1、靶向治療鱗狀細(xì)胞癌中靶向治療鱗狀細(xì)胞癌中Bmi1+腫瘤腫瘤干細(xì)胞可以克服化療抗藥性、抑制其轉(zhuǎn)移干細(xì)胞可以克服化療抗藥性、抑制其轉(zhuǎn)移 導(dǎo)師：程磊導(dǎo)師：程磊 教授教授 報(bào)告人：于金釗報(bào)告人：于金釗2017.4.62017.4.6期刊、作者期刊、作者期刊：期刊：Cell Stem Cell IF：22.387 22.387 發(fā)表時(shí)間：發(fā)表時(shí)間：2017.3.92017.3.9通訊作者：通訊作者：王存玉王存玉（UCLA）Part 1 研究背景研究背景Part 2 文章簡(jiǎn)介文章簡(jiǎn)介Part 3 實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)方法Part 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果Part 5 結(jié)論結(jié)論ContentPart 6 討論討論研究背

2、景研究背景頭頸鱗狀細(xì)胞癌的現(xiàn)狀頭頸鱗狀細(xì)胞癌的現(xiàn)狀鱗狀細(xì)胞癌是頭頸癌最常見(jiàn)的病鱗狀細(xì)胞癌是頭頸癌最常見(jiàn)的病理類(lèi)型。由于對(duì)化療的抗藥性以理類(lèi)型。由于對(duì)化療的抗藥性以及復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的發(fā)生，患者的五及復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的發(fā)生，患者的五年生存率依然很低。有研究表明年生存率依然很低。有研究表明干細(xì)胞干細(xì)胞在其中在其中起起重要作用重要作用腫瘤干細(xì)胞理論腫瘤干細(xì)胞理論腫瘤干細(xì)胞腫瘤干細(xì)胞(CSC)(CSC)是腫瘤中具有是腫瘤中具有干細(xì)胞特性的一類(lèi)細(xì)胞，既具備干細(xì)胞特性的一類(lèi)細(xì)胞，既具備高度增殖能力與高度增殖能力與自我更新自我更新能力，能力，也具有也具有多向分化多向分化的能力。的能力。Rebecca L. Siegel

3、 et. al CA CANCER J CLIN 2016;66:730 腫瘤細(xì)胞起源的模型腫瘤細(xì)胞起源的模型克隆增殖進(jìn)化模型克隆增殖進(jìn)化模型：每個(gè)腫瘤細(xì)：每個(gè)腫瘤細(xì)胞均能形成新的腫瘤組織胞均能形成新的腫瘤組織腫瘤干細(xì)胞假說(shuō)腫瘤干細(xì)胞假說(shuō)：腫瘤干細(xì)胞能：腫瘤干細(xì)胞能形成新的腫瘤組織形成新的腫瘤組織Bmi1Bmi1基因基因全稱(chēng)：全稱(chēng)： B 細(xì)胞特異性莫洛尼鼠白血病病毒整合位點(diǎn)細(xì)胞特異性莫洛尼鼠白血病病毒整合位點(diǎn) 1(B cell-specific Moloney murine leukemia virus integration site1) 前期研究顯示：前期研究顯示：Bmi1與腫瘤干細(xì)胞的自

4、我更新、侵襲性生長(zhǎng)、化療與腫瘤干細(xì)胞的自我更新、侵襲性生長(zhǎng)、化療抗藥性密切相關(guān)抗藥性密切相關(guān)Sudha Krishnamurthy,et al. Cancer Res.70, 99699978.2010Yang, et al. Nat. Cell Biol. 12, 982992. 2010前期研究存在的問(wèn)題前期研究存在的問(wèn)題1.腫瘤干細(xì)胞（腫瘤干細(xì)胞（CSC）介導(dǎo)了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移介導(dǎo)了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、在抗藥性和復(fù)發(fā)中的、在抗藥性和復(fù)發(fā)中的作用作用未在未在不受干擾腫瘤模型不受干擾腫瘤模型中得到證實(shí)中得到證實(shí)2.最佳的治療方法是什么呢？最佳的治療方法是什么呢？文章簡(jiǎn)介文章簡(jiǎn)介1. Bmi1+腫瘤干細(xì)胞促

5、進(jìn)鱗狀細(xì)胞癌的侵襲，腫瘤干細(xì)胞促進(jìn)鱗狀細(xì)胞癌的侵襲，轉(zhuǎn)移和抗藥性分發(fā)生轉(zhuǎn)移和抗藥性分發(fā)生2. Bmi1+腫瘤干細(xì)胞激活蛋白腫瘤干細(xì)胞激活蛋白1（AP-1）活性）活性升高升高3.聯(lián)合針對(duì)聯(lián)合針對(duì)Bmi1+細(xì)胞和整體細(xì)胞的治療預(yù)細(xì)胞和整體細(xì)胞的治療預(yù)后更好后更好實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)?zāi)康模禾骄刻骄緽mi1能否標(biāo)記腫瘤干細(xì)胞能否標(biāo)記腫瘤干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：1.建立化學(xué)誘導(dǎo)模型建立化學(xué)誘導(dǎo)模型2.譜系示蹤探究譜系示蹤探究Bmi1+細(xì)胞的細(xì)細(xì)胞的細(xì)胞命運(yùn)胞命運(yùn)譜系示蹤譜系示蹤Bmi1Cre-ERTtdTOMATOSTOPBmi1Cre-ERTtdTOMATO他莫西芬時(shí)間特異性定義：定義：細(xì)胞的

6、命運(yùn)決定是指細(xì)胞的命運(yùn)決定是指單個(gè)細(xì)胞及其所有后代細(xì)胞的分化和發(fā)育活動(dòng)單個(gè)細(xì)胞及其所有后代細(xì)胞的分化和發(fā)育活動(dòng)， 對(duì)細(xì)胞的命運(yùn)決定進(jìn)行追蹤和觀察稱(chēng)為細(xì)胞譜系示蹤對(duì)細(xì)胞的命運(yùn)決定進(jìn)行追蹤和觀察稱(chēng)為細(xì)胞譜系示蹤 表達(dá)表達(dá)Bmi1的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生環(huán)化重組酶環(huán)化重組酶- -雌激素受體復(fù)合體（雌激素受體復(fù)合體（Cre-ERCre-ERT T） ，在有，在有他莫西芬他莫西芬激活時(shí)，可以切除激活時(shí)，可以切除“STOP” 序列，序列， 標(biāo)志基因（紅色熒光蛋白）標(biāo)志基因（紅色熒光蛋白）就能成功表達(dá)。且就能成功表達(dá)。且其所有子代細(xì)胞均被標(biāo)記其所有子代細(xì)胞均被標(biāo)記實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一 Bmi1正常細(xì)胞中靠近正常細(xì)胞

7、中靠近上皮基底層和靠近基底膜上皮基底層和靠近基底膜，而在而在病變組織病變組織中表達(dá)增高中表達(dá)增高。在良性乳頭狀瘤和在良性乳頭狀瘤和鱗狀細(xì)胞癌鱗狀細(xì)胞癌中有表達(dá)。中有表達(dá)。具有自我更新、分化能力具有自我更新、分化能力Bmi1+在侵襲的前沿，具有自我更新能力在侵襲的前沿，具有自我更新能力Bmi1+細(xì)胞具有分化能力細(xì)胞具有分化能力慢周期、轉(zhuǎn)移癌中有表達(dá)慢周期、轉(zhuǎn)移癌中有表達(dá)Bmi1+細(xì)胞增殖活動(dòng)不活躍細(xì)胞增殖活動(dòng)不活躍淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移瘤中也發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移瘤中也發(fā)現(xiàn)Bmi1+細(xì)胞，隨著時(shí)間數(shù)量增多細(xì)胞，隨著時(shí)間數(shù)量增多實(shí)驗(yàn)一結(jié)論：實(shí)驗(yàn)一結(jié)論：Bmi1可以作為干細(xì)胞的標(biāo)志物可以作為干細(xì)胞的標(biāo)志物實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二實(shí)

8、驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)?zāi)康模禾骄刻骄緽mi1+細(xì)胞的成瘤能力和化療敏感性細(xì)胞的成瘤能力和化療敏感性實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：1.流式細(xì)胞術(shù)分選小鼠舌癌原發(fā)灶中的流式細(xì)胞術(shù)分選小鼠舌癌原發(fā)灶中的Bmi1+細(xì)胞細(xì)胞2.通過(guò)體外成球?qū)嶒?yàn)、皮下移植瘤實(shí)驗(yàn)探究成瘤能力通過(guò)體外成球?qū)嶒?yàn)、皮下移植瘤實(shí)驗(yàn)探究成瘤能力3.對(duì)荷瘤小鼠進(jìn)行順鉑治療，觀察反應(yīng)對(duì)荷瘤小鼠進(jìn)行順鉑治療，觀察反應(yīng)成球?qū)嶒?yàn)、皮下移植實(shí)驗(yàn)成球?qū)嶒?yàn)、皮下移植實(shí)驗(yàn)成球試驗(yàn)：成球試驗(yàn)： Bmi1+細(xì)胞成球細(xì)胞成球更大且更多更大且更多，且，且穩(wěn)定穩(wěn)定可遺傳可遺傳。異位移植：異位移植： Bmi1+細(xì)胞成瘤更大，更少的細(xì)胞便可成瘤細(xì)胞成瘤更大，更少的細(xì)胞便可成瘤原位瘤實(shí)

9、驗(yàn)原位瘤實(shí)驗(yàn)原位移植：原位移植： Bmi1+細(xì)胞細(xì)胞成瘤能力強(qiáng)于成瘤能力強(qiáng)于Bmi1-細(xì)胞細(xì)胞Bmi1+細(xì)胞頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移細(xì)胞頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移能力能力 比比Bmi1-細(xì)胞細(xì)胞強(qiáng)強(qiáng)對(duì)順鉑的敏感性對(duì)順鉑的敏感性順鉑處理后，增殖活性細(xì)胞減少順鉑處理后，增殖活性細(xì)胞減少，Bmi1+細(xì)胞卻增多細(xì)胞卻增多凋亡免疫熒光：凋亡免疫熒光：順鉑誘導(dǎo)的凋亡，主要發(fā)生在順鉑誘導(dǎo)的凋亡，主要發(fā)生在Bmi1-細(xì)胞細(xì)胞。順鉑處理后的譜系示蹤順鉑處理后的譜系示蹤Bmi1+細(xì)胞在后續(xù)抗藥細(xì)胞在后續(xù)抗藥/ /復(fù)發(fā)復(fù)發(fā)細(xì)胞細(xì)胞中存留中存留實(shí)驗(yàn)二結(jié)論：實(shí)驗(yàn)二結(jié)論：Bmi1+干細(xì)胞具有高度成瘤能力干細(xì)胞具有高度成瘤能力和化療抗藥性和化療抗藥

10、性實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)?zāi)康模禾骄刻骄緽mi1+細(xì)胞細(xì)胞與與侵襲性生長(zhǎng)侵襲性生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移的關(guān)系的關(guān)系實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：1.雜交手段得到雜交手段得到剔除剔除Bmi1+細(xì)胞的小鼠，細(xì)胞的小鼠，并建立化學(xué)誘導(dǎo)腫瘤模型并建立化學(xué)誘導(dǎo)腫瘤模型2.順鉑處理，觀察反應(yīng)順鉑處理，觀察反應(yīng)實(shí)驗(yàn)分組：實(shí)驗(yàn)分組：1.剔除剔除Bmi1+細(xì)胞細(xì)胞2.順鉑順鉑3.剔除剔除Bmi1+細(xì)胞細(xì)胞+順鉑順鉑4.對(duì)照組對(duì)照組實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果剔除剔除Bmi1+細(xì)胞細(xì)胞后的小鼠后的小鼠，出現(xiàn)了細(xì)胞凋亡，出現(xiàn)了細(xì)胞凋亡譜系追蹤：證實(shí)了譜系追蹤：證實(shí)了確實(shí)確實(shí)剔除了剔除了Bmi1+細(xì)胞。細(xì)胞。病損面積方面：病損面積方面：剔除剔除B

11、mi1+細(xì)胞細(xì)胞和順鉑治療、聯(lián)合治療與對(duì)照組相比均減少。和順鉑治療、聯(lián)合治療與對(duì)照組相比均減少。SCCSCC數(shù)量數(shù)量：剔除剔除Bmi1+細(xì)胞后細(xì)胞后數(shù)量數(shù)量明顯下降。明顯下降。聯(lián)合治療的效果強(qiáng)于單獨(dú)使用順聯(lián)合治療的效果強(qiáng)于單獨(dú)使用順鉑鉑侵襲程度：可以看到剔除侵襲程度：可以看到剔除Bmi1+細(xì)胞之后侵襲程度降低，聯(lián)合治療的效果最好。細(xì)胞之后侵襲程度降低，聯(lián)合治療的效果最好。增殖細(xì)胞比例：剔除增殖細(xì)胞比例：剔除Bmi1+細(xì)胞之后增殖細(xì)胞的比例下降，順鉑處理組比例更細(xì)胞之后增殖細(xì)胞的比例下降，順鉑處理組比例更低，聯(lián)合治療組效果最好。低，聯(lián)合治療組效果最好。剔除剔除Bmi1+細(xì)胞后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有下降，細(xì)

12、胞后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有下降，而順鉑處理組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而順鉑處理組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。聯(lián)合治療組的效果最佳聯(lián)合治療組的效果最佳實(shí)驗(yàn)三結(jié)論：實(shí)驗(yàn)三結(jié)論：鱗狀細(xì)胞癌的侵襲和轉(zhuǎn)移需要鱗狀細(xì)胞癌的侵襲和轉(zhuǎn)移需要Bmi1+ 細(xì)胞的參與細(xì)胞的參與實(shí)驗(yàn)四實(shí)驗(yàn)四實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)?zāi)康模赫{(diào)查抑制調(diào)查抑制Bmi1的作用聯(lián)合順鉑的使用對(duì)腫瘤的作用聯(lián)合順鉑的使用對(duì)腫瘤細(xì)胞的影響細(xì)胞的影響實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：對(duì)成瘤小鼠使用對(duì)成瘤小鼠使用Bmi1抑制物抑制物PCT-209和順鉑，和順鉑，并做病理分析并做病理分析實(shí)驗(yàn)分組：實(shí)驗(yàn)分組：1.Bmi1抑制劑抑制劑2.順鉑順鉑3.Bmi1抑制劑抑制劑+順鉑順鉑4.對(duì)照組對(duì)照組實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果Bmi

13、1抑制抑制劑和順鉑單獨(dú)使用均可降低病損面積、不典型增生數(shù)量和劑和順鉑單獨(dú)使用均可降低病損面積、不典型增生數(shù)量和SCC數(shù)數(shù)量，但聯(lián)合治療作用更明顯量，但聯(lián)合治療作用更明顯腫瘤的侵襲程度腫瘤的侵襲程度：三組均有所好轉(zhuǎn)，但聯(lián)合治療組程度：三組均有所好轉(zhuǎn)，但聯(lián)合治療組程度最輕最輕Bmi1+細(xì)胞細(xì)胞：順鉑治療順鉑治療后增多后增多，PTC-209治療后治療后則顯著減少則顯著減少，二者合用作用最強(qiáng)二者合用作用最強(qiáng)增殖細(xì)胞數(shù)量增殖細(xì)胞數(shù)量：和和PTC-209相比，順鉑顯著減少了相比，順鉑顯著減少了，二者合用作用最強(qiáng)二者合用作用最強(qiáng)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面：方面：聯(lián)合治療轉(zhuǎn)移最少聯(lián)合治療轉(zhuǎn)移最少，順鉑組無(wú)統(tǒng)

14、計(jì)學(xué)意義，順鉑組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義譜系示蹤：聯(lián)合治療譜系示蹤：聯(lián)合治療最能最能減少轉(zhuǎn)移癌中減少轉(zhuǎn)移癌中Bmi1+干細(xì)胞來(lái)源腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。干細(xì)胞來(lái)源腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)四結(jié)論：實(shí)驗(yàn)四結(jié)論：聯(lián)合治療能有效地抑制聯(lián)合治療能有效地抑制HNSCC的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)五實(shí)驗(yàn)五實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)?zāi)康模簭?fù)發(fā)腫瘤對(duì)聯(lián)合治療的反應(yīng)復(fù)發(fā)腫瘤對(duì)聯(lián)合治療的反應(yīng)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：建立復(fù)發(fā)模型，再次給予聯(lián)合治療建立復(fù)發(fā)模型，再次給予聯(lián)合治療實(shí)驗(yàn)分組：實(shí)驗(yàn)分組：1.PTC-209順鉑組順鉑組2.對(duì)照組對(duì)照組在復(fù)發(fā)腫瘤中，可見(jiàn)在復(fù)發(fā)腫瘤中，可見(jiàn)Bmi1+細(xì)胞細(xì)胞再次給予聯(lián)合治療，再次給予聯(lián)合治療， Bmi1+細(xì)胞

15、數(shù)量減少細(xì)胞數(shù)量減少再次給予聯(lián)合治療，腫瘤細(xì)胞中增殖細(xì)胞比例降低，凋亡細(xì)胞比例升高再次給予聯(lián)合治療，腫瘤細(xì)胞中增殖細(xì)胞比例降低，凋亡細(xì)胞比例升高實(shí)驗(yàn)五結(jié)論：實(shí)驗(yàn)五結(jié)論：復(fù)發(fā)瘤對(duì)聯(lián)合治療依然敏感復(fù)發(fā)瘤對(duì)聯(lián)合治療依然敏感實(shí)驗(yàn)六實(shí)驗(yàn)六實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)?zāi)康模禾骄柯?lián)合治療是否可以直接消除轉(zhuǎn)移癌中的探究聯(lián)合治療是否可以直接消除轉(zhuǎn)移癌中的Bmi1+細(xì)胞細(xì)胞實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：對(duì)已有轉(zhuǎn)移癌的小鼠進(jìn)行聯(lián)合治療對(duì)已有轉(zhuǎn)移癌的小鼠進(jìn)行聯(lián)合治療實(shí)驗(yàn)分組：實(shí)驗(yàn)分組：1.Bmi1抑制劑抑制劑2.順鉑順鉑3.Bmi1抑制劑抑制劑+順鉑順鉑4.對(duì)照組對(duì)照組實(shí)驗(yàn)六結(jié)論：實(shí)驗(yàn)六結(jié)論：已有已有轉(zhuǎn)移癌的動(dòng)物，聯(lián)合治療相比于單獨(dú)治療可以

16、轉(zhuǎn)移癌的動(dòng)物，聯(lián)合治療相比于單獨(dú)治療可以減少增殖細(xì)胞和減少增殖細(xì)胞和Bmi1+的數(shù)量的數(shù)量。實(shí)驗(yàn)七實(shí)驗(yàn)七實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)?zāi)康模禾骄刻骄緽mi1+作用的機(jī)制作用的機(jī)制實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì): :進(jìn)行進(jìn)行Bmi1+和和Bmi1-細(xì)胞的細(xì)胞的RNARNA測(cè)序測(cè)序、RT-PCR和熒光染和熒光染色色實(shí)驗(yàn)結(jié)果：實(shí)驗(yàn)結(jié)果：激活蛋白激活蛋白1（AP-1）依賴(lài)性依賴(lài)性目標(biāo)基金在目標(biāo)基金在Bmi1+細(xì)胞中明細(xì)胞中明顯上調(diào)顯上調(diào)。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)?zāi)康模禾骄刻骄吭龈叩脑龈叩腁P-1與與Bmi1+細(xì)胞的侵襲性細(xì)胞的侵襲性生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的關(guān)系的關(guān)系實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：對(duì)荷瘤小鼠進(jìn)行對(duì)荷瘤小鼠進(jìn)行AP-1抑制劑抑制劑(3-PA

17、)的治的治療，觀察反應(yīng)療，觀察反應(yīng)實(shí)驗(yàn)分組：實(shí)驗(yàn)分組：1.AP-1抑制劑抑制劑2.順鉑順鉑3.AP-1抑制劑抑制劑+順鉑順鉑4.對(duì)照組對(duì)照組3-(5-(4-(cyclopentyloxy)-2-hydroxybenzoyl)-2-(3-hydroxybenzodisoxazol-6-yl)methoxy)phenyl) propanoic acid (3-PA全稱(chēng)) 單獨(dú)治療可以減少病損單獨(dú)治療可以減少病損面積和鱗狀細(xì)胞癌的數(shù)面積和鱗狀細(xì)胞癌的數(shù)量，但聯(lián)合治療效果更量，但聯(lián)合治療效果更好好順鉑治療組：更有力的減少了增殖細(xì)胞，但順鉑治療組：更有力的減少了增殖細(xì)胞，但Bmi1+細(xì)胞增多細(xì)胞增多抑制

18、劑治療組：有效的減少了抑制劑治療組：有效的減少了Bmi1+細(xì)胞細(xì)胞聯(lián)合治療組聯(lián)合治療組:減少了減少了Bmi1+細(xì)胞和增殖細(xì)胞細(xì)胞和增殖細(xì)胞，侵襲程度最輕，侵襲程度最輕譜系追蹤：譜系追蹤：3-PA 3-PA 和順鉑相比，抑制了和順鉑相比，抑制了Bmi1+細(xì)胞來(lái)源細(xì)胞細(xì)胞來(lái)源細(xì)胞的的生長(zhǎng)生長(zhǎng)，聯(lián)合治療組效果最好。聯(lián)合治療組效果最好。實(shí)驗(yàn)七結(jié)論：實(shí)驗(yàn)七結(jié)論：增高的增高的AP-1AP-1介導(dǎo)介導(dǎo)Bmi1+細(xì)胞的侵襲性生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移細(xì)胞的侵襲性生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)八實(shí)驗(yàn)八實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)?zāi)康模禾骄刻骄恳种埔种艬mi1能否能否克服人頭頸癌干細(xì)胞的化療抗藥性，預(yù)防轉(zhuǎn)移克服人頭頸癌干細(xì)胞的化療抗藥性，預(yù)防轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：實(shí)

19、驗(yàn)設(shè)計(jì)：1.使用流式細(xì)胞術(shù)分選人頭頸癌干細(xì)胞，并行使用流式細(xì)胞術(shù)分選人頭頸癌干細(xì)胞，并行RNA測(cè)序測(cè)序2.建立原位移植瘤模型建立原位移植瘤模型3.對(duì)荷瘤進(jìn)行對(duì)荷瘤進(jìn)行Bmi1抑制劑治療抑制劑治療實(shí)驗(yàn)分組：實(shí)驗(yàn)分組：1.Bmi1抑制劑抑制劑2.順鉑順鉑3.Bmi1抑制劑抑制劑+順鉑順鉑4.對(duì)照組對(duì)照組RT-PCRRT-PCR提示提示AP-1AP-1的活性異常升高。的活性異常升高。腫瘤體積：腫瘤體積：聯(lián)合治療組最有效。聯(lián)合治療組最有效。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：聯(lián)合治療組效果明顯。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：聯(lián)合治療組效果明顯。同樣的方法去檢測(cè)同樣的方法去檢測(cè)AP-1AP-1抑制劑抑制劑的作用。的作用。結(jié)果相似結(jié)果相似。實(shí)驗(yàn)八結(jié)論：實(shí)驗(yàn)八結(jié)論：抑制抑制Bmi1+細(xì)胞或者細(xì)胞或者AP-1AP-1可以可以克服人頭頸癌干細(xì)胞的化療抗克服人頭頸癌干細(xì)胞的化療抗藥性，預(yù)防轉(zhuǎn)移藥性，預(yù)防轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)論1.Bmi1+腫瘤干細(xì)胞介導(dǎo)了鱗狀細(xì)胞的腫瘤干細(xì)胞介導(dǎo)了鱗狀細(xì)胞的發(fā)生、侵襲性生長(zhǎng)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生、侵襲性生長(zhǎng)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移