1、項目內容要求考點1.植物組織培養技術2.dna和蛋白質技術3.植物有效成分的提取重難點植物組織培養技術和dna及蛋白質技術年份及考卷考點2010年全國新課標2008年寧夏卷植物有效成分的提取2010年安徽、2009年山東、2006年廣東植物組織培養2010、2009年江蘇、2005年廣東高考題dna和蛋白質技術 1(2010浙江理綜，6)將無根的非洲菊幼苗轉入無植物激素的培養基中，在適宜的溫度和光照等條件下培養一段時間后，應出現的現象是() 答案b 解析本題考查激素對植物生根、發芽、形成愈傷組織的作用。細胞分裂素促進細胞分裂，誘導芽的分化；生長素可以促進不定根、側根的形成；此題中雖然培養基中沒

2、有植物激素，但是植物幼苗葉片本身可以產生生長素，而細胞分裂素的產生部位在根尖，所以細胞分裂素不能產生，因此植物能夠在一段時間后長出少量的根而沒有出芽，答案為b。 2(2010全國新課標，37)下列是與芳香油提取相關的問題，請回答： (1)玫瑰精油適合用水蒸氣餾法提取，其理由是玫瑰精油具有_的性質。蒸餾時收集的蒸餾液_(是、不是)純的玫瑰精油，原因是_。 (2)當蒸餾瓶中的水和原料量一定時，蒸餾過程中，影響精油提取量的主要因素有蒸餾時間和_。當原料量等其他條件一定時，提取量隨蒸餾時間的變化趨勢是 _。 (3)如果蒸餾過程中不進行冷卻，則精油提取量會_，原因是_。 (4)密封不嚴的瓶裝玫瑰精油保存

3、時最好存放在溫度_的地方，目的是_。 (5)某植物花中精油的相對含量隨花的不同生長發育時期變化趨勢如圖所示。提取精油時采摘花的最合適時間為_天左右。 (6)從薄荷葉中提取薄荷油時_(能、不能)采用從玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是 _。 答案(1)易揮發、難溶于水、化學性質穩定不是玫瑰精油隨水蒸汽一起蒸餾出來，所得到的是油水混合物。 (2)蒸餾溫度在一定時間內提取量隨蒸餾時間的延長而增加，一定時間后，提取量不再增加 (3)下降部分精油隨水蒸汽揮發而流失 (4)較低減少揮發(5)a(6)能薄荷油與玫瑰精油的化學性質相似 解析本題主要是考查芳香類植物精油的化學特性、提取過程。內容較為基礎，主要是

4、圍繞著玫瑰精油的化學特性而考查，由于此精油易揮發，難溶于水，化學性質穩定，因此可以用高溫水蒸餾法提取，冷卻后必然含有水；蒸餾的提取效果與蒸餾的溫度與蒸餾的時間有關，隨著蒸餾時間的延長，原料中含的精油減少，提取的量也會減少直至再也提不出精油。蒸餾過程，如果不冷卻，提取后的混合液溫度較高，由于精油易揮發，其中的含量會降低；同樣保存時，環境溫度應較低為好，防止精油揮發；第(5)小題為信息題，主要考查學生的讀圖、識圖及圖文轉化能力，根據圖象可知，玫瑰精油在蓓蕾期，開放期前的含量較高，應在此時采收；由于薄荷精油與玫瑰精油的化學性質相似，可以采用相同的提取方法。要點歸納1原理(1)植物細胞全能性的概念：高

5、度分化的植物細胞，仍然具有發育成完整植株的潛能。(2)高度分化的植物細胞全能性表達的條件離體條件；無菌操作(防止雜菌污染)；適宜物質的誘導和調節(激素主要是生長素、細胞分裂素等)；種類齊全、比例適合的營養物質；溫度、酸堿度、光照等條件的控制。 2基本過程 3影響植物培養的因素 (1)外植體的選取 不同植物的組織培養難度不同。 對于同一種植物材料，材料的年齡，保存時間的長短等也會影響實驗結果。生長旺盛的嫩枝生理狀況好，容易誘導脫分化和再分化。 (2)培養基的配制(ms培養基) 大量元素：c、h、o、n、p、k、ca、mg、s。 微量元素：b、mn、cu、zn、fe、mo、i、co。 有機物：甘氨

6、酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。 ph、溫度、光照 不同的植物對各種條件的要求往往不同。菊花適宜條件：ph在5.8左右；溫度控制在1822；每日日光燈光照12h。 典例導悟 1如圖為科學家將胡蘿卜韌皮部的細胞培養形成胡蘿卜植株的過程示意圖(注：胚狀體即等同于植物種子的胚的結構)。 請據圖完成下列問題： (1)由細胞團形成胚狀體要經過_過程。 (2)這種培養方法在生物技術中稱為_培養。 (3)培養基中除了需要水分和有機營養物質外，還需要加入_和_。培養過程必要的外界條件是適宜的溫度、_和_等。 (4)由胡蘿卜韌皮部細胞培養成完整的胡蘿卜植株證明了 _， 解析植物組織培養的理論基礎是細胞的全能性；

7、由細胞團發育成植物幼苗需經細胞分裂和細胞分化兩個過程；植物組織培養所用的培養基中應含有植物生長發育所需的各種營養物質，為誘導根或芽的分化還應加入生長素、細胞分裂素兩種植物激素，并保證適宜的外界環境。 答案(1)細胞分裂和細胞分化(2)組織(3)礦質元素生長調節類(激素)物質光照、氧氣無菌(4)植物細胞具有全能性 月季花藥培養時的花粉粒最好是() a四分體時期b單核居中期 c單核靠邊期 d二核或三核花粉粒 答案c 解析花粉發育過程中，只有某一個時期對離體刺激敏感。一般來說，在單核期細胞核由中央移向細胞一側的時期，花藥培養成功率最高。 要點歸納 一、dna的粗提取和鑒定 1基本原理 (1)dna在

8、不同濃度的nacl溶液中的溶解度不同，在0.14 mol/l的nacl溶液中的溶解度最低； (2)dna不溶于酒精溶液； (3)dna不被蛋白酶所水解； (4)dna可被二苯胺染成藍色。 2方法目的方法目的溶于nacl溶液中并稀釋nacl濃度為2mol/l時，dna溶解，而部分蛋白質發生鹽析而生成沉淀，通過過濾可除去部分蛋白質及不溶于nacl溶液的雜質當nacl溶液稀釋至0.14 mol/l時，dna析出，過濾可除去溶于nacl中的部分蛋白質和其他雜質加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白質加入冷卻酒精(95%)dna析出，除去溶于酒精的蛋白質 二、多聚酶鏈式反應擴增dna片段 細胞內dna

9、復制與pcr技術的比較細胞內dna復制pcr不同點解旋在解旋酶作用下邊解旋邊復制80100高溫解旋，雙鏈完全分開酶dna解旋酶、dna聚合酶taq dna聚合酶引物rnadna或rna溫度體內溫和條件高溫相同點需提供dna復制的模板四種脫氧核苷酸作原料子鏈延伸的方向都是從5端到3端 三、血紅蛋白的提取和分離 1方法及原理方法原理凝膠色譜法根據相對分子質量的大小分離蛋白質電泳法各種分子帶電性質的差異以及分子本身大小、形狀的不同 2.實驗操作程序 (1)樣品處理 紅細胞的洗滌：除去血漿蛋白等雜質，有利于后續步驟的分離純化； 血紅蛋白的釋放：使紅細胞漲破，血紅蛋白釋放出來； 分離血紅蛋白溶液：經過離

10、心使血紅蛋白和其他雜質分離開來，便于下一步對血紅蛋白的轉化。 (2)粗分離透析：除去樣品中分子量較小的雜質。 (3)純化：一般采用凝膠色譜法對血紅蛋白進行分離和純化。 (4)純度鑒定：一般用sds聚丙烯酰胺凝膠電泳方法，來測定蛋白質的分子量，即對血紅蛋白進行純度鑒定。 感悟拓展 1dna的粗提取實驗 哺乳動物成熟的紅細胞中不含細胞核，也沒有dna，不適于作dna提取的材料，但卻是提取血紅蛋白的理想材料。實驗過程中兩次用于蒸餾水，第一次目的是使成熟的雞血紅細胞漲破釋放出dna，第二次目的是稀釋nacl溶液。 2pcr技術反應過程中控制不同溫度的意義 (1)90以上時變性，雙鏈dna解聚為單鏈；

11、(2)50左右時復制，引物與兩條單鏈dna結合； (3)72左右時延伸，taq dna聚合酶有最大活性，使dna新鏈由5端向3端延伸。 典例導悟 2一個由32p標記的dna分子，放在未標記的環境中培養，復制5次后標記的dna分子占dna分子總數的 () a1/10 b1/16 c1/25 d1/32 解析一個dna分子n次復制后產生的dna數目為2n，而dna復制是半保留復制，其特點是：新形成的dna雙鏈一條是來自親代的dna分子的母鏈，另一條是新形成的子鏈。這樣最初由32p標記的dna分子復制后，其標記的兩條鏈就分別進入兩個子代dna分子中，即兩個子代dna分子被標記了。然而由于是在未標記的

12、環境中培養，不論多少次復制，只有最初標記過的兩條鏈存在的兩個dna分子中含32p，這樣經n次復制，標記的dna分子占2/2n，即1/2n1，所以本題應選b。 答案b在血紅蛋白的整個提取過程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是()a防止血紅蛋白被o2氧化b血紅蛋白是一種堿性物質，需要酸中和c磷酸緩沖液會加速血紅蛋白的提取過程d讓血紅蛋白處在穩定的ph范圍內，維持其結構和功能答案d解析利用磷酸緩沖液模擬細胞內的ph環境，保證血紅蛋白的正常結構和功能，便于分離觀察(紅色)和科學研究(活性)。 要點歸納 典例導悟 3玫瑰精油被稱為“液體黃金”，其提取方法可用 () a只能用水蒸氣蒸餾法 b可用蒸餾法和壓榨

13、法 c可用蒸餾法和萃取法 d可用壓榨法和萃取法 解析用玫瑰花提取精油，根據玫瑰花的干濕情況可采用不同的提取方法，鮮玫瑰花可采用水蒸氣蒸餾法，干玫瑰花可使用有機溶劑萃取法，一般不采用壓榨法。 答案c 胡蘿卜素鑒定過程中，判斷標準樣品點與萃取樣品點的依據是() a顏色不一樣 b大小不一樣 c形狀不一樣 d層析后的色素點數不一樣 答案d 解析標準樣品為單一色素，層析后只有單一樣點，而萃取樣品不純，含有多種色素，會有多個色素點。 命題熱點1關于實驗考查 【例1】關于dna的粗提取與鑒定實驗材料的選擇，也經過了多次實驗效果的比較，最終選擇雞血作實驗材料。請據圖回答問題。 (1)雞血細胞中紅細胞_，家雞屬

14、于鳥類，新陳代謝旺盛，因而血液中_細胞數目較多，可以提供豐富的_。 (2)實驗前由老師選取血細胞液供同學們作實驗材料，而不用雞全血，主要原因是 _。 (3)在牧區采集牛、羊和馬血比較方便，若用這些材料按實驗要求完成實驗步驟后，結果是 _。 這是因為這些動物和人類一樣_，但若改用動物肝臟作實驗材料，實驗結果明顯。這是因為 _ (4)若選用動物肝臟作實驗材料，在提取之前，最好增加_程序，使組織、細胞更易分離。 答案(1)含細胞核紅dna (2)雞血細胞中dna相對含量高 (3)很難提取到dna成熟的紅細胞中無細胞核肝細胞中有細胞核(4)研磨 解析(1)雞血細胞中含有成形的完整的細胞核，而且紅細胞數

15、量比較多，因而dna含量也豐富。(2)雞的全血包括血漿和血細胞，血漿中無dna，全血中除去血漿后即是濃縮的血細胞液，dna的相對含量提高了。(3)哺乳動物成熟的紅細胞中無細胞核，僅靠白細胞和淋巴細胞在實驗中很難提取到dna，但肝細胞含有細胞核，并且肝組織易破壞，有利于dna的提取；(4)若使肝組織分離，將肝組織剪碎、研磨是一種簡便易行的方法。 1(2010江蘇高考，32)某生物興趣小組開展dna粗提取的相關探究活動，具體步驟如下： 材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份10 g。剪碎后分成兩組，一組置于20、另一組置于20條件下保存24 h。 dna粗提取： 第一步：將上述材料分別放

16、入研缽上，各加入15 ml研磨液，充分研磨。用兩層紗布過濾，取濾液備用。 第二步：先向6只小燒杯中分別注入10 ml濾液，再加入20 ml體積分數為95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。 第三步：取6支試管，分別加入等量的2 mol/l nacl溶液溶解上述絮狀物。 dna檢測：在上述試管中各加入4 ml二苯胺試劑，混合均勻后，置于沸水中加熱5 min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺，結果如下表。 (注：“”越多表示藍色越深)材料保存溫度花菜辣椒蒜黃2020 分析上述實驗過程，回答下列問題：(1)該探究性實驗課題名稱是：_。(2)第二步中“緩緩地”攪拌，

17、這是為了減少_。(3)根據實驗結果，得出結論并分析。結論1：與20相比，相同實驗材料在20條件下保存，dna的提取量較多。結論2：_。針對結論1，請提出合理的解釋：_。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白質變性沉淀，與水和dna均不相溶，且對dna影響極小。為了進一步提高dna純度，依據氯仿的特性，在dna粗提取第三步的基礎上繼續操作的步驟是：_，然后用體積分數為95%的冷酒精溶液使dna析出。 答案(1)探究不同材料和不同保存溫度對dna提取量的影響 (2)dna斷裂 (3)等質量的不同實驗材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃提取的dna量最多 低溫抑制了相關酶的活性，dna降解速度慢 (4)將第三步

18、獲得的溶液與等量的氯仿充分混和，靜置一段時間，吸取上清液 解析(1)題目給出了多種實驗材料，以探究不同保存溫度對dna提取量的不同影響，因此該實驗名稱可為“探究不同實驗材料和不同保存溫度對dna提取量的影響” (2)在提取dna時，玻璃棒沿一個方向緩慢攪拌，是為了有效提取dna，防止dna分子斷裂。 (3)由表格可見，花菜、辣椒、蒜黃三種不同的實驗材料在20時，dna提取量表現為蒜黃多于花菜，花菜多于辣椒，在20結果相同，等質量的不同實驗材料，在同一溫度下dna提取量不同(或從蒜黃提取的dna量最多)；低溫下由于dna水解酶的活性減弱，導致dna降解速度慢，從而dna提取量相對較高。 (4)由

19、于氯仿可使蛋白質變性沉淀，而dna易溶解于其中，對dna結構無影響，因此可將第三步獲得的綠葉與等量氯仿混合，靜置一段時間，蛋白質變性沉淀，而dna溶解于上清液中，從而可吸取上清液，從上清液中提取dna。 2(2010全國，34)下列是與微生物培養有關的問題，請回答： (1)某細菌固體培養基的組成成分是kh2po4、na2hpo4、mgso4、葡萄糖、尿素、瓊脂和蒸餾水，其中凝固劑是_，碳源是_，氮源是_。已知只有能合成脲酶的細菌才能在該培養基上生長，故該培養基屬于_培養基。按照化學成分分類，該培養基屬于_培養基。從同化作用類型看，用該培養基培養的細菌屬于_。 (2)將少量細菌接種到一定體積的液

20、體培養基中，適宜條件下培養，定時取樣測定菌體數目，以時間為橫坐標，以菌體數目的對數為縱坐標，可以得到細菌的_曲線。該曲線中以菌體數目的對數作為縱坐標的原因是 _。 實驗室中，為了獲得形態和生理特征一致的菌體，一般應在_期取材；在生產中，常收集培養至_期的細菌用于次級代謝產物的提取。 答案(1)瓊脂葡萄糖尿素選擇合成異養型 (2)生長培養中的細菌以指數形式增殖，取對數便于反映細菌群體的生長規律(其他合理答案也給分)對數穩定 解析本題考查了培養基的配制、微生物培養及生長規律。培養基提供微生物生長、繁殖、代謝的混合養料。由于微生物具有不同的營養類型，對營養物質的要求也各不相同，加之實驗和研究的目的不

21、同，所以培養基的種類很多，使用的原料也各有差異，但從營養角度分析，培養基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無機鹽、生長因子以及水分等。另外，培養基還應具有適宜的ph值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原性及合適的滲透壓。瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質，是應用最廣的凝固劑。本題中的培養基能培養特定的生物，為人工合成，應屬于選擇性培養基，加入了葡萄糖作為能源物質，說明該細菌為異養型；以時間為橫坐標，以活菌數的對數為縱坐標，可得出一條生長曲線，曲線顯示了細菌的生長繁殖的4個時期：調整期、對數期、穩定期、衰亡期，“說明微生物生長曲線以菌體數目的對數作為縱坐標的原因”，如果平時只是死記住了課本上的圖解，不明白繪圖的思維過程及方法，這道題答起來就會很困難。細菌呈現指數增長，取它對數，這樣可以把曲線壓縮在一個相對小的面積內，便于觀察變化趨勢，若直接以數量為縱坐標，則因數據