1、光合細(xì)菌的培養(yǎng)方法 光合細(xì)菌(簡(jiǎn)稱PSB)是地球上最早出現(xiàn)具有原始光能合成體系的原核生物，是一大類在 厭氧條件下進(jìn)行不放氧光合作用的細(xì)菌的總稱，其廣泛存在于地球生物圈的各處。光合細(xì)菌 在水產(chǎn)養(yǎng)殖上的應(yīng)用主要有以下五個(gè)方面：作為養(yǎng)殖水質(zhì)凈化劑；作為飼料添加劑；用于魚(yú) 、蝦、貝幼體的培育；作為動(dòng)物性生物餌料的餌料；防治魚(yú)病。光合細(xì)菌的培養(yǎng)，按次序分 容器工具的消毒、培養(yǎng)基的配制、接種、培養(yǎng)管理四步。 一、容器、工具的消毒 消毒方法參考本報(bào)第1199期B3版單細(xì)胞藻類的培養(yǎng)方法一文中的容器、工具的消 毒方法。 二、培養(yǎng)基的配制 1.培養(yǎng)基配方 培養(yǎng)光合細(xì)菌首先應(yīng)選擇一個(gè)能基本滿足培養(yǎng)種的生理生態(tài)特性

2、和營(yíng)養(yǎng) 要求、經(jīng)過(guò)培養(yǎng)實(shí)踐證明且效果比較理想的培養(yǎng)基配方。 2.配制培養(yǎng)基的用水 如果培養(yǎng)的光合細(xì)菌是淡水種，菌種培養(yǎng)可用蒸餾水；生產(chǎn)性培 養(yǎng)可用自來(lái)水（或井水）配制。如果培養(yǎng)的光合細(xì)菌是海水種，則用天然海水（或人工海水 ）配制。用天然海水配制培養(yǎng)基，可免加鎂鹽和鈣鹽，因?yàn)楹Ｋ墟V、鈣元素的含量已能滿 足需要。此外，在海水中加入磷元素時(shí)不能用磷酸氫二鉀，應(yīng)用磷酸二氫鉀，否則會(huì)產(chǎn)生大 量沉淀。 3.配制 按培養(yǎng)基配方把所列物質(zhì)稱量，逐一溶解后，混合，配成培養(yǎng)基。也可把部分 組份配成母液，使用較方便。 4.滅菌和消毒 菌種培養(yǎng)用的培養(yǎng)基應(yīng)連同培養(yǎng)容器用高壓蒸氣滅菌鍋滅菌。小型生產(chǎn) 性培養(yǎng)可把配好的

3、培養(yǎng)液用普通鋁鍋煮沸消毒。大型生產(chǎn)性培養(yǎng)則先把水用次氯酸鈉處理、 消毒，然后加入配方所列組份，溶解、混合。 三、接種 培養(yǎng)基配制好后，應(yīng)立即進(jìn)行接種。光合細(xì)菌生產(chǎn)性培養(yǎng)的接種量比較高， 一般為2050，即菌種母液量和新配培養(yǎng)量之比為1：4（20）1：1（50），且不 應(yīng)低于20，尤其微氣培養(yǎng)接種總量應(yīng)高些，否則，光合細(xì)菌在培養(yǎng)液中很難占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)。 四、培養(yǎng)管理 光合細(xì)菌的培養(yǎng)過(guò)程中，管理工作包括日常管理操作和測(cè)試、生長(zhǎng)情況 的觀察檢查和出現(xiàn)問(wèn)題的分析處理等三個(gè)方面。 1.日常管理和測(cè)試 （1）攪拌或充氣 光合細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中必須攪拌或充氣，其作用 是幫助沉淀的光合細(xì)菌上浮獲得光照，保持菌細(xì)胞的良

4、好生長(zhǎng)。小型厭氣培養(yǎng)常用人工搖動(dòng) 培養(yǎng)容器的方法使菌細(xì)胞上浮，可在接種前在培養(yǎng)容器中加入少量玻璃珠，搖動(dòng)時(shí)易于攪起 菌細(xì)胞。每天至少搖動(dòng)3次，定時(shí)進(jìn)行。也可使用磁力攪拌器攪拌，把錐形瓶或其他玻璃培 養(yǎng)容器放置在磁力攪拌器上，瓶?jī)?nèi)放磁力攪拌棒，連續(xù)攪拌或間隔定時(shí)攪拌，攪拌時(shí)控制轉(zhuǎn) 速以液面微起波紋而無(wú)旋渦為適度。大型厭氣培養(yǎng)則用機(jī)械攪拌器攪拌或使用小水泵使水緩 慢循環(huán)運(yùn)轉(zhuǎn)，保持菌體懸浮。 微氣培養(yǎng)是通過(guò)充氣幫助菌體上浮的，因?yàn)榕囵B(yǎng)液中溶解氧含量增加，光合細(xì)菌繁殖受 到抑制，產(chǎn)量下降，所以必須嚴(yán)格控制充氣量。一般采用定時(shí)斷續(xù)充氣，每小時(shí)每升水充氣 1升1.5升左右，溶解氧含量保持在1ppm以下。

5、（未完待續(xù)）光合細(xì)菌培養(yǎng)基一、生產(chǎn)條件1、 培養(yǎng)介質(zhì)：含菌量較低的清潔淡水。地下水（井水）含菌量低，為最佳水源；清潔的地表水（河水）也可使用；含氯量較高的自來(lái)水應(yīng)敞口放置一天；蒸餾水及純凈水固然很好，但成本太高。 選取水源時(shí)，最好先做幾種方便取用的水源的對(duì)比試驗(yàn)，使用哪里的水源在培養(yǎng)試驗(yàn)中最先變成紅色（生長(zhǎng)良好），就選用哪里的水作為生產(chǎn)用水。2、酸堿度：PH值在7.5-8.5為最好，光合細(xì)菌的適應(yīng)PH范圍在6-10之間。 3、溫度：以30-34為最適生長(zhǎng)溫度，其適應(yīng)的生長(zhǎng)溫度范圍為18-45,實(shí)際操作越接近最適溫度范圍越好。本公司產(chǎn)品配方中含有抑制高溫季節(jié)綠硫菌的產(chǎn)生，所以不懼高溫，也不會(huì)大量

6、產(chǎn)生綠硫菌。 4、光照強(qiáng)度：以3000-4000勒克斯（LX）為最佳，即每25公斤菌液需要用相當(dāng)于60瓦左右的白熾燈炮作光源，而太陽(yáng)光照為最好且不要成本。5、透氣性：密閉、敞口皆可培養(yǎng)，密閉但是留十分之一空氣效果更好。6、工具：筒狀塑料農(nóng)膜或透明玻璃池、敞口塑料容器（400升）、兩頭能接管的最小型自吸泵或水舀子、白幟燈炮、溫度計(jì)二、生產(chǎn)方法（以生產(chǎn)1噸光合細(xì)菌菌液為例）（一） 培養(yǎng)容器1、兩端開(kāi)口的長(zhǎng)筒狀透明塑料農(nóng)膜，盡量選擇厚一點(diǎn)的不破，盡量選擇幅度寬一點(diǎn)的，剪成10米長(zhǎng)一個(gè)備用2、透明玻璃連接而成的池子，類似于金魚(yú)池，但是要做薄（30厘米厚）以方便兩邊采光 （二） 生產(chǎn)過(guò)程1、第一次培養(yǎng)，

7、可以得到220公斤菌種（1）在陽(yáng)光充足的上午10點(diǎn)左右，先將準(zhǔn)備用水160公斤（有條件可以先將水加溫到30度，這樣培養(yǎng)的速度更快，菌液質(zhì)量更好。注意溫度不可過(guò)高破壞菌種）加入到敞口塑料容器（400升）內(nèi)，再加入培養(yǎng)基二袋，建議先用小容器少量水溶解培養(yǎng)基攪拌，慢慢加水慢慢溶解直至溶解完全，最后接種菌種60公斤攪拌均勻，可以按照上述比例相應(yīng)增加批次量。（2）選擇采光充足，地面平坦的地方（可以墊上編織袋及其它東西，以防地面溫度太低），將上述混合培養(yǎng)液灌入或用自吸泵直接抽入透明塑料農(nóng)膜內(nèi)，盡量排盡空氣，可以有少量小氣泡，兩端系緊。（3）玻璃池子可以直接配培養(yǎng)基和接種菌種，需攪拌均勻。（4）室外溫度適宜

8、情況下（30-34），將菌液直接置于陽(yáng)光充足的地方培養(yǎng)。溫度過(guò)低（氣溫低于25度），可用透明塑料薄膜搭建溫棚，采光增溫，仍達(dá)不到要求，應(yīng)采取其它增溫措施；溫度過(guò)高（氣溫高于40度），將菌液置于通風(fēng)的地方，仍過(guò)高，應(yīng)在桶周圍灑水降溫，或采取部分遮陽(yáng)（用黑色的遮陽(yáng)塑料網(wǎng)）。 （5）為了光合細(xì)菌更快繁殖，如方便請(qǐng)白天每隔3小時(shí)人工搖動(dòng)菌液一次，此方法是為了使下沉菌種上浮，更好接觸培養(yǎng)基加快繁殖，如不方便也可以不用，只是繁殖相對(duì)較慢。（6）本公司菌種紅螺菌特別對(duì)溫度要求很高，喜高溫，只要溫度達(dá)到（34度以上），即使有微弱光均可快速生長(zhǎng)。所以有條件特別是氣溫較低時(shí)盡量將水溫加熱到30度。（7）如連續(xù)晴天

9、或氣溫較高的陰天，3-4天后可培養(yǎng)成熟；若有下雨天或氣溫較低陰天，培養(yǎng)時(shí)間則相對(duì)延長(zhǎng)；連續(xù)有下雨天或氣溫較低陰天，應(yīng)采用60瓦的白幟燈炮懸于農(nóng)膜上方10厘米，每隔30厘米間距一個(gè)連續(xù)光照，縮短培養(yǎng)時(shí)間；也可以采用白天曬太陽(yáng)，晚上用白幟燈泡補(bǔ)光，縮短培養(yǎng)時(shí)間。2、第二次培養(yǎng)，可以生產(chǎn)1000公斤菌液（1）在陽(yáng)光充足的上午10點(diǎn)左右，先將準(zhǔn)備用水800公斤（有條件可以先將水加溫到30度，這樣培養(yǎng)的速度更快，菌液質(zhì)量更好，注意溫度不可過(guò)高破壞菌種）加入到敞口塑料容器內(nèi)，再加入培養(yǎng)基八袋，建議先用小容器少量水溶解培養(yǎng)基攪拌，慢慢加水慢慢溶解直至溶解完全，最后接種第一次培養(yǎng)成功的220公斤菌種攪拌均勻。

10、若配比容器較小，可以按照上述比例相應(yīng)減小批次量。（2）-（7）見(jiàn)第一次培養(yǎng)方法3、注意事項(xiàng)（1）盡量選擇在陽(yáng)光充足的上午10點(diǎn)開(kāi)始，因?yàn)榕囵B(yǎng)繁殖初期8小時(shí)對(duì)溫度和陽(yáng)光要求最高，是關(guān)鍵階段。（2）對(duì)水溫要求較高，特別第一次培養(yǎng)200公斤菌種盡量采用人工加熱，第二次培養(yǎng)數(shù)量較大，有條件可以加熱，沒(méi)有條件可以提前一天準(zhǔn)備用陽(yáng)光曬熱。可以采用加熱少量水高溫再兌至30度。三、培養(yǎng)過(guò)程中菌液可能出現(xiàn)的問(wèn)題及對(duì)策1、變淡原因：接種量過(guò)少，菌種老化、雜菌過(guò)多,PH值過(guò)低或過(guò)高,光照不足，溫度過(guò)低或過(guò)高，水的硬度過(guò)高。對(duì)策：調(diào)節(jié)至正常狀態(tài)。2、變黑原因：氣溫較高的季節(jié)，剛培養(yǎng)好的菌液因長(zhǎng)時(shí)間失去光照。對(duì)策：施以

11、光照。3、變綠原因：可能是菌液中綠硫菌大量繁殖，多見(jiàn)于高溫季節(jié)。對(duì)策：連續(xù)多次密閉培養(yǎng)，或更換菌種和水源。4、變灰原因：接種量少，菌種不純，光照不足，PH值過(guò)低。對(duì)策：選用優(yōu)質(zhì)菌種，按要求接種，增強(qiáng)光照，調(diào)適PH值。益瑞光合微生物菌肥是由青島普瑞生物制品有限公司生產(chǎn)的一種新型微生物肥料，目前已獲得國(guó)家農(nóng)業(yè)部審批，登記證號(hào)為“微生物肥（2007）臨字（0630）號(hào)”。該技術(shù)為我公司自有技術(shù)，由山西大學(xué)張肇銘教授主持研究，經(jīng)科技成果鑒定已達(dá)到國(guó)際領(lǐng)先水平。該項(xiàng)目先后申報(bào)并獲授權(quán)8項(xiàng)國(guó)家專利，榮獲北京國(guó)際發(fā)明展覽會(huì)金獎(jiǎng)，系國(guó)家級(jí)星火項(xiàng)目計(jì)劃、國(guó)家科技攻關(guān)計(jì)劃和山西省重點(diǎn)科技成果推廣項(xiàng)目。該菌肥是利用

12、光合細(xì)菌的獨(dú)特生理學(xué)特性，采用多株光合細(xì)菌菌種而發(fā)酵生產(chǎn)的一種高效活性硒微生物菌劑。首先，它富含生物硒，經(jīng)光合微生物轉(zhuǎn)化的生物有機(jī)硒，易被植物體吸收，可生產(chǎn)出富硒食品；其次，它富含植物生長(zhǎng)所必須的多種營(yíng)養(yǎng)元素、維生素、生長(zhǎng)刺激因子及多種調(diào)節(jié)植物新陳代謝的活性物質(zhì)和微量元素，是一種新型高效的微生物肥料；再次，施用該菌肥可有效降解植物體內(nèi)的農(nóng)藥殘留和重金屬污染，為我們提供健康的綠色有機(jī)蔬菜。 同時(shí)，試驗(yàn)證明對(duì)部分病蟲(chóng)害如根線蟲(chóng)、霜霉病等具有抑制作用。因此，該微生物菌肥和其它種類的肥料相比，具有多種綜合效應(yīng)和獨(dú)特功效。該菌肥適用于糧食、蔬菜、果木、花木、茶桑等作物，由于其獨(dú)特的生理學(xué)特性，該菌肥可針對(duì)不同類型的作物采用不同的施用方法，可將其稀釋后進(jìn)行浸種、拌種、灌根和葉面噴施。施用本菌肥，可生產(chǎn)出具有抗癌保健功效的富硒農(nóng)產(chǎn)品；可大幅提高產(chǎn)量（10% 40%）；促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)換，提高產(chǎn)品品質(zhì)（果形美、色澤鮮、口感好、各種營(yíng)養(yǎng)成分增加）；作為種肥施入土壤，可改善