1、第五章1.列出三種以上的次生代謝產(chǎn)物并闡述其意義。 （p143，抗生素、色素、毒素、生物堿、信息素等）2.什么是生物氧化 ? 比較與非生物氧化之間的異同。 （p102，表5-1）3.什么叫呼吸？什么是呼吸鏈（電子傳遞鏈）？呼吸鏈有哪些組分？ 4.自EMP 途徑中丙酮酸出發(fā)的發(fā)酵有哪些？它們對食品與發(fā)酵工業(yè)有何意義？ (p115-116) 同型酒精發(fā)酵、同型乳酸發(fā)酵、丙酸發(fā)酵、混合酸發(fā)酵、丁酸型發(fā)酵等 意義：5、試圖示由EMP途徑中的中間代謝物丙酮酸出發(fā)的六種發(fā)酵類型及其各自的發(fā)酵產(chǎn)物。6.試比較同型與異型乳酸發(fā)酵。 (p116，表5-3) 同時要注意名詞、途徑、產(chǎn)物等方面類型途徑產(chǎn)物/1葡萄糖

2、產(chǎn)能/1葡萄糖同型EMP2乳酸2ATP異型HMP1乳酸，1乙醇，1CO21 ATP1乳酸，1乙醇，1CO22 ATP1乳酸，1.5乙醇2.5 ATP7.試列表比較呼吸、無氧呼吸與發(fā)酵的異同點。 （p110-112）此處還要明確三種方式的概念，也有可能會考到名詞解釋。比較呼吸無氧呼吸發(fā)酵脫氫以 H 存在以 H 存在以 H 存在遞氫電子傳遞連呼吸鏈不經(jīng)過呼吸鏈?zhǔn)軞銸2氧化態(tài)無機(jī)物、有機(jī)物內(nèi)源性中間代謝產(chǎn)物需氧是否否釋能是是是8.試從狹義和廣義兩方面來說明發(fā)酵的概念。 （p113）9.寫出固氮過程從分子氮還原到氨并進(jìn)一步轉(zhuǎn)變?yōu)楦鞣N氨基酸的反應(yīng)過程。（p133）生物固氮及其六要素？ATP的供應(yīng) 還原力

3、H及其傳遞載體固氮酶 還原底物：N2Mg2+離子 嚴(yán)格厭氧微環(huán)境10.微生物代謝調(diào)節(jié)有何特點？它們調(diào)節(jié)代謝流的主要方式有哪兩類？其機(jī)制如何？代謝調(diào)節(jié)特點：可塑性強(qiáng)、靈敏度高、反應(yīng)精確。方式：調(diào)節(jié)酶合成量的酶誘導(dǎo)、阻遏機(jī)制調(diào)節(jié)酶催化活力的激活和抑制的反饋抑制機(jī)制11.微生物代謝調(diào)節(jié)在發(fā)酵工業(yè)中有何重要性？試舉例加以說明。12.本章的名詞解釋。新陳代謝，生物氧化，呼吸，無氧呼吸，發(fā)酵，氧化磷酸化，光合磷酸化，底物水平磷酸化，Stickland反應(yīng)。13.青霉素為何只能抑制代謝旺盛的細(xì)菌？其制菌機(jī)制如何？原因：青霉素抑制肽聚糖的合成過程，形成破裂的細(xì)胞壁，代謝旺盛的細(xì)菌才存在肽聚糖的合成，因此此時有

4、青霉素作用時細(xì)胞易死亡。作用機(jī)制：青霉素破壞肽聚糖合成過程中肽尾與肽橋間的轉(zhuǎn)肽作用。14、如何運用代謝調(diào)控理論使微生物合成比自身需求量更多的有用代謝產(chǎn)物？舉例說明。應(yīng)用營養(yǎng)缺陷型菌株解除正常的反饋調(diào)節(jié)      如賴氨酸發(fā)酵、肌苷酸的生產(chǎn)；應(yīng)用抗反饋調(diào)節(jié)的突變株解除反饋調(diào)節(jié)      如黃色短桿菌的抗氨基羥基戊酸菌株能累積蘇氨酸；控制細(xì)胞膜的滲透性        如在谷氨酸發(fā)酵生產(chǎn)中只要把生物素濃度控制在亞適量的情況下，才能分泌出大量的谷氨酸15細(xì)菌的酒精

5、發(fā)酵途徑如何？它與酵母菌的酒精發(fā)酵有何不同？細(xì)菌的酒精發(fā)酵有何優(yōu)缺點？酒精發(fā)酵途徑ED, 酵母菌的酒精發(fā)酵EMP優(yōu)缺點:     a.優(yōu)點：代謝速率高；產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率高；菌體生成少；代謝副產(chǎn)物少；發(fā)酵溫度高；不必定期供氧；細(xì)菌為原核生物，易于用基因工程改造菌種；厭氧發(fā)酵，設(shè)備簡單。b.缺點：生長pH為5，較易染菌；細(xì)菌耐乙醇力較酵母菌為低（細(xì)菌7%乙醇，酵母菌耐8-10%乙醇）；底物范圍窄（葡萄糖、果糖）。 第六章（本章重點多，注意靈活應(yīng)用，與實踐結(jié)合）1.測定微生物生長和繁殖的方法有哪些？試比較它們的優(yōu)缺點。繁殖數(shù)：（一）、直接法：在顯微鏡下直接

6、觀察細(xì)胞并進(jìn)行計數(shù)的方法，所的結(jié)果包括死細(xì)胞。 比例計數(shù)法：很粗的計算方法 血球計數(shù)板法：可以數(shù)出死菌和活菌的數(shù)目較精確，但亦有一定誤差。 （二）、間接計數(shù)法：活菌計數(shù)法 液體稀釋法（MPN）：不準(zhǔn)確 平板菌落計數(shù)法：不能全面反映樣品中的活菌數(shù)，技術(shù)要求較高。生長量：（一）、直接法： a.測體積：很粗的方法，用于初步比較用。 b.稱干重：可用離心法或過濾法測定。 （二）、間接法： a.比濁法：可用目測觀察未知濃度菌的濃度高低，精確度低，方便；精確測定可用分光度計，方法簡單，可隨時測出菌體生長情況。 b.生理指標(biāo)法： 測含氮量，含碳量等，精確度很高，但測定技術(shù)要求高。2.影響微生物生長的因素包括

7、哪些？通過對這些因素的控制可以實現(xiàn)哪些食品加工與保藏？ （p160） 溫度 氧氣 pH3.何為同步培養(yǎng)物？有哪些獲得方法？（p152） 4.比較滅菌、消毒、防腐的異同，并各舉若干實例。比較項目滅菌消毒防腐化療處理因素強(qiáng)理化因素較溫和的理化因素理化因素利用化學(xué)物質(zhì)處理對象任何物體內(nèi)外物體表面有機(jī)質(zhì)物體內(nèi)外宿主體內(nèi)微生物類型一切微生物有害的病原菌霉腐微生物有關(guān)病原微生物對微生物作用徹底殺滅殺死或抑制殺死或抑制殺死或抑制實例加壓蒸汽滅菌70%酒精消毒，巴氏消毒法冷藏，干燥，鹽腌，缺氧，化學(xué)防腐抗生素，磺胺藥，生物藥物素          

8、     5.什么叫典型生長曲線？它可分為幾期？劃分的依據(jù)是什么？  典型生長曲線 ：將少量純種單細(xì)胞微生物接種到恒容積的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。在適宜條件下，其群體就會有規(guī)律地生長，定時取樣測定細(xì)胞含量，以細(xì)胞數(shù)目的對數(shù)值作縱坐標(biāo)，以培養(yǎng)時間作橫坐標(biāo)，就可以畫出一條有規(guī)律的曲線，這就是微生物的典型生長曲線。   劃分的依據(jù)：單細(xì)胞微生物。(1)延滯期(停滯期、調(diào)整期)  (2) 對數(shù)期穩(wěn)定期 衰亡期6.延滯期有何特點？如何縮短延滯期？ 特點：a.生長速率常數(shù)為零；b.細(xì)胞形態(tài)變大或增大；c.細(xì)胞內(nèi)RNA尤其是rRNA含量增高，原

9、生質(zhì)呈嗜堿性。d.合成代謝活躍；e.對外界不良條件的反應(yīng)敏感。  消除：a. 以對數(shù)期的菌體作種子菌 ；b. 適當(dāng)增大接種量 ：一般采用3%8%的接種量，根據(jù)生產(chǎn)上的具體情況而定，最高不超過1/10。c. 培養(yǎng)基的成分：種子培養(yǎng)基盡量接近發(fā)酵培養(yǎng)基 。7、指數(shù)期有何特點？處于該期的微生物有何應(yīng)用？   特點：此時菌體細(xì)胞生長的速率常數(shù)R最大，分裂快，代時短，細(xì)胞進(jìn)行平衡生長，菌體內(nèi)酶系活躍，代謝旺盛，菌體數(shù)目以幾何級數(shù)增加，群體的形態(tài)與生理特征最一致，抗不良環(huán)境的能力強(qiáng)。   應(yīng)用：指數(shù)期的微生物是研究生理、代謝等的良好材料；是增殖噬

10、菌體的最適菌齡；是發(fā)酵生產(chǎn)中用做種子的最佳種齡，通過補(bǔ)加營養(yǎng)物質(zhì)延長指數(shù)期。8、穩(wěn)定期為何會到來？有何特點？   形成原因:a.營養(yǎng)物尤其是生長限制因子的耗盡；b.營養(yǎng)物的比例失調(diào)；c.有害代謝產(chǎn)物的積累；d.物化條件的變化。   特點:a.生長速率常數(shù)為零；b.菌體產(chǎn)量達(dá)到最高；c.活菌數(shù)相對穩(wěn)定；d.細(xì)胞開始貯存貯藏物；e.芽孢在這個時期形成；f.有些微生物在此時形成次生代謝產(chǎn)物。 9、利用微生物的生長的4個時期對生產(chǎn)有何指導(dǎo)意義？延滯期：接種對數(shù)生長期的菌種，采用最適菌齡；加大接種量；用營養(yǎng)豐富的天然培養(yǎng)基對數(shù)期：因微生物整個群體的生理特性一致、細(xì)

11、胞各成分平衡增長和生長速率恒定等優(yōu)點，故用作代謝、生理等研究的良好材料，是增殖噬菌體的最適宿主，也是發(fā)酵工業(yè)中用做種子的最好材料穩(wěn)定期：對以生長菌體或以菌體生長相平行的代謝產(chǎn)物為目的的某些發(fā)酵生產(chǎn)來說，該期是產(chǎn)物的最佳收獲期，對維生素、堿基、氨基酸等物質(zhì)進(jìn)行生物測定來說，該期是最佳測定時期；通過對該期到來原因的研究，促進(jìn)了連續(xù)培養(yǎng)基的提出和工藝、技術(shù)的創(chuàng)建衰亡期：有的微生物在該期會進(jìn)一步合成對人類有益的抗生素10.什么叫生長速率常數(shù)R？什么叫代時G？它們?nèi)绾斡嬎悖?R：每繁殖一代所需的時間G：生長速率常數(shù)的倒數(shù)計算式的推導(dǎo)：x2 = x1·2n lg x2 =lg x1 + n lg

12、2n = (lg x2 -lg x1 ) / lg2 = 3.322(lg x2 -lg x1) R = n / (t2-t1) = 3.322 (lg x2-lg x1) / (t2-t1) G = 1 / R = (t2-t1) / 3.322 (lg x2-lg x1) 11.什么叫連續(xù)培養(yǎng)？有何優(yōu)點？為何連續(xù)培養(yǎng)的時間是有限的？ 連續(xù)培養(yǎng)：指微生物接種到培養(yǎng)基里以后的整個生長期間，微生物能持續(xù)地以比較恒定的生長速率常數(shù)進(jìn)行生長，從而導(dǎo)致微生物的生長過程能“不斷”地進(jìn)行下去的一種培養(yǎng)方法。   優(yōu)點：高效、低耗、利于自控、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。   菌種易

13、于退化；容易污染；營養(yǎng)物的利用率低于分批培養(yǎng)。 因此連續(xù)時間是有限的。12、試比較恒濁器和恒化器。裝置控制對象培養(yǎng)基培養(yǎng)基流速生長速率產(chǎn)物應(yīng)用范圍恒濁器 菌體密度（內(nèi)控制）  無限制生長因子不恒定最高大量菌體及與菌體相平行的代謝產(chǎn)物生產(chǎn)為主 恒化器培養(yǎng)基流速（外控制）  有限制生長因子恒定低于最高不同生長速率的菌體實驗室為主 13.按照微生物生長、發(fā)酵與氧氣的關(guān)系，可分成哪幾類？為何氧對厭氧菌有毒害作用？ 根據(jù)氧與微生物生長的關(guān)系可將微生物分為好氧、微好氧、耐氧型、兼性厭氧和專性厭氧五種類型。 因為厭氧生物細(xì)胞內(nèi)缺少或沒有可以消除氧在

14、生化反應(yīng)中的副作用，因而生長會受抑制甚至死亡。 14.影響濕熱滅菌效果的主要因素有哪些？在實踐中應(yīng)如何正確對待？ 滅菌物體含菌量：含菌量越高需，要滅菌的時間越長滅菌鍋內(nèi)空氣排出程度：鍋內(nèi)空氣要全部排盡滅菌對象pH：pH<6.0易死亡；pH在之間不易死亡滅菌對象的體積：大容積培養(yǎng)基滅菌時必須延長滅菌時間加熱與散熱速度：會影響培養(yǎng)基成分的破壞程度，應(yīng)適當(dāng)控制。15.描述某一單細(xì)胞微生物在液體培養(yǎng)基中的生長行為。在發(fā)酵過程中怎樣根據(jù)生長曲線縮短發(fā)酵周期、增加產(chǎn)量？ （要點：注意，這種題目最好將生長曲線畫出，然后簡單描述。） 第二問就相當(dāng)于如何縮短延滯期。16.常用的滅菌、消毒方法有哪些? 各種

15、方法的原理、適用范圍、注意問題是什么 ?一、滅菌方法 1）、高溫滅菌法：干熱滅菌 原理：干熱可使破壞細(xì)胞膜破壞、蛋白質(zhì)變性和原生質(zhì)干燥，并可使各種細(xì)胞成分發(fā)生氧化變質(zhì)。 應(yīng)用范圍：1）烘箱內(nèi)熱空氣滅菌法（150170，12hr）：金屬器械、洗凈的玻璃器皿。 2）火焰灼燒法：接種環(huán)、接種針等。濕熱滅菌 原理：干熱可使破壞細(xì)胞膜破壞、蛋白質(zhì)變性和原生質(zhì)干燥，并可使各種細(xì)胞成分發(fā)生氧化變質(zhì)。 應(yīng)用范圍：1）烘箱內(nèi)熱空氣滅菌法（150170，12hr）：金屬器械、洗凈的玻璃器皿。 2）火焰灼燒法：接種環(huán)、接種針等。二、消毒方法 物理消毒法：機(jī)械消毒；熱力消毒；輻射消毒 化學(xué)消毒法17、微生物培養(yǎng)過程中

16、pH變化的規(guī)律如何？如何調(diào)整？   即使同一微生物在其生長不同階段和不同的生理、生化過程，也有不同的最適，所以在培養(yǎng)時pH升高或降低。治標(biāo)： 過酸時，加NaOH、NaCO3等堿中和 過堿時，加H2SO4、HCl等酸液中和治本： 過酸時A. 加適當(dāng)?shù)牡矗杭幽蛩亍aNO3、NH4OH、蛋白質(zhì) B. 提高通氣量過堿時A. 加適當(dāng)?shù)奶荚矗杭犹恰⑷樗帷⒋姿帷幟仕?B. 降低通氣量18.歸納本章名詞解釋。CFU，分批培養(yǎng)，代時，連續(xù)培養(yǎng)，滅菌，生長產(chǎn)量常數(shù)（Y），最適生長溫度，巴氏消毒法，抗生素，抗代謝藥物，選擇毒力，生長限制因子，MIC。19、根據(jù)生長溫度以及根據(jù)最適生長溫度進(jìn)

17、行的微生物類群劃分？溫度如何影響微生物的生長？微生物類型     生長溫度范圍（）     分布的主要處所     最低     最適     最高    低溫型    專性嗜冷     12      515   &#

18、160;1520     兩極地區(qū)     兼性嗜冷    50     1020     2530     海水及冷藏食品上中溫型     室溫     1020     2035 3540     

19、;  腐生菌     體溫                  4045  寄生菌高溫型     2545     5060     7095     溫泉、堆肥、土壤表層等 溫度是影響微生物生長繁殖最重要的因素之一。在一

20、定溫度范圍內(nèi)，機(jī)體的代謝活動與生長繁殖隨著溫度的上升而增加，當(dāng)溫度上升到一定程度，開始對機(jī)體產(chǎn)生不利的影響，如再繼續(xù)升高，則細(xì)胞功能急劇下降以至死亡。 微生物的生長溫度盡管有高有低，但總有最低生長溫度、最適生長溫度和最高生長溫度這三個重要指標(biāo)，這就是生長溫度的三個基本點。 最低生長溫度  是指微生物能進(jìn)行繁殖的最低溫度界限。處于這種溫度條件下的微生物生長速率很低，如果低于此溫度則生長完全停止。不同微生物的最低生長溫度不一樣，這與它們的原生質(zhì)物理狀態(tài)和化學(xué)組成有關(guān)系，也可隨環(huán)境條件而變化。 最適生長溫度  是指某菌分裂代時最短或生長速率最高時的培養(yǎng)溫度。但

21、是，同一微生物，不同的生理生化過程有著不同的最適溫度，也就是說，最適生長溫度并不等于生長量最高時的培養(yǎng)溫度，也不等于發(fā)酵速度最高時的培養(yǎng)溫度或累積代謝產(chǎn)物量最高時的培養(yǎng)溫度，更不等于累積某一代謝產(chǎn)物量最高時的培養(yǎng)溫度。因此，生產(chǎn)上要根據(jù)微生物不同生理代謝過程溫度的特點，采用分段式變溫培養(yǎng)或發(fā)酵。例如，嗜熱鏈球菌的最適生長溫度為37，最適發(fā)酵溫度為47，累積產(chǎn)物的最適溫度為37。 最高生長溫度  是指微生物生長繁殖的最高溫度界限。在此溫度下，微生物細(xì)胞易于衰老和死亡。微生物所能適應(yīng)的最高生長溫度與其細(xì)胞內(nèi)酶的性質(zhì)有關(guān)。例如細(xì)胞色素氧化酶以及各種脫氫酶的最低破壞溫度常與該菌的最

22、高生長溫度有關(guān)。 致死溫度  最高生長溫度如進(jìn)一步升高，便可殺死微生物。這種致死微生物的最低溫度界限即為致死溫度。致死溫度與處理時間有關(guān)。在一定的溫度下處理時間越長，死亡率越高。嚴(yán)格地說，一般應(yīng)以10分鐘為標(biāo)準(zhǔn)時間。細(xì)菌在10分鐘被完全殺死的最低溫度稱為致死溫度。測定微生物的致死溫度一般在生理鹽水中進(jìn)行，以減少有機(jī)物質(zhì)的干擾。20、pH對微生物生長的影響以及根據(jù)pH如何對微生物進(jìn)行劃分？ 微生物生長的pH值范圍極廣, 一般在pH28之間，有少數(shù)種類還可超出這一范圍，事實上，絕大多數(shù)種類都生長在pH5 9之間。 不同的微生物都有其最適生長pH值和一定的pH

23、范圍，即最高、最適與最低三個數(shù)值，在最適pH范圍內(nèi)微生物生長繁殖速度快，在最低或最高pH值的環(huán)境中，微生物雖然能生存和生長，但生長非常緩慢而且容易死亡。一般霉菌能適應(yīng)pH值范圍最大，酵母菌適應(yīng)的范圍較小，細(xì)菌最小。霉菌和酵母菌生長最適pH值都在56，而細(xì)菌的生長最適pH值在7左右。21、圖解營養(yǎng)物濃度對生長速度和菌體產(chǎn)量的影響。（p155,圖6-4）22、現(xiàn)有的微生物保藏法可分為幾類？試用表解之。就方法的簡便與否，保藏效果的好壞，保藏對象的范圍，保藏的基本原理，以及保藏期的長短等方面，列表比較幾種最常見的菌種保藏法。方 法主要措施適宜菌種保藏期評價冰箱保藏法（斜面）低溫各大類約1-6月簡便冰箱

24、保藏法（半固體）低溫、避氧細(xì)菌、酵母菌約6-12月簡便石蠟油封保藏法低溫、阻氧各大類約1-2年簡便甘油懸浮液保藏法低溫、保護(hù)劑干燥、無營養(yǎng)細(xì)菌、酵母菌約10年較簡便砂土保藏法干燥、無營養(yǎng)產(chǎn)孢子的微生物約1-10年簡便有效冷凍干燥保藏法干燥、低溫、無氧、有保護(hù)劑各大類>5-15年繁而高效液氮保藏法超低溫、有保護(hù)劑各大類>15年繁而高效23試分析麥康開培養(yǎng)基的各組分的主要作用是什么？該培養(yǎng)基屬于什么培養(yǎng)基？ A 功能蛋白胨氮源乳糖碳源NaCl無機(jī)物牛膽酸鹽生長因子PH7.4適宜菌生長1%中性紅指示劑發(fā)酵管判斷是否產(chǎn)氣屬于半組合培養(yǎng)基24從微生物學(xué)的角度分析，低酸性食品（PH4.5）和酸

25、性食品（PH4.5）如要長期保藏，應(yīng)分別采用什么溫度殺菌？為什么？25引起下列食品變質(zhì)的微生物主要是什么類群？為什么？（1）消毒牛奶（室溫） （2）真空包裝的蜜餞產(chǎn)品 （3）面粉（4）充CO2不足的碳酸飲料 （5）殺菌不足的肉類罐頭A：消毒牛奶：細(xì)菌，因細(xì)菌表面積大，生長速度最快。B：真空包裝的蜜餞產(chǎn)品：酵母菌，在高滲情況下，Aw0.85，兼在厭氧的酵母菌可以活。C：面粉，干霉菌，因干性霉菌可以分解淀粉，引起面粉發(fā)霉。Aw小。D：充CO不足的碳酸飲料：酵母菌，PH=4呈酸性，霉菌酵母菌可以生長，但CO抑制了細(xì)菌的生長。E：殺菌不足的肉類罐頭：芽孢未殺死。第七章 （本章考點較多，大多為基本的簡單

26、的知識點）1.歷史上證明核酸是遺傳是遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)的經(jīng)典實驗有幾個？實驗者是誰？試舉其中一例加以說明。 三個，還要注意圖2.什么是影印平板培養(yǎng)法？它有何理論與實際應(yīng)用？ 影印培養(yǎng)法就是一種通過蓋章的方式能達(dá)到在一系列培養(yǎng)皿的相同位置上出現(xiàn)相同的遺傳型菌落的接種和培養(yǎng)方法。它證明了微生物的抗藥性是在未接觸藥物前自發(fā)產(chǎn)生的，這一突變與相應(yīng)的藥物環(huán)境不相干是自發(fā)的。利用影印平板法，可從非選擇性條件下生長的微生物群體中分離到只有在選擇性條件下才能分離到的相應(yīng)突變株。實際應(yīng)用：育種等方面，證明證明突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性。3圖示平板影印培養(yǎng)法證明突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性。（p206 圖7-8）4.證明突變的發(fā)

27、生與環(huán)境因子間無直接對應(yīng)關(guān)系的三個經(jīng)典試驗？5.簡述誘變育種的基本環(huán)節(jié)。關(guān)鍵是什么？何故？ 出發(fā)菌株誘變多數(shù)個體死亡少數(shù)存活存活率多數(shù)未變少數(shù)突變多數(shù)負(fù)變少數(shù)正變突變率正變率多數(shù)幅度小多數(shù)幅度大“高產(chǎn)率”多數(shù)不宜投產(chǎn)少數(shù)適宜投產(chǎn)投產(chǎn)率工作關(guān)鍵：選擇簡便有效的誘變劑 挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株 處理單孢子懸液 選用最適誘變劑量充分利用復(fù)合處理的協(xié)同效應(yīng)利用和創(chuàng)造形態(tài)，生理和產(chǎn)量相關(guān)指標(biāo)設(shè)計和采用高效的篩選方案方法。創(chuàng)造新型篩選方法。6.什么是質(zhì)粒？它有何特點？主要質(zhì)粒有幾類？各有何理論與實際意義？ （p197）7.試述用 Ames 法檢測致癌劑的理論依據(jù)、方法概要和優(yōu)點。 鼠傷寒沙門氏菌的組氨酸營養(yǎng)缺陷

28、型菌株在基本培養(yǎng)基的平板上不能生長，如發(fā)生回復(fù)突變成原養(yǎng)型后能生長。方法大致是在含待測可疑“三致”物（例如黃曲霉毒素、二甲氨基偶氮苯、“反應(yīng)停”或二堊英等）的試樣中，加入鼠肝勻漿液，經(jīng)一段時間保溫后，吸入濾紙片中，然后將濾紙片放置于平板中央。經(jīng)過培養(yǎng)后，出現(xiàn)三種情況：在平板上無大量菌落產(chǎn)生，說明試樣中不含誘變劑；在紙片周圍有一抑制圈，其外周圍出現(xiàn)大量菌落，說明試樣中有某種高濃度誘變劑存在；在紙片周圍長有大量菌落，說明試樣中有濃度適當(dāng)?shù)恼T變劑存在。 優(yōu)點：快速、準(zhǔn)確和費用省等。8.舉例說明在微生物誘變育種工作中，采用高效篩選方案和方法的重要性。 通過誘變處理，在微生物群體中會出現(xiàn)各種突變型個體，

29、但其中絕大部分是負(fù)變株。要在其中把極個別的產(chǎn)量提高較顯著的正變株篩選出來工作量會非常大。為了花費最少的工作量，又能在最短的時間內(nèi)取得最大的成效。例如：在檸檬酸生產(chǎn)菌株Aspergillususamii（宇佐美曲霉）的篩選過程中，有人把待測菌株的單孢子用特制的不銹鋼多點接種器接種到浸有淀粉培養(yǎng)基和溴甲酚綠指示劑的厚濾紙片上，經(jīng)培養(yǎng)后，根據(jù)黃色變色圈的直徑和該菌落直徑之比，就可篩選出產(chǎn)量較高的菌株。此處可以列舉教材p219 圖7-17所設(shè)計的實驗。9、為什么在進(jìn)行誘變處理時，要把成團(tuán)的微生物細(xì)胞或孢子制成充分分散的單細(xì)胞或孢子懸液？ 一方面分散狀態(tài)的細(xì)胞，可以均勻的接觸誘變劑，另一方面又可避免長出

30、不純菌落。在某些微生物中，由于許多微生物細(xì)胞內(nèi)同時含有幾個核，即使用單細(xì)胞懸浮液還是易長出不純菌；有時雖處理了單核的細(xì)胞或孢子，由于誘變劑只作用DNA雙鏈中某的一條單鏈，故某一突變還是無法反映在當(dāng)代的表型上。只有經(jīng)過DNA復(fù)制、細(xì)胞分裂后，這一變異才在表型上表述，出現(xiàn)不純菌落。不純菌落的存在，是誘變育種中初分離的菌株經(jīng)傳代后很快出現(xiàn)生產(chǎn)性狀“衰退”的主要原因。故對霉菌、放線菌應(yīng)處理分生孢子，芽孢桿菌則應(yīng)處理芽孢。10.試用表解法概括一下篩選營養(yǎng)缺陷型突變株的主要步驟和方法。 （p220）營養(yǎng)缺陷性的篩選：一般要經(jīng)過四個環(huán)節(jié)（1）誘變、（2）淘汰野生型：富集培養(yǎng)、抗生素法、菌絲過濾法（3）檢出營

31、養(yǎng)缺陷型：夾層培養(yǎng)法、限量補(bǔ)充培養(yǎng)法、逐個檢出法、影印平板法（4）鑒定營養(yǎng)缺陷型：生長譜法11.試比較E.coli的 F+、F-、Hfr和F'菌株的異同，并圖示四者間的聯(lián)系。 F+菌株：含游離F因子菌株為雄性菌株，還可使細(xì)胞產(chǎn)生14條性傘毛。游離F因子，可以獨立于細(xì)胞核進(jìn)行復(fù)制。Hfr菌株：:F因子整合到DNA 的特定位置上的菌株，為高頻重組菌株（Hfr），與宿主染色體同步復(fù)制。重組頻率高。F菌株和F因子：F因子從細(xì)菌DNA上脫落下來，而帶有細(xì)菌DNA的F因子。F因子：帶有細(xì)菌DNA的F因子。F菌株：帶有F因子細(xì)菌。F-菌株：不含F(xiàn)因子的菌株為F-12.什么是原生質(zhì)體融合？其基本操作程

32、序如何？他在育種工作中有何優(yōu)點？ 原生質(zhì)體融合：就是將雙親株的微生物細(xì)胞分別通過酶解去壁，形成原生質(zhì)體，然后在高滲條件下混合，并加入物理的、化學(xué)的或生物的助融條件，使雙親株的原生質(zhì)體間發(fā)生相互凝集和融合的過程。基本程序：篩選標(biāo)記菌株；制備原生質(zhì)體；原生質(zhì)體融合；原生質(zhì)體再生；選擇融合子；篩選實用性菌株。 13.什么是基因工程？簡述其操作過程。 （請注意教材p237，圖7-34，可能考點為圖填空，此圖請理解為準(zhǔn)）基因工程：主要操作過程（1）獲得目的基因（2）選擇基因載體（3）體外重組（4）外源基因?qū)耄?xì)菌、植物、動物、基因槍）（5）篩選和鑒定（6）應(yīng)用14.試述微生物在基因工程中的重要地位。

33、15.菌種衰退的原因是什么？如何區(qū)分衰退、飾變與雜菌污染？菌種退化即生產(chǎn)性能退化，遺傳標(biāo)記丟失，原有典型的性狀變得不典型。衰退原因1、自發(fā)突變2、通過誘變獲得的高產(chǎn)菌株本身不純3、培養(yǎng)、保藏條件 衰退指由于自發(fā)突變的結(jié)果而使某物種原有一系列生物學(xué)性狀發(fā)生量或質(zhì)變的現(xiàn)象。 飾變是指外表的修飾性改變，即一種不涉及及遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)改變而只發(fā)生在轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)譯水平上的表型變化。雜菌污染則是指混入其它菌。16.試述菌種保藏的目的、原理，各種保藏方法的理論依據(jù)、適用對象及保藏期如何？ 菌種保藏原理：根據(jù)微生物生理、生化特點，選用優(yōu)良的菌株，最好是他們的休眠體，人工的創(chuàng)造適合休眠的環(huán)境條件，即干燥、低溫、缺乏氧氣

34、和養(yǎng)料等使其代謝活動處于最低狀態(tài)，但又不至于死亡，從而達(dá)到保藏的目的。冷凍干燥保藏法：1、準(zhǔn)備安 管 2、準(zhǔn)備菌種 3、制各菌懸液及分離 4、冷凍：迅速降溫至-40-70攝氏度 5、抽真空：完成時有干燥塊 6、抽真空，封口 7、冰箱保藏冷凍干燥保藏法原理：通過洗滌液體的所有對細(xì)胞生長有害的物質(zhì)，脫脂牛奶或糖、甘油等可以與大分子形成氫鍵的物質(zhì)做保護(hù)劑，防止細(xì)胞損傷；在-20攝氏度以下快速凍結(jié)，形成的冰晶小，細(xì)胞質(zhì)濃縮現(xiàn)象減少，防止細(xì)胞損傷；在0攝氏度保證不解凍的條件下，高度的冷凍干燥，低溫、封口，使保藏時間延長。17.歸納本章名詞解釋。 18.設(shè)計篩選蛋白酶產(chǎn)生菌的實驗方案，并指出關(guān)鍵步驟的注意

35、要點。 來源：紡織廠腐敗的漿料，面粉廠垃圾堆中采集菌樣。富集：淀粉作為唯一C源的培養(yǎng)基中高溫培養(yǎng)。分離：依據(jù)平板菌落周圍、淀粉水解全的大小進(jìn)行分離。誘變：用化學(xué)或物理方法。初篩復(fù)篩19、常見的誘變劑及其作用特點。第八章1.尋找一種環(huán)境或產(chǎn)品，請分析上面的微生物組成。并說明為什么？ 2.嗜極菌有哪幾種？請任選一種，闡述它的研究意義。 3.列舉微生物與微生物之間的相互關(guān)系。 4.為何說土壤是人類最豐富的“菌種資源庫”？如何從中篩選所需要的菌種？ 5.微生物在環(huán)境保護(hù)中有哪些應(yīng)用？ 6.我國飲用水細(xì)菌學(xué)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)是什么？為何選用大腸菌群作為主要微生物學(xué)衛(wèi)生指標(biāo)？ 7.試討論防霉與防癌間的關(guān)系。 8.為

36、什么說在治理污水中最根本、最有效的手段是微生物處理法？ 9.何為益生菌劑？益生菌的種類有哪些？有何重要生理功能？舉例說明市場上常見的益生菌劑制品。 10.歸納本章名詞解釋。 第九章1.比較下列相近名詞： 外毒素與內(nèi)毒素 類毒素與抗毒素 非特異性免疫與特異性免疫 完全抗原與半抗原 特異性抗原與共同抗原 多克隆抗體與單克隆抗體 菌苗與疫苗 細(xì)胞免疫與體液免疫 2. 什么是抗原？它應(yīng)該具備哪些條件？ 抗原：抗原是一類能刺激人或動物產(chǎn)生抗體或致敏淋巴細(xì)胞，并能與這些產(chǎn)物在體內(nèi)或體外發(fā)生特異性反應(yīng)的物質(zhì)。 條件：異物性：指抗原的理化性質(zhì)與其所刺激的機(jī)體的自身物質(zhì)間的差異程度。具有一定的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)的大

37、分子物質(zhì)；特異性由抗原決定簇決定3.血清學(xué)反應(yīng)的一般規(guī)律是什么？ 特異性可逆性定比性階段性條件依賴性4.比較凝集反應(yīng)與沉淀反應(yīng)的異同。 凝集反應(yīng)是顆粒性抗原與相應(yīng)的抗體在合適的條件下反映并出現(xiàn)肉眼可見的凝集團(tuán)現(xiàn)象。作凝集反應(yīng)時，抗原體積巨大，抗原結(jié)合體相對較少，為使抗原、抗體間有合適比例，應(yīng)稀釋抗體。 沉淀反應(yīng)是可溶性抗原與相應(yīng)的抗體在合適的條件下反映并出現(xiàn)沉淀的現(xiàn)象。沉淀原的分子小，表面抗原決定簇的相對數(shù)較高，因此一般先要稀釋抗原才能獲得合適比例的抗原、抗體。5.決定抗原免疫原性的因素有哪些？怎樣才能獲得高效價的抗體？ 第一，異物性；免疫學(xué)中的異物指凡在胚胎期與免疫細(xì)胞未接觸過的物質(zhì)。異物性是決定抗原免疫原性的核心條件。根據(jù)親緣關(guān)系，異物包括：（1）異種抗原（2）同種異型物質(zhì)（3）自身物質(zhì) 第二：大分子物質(zhì)；分子質(zhì)量一般在10.0kDa以上，分子質(zhì)量越大，免疫原性越強(qiáng)。 第三：抗原物質(zhì)的結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成；多數(shù)大分子蛋白質(zhì)均具有良好的免疫原性，多糖，糖蛋白，脂蛋白及糖脂等已具有免疫原性，較蛋白質(zhì)弱，核酸分子一般無免疫原性，若與蛋白質(zhì)結(jié)合則具有免疫原性 第四：抗原進(jìn)入機(jī)體的方式；一般而言靜脈注射免疫原性較強(qiáng)，其次是皮下注射，皮內(nèi)注射，腹腔。 第五：機(jī)體因素：免疫原性還受機(jī)體的遺傳