1、新生兒機械通氣患者血清MMP-9,TIMP-1測定及研究         【摘要】  目的 探討新生兒機械通氣患者肺損傷與患者血清（MMP-9）及其組織抑制因子（TIMP-1）的關系。方法 32例機械通氣的新生兒患者組與對照組分別均測定血清MMP-9，TIMP-1濃度，并相互進行比較。兩組數據比較均用非配對資料的t檢驗。結果 機械通氣新生兒患者組血清MMP-9水平較未機械通氣新生兒患者組高（P0.05，而機械通氣新生兒患者組血清TIMP-1水平與未機械通氣新生兒患者組相比差異無顯著性（P0.05）。 結論

2、 新生兒機械通氣后血清中的MMPs/TIMPs失衡，導致MMPs活性增強，過度增強的MMPs活性導致了細胞外基質的降解，可能造成基底膜受損。加速了炎性反應，與新生兒呼吸機相關性肺損傷（VI LI）的發生相關聯。 【關鍵詞】  新生兒 機械通氣 肺損傷 基質金屬蛋白酶-9 基質金屬蛋白酶組織抑制因子-1【Abstract】  Objective  To investigate the relationship between the serum level of matrix metalloproteinase-9(MMP-9), tissue inhibitor

3、of matrix metalloproteinase-1(TIMP-1) and the lung injury caused by ventilation in newborns. Methods  The serum level of MMP-9/TIPM-1 in 32 newborn with ventilation and control group was measured. Results  The serum level of MMP-9 was significantly higher in the newborns with ventilation t

4、han that in the control group (p0.05), but the serum level of TIPM-1 had no significant difference in the newborns with ventilation than that the control group (p0.05). Conclusion  The imbalance of MMP-9/TIPM-1 in the newborns with ventilation induces the degradation of extracellular matrix and

5、 injures the basement membrance, these changes are related to mewborn ventilation induced lung injury(VILI).【Key words】  newborn  ventilation  lung injury  matrix metalloproteinase-9  tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1  目前隨著機械通氣技術在新生兒患者中的廣泛使用，機械通氣所致的肺損傷

6、問題得到了重視。現有研究表明機械通氣所致肺損傷（VI LI）與急性肺損傷（ALI）有著類似的肺臟形態學和病理生理學改變，而基底膜損傷在ALI發生過程中發揮重要作用，其中，基質金屬蛋白酶（MMP-2和MMP-9）及其組織抑制因子（TIMP-1和TIMP-2）失衡逐步受到關注，為了探討機械通氣所致肺損傷的機制，本文測定了32例機械通氣的新生兒患者血中MMP-9和TIMP-1的濃度，并與未機械通氣的其他新生兒患者進行比較，為臨床提供參考。1  資料與方法1.1  一般資料  機械通氣組：2003年1月至2006年3月期間住我院予機械通氣的新生兒患者32例；均予氣管插管通

7、氣；其中男20例，女12例；年齡：生后1h生后10d不等；通氣時間：通氣2h96h不等；原發病有：新生兒呼吸窘迫綜合征（ARDS）8例，新生兒肺炎2例，新生兒胎糞吸入5例，新生兒窒息后7例，敗血癥4例，先天性心臟病6例。對照組取同期間的未機械通氣的新生兒患者，其中，男14例，女18例；年齡：128d；住院天數：214d；原發病：新生兒高膽紅素血癥10例，新生兒肺炎3例，新生兒缺血缺氧性腦病8例，先天性心臟病4例，新生兒敗血癥7例。1.2  檢測方法  標本采集均在清晨空腹，取血5ml，分兩份，均放置30分鐘使其凝固，然后予1000r/min離心10min,吸取上層血清，放入

8、-75冰箱保存，血清MMP-9，TIMP-1采用酶標法（試劑盒購自美國）測定，測定前標本恢復至室溫，按說明書操作。1.3  統計學分析  采用SPSS 11.0進行數據統計處理，標本值用平均數±平均數表示，兩組數據的比較均用非配對資料的t檢驗，P0.05為差異有顯著性。2  結果   機械通氣新生兒組和未機械通氣新生兒組血清MMP-9，TIMP-1水平比較見表1。機械通氣組與未機械通氣組血清MMP-9比較差異有顯著性（p0.05)，機械通氣組與未機械通氣組血清TIMP-1比較差異無顯著性（p0.05）。表1  機械通氣新生兒

9、組和未機械通氣新生兒組血清MMP-9，TIMP-1水平比較（略）*p0.05,*p0.053  討論   基質金屬蛋白酶類（MMPs）是一個蛋白水解酶大家族，可降解很多種細胞外基質。明膠酶是其中的一種，它包括72Kda的明膠酶-A（MMP-2）和92Kda的明膠酶-B（MMP-9）。MMP-2是一種廣泛分布明膠酶，在許多細胞均有表達，包括上皮細胞和內皮細胞。MMP-9由多種炎性細胞產生，包括中性粒細胞，肺泡巨噬細胞以及結締組織細胞。MMP-2和MMP-9在生理和病理條件下可以降解基底膜的多種成分，參與基底膜的轉換。在ALI過程中基底膜的斷裂與MMPs有關。肺泡上皮

10、基底膜對維持肺泡上皮的完整性和分化，保證肺組織結構正常修復起關鍵性作用，肺泡上皮基底膜的裸露和破壞導致肺泡上皮細胞受損，炎癥細胞等遷移到肺泡腔和細胞外基質成分過度降解，基底膜的完整性受到嚴重破壞，肺通透性增加，最終導致肺損傷，。   本組數據顯示，機械通氣新生兒組血清MMP-9較未機械通氣新生兒組高，表明MMP-9處于激活狀態，其降解細胞外基質及破壞氣道壁和肺泡結構的作用增強。機械通氣使肺泡細胞受到了牽張力和剪切力的影響，從而形成了對肺泡細胞的一種周期性機械應力。有證據表明周期性機械應力影響MMPs的釋放和活化，并在細胞外基質重塑中發揮重要作用，具體周期性機械應力可導致培養

11、的軟骨細胞和血管內皮細胞上調，釋放和活化MMP-2和MMP-9，；膜型基質金屬蛋白酶（MT1-MMP）的表達導致心成纖維細胞MMP-2活化；在體外活化肺泡巨噬細胞及其MMP-9釋放，而且周期性機械應力抑制氣道上皮細胞的修復，阻止前列腺素的合成。            MMPs的組織抑制因子（TIMPs）是MMPs的主要內源性抑制因子，TIMP-1和TIMP-2主要與活化的MMP-2，MMP-9，膠原酶，基質溶解素及MMP-9酶原等結合并抑制其活性。正常情況下，組織中MMPs與TIMPs之間保持相

12、對平衡狀態，它們的平衡和相互影響決定著細胞外基質是降解還是聚集，本組資料顯示機械通氣新生兒組的TIMP-1水平與未機械通氣比較，差異無顯著性，說明TIMP-1并沒有隨著MMP-9濃度的增加而增加，從而使MMP-9缺乏內源性抑制，造成MMPs/TIMPs失衡，導致MMPs活性增強。推測過度增強的MMPs活性導致了細胞基質的降解，可能造成基底膜受損。加速了炎性反應，導致了新生兒VI LI的發生。   新生兒機械通氣后血清中的MMPs/TIMPs失衡是否與新生兒機械通氣后支氣管肺發育不良（BPD）發生率升高有關，由于缺乏臨床資料以及這部分病人的隨訪工作未做，所以目前無法作出判斷，

13、但這值得探索。【參考文獻】  1 Ricard JD,Dreyfuss D,Saumon G.Ventilator-induced lung injury.Eur respir J Suppl,2003,42:29.2 Pinhu L,Whitehead T,Evans T, et al. Ventilator-associated lung injury . Lancet,2003,361:332340.3 Brew K,Dinakarpandian D,Nagase H. Tissue inhibitiors of metalloproteinases:evolution,str

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