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醫(yī)院檢驗(yàn)中心血小板抗體測(cè)定(PAIgG, PAIgM, PAIgA)操作規(guī)程( 1)試劑1)鼠抗人 IgG 多抗cat NO 0279蒸餾水復(fù)溶后分裝,每支50ul ,置 - 30貯存2)鼠抗人IgM 多抗cat NO 0285同上3)鼠抗人IgA 多抗cat NO 0278同上4) FITC 羊抗鼠熒光單抗cat NO 0279按說(shuō)明書(shū)復(fù)溶,置 - 30貯存( 2)方法血小板固定: 取富含血小板的血漿0.4ml 加 1mlTEN緩沖液中。再取上述稀釋血漿0.4ml 加等量 2%的多聚甲醛,室溫固定15 分鐘。洗滌:在已固定的血小板試管中加2mlTEN緩沖液, 3000轉(zhuǎn)/ 分,離心 5 分鐘,洗滌 2 次。棄上清液, 加 TEN緩沖液 0.4ml 。測(cè)定:測(cè)定管中分別加入IgG、IgM、 IgA 單抗 50ul ,將固定血小板50ul 分別加入測(cè)定管和對(duì)照管。室溫20 分鐘,用 2mlTEN 3000 轉(zhuǎn) / 分離心 5 分鐘洗滌一次后,再加0.6mlTEN。上機(jī):用各自的陰性對(duì)照。陰性對(duì)照值在1.0 左右,計(jì)數(shù) 1 萬(wàn)個(gè)血小板。(3)參考范圍PAIgG
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