、工藝的可行性、臨床使用的方便等。 首先要考慮被選劑型可采用的滅菌工藝的無菌首先要考慮被選劑型可采用的滅菌工藝的無菌保證水平的高低。原則上首選劑型應能采用終保證水平的高低。原則上首選劑型應能采用終端滅菌工藝，并保證端滅菌工藝，并保證SAL不小于不小于6。 對于有充分的依據證明不適宜采用終端滅菌工對于有充分的依據證明不適宜采用終端滅菌工藝且臨床必需注射給藥的品種，可考慮選擇采藝且臨床必需注射給藥的品種，可考慮選擇采用無菌生產工藝的劑型。通常無菌生產工藝僅用無菌生產工藝的劑型。通常無菌生產工藝僅限于粉針劑或部分小容量注射劑。限于粉針劑或部分小容

16、量注射劑。 26輸液產品滅菌工藝的選擇原則輸液產品滅菌工藝的選擇原則 應采取終端滅菌工藝，建議首選過度殺滅法應采取終端滅菌工藝，建議首選過度殺滅法（F012）。例如：氯化鈉大輸液。如產品不）。例如：氯化鈉大輸液。如產品不能耐受，可采用殘存概率法能耐受，可采用殘存概率法(8F012)，但均，但均應保證產品滅菌后的應保證產品滅菌后的SAL不小于不小于6。采用其它。采用其它F0值小于值小于8的終端滅菌條件的工藝，原則上不的終端滅菌條件的工藝，原則上不予認可。予認可。如產品不能耐受終端滅菌工藝條件，應盡量如產品不能耐受終端滅菌工藝條件，應盡量優化處方工藝，以改善制劑的耐熱性。如確優化處方工藝，以改善制

17、劑的耐熱性。如確實無法耐受，則應考慮選擇其他劑型，而非實無法耐受，則應考慮選擇其他劑型，而非大容量注射劑。大容量注射劑。 27工藝驗證要求工藝驗證要求 主要包括以下試驗：主要包括以下試驗：滅菌前微生物污染水平測定，包括滅菌滅菌前微生物污染水平測定，包括滅菌前產品中的污染菌及其耐熱性；前產品中的污染菌及其耐熱性；熱穿透試驗；熱穿透試驗；微生物挑戰試驗：生物指示劑的耐熱性微生物挑戰試驗：生物指示劑的耐熱性及數量應對滅菌工藝構成必要的挑戰。及數量應對滅菌工藝構成必要的挑戰。過度殺滅法（過度殺滅法（F012）不要求此項驗證）不要求此項驗證28粉針劑的工藝與驗證粉針劑的工藝與驗證 粉針劑的無菌保證水平應

18、能保證粉針劑的無菌保證水平應能保證SAL不大于不大于10-3。 常規的工藝驗證試驗包括：常規的工藝驗證試驗包括：培養基模擬灌裝試驗：至少在線灌裝三批，每培養基模擬灌裝試驗：至少在線灌裝三批，每批的批量詳見附表，每瓶產品均應進行無菌檢批的批量詳見附表，每瓶產品均應進行無菌檢查。查。除菌過濾系統適應性驗證：包括過濾系統相容除菌過濾系統適應性驗證：包括過濾系統相容性測試、過濾前后濾膜完整性測試，必要時尚性測試、過濾前后濾膜完整性測試，必要時尚需進行濾膜的微生物截留量測試。需進行濾膜的微生物截留量測試。 29附表：培養基灌裝試驗的批量附表：培養基灌裝試驗的批量與判斷合格的標準與判斷合格的標準批量批量（瓶）（瓶）3000475063007760允許染允許染菌的數菌的數量（瓶）量（瓶）012330小容量注射劑小容量注射劑的工藝與驗證的工藝與驗證 應首選終端滅菌工藝，相關技術要求同應首選終端滅菌工藝，相關技術要求同大容量注射劑。大容量注射劑。 如有充分的依據證明不能采用終端滅菌如有充分的依據證明不能采用終端滅菌工藝，且為臨床必需注射給藥的品種，工藝，且為臨床必需注射給藥的品種，可考慮采用無菌生產工藝，相關技術要可考慮采用無菌生產工藝，相關技術要求同凍干粉針劑。求同凍干粉針劑。 31歐盟歐盟1999年年8月正式開始執行