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文檔簡介

1、第三節 蛋白質的結構蛋白質的結構層次：一級結構、二級結構、超二級結構、結構域、三級結構、四級結構1 蛋白質的一級結構定義：一級結構是指蛋白質多肽鏈中的氨基酸排列順序，包括肽鏈數目和二硫鍵位置。蛋白質一級結構是高級結構的分子基礎，它包含了決定蛋白質分子所有結構層次構象的全部信息。（1） 肽鍵和肽鏈 肽鍵：一個氨基酸的-羧基與另一個氨基酸的-氨基之間脫去一分子水形成的共價鍵稱為肽鍵。又稱酰胺鍵。肽鏈：多個氨基酸以肽鍵相連成鏈稱肽鏈或多肽（二肽、三肽多肽）主鏈：-NCCNCCNCCNCCN-側連：R命名：氨基酸殘基， N-末端 ，C-末端 表達：GASVLMKKRE二硫鍵 -S-S- (2) 蛋白質

2、的一級結構測定-片段重疊法A. 原理： N -A-B-C-D-E-F-G-H-M-N- C 酶1 A-B-C-D E-F-G H-M-N酶2 A-B-C D-E-F G-H-M-NB. 測定步驟 a. 提純蛋白質樣品 b. 測定蛋白質的分子量和氨基酸組成 c. 氨基酸末端分析（N-末端和C末端 ）（a）.24-二硝基氟苯法（FDNB ）(b). 苯異硫氰酸法（PITC）(c).二甲基氨基萘磺酰氯（DNS-Cl）(d).肼解法（e）.羧肽酶法：24-二硝基氟苯法（FDNB ）Sanger 1953苯異硫氰酸法（PITC Edman degradation） 丹磺酰氯法（DNS）肼解法 羧肽酶法羧肽酶 A: 除 Lys , Arg , Pro 羧肽酶B： 只水解 Arg , Lys d. 拆開二硫鍵 ：（a）過甲酸氧化法 （b）還原法e. 專一水解肽鏈成一系列片段（化學法和酶法）：CNBr法甲硫氨酸形成高絲氨酸內酯 胰蛋白酶法：Lys和Arg 不與Pro相連時 胰凝乳蛋白酶：芳香族氨基酸的羧基端 ( F. Y. W ) 胃蛋白酶：斷裂鍵的兩端均為疏水氨基酸( L-V)f分離純化各肽段并采用Edma

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