1、固液比分別為1：6，1：7，1：8，1：9，1：10微波功率500W，提取時間5min，溫度50稱取250g的海帶粉裝入500ml的大圓底燒瓶，加入石油醚（乙醇、乙醚）用微波萃取法提取脂肪酸，500ml大圓底燒瓶稱重海帶粉碎成粉，過篩60稱重濾液濃縮抽濾固液比分別為1：6，1：7，1：8，1：9，1：10微波功率500W，提取時間5：00，溫度50集中收集，一起濃縮濾渣繼續提取，提取3次16 / 16文檔可自由編輯打印稱100ml的空錐形瓶，稱取5g的樣品加入到100ml的錐形瓶中沸水加熱1小時加10mL0.5mol/L 氫氧化鈉乙醇溶液，在瓶口上插一小漏斗，漏斗上再蓋一塊玻璃反應完成后移去漏

2、斗，繼續加熱除去乙醇。再加人10mL 蒸餾水，加熱，使皂化物溶解成混合液。加入10ml，0.5mol/L的硫酸，在瓶口上插一小漏斗，漏斗上再蓋一塊玻璃加人10mL 蒸餾水加熱1小時加濃鹽酸(約5mL)使之呈酸性加熱，可見脂肪酸呈油狀浮于上層時，用分液漏斗分開上下層油狀物分層，用分液漏斗分開上下層，上次用熱水重復洗滌三次，洗去甘油、硫酸等，靜置澄清，上清液即為脂肪酸上層用熱水重復洗滌三次，每次用水100m1，除去混雜于脂肪中的無機鹽、甘油、鹽酸等，靜置澄清，上清液即為脂肪酸加入25ml,0.5mol/l的KOH-CH3OH,25ml石油醚加入甲醇7ml和3-4滴BF3-乙醚冷卻加熱60，處理30

3、min加入2g經預處理的樣品1稱量兩個100ml圓底燒瓶中加入為處理的2g未經預處理的樣品冷卻后加入25ml飽和NaCl溶液至中性，取上層清夜，稱重加入25ml,10：1的濃硫酸-CH3OH再加蒸餾水至瓶頸，取出上清，再用2ml石油醚洗多次，合并上清，放入小瓶中待測，稱重加入2ml石油醚加熱60，處理30min參考文獻：1寇秀穎，于國萍. 脂肪和脂肪酸甲酯化方法的研究. 食品研究與開發,2005, 26(2),起止頁碼2 閏玉霞, 李平林, 蔡揚鵬, 李八方. 利用G C 一M S 測定不同甲醋化條件下沙蜚脂肪酸組成. 中國海洋藥物雜志，2010，第29卷第6期3 何勇，彭鶯，黎軍. 硫酸催化

4、甲酯化氣相色譜法測肥皂產品中的脂肪酸分布及總脂肪物含量. 順德職業技術學院學報,2011,7: 第9 卷第3 期4 曾虹燕,李昌珠,蔣麗娟. 用GC-MS分析不同方法提取的茶油脂肪酸.熱帶亞熱帶植物學報，2005,13(3):271-2745 蔡心堯, 尹建軍. 海藻中多不飽和脂肪酸的測定方法.無錫輕工大學學報，1999，9：第18卷第5期6 羅盛旭，梁振益，陳佩. 海帶脂肪酸的提取及其成分分析.海南大學學報自然科學，2005，9：第23卷第3期7 馮小峻，鄧舟，陸慧寧等.GN海帶新品系脂肪酸的氣相色譜一質譜聯用分析. 中山大學學報，2010，11：第49卷第6期8 紀麗麗，宋文東，劉建秀.

5、紅樹林植物露兜中揮發油和脂肪酸的測定. 現代食品科技, 2008:V0124，No69 朱曉楠,魏士剛等. 微波輔助提取一氣相色譜質譜聯用測定肉桂中的揮發油. 高等學校化學學報，2009，7：V0130，No7，1300一13041.脂肪化學名甘油三酯，脂肪是由甘油和脂肪酸組成的三酰甘油酯，其中甘油的分子比較簡單，而脂肪酸的種類和長短卻不相同。脂肪酸分三大類：飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸。 脂肪在多數有機溶劑中溶解，但不溶解于水。2.多不飽和脂肪酸指含有兩個或兩個以上雙鍵且碳鏈長度為1822個碳原子的直鏈脂肪酸。通常分為omega3和omega6，在多不飽合脂肪酸分子中，距羧基最

6、遠端的雙鍵在倒數第3個碳原子上的稱為omega3；在第六個碳原子上的，則稱為omega63.單不飽和脂肪酸,在分子結構中僅有一個雙鍵；多不飽和脂肪酸,在分子結構中含兩個或兩個以上雙鍵脂肪轉化為脂肪酸的方法：1.脂肪在堿性溶液底下水解生成脂肪酸鈉，然后加入硫酸，溶于水，不溶于乙醇。無水物是白色晶體或粉末，濃縮把乙醇蒸出，得到脂肪酸脂肪酸提取：稱200g的海帶粉，加入固液比為1:5的乙醇在50,500W的條件下用微波法提取，抽濾，取濾液靜置，濾渣再加入1:4的乙醇溶劑進行二次提取，提取條件為50,500W的條件下進行,提取后抽濾，靜置至一段時候后,充分析出白色固體后抽濾進行濃縮,在濃縮前可適當加入

7、甲醇,再經行濃縮現象:甲酯化：酸化甲酯化1.加入正己烷4 ml，濃度2 mol的氫氧化鉀一甲醇溶液2 ml，劇烈振搖12 min，30度水浴反應20 min。加入三氟化硼-甲醇溶液，3 000 rmin離心10min。取上清液待測。其中三氟化硼法能利用快速皂化使脂肪酸鹽直接轉化成脂肪酸甲酯，減少酸化提取手續2.取13 g浸膏，加05mol·LKOH-CH3OH溶液25 mL，苯一正己烷(體積比為1：1)溶液25 mL，室溫下振蕩5min后，加熱至60，處理20 min，冷卻后，加入飽和NaCI溶液25 mL，靜置分層后取上層清液進行GCMS分析。3.樣品5 g ，于小燒杯中，加入乙醚

8、16.7mL，正己烷8.3mL，使脂肪完全溶解后轉入250mL 容量瓶，加入甲醇25mL，再加入0.8mol/L 甲醇-KOH 溶液25mL，搖勻后靜置10min。加蒸餾水至刻度，吸取上層溶液，待作GC-MS 分析。氣相條件：進樣口溫度270，溫100，以10/min升到170保持1min 后，以3/min 升到250，保持4min；流速：恒流模式2.4mL/min，分流進樣分流比為50:1。測定方法：將沙棘油進行氫氧化鉀- 甲醇室溫酯化法處理后進樣分析，進樣量0 . 2L。按氣相條件，用GC-MS 測定樣品后得到色譜圖。利用氣質聯用儀所帶的標準圖譜庫的質譜數據進行自動檢索，同時根據質譜圖及相

9、關文獻鑒定出主要色譜峰對應的物質名稱，并使用數據處理系統對色譜峰進行面積歸一化處理，從而計算出各物質相對含量。加入3-4滴BF3-乙醚溶液，將混合物放置在70的水浴中加熱3分鐘，冷卻后，加入1ml正己烷，振搖使甲酯轉入正己烷層4.稱取20 mg提取出的茶籽油于小樣品瓶中，加入15 mL正己烷溶解油樣，搖勻，加入60“L乙酸甲酯，搖勻靜置10 min。用移液槍往每個小瓶中加入100“L 27 mgmL甲醇鈉甲醇溶液，在振蕩器上振蕩2 min，然后靜置20 min以上使甲酯化完全，加入飽和草酸60¨L使甲酯化終止，搖勻靜置于一24冰箱內20 min。取出，將樣液通過無水硫酸鈉微柱脫水，用

10、小瓶收集濾液約12 mL上機測定。5.取1ml樣品,加2N的甲醇氫氧化鉀溶液0.5ml,然后加10ml正庚烷在120度的溫度下加熱半小時就可以直接進樣了.也可以用比較復雜的方法進行,樣品大約20克,無水甲醇50ml左右,加濃硫酸5ml,在不低于95度的水浴中回流六小時以上,然后萃取甲酯.萃取后甲酯用無水乙醇以1:3或1;5比列稀釋后進樣即可.6.加入3ml的KOH甲醇溶液，70水浴加熱回流5min；取出冷卻至室溫（可用水冷），加入5ml三氟化硼溶液，70水浴加熱回流5min；取出冷卻至室溫，加入3ml正己烷，70水浴加熱回流5min；取出冷卻至室溫，加入適量飽和食鹽水溶液，靜止35min，取上

11、層油樣1ml于試樣瓶中，進GC分析脂肪酸甲酯化方法的選擇。在對食物樣品中的反式脂肪酸含量進行分析測定前，需對其甲酯化處理。甲酯化的方法很多，常用的有氫氧化鉀一甲醇法、濃硫酸一甲醇法、三氟化硼一甲醇法。氫氧化鉀-甲醇法是一種在常溫下進行的堿處理方法，其原理是將油脂降解為甘油和脂肪酸，脂肪酸與甲醇結合生成瞻肪酸甲酯。該方法無需冷凝回流，常溫下酯化效果好，組分完全分離，適用范圍廣。可用于分析動植物油脂、食品中油脂、藻類、微生物類脂肪酸，目操作簡單。省時省力。體積比1:15 濃硫酸-甲醇溶液配取0.5ml濃硫酸和2.5ml的,加入到上述樣品中搖勻,組裝回流裝置稱取1g樣品加入到50ml的圓底燒瓶內,加入5ml的甲醇,搖勻,稍微加熱至溶解酸化在60下水浴加熱回流,回流時間為30min回流時加入攪拌子充分攪拌,避光回流冷卻后,加入15ml的石油醚萃取,提出上層,下層重復前萃取步驟稱量100ml空瓶子重量,合并上層溶液到100ml的圓底燒瓶內,在50下水浴濃縮至干,稱重樣品點板1mol/L的KOH-CH3OH加入0.4g的KOH固體2.5ml的甲醇內,攪拌,