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文檔簡介
1、名詞解釋1半不連續復制:在生物中普遍存在的這種前導鏈的連續復制和滯后鏈的不連續復制方式,稱為DNA合成的半不連續性復制2反轉錄:以RNA為模板,按照RNA中的核苷酸順序合成DNA,也稱為逆轉錄,由逆轉錄酶催化進行。3遺傳密碼:核酸中的核苷酸殘基序列與蛋白質中的氨基酸殘基序列之間的對應關系。連續的3個核苷酸殘基序列為一個密碼子,特指一個氨基酸4岡崎片段在DNA復制過程中,后隨鏈合成是不連續的,即先按5-3方向(與復制叉移動方向相反)合成若干片段,即為岡崎片段。5前導鏈::與復制叉移動的方向一致,通過連續的5-3聚合合成的新的DNA鏈6 cDNA::互補DNA8 intron 內含子:真核生物的斷
2、裂基因中的非編碼序列稱為內含子。其轉錄產生的RNA片段在RNA的修飾過程中被剪切掉。9起始子(initiator):II類啟動子在轉錄起始部位周圍有一段保守序列10 Operon操縱子:原核生物中,功能相關的基因通常一起被調控,這些被協同調控的基因組織起來的結構叫做操縱子11多順反子mRNA:操縱子上所有基因被RNA聚合酶轉錄成的一條長鏈mRNA12exon外顯子 在斷裂基因及其初級轉錄產物中出現,并表達為成熟RNA的核苷酸序列13斷裂基因 由若干內含子和外顯子互相隔開,但又連續鑲嵌的基因14 Cistron順反子:遺傳學中,編碼一個多肽的遺傳單位。15 Polycistron多順反子:原核細
3、胞中數個結構基因常串聯為一個轉錄單位,轉錄生成的mRNA可編碼幾種功能相關的蛋白質。16 Single cistron單順反子:真核mRNA只編碼一種蛋白質17 Enhancer增強子:,能強化轉錄起始的序列的為增強子或強化子18 Silencer:沉默子,可降低基因啟動子轉錄活性的一段DNA順式元件。與增強子作用相反19 基因(gene):是指攜帶有遺傳信息的DNA或RNA序列,也稱為遺傳因子,是控制性狀的基本遺傳單位20編碼區(coding regions),開放閱讀框(open reading frame,ORF):可以翻譯成蛋白質的DNA區域;在真核細胞中,編碼區可被內含子隔斷21非編
4、碼區(internal noncoding regions),非翻譯區(untranslated regions,UTRs):轉錄單位中不能翻譯成蛋白質的部分22基因座(locus):又稱座位。基因在染色體上所占的位置。在分子水平上,是有遺傳效應的DNA序列23基因組(genome):生物機體一個細胞所有不同染色體上全部的DNA總和稱為基因組24基因轉移(gene transfer):外源的遺傳信息進入一個細胞的現象25轉化(transformation):細胞從周圍介質中吸收裸露的DNA,而獲得新的遺傳表型26轉導(transduction):通過病毒介導發生在供體細胞與受體細胞之間的DNA
5、轉移及基因重組27轉座子(transposon):在基因組中可以移動的一段DNA序列28轉座(transposition):由插入序列和轉座子介導的基因轉移或重排29 SD序列:原核生物蛋白質合成中,一種標明起始密碼子的AUG的保守序列,標明了哪一個AUG應該作為起始密碼子30 polymerase chain reaction (PCR):聚合酶鏈式反應,是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性(9297)、低溫退火(4555復性)及適溫延伸(72、Taq酶)等幾步反應組成一個周期,循環進行,使目的DNA得以迅速擴增31核糖體循環(ribosomal cycle):肽鏈延長在核糖體
6、上連續性循環式進行,又稱為核糖體循環(ribosomal cycle),包括進位、成肽、轉位33端粒酶:由蛋白質和 RNA 兩部分組成,是一種特殊的反轉錄酶34 啟動子promoter:基因序列上一段不編碼但可以標記基因起始位置的區域,召集RNA聚合酶進而進行轉錄35模板鏈(template strand): 指 DNA分子中可轉錄成 RNA的一股鏈。36編碼鏈(coding strand):指與模板鏈互補的一股鏈。其與產物 RNA的關系:用T代替RNA分子中U外,其余都相同判斷選擇1. 原核生物轉錄終止時一定要因子參與。× 內在型終止 依賴型終止2. RNA的轉錄合成和DNA合成一
7、樣,在起始合成前變需要有RNA引物參加。×3真核生物的5端帽子結構是在轉錄完之后加上去。4在蛋白質生物合成過程mRNA是由3端向5端進行翻譯的-× 5-35一般講,從DNA的三聯體密碼子可以推定氨基酸的順序,相反從氨基酸的順序也可以推定DNA的順序-× 擺動性6下面哪一個在復制叉前除去緊纏的正超螺旋?A.解螺旋酶B.引物酶C.旋轉酶D.、DNA連接酶7大腸桿菌有三種DNA聚合酶,其中參與DNA損傷修復的是A.DNA聚合酶IB.DNA聚合酶IIC.DNA聚合酶III8下列關于遺傳密碼的描述哪一項是錯誤的A.密碼閱讀有方向性,從5端開始,3端比終止B.密碼第3位(即3
8、端)堿基與反密碼子的第1位確堿基配對具有一定自由度,有時會出現多對一情況 擺動性C一種氨基酸只能有一種密碼子D.一種密碼子只代表一種氨基酸9 DNA指導的RNA聚合酶由數個亞基組成,其核心酶的組成是A2B. 2C. D. 10.1958年Meselson和Stahl利用¹5N標記大腸桿菌DNA的實驗首先證明了下列哪一種機制?ADNA能被復制B.DNA的基因可以被轉錄為mRNAC.DNA半保留復制機制D。DNA全保留復制機制11原核細胞中新生肽鏈的N-末端氨基酸是A甲硫氨酸B.蛋氨酸C.甲酰甲硫氨酸D.任何氨基酸12下列參與原核生物的肽鏈延伸的因子是A.IF-1B.IF-2C.RF-1
9、D.EF-Ts13which group of codes stands for Stop Codons?哪一組是終止密碼子。A.UCC,UCA,UACB.UAA,UCA,UAC,C. UGG,UAG,UGAD.UAA,UAG,UGA14依賴于DNA的RNA聚合酶所催化的反應需要下列哪組物質存在:A.NTP+,Mg² B.dNTP,DNA, Mg²C. NTP,DNA, Mg²D.RNA,DNA,NTP15關于岡崎片段的敘述哪一個是正確的A是由DNA聚合酶I催化合成的B.合成方向是5-3C.其合成的方向與復制叉移動的方向相同D.其合成方向是3-516下列何處是氨酰
10、tRNA的結合部位?A.核蛋白質小亞基B.核蛋白質的P位C.核蛋白質的A位D.核蛋白質的D位17不參與蛋白質生物合成的物質是:A.mRNAB.rRNAC.tRNAD.內含子填空1. 大腸桿菌RNA聚合酶由_亞基組成,核酶是由_2_亞基組成。2.終止密碼子的堿基順序是_UAA,UAG,UGA_,起始密碼子的堿基順序是_AUG_3.在大腸桿菌DNA合成中的DNA聚合酶_可在RNA引物的3-OH端聚合脫氧核苷酸,而RNA引物的消除和缺口填補是由_DNA聚合酶_來完成的。4.生物得以保持性狀代代相傳依賴于DNA的半保留復制。5.PCR是DNA離體復制的有效技術,代表的中文意思是_ 聚合酶鏈式反應_問答
11、題1 SDS-PAGE電泳的原理(不做重點)SDS-PAGE是利用SDS(帶負電)和還原劑破壞蛋白的高級結構, 同時SDS與蛋白定量結合, 消除蛋白之間的電荷差異,使得蛋白的遷移率主要依賴分子量 (分子小跑得快) ,加上不連續電泳,即上層為濃縮膠,可將樣品壓縮到同一起跑線, 下層為分離膠; 可獲得更高的分辨率.再用考馬斯亮藍進行染色.即可進行蛋白分子量的測定、蛋白濃度的測定、蛋白的鑒定。2超速離心原理:蛋白質在高達50萬g的重力作用下,在溶液中逐漸沉降,直至其浮力與離心所產生的力相等,此時沉降停止。不同蛋白質其密度與形態各不相同,因此用上述方法可以將它們分開。3層析(chromatograph
12、y)原理:待分離蛋白質溶液(流動相)經過一個固態物質(固定相)時,根據溶液中待分離的蛋白質顆粒大小、電核多少及親和力等,使待分離的蛋白質組分在兩相中反復分配,并以不同的速度流經固定相而達到分離蛋白質的目的。4 PCR擴增特異性(不做重點背)引物設計的特異性,使引物能和模版上的特定片段配對,在最優條件下特異擴增。退火溫度的不合適,也會出現非特異條帶(假陽性)。5 DNA 復制的意義: 1子代保留了親代DNA的全部信息; 2 DNA通過復制和基因表達決定生物特性;3體現了遺傳過程的相對保守性;保守性是相對的,不能忽視其變異性6真核與原核生物復制的主要區別(重點)真核生物原核生物起始點多點單點速度慢
13、快引物大小短(約十個核苷酸)長(約數十個核苷酸)岡崎片段少多酶DNA聚合酶-DNA聚合酶-III主要復制酶端粒酶有無發生一次復制、細胞周期S期ARS自主復制序列多重復復制同時進行大腸桿菌的Oric起始點7 TATA box的功能:(不做重點背) 選擇正確的轉錄起始位點; 影響轉錄效率; 與TATA盒結合蛋白(TATA box binding protein, TBP)形成復合物,再與其它因子結合。對于無TATA盒的基因,TBP則與其它啟動子元件結合8 DNA復制與RNA轉錄的比較 重點背復制轉錄模板兩股鏈模板鏈(反義鏈)原料dNTPNTP配對A-T G-CA-U G-C聚合酶DNA聚合酶RNA
14、聚合酶產物半保留DNA三種RNA引物有無9乳糖操縱子的作用機制乳糖操縱子中有三種乳糖代謝基因,控制代謝和合成蛋白質,細胞中沒有乳糖時,lac阻遏蛋白結合到操縱子操縱基因上,防止lac基因的轉錄,為負調控。乳糖存在時,它會與lac阻遏蛋白結合,使lac不能與DNA結合,就給了lac基因表達的空間,為別構調控CAP在葡萄糖水平低的情況下,與高濃度的cAMP結合,這時如果lac阻遏蛋白不存在,就強烈激活lac基因表達,在高葡萄糖濃度下,cAMP濃度低,CAP不能結合到DNA上,基因不能表達,為正調控10遺傳密碼及其特性 重點背遺傳密碼:mRNA分子上從5¢至3¢方向,由AUG開始
15、,每3個核苷酸為一組,決定肽鏈上某一個氨基酸或蛋白質合成的起始、終止信號,稱為遺傳密碼特性:連續性:編碼蛋白質氨基酸序列的各個三聯體密碼連續閱讀,密碼間既無間斷也無交叉簡并性:遺傳密碼中,某些氨基酸具有兩個或兩個以上的密碼子通用性:蛋白質生物合成的整套密碼,從原核生物到人類都通用,已發生少數例外擺動性:mRNA密碼子和tRNA的反密碼子堿基配對是嚴格的,但反密碼與密碼間不嚴格遵守常見的堿基配對規律,稱為擺動配對11原核生物與真核生物mRNA的異同 原核生物以多順反子的形式存在,真核生物一般以單順反子的形式存在原核生物mRNA轉錄、翻譯一般是偶聯的,真核生物轉錄的mRNA前體要經轉錄后加工,并與
16、蛋白質結合生成信息體后才開始工作原核生物mRNA半壽期很短,一般為幾分鐘,最長為數小時,真核生物半壽期較長原核生物mRNA一般5端有一段不翻譯區,稱前導序列,一般編碼幾種蛋白質,真核mRNA一般有5端帽子結構,5端不翻譯區,3端不翻譯區和3端聚A尾巴,構成分子除m7G構成帽子外,常含有其他修飾核苷酸,如m6A等,通常都有翻譯的前體,從DNA轉錄產生的原始產物可稱作原始前體12 原核生物轉錄與真核生物轉錄的異同點相同點:原核生物與真核生物轉錄共同的特點:都分為分為起始、延伸、終止三個過程;都有啟動子、終止子或終止信號、調控序列;所需原料都有聚合酶、等不同點: 真核生物轉錄起始,延伸, 終止都需要
17、因子的幫助 原核的啟動子為-10box和-35box,真核為TATAbox。 真核生物要進行5加帽 (轉錄早期進行30 nt) 、 3加尾 (前體mRNA加polyA) 、切除內含子 、 編輯和修飾。 原核生物mRNA, tRNA, rRNA 都 由同一種RNA聚合酶轉錄而真核是三種不同的酶。 原核生物轉錄終止是依靠終止子(發夾結構),真核生物是依賴轉錄信號(AAU、AAG)13原核生物與真核生物翻譯的異同點共同點: 都分三步進行,即翻譯的起始、肽鏈的延伸、肽鏈的終止及釋放 遺傳密碼相同不同點: 翻譯起始核糖體識別序列原核是序列且有多個,真核是先通過5Cap序列上的帽結合蛋白,找到mRNA,再
18、通過Kozak序列找到翻譯起始AUG進入P位。 原核是轉錄與翻譯相耦聯,故翻譯也在細胞核內,而真核翻譯在細胞核外。 原核翻譯起始tRNA為fMet-tRNAfMet ,真核為Met-tRNAMet。 真核翻譯有復雜的后加工系統,如糖基化、磷酸化-去磷酸化等,原核無。14原核生物與真核生物復制的異同點共同點:分為起始、延伸、終止三個過程;必須有提供3羥基末端的引物;親代DNA分子為模板,四種脫氧三磷酸核苷(dNTP)為底物,多種酶及蛋白質 :DNA拓撲異構酶、DNA解鏈酶、單鏈結合蛋白、引物酶、 DNA聚合酶、RNA酶以及DNA連接酶等;一般都為半保留復制、半不連續復制。不同點:真核生物為線性D
19、NA,具有多個復制起始位點,形成多個復制叉,DNA聚合酶的移動速度較原核生物慢。原核生物一般為環形DNA,具有單一復制起始位點。真核生物DNA復制只發生在細胞周期的S期,一次復制開始后在完成前不再進行復制,原核生物多重復制同時進行。真核生物有多個復制子大小不一且并不同步。原核生物只有一個復制子。真核生物有五種DNA聚合酶,需要Mg+。主要復制酶為DNA聚合酶(),引物由DNA聚合酶合成。原核生物只有三種,主要復制酶為DNA聚合酶III。真核生物末端靠端粒酶(部分細胞)補齊,而原核生物以多聯體的形式補齊。真核生物岡崎片段間的RNA引物由核酸外切酶MF1去除,而原核生物引物由DNA聚合酶I去除。15原核生物與真核生物基因表達調控的異同點相同點:表達為多層次不同點: 原核是以操縱子進行轉錄的調控,真核是受單基因控制。 原核生物調控在2個水平(轉錄水平的調控、翻譯水平的調控),真核在五個水平(DNA水平的調控、轉錄水平的調控、轉錄后水平的調控、翻譯水平的調控、翻譯后水平的調控)進行基因表達調控。 真核生物中有選擇性剪接,原核沒有。 原核的基因表達主要受環境等調控,真核是受激素等調控16 PCR與細胞內DNA復制的異同相同點:原料都是四種脫氧核苷酸、模板、都需要引物、都是單鏈DNA,都遵循堿基互補配對原則不同點:PCR技術 DNA生物復制
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