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文檔簡介

A13,精液檢查標準操作規程A14,前列腺液檢查標準操作規程A15,陰道分泌物檢

查標準操作規程A16,胃液檢查標準操作規程B,生化室B1,血氨測定標準操作規

程…

規程

騎大象的螞蟻整理編輯

一、檢驗科檢測項目標準操作規程(見附錄)

A、臨檢室

A1、血常規檢驗標準操作規程

A2、嗜酸性粒細胞直接計數標準操作規程

A3、紅細胞沉降率測定標準操作規程

A4、血型鑒定標準操作規程

A5、尿常規標準操作規程

A6、一小時尿沉渣計數標準操作規程

A7、尿乳糜定性檢查標準操作規程

A8、大便常規標準操作規程

A9、蟲卵及包囊濃縮檢查標準操作規程

A10、隱血試驗標準操作規程

All、腦脊液檢驗標準操作規程

A12、漿膜腔積液檢查標準操作規程

A13、精液檢查標準操作規程

A14、前列腺液檢查標準操作規程

A15、陰道分泌物檢查標準操作規程

A16、胃液檢查標準操作規程

B、生化室

B1、血氨測定標準操作規程

B2、17-KS測定標準操作規程

B3、17-0H測定標準操作規程

B4、VMA標準操作規程

B5^InsulinAutoantibadies(IAA)胰島素自身抗體標準操作規程

B6^IsletCellAutoantibodies(ICA)胰島細胞自身抗體標準操作規程

B7、脯氨酸肽醯測定(ProlidaseTestKit)標準操作規程

B8、I型糖尿病檢測(診斷酶聯試劑盒)標準操作規程

B9、血清IV膠原蛋白(PANASSAYIV.C)標準操作規程

B10、血清蛋白電泳標準操作規程

Bl1、N-乙酰葡萄糖甘酶(NAG)標準操作規程

B12、腺甘脫氨酶(ADA)標準操作規程

B13、尿肌酸測定標準操作規程

B14、肌鈣蛋白(TNT)測定標準操作規程

B15,腫瘤相關物質測定標準操作規程

C、免疫室、發光、放免室

CkHAVAblgM標準操作規程

C2、PreSl標準操作規程

C3、HBSAg標準操作規程

C4、HBSAb標準操作規程

C5、HBEAg標準操作規程

C6、HBcAb標準操作規程

C7、HBcAblgM標準操作規程

C8、HCVIgG標準操作規程

C9、HCVIgM標準操作規程

CIO、HDVAg標準操作規程

Cll、HDVIgG標準操作規程

C12、HDVIgM標準操作規程

C13、HEVAblgG標準操作規程

C14、HEVAblgM標準操作規程

C15、HGVAb標準操作規程

C16、TTV-IgG標準操作規程

C17、寒冷凝集反應標準操作規程

C18、ENA多肽抗體譜標準操作規程

C19、ANA標準操作規程

C20、ds-DNA標準操作規程

C21、幽門螺桿菌抗體標準操作規程

C22、嗜異性凝集試驗標準操作規程

C23、肥達氏反應標準操作規程

C24、胰島素測定標準操作規程標準操作規程

C25、C肽測定標準操作規程標準操作規程

C26、胰高血糖素測定標準操作規程標準操作規程

C27、a1-微球蛋白測定標準操作規程

C28、B2-微球蛋白測定標準操作規程

C29、THP-蛋白測定標準操作規程

C30、抗TG,TM抗體測定標準操作規程

C3k抗INS-抗體測定標準操作規

C32、人山型前膠原放射免疫測定標準操作規程

C33、逶明質酸放免測定標準操作規程

C34、IV型膠原放免測定標準操作規程

C35、內皮素放免測定標準操作規程

C36、肺腫瘤標記CY21-1放免測定標準操作規程

C37、T3T4TSHFT3FT4測定標準操作程序(SOP)

C38、AFP、CEA、Fer、BR、OV、GLPSA、fPSA,Ca-125,Ca-

199,Ca-153測定標準操作程序(SOP)

C39、HCG、PRL、FSH、LH、E2、P(孕酮)、T(睪酮)測定標準操作

程序(SOP)

C40、鐵蛋白、葉酸、VitB12測定標準操作程序(SOP)

C4kCKMB、cTnLMYO測定標準操作程序(SOP)

C42、IgE測定標準操作程序(SOP)

C43、地高辛、茶堿、皮質醇、卡馬西平、苯巴比妥、苯妥英鈉,

丙戊酸,安定,環胞霉素標準操作程序

C44、DPD測定標準操作程序(SOP)

C45、過敏原測定標準操作程序

D、血液、骨髓室、FCM

DI、D-二聚體標準操作規程

D2、3P試驗標準操作規程

D3、骨髓細胞學檢查標準操作規程

D4、過氧化物酶(POX)染色標準操作規程

D5、蘇丹黑B(SBB)染色標準操作規程

D6、中性粒細胞堿性磷酸積分(NAP)染色改良GOmorl氏鈣鉆法標

準操作規程

D7、中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)染色偶氮偶聯法標準操作規程

D8、糖原(PAS)染色標準操作規程

D9、酯酶染色…中性非特異性脂酶(a-NAE)染色標準操作規程

D10、鐵染色標準操作規程

D11、酸性磷酸酶(ACP)染色標準操作規程

D12、紅細胞滲透脆性試驗標準操作規程

D13、自體溶血試驗標準操作規程

D14、血清酸化溶血試驗(Ham試驗)標準操作規程

D15、熱溶血試驗(定性)標準操作規程

D16、蔗糖溶血試驗(糖水試驗)標準操作規程

D17、變性珠蛋白小體檢查(Heinz小體染色)標準操作規程

D18、血漿游離血紅蛋白測定標準操作規程

D19、淋巴細胞亞群測定標準操作規程

D20、HLAB27/HLAB7測定標準操作規程

D21、活化細胞亞群測定標準操作規程

D22、活化血小板測定標準操作規程

D23、APO2.7測定標準操作規程

D24、CD25/CD3測定標準操作規程

D25、MDR(P—gP)多藥耐藥基因)測定標準操作規程

D26、TdT(MRD白血病殘留病灶)測定標準操作規程

D27、血小板糖蛋白測定標準操作規程

D28、CD23(Ige低親和力受體)測定標準操作規程

D29、CD95/Fas測定標準操作規程

D30、FCM試劑配制標準操作規程

D31、Bcl-2測定標準操作規程

D32、ANNEXINV測定標準操作規程

D33、P53測定標準操作規程

D34、入鏈測定標準操作規程

D35、CD55測定標準操作規程

D36、血小板抗體測定(PAIgG,PAIgM,PAIgA)標準操作規程

D37、DNA測定標準操作規程

D38、干細胞CD34測定標準操作規程

D39、CD34+細胞絕對計數標準操作規程

D40、纖溶酶原激活劑抑制物(PAD活性測定(發色底物法)標準操

作規程

D4k組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)活性測定(發色底物法)標

準操作規程

D42、血管性假血友病因子(vWF)含量測定(ELISA)標準操作規程

E、細菌室

E1、革蘭氏陰性鑒定卡及藥敏卡(GNI及GNS卡的操作步驟)標準

操作規程

E2、革蘭氏陽性鑒定卡及藥敏卡(GPI及GPS卡的操作步驟)標準

操作規程

E3、酵母菌鑒定卡(YBC卡)標準操作規程

二、檢驗科工作流程圖

住院病人就診檢驗流程

醫生在電腦網絡中申請檢驗項目

各類穿

刺液等護士工作站打印條碼粘貼

]大小便

血液

穿刺標本按

囑病人按要

要求處理

求留取標本

按有關要求抽

取血液樣本

A檢驗科各實驗室V-----

簽收

具體實驗室進行檢驗

各實驗室檢驗后簽發報告單

送回各病房并簽收

門診病人就診檢驗流程

三、檢驗科各項規章制度

(-)生物安全制度

1、醫務人員

1)每1—2年做體檢一次,并接受乙肝疫苗接種。

2)每1—2年檢查乙肝病毒抗原抗體水平,發現乙型肝炎者應進行隔離治

療。

3)檢驗人員進入實驗室應穿好工作服,不允許在實驗室進食和吸煙。

4)檢驗人員在工作前后和被污染后,應用肥皂和流水清洗,必要時由消

毒液浸泡雙手,每季度抽查檢驗人員的手,并做細菌培養一次。

2、環境消毒隔離

1)實驗室應分為清潔區和操作區,清潔區要注意保護不受污染。操作有

氣溶膠可能的標本應配置生物安全柜及其它防護設置,如紫外線燈,排氣

扇等操作區的工作臺及地面每日用消毒液擦拭一次,有污染時隨時消毒,

每周大掃除一次。

2)采血室每日操作前用清水擦拭操作臺一次,采血結束用消毒液擦拭操

作臺、桌子和地面一次,紫外線每日照射消毒一次,每月空氣細菌培

養一次,紫外線強度定期測定。并做記錄。

3、各種檢驗標本的收集,送檢必須用相應指定的容器留取,不得外溢污染。

4、靜脈及末稍采血,應嚴格執行消毒隔離措施,靜脈抽血做到一人一針一筒

一巾一帶一消毒,所用止血帶及紙墊每日消毒,末稍采血一人一片一管,

杜絕交叉污染。

5、一次性醫用器具包括采血針,注射器、尿杯、血紅蛋白微量吸血吸管,應

嚴格做好領發登記,注射器先浸泡消毒后由供應室一對一調換,統一處

理,其余一次性器具浸泡消毒后裝入污物袋送焚燒爐焚燒。

6、檢驗人員在進行靜脈抽血時應嚴格遵守無菌操作技術,操作前必須洗手必

須戴好帽子與口罩,操作臺和手被污染時應用肥皂和流水認真洗手,必要

時用消毒液浸泡雙手,酒精、碘酒瓶每周更換消毒兩次。

7、凡是肝炎病人和透析病人的血液標本及疑有黃疸的血標本,都視為肝炎的

污染標本,應貼上紅色危險標記,放在規定區域內,引起警惕和防止擴大

污染面。

8、溢出試管外的血液,應立即用碘酒棉簽擦拭干凈,注意防止玻璃碎片刺傷

手,并注意試管有無破裂。

9、當針頭和碎玻璃刺傷手時,用流水沖洗,擠出血水,應立即用碘酒消毒局部。

10、實驗室操作時應戴上手套。吸取標本,離心振蕩等應嚴格按操作規程,防

止自身和實驗室受污染。

11、已檢查標本與容器分別浸泡于施康1號消毒液(2000mg/L)中兩小時后,標

本傾棄,一次性容器送焚燒,重復使用的經清洗消毒和滅菌后再使用,均

要有記錄。有毒化學試劑和放射性試劑使用后要經無害化處理,防止污染

環境。

12、菌種、毒種按《傳染病防治法》進行管理。

13、三級醫院必須設置清潔區,污染區,操作有氣溶膠可能的標本應配置生物

安全柜及其它防護設置,如紫外線燈,排氣扇等。

14、非科室工作人員不準進入實驗室,外來人員參觀需經科主任同意方可進入

(-)質量管理制度

1、各專業實驗室根據省臨檢中心的有關規定,開展實驗室內的質量控制,并

制定有關措施。對室內質控應每日有記錄,對失控情況有糾正方法,有預

防性措施,對于目前尚無完整的室內質控體系的實驗室,應積極創造條

件,建立室內質量控制體系。

2、各專業實驗室必須參加部、省的各次室間質控活動,對每次質控評價應有

記錄。

3、計量儀器(包括分析天平,天平、分光光度計等)應定期校正,每年一

1次O

4、大型分析儀器必須專人負責,有使用維修記錄。

5、商品化的試劑盒的申購由各專業室的組長負責申報,每月一次報科主任審

批,不得使用過期,無批準文號的劣質試劑,進貨統一由科室管理,自配

試劑須嚴格校正后方可使用。

6、各專業實驗室必須建立完整的操作程序,并應嚴格按程序執行。

7、當日發出的全部檢驗報告單須經當日科室總值班人員嚴格審核后方可發

出。

8、科室在完成嚴格的室內、室間質量控制體系的同時,應逐步建立全面質量

控制體系,對標本的采集,運送,保存等納入嚴格的管理之中。每日送檢

的標本應簽收。

9、急診檢驗應嚴格按照急診制度執行。

(三)安全制度

1、菌種、毒種、劇毒品及貴重儀器物品指定專人保管、有防盜措施,建立帳

冊,記錄進出數量,定期檢查制度。劇毒藥品專人保管,由科室主任,主

管試劑的同志負責,放保險柜,領用時須有主管同志在場,作好領用登

記。

2、易燃物品專柜存放,普通試劑按常規分類存放,并由科室主任和主管試劑

同志負責,注意用電安全,特別是電爐子、大烤箱、火焰光度計,由各科

使用同志負責安全,嚴防火災。

3、對工作中可能發生的觸電、失火、玻璃割傷、針頭刺傷、燒傷、不慎中

毒、傳染性標本的污染,各實驗室應有應急處理的方法,有關人員均應熟

悉。

4、用電設備、電源線路、C02氣體、給排水系統的安全性符合使用要求,不

能帶電檢修儀器。

5、使用強酸堿腐蝕品時,應在適當的環境下正確操作,防止腐蝕、灼傷、中

毒、火災和爆炸等事件發生。

6、注意安全,隨手隨時關門,下班時要做好水,電,門的安全保衛工作,防

火防盜防水。

7、科室安全保衛負責:鄭軍

(四)試劑管理制度

1、各專業實驗室應根據各自的工作需要,按月向科主任申報所購試劑,并應

做到及時盤存清點,入庫做到心中有數。

2、所有試劑的申請,進貨一律由科室統一管理,嚴格按市衛生局招標要求執

行,做到三證齊全。無三無產品。

3、各專業實驗室應對試劑庫存定期檢查,不使用過期變質的試劑。

4、自配試劑須以嚴格校正后方可使用。

5、試劑的保存應嚴格按照要求,以保證有效期內能有效地使用,杜絕浪費現

象。

6、試劑外借一律須經科主任同意方可執行。

7、劇毒試劑必須由科主任和負責科室保衛的同志負責保存,放保險箱內,使

用時應有兩人在場,并做好登記。

8、易燃,易爆試劑應分開存放遠離火源和電源。

9、供應商所送的試劑必須先經藥庫清點才能接受,檢驗科人員清點后必須在

貨單上簽字,有出入者必須向科主任或試劑管理員、組長報告,再將貨單

交給試劑管理員,以便月底結帳。

10、科室試劑管理員:鐘梁。

(五)實習生管理制度

1、科室按實習大綱安排實習時間表,如遇特殊情況科室統一安排。

2、實習生必須服從實習單位和科室的直接管理,遵守實習單位的規章制度,

參加實習單位的政治、業務學習和有關活動、會議。

3、實習生必須加強醫德醫風修養,文明行醫,禮貌待人,主動熱情為病人服

務。

4、實習生應在指導老師指導下進行實習和工作,一切實驗結果均須指導老師

簽名后方能發出報告。不得擅自簽名發出報告,指導老師應嚴格把關逐步

培養學生獨立工作能力。

5、嚴格請假制度,學生一般情況下不得請事假,節假日按國家法定給與準

假,請假一律寫報告,一天內經指導老師同意,科主任批準,報告交俞北

偉老師登記,三天內經醫教科批準,三天以上經學校批準。

6、實習生必須準時上班,不遲到早退,要有嚴格的實習作風,不得離崗,為

了培養學生的應急處理能力,實習生必須每天晚上輪流跟班(6.00-9.00)

7、實習生必須嚴格保護實驗儀器和公物,科室貴重儀器必須在指導老師具體

指導下進行操作。

(六)標本管理制度

—■、標本采集

1、按每個項目要求,告訴病人、病房護士或本室采血人員最佳采血時間、采血

前空腹或飲食注意、用藥情況、活動情況、體位等。

2、明確抗凝劑種類、抗凝劑與血的比例、抽血時注意事項。

3、體液、分泌物、細菌培養標本按要求留足量、及時送檢。

二、標本運送

1、運送過程中,原則上帶蓋(不能用棉花等吸水物品),以防倒翻和溢出或雨

淋。凡含傳染源的標本必須帶蓋,外套尼龍袋,以防溢出而污染環境。

2、不能劇烈振蕩,以防標本溶血和有形成分破壞。

3、必須及時送檢。

三、標本接收

1、必須認真核對標本上病人姓名、病區、床號、聯號與申請單符合。

2、必須觀察標本的量、標本類型、是否抗凝或有小凝塊、細菌培養標本是否符

合無菌要求。是否有明顯溶血或脂濁。

3、不符要求的標本,必須及時填寫退回理由單,及時反饋臨床。

四、標本檢測

1、在檢測每一過程中,都應復核標本接收過程中的每一步驟。

2、在標本足夠的情況下,不能浪費、隨意丟棄或損壞標本。

五、標本儲存

1、當天不能完成的標本,必須分離血清,按要求儲存在2℃-8℃或-20℃。

2、當天檢測完成的標本,血常規儲存在2℃-8℃3天以上,生化免疫儲在2℃-

8c7天以上,腦脊液、胸腹水等重要標本儲存在2c-8c7天以上。

3、特殊標本按要求保存。

六、標本處理

檢驗標本先用含2-3g/L有效氯消毒靈浸泡半小時,再煮沸清洗試管,烘

干備用。用雙層專用黃色醫用垃圾袋專人收集所有廢棄醫用垃圾。送專門存放醫

用垃圾處統一處理。并做好登記。.

七.外單位標本

外單位送檢的樣本,一律由服務臺同志登記后,再轉交各實驗室檢測。實驗

室保留原始申請單。

八、多張檢驗單標本

凡有兩張以上的檢驗申請單(包括其他實驗室或外送兄弟醫院)原則上

要分裝各管,隨檢驗申請單一起分別放置各樣本盒,對采樣困難者要主動跟

蹤樣本,并作詳細記錄以免漏檢,分清責任。

附錄:檢驗科檢測項目標準操作規程

A、檢室

A1、血常規檢驗

(1)標本

用EDTA-KO2ul抗凝靜脈血1ml,門診病人在CD-1700儀器上做三分類

測定,住院病人在COULTERHMX儀器上做五分類測定。

(2)試劑及儀器

COULTERHMX五分類血球分析儀及配套試劑,質控用COULTER4CPLUS

全血質控品,COULTERHMX五分類血分析儀及配套試劑,質控用

COULTER5C全血質控品。(血液細胞自動化分析儀介紹)

(3)操作

1)門診:

a)收到血常規標本后,查看核對檢驗項目,立即編號,放混勻器上混勻

3分鐘。

b)如有血型立即用玻片法和試管法測定血型,輸入電腦。

c)血標本在ABBOTCD-1700上檢測,結果入庫。

d)對于中間細胞比較多的應當手工涂片染色分類,對于血小板等圖形不

好或結果異常較大的應手工復查。

e)結果核對后,在半小時內報告。

2)病房:

a)采集血常規標本后,立即編號,試管加蓋后放于專用試管架上放入

HMX上自動混勻,

b)如有血型用玻片法和試管法測定血型,輸入電腦。

c)血標本在COULTERHMX上機檢測,結果入庫。

d)對于分類圖形不好的結果應當手工涂片染色分類,對于血小板等結果

圖形不好或結果異常較大的應手工復查。(復查條件)

e)結果核對后,簽發報告單。如果急診則電話報告,有血型的話,通知

病房來拿報告單。(血液項目)(4)項目

代號中文名單位

WBC白細胞計數X1O9/L

LY%(LY)淋巴細胞分類%

M0%單核細胞分類%

NE%(GR)中性細胞分類%

LY#淋巴細胞計數X1O9/L

MO#單核細胞計數X109/L

NE#中性細胞計數X1O9/L

RBC紅細胞計數X1O12/L

HGB血紅蛋白g/L

HCT紅細胞壓積

MCV平均紅細胞體積fl

MCH平均紅細胞血紅蛋白含量pg

MCHC平均紅細胞血紅蛋白濃度g/L

RDW紅細胞分布寬度

PLT血小板計數X1O9/L

MPV平均血小板體積fl

PCT血小板比積%

PDW血小板分布寬度

EO%嗜酸性細胞分類%

BO%嗜堿性細胞分類%

EO#嗜酸性細胞計數X1O9/L

BO#嗜堿性細胞計數X1O9/L

(5)特殊規定

在檢驗血常規時,科室所有工作人員及同志如發現以下樣本結果過高可過低,務必

作登記,復查和及時報告,以備查詢。

1.血紅蛋白低于100g/L

2.白細胞低于3000/ul.

3.血小板低于8萬/ul.

4.發現白細胞分類異常圖形時.

5.發現其中一項過高時,或是臨床指定要鏡檢時.

(6)臨床意義

(6.1)WBC計數

參考范圍

4-10X107L

1、增加

(1)生理性:初生兒、妊娠末期、分娩期、經期、飯后、劇烈運動

后、冷水浴后及極度恐懼與疼痛等。

(2)病理性:大部分化膿性細菌所引起的炎癥、尿毒癥、嚴重燒

傷、傳染性單核細胞增多癥、傳染性淋巴細胞增多癥、急性出血、

組織損傷、手術創傷后、白血病等。

2.減少

病毒感染、傷寒、副傷寒、黑熱病、瘧疾、再生障礙性貧血、極度

嚴重感染、X線及鐳照射、腫瘤化療后、非白血性白血病等。

(6.2)白細胞分類計數

(6.2.1)染色液

1.瑞氏一姬姆薩復合染色液

I液取瑞氏染粉1g、姬姆薩染粉1g,加入甲醇(分析純),充分振搖,第二

天加甘油10ml,混勻即能使用。

II液pH6.4—6.8磷酸鹽緩沖液(或用H2O替代緩沖液)

磷酸二氫鉀(無水)6.648

磷酸氫二鈉(無水)2.56g

加少量蒸儲水溶解,用磷酸鹽調整pH,加水至1000ml。

染色置玻片于染色架上,滴加染液3—5滴,使其迅速蓋滿血膜,約Imin

后,滴加緩沖液5—10滴,輕輕搖動玻片或對準血片吹氣,與染液

充分混和,5—lOmin后用水沖去染液,待干。或染色液蓋滿血片后

半分鐘即可水洗鏡檢。

2.快速染色液

I液:磷酸二氫鉀6.648

磷酸氫二鈉2.56g

水溶性伊紅Y4g(或伊紅B2.5g)

蒸儲水1000ml

石炭酸40ml

煮沸,待冷備用。

n液亞甲藍4g

蒸儲水1000m1

高鈦酸鉀2.48g

煮沸,待冷備用。

染色

把干燥血片浸入快速染色液的I液中30s,水洗,再浸入H液30s,

水洗待干。

注:本染色法除了能快速用于急癥外,對玻片質量要求也不高。隨

著染液多次使用,可適當延長染色時間或更換新液。

.30s快速單一染色液

貯存液瑞氏染粉2.0g

姬姆薩染粉0.68

天青E0.6g

甘油10.0ml

聚乙烯D比咯烷酮(PVP)20.0g

甲醇1000ml

磷酸鹽緩沖液磷酸二氫鉀6.648

(PH6.2-6.8)磷酸氫二鈉0.268

石炭酸4.0ml

蒸饋水加至1000ml

應用液1液、2液按3:1比例混合放置14天后備用。

染色將染液鋪滿血膜或將血片浸入染色缸內,30s后用自來水沖洗。

注:加表面活性劑PVP可增加染料的溶解度并起穩定作用,加入天青E可縮短

染色時間。

(6.2.2)參考范圍

LY:18.7%-47%LY#:(1.0—3.3)xl()9/L

MO:3.5%-7.9%MO#:(0.2—0.7)xlO9/L

GR:46.0%—76.5%GR#:(1.8—6.4)xlO9/L

1.增多

(1T中性粒細胞:急性化膿感染、粒細胞白血病、急性出血、溶血、手術

后、尿毒癥、酸中毒、急性汞中毒、急性鉛中毒等。

(2)嗜酸性粒細胞:變態反應、寄生蟲病、某些皮膚病、某些血液

病、手術后、燒傷等。

(3)嗜堿性粒細胞:慢性粒細胞白血病、何杰金病、癌轉移、鉛及

秘中毒等。

(4)淋巴細胞:百日咳、傳染性單核細胞增多癥、慢性淋巴細胞白

血病、麻疹、腮腺炎、結核、傳染性肝炎等。

(5)單核細胞:結核、傷寒、亞急性感染性心內膜炎、瘧疾、黑熱

病、單核細胞白血病、急性傳染病的恢復期等。

2.減少

(1)中性粒細胞:傷寒、副傷寒、瘧疾、流感、化學藥物中毒、X

線和鐳照射、抗癌藥物化療、極度嚴重感染、再障、粒細胞缺

乏等。

(2)嗜酸質粒細胞:傷寒、副傷寒以及應用腎上腺皮質激素后。

(3)淋巴細胞:多見于傳染病急性期、放射病、細胞免疫缺陷等。

(6.3)常見的異常白細胞形態的變化

在外周血象中,除了各類白血病幼稚細胞外,通常能見到一些細胞形

態上的異常變化。

(6.3.1)中性粒細胞

1.核象變化:反映中性粒細胞的成熟程度。正常血象中有少量桿狀

核細胞出現,它與分葉核細胞之間的比值約占1:13。

(1)核左移:是指桿狀核細胞增多,常見于感染。如晚幼粒、中幼

粒等細胞增多為核象極度左移,多見于類白血病反應或白血

病。

①伴白細胞總數增高的核左移:稱再生性左移,常見于

急性化膿性感染,如大葉性肺炎等。

②白細胞總數不增加或減低的核左移:稱退行性左移,

常見于嚴重感染、機體抵抗力低下時,如傷寒、伴感

染中毒性休克的敗血癥等。

(2)核右移:是指不僅分葉核粒細胞增多,且分葉過多,常

見4葉、5葉(正常時多分3葉),這是造血功能衰退或造

血物質缺乏的表現。常見于營養性巨幼細胞性貧血和使

用抗代謝藥物后。止匕外,在疾病進行期突然出現核象右

移,表示預后不良。

2.毒性變化:

嚴重感染、惡性腫瘤、各種重金屬或藥物中毒、大面積燒傷等癥

時,中性粒細胞可出現形態變異。

(1)細胞大小不均:為骨髓內幼稚粒細胞發生不規則的分裂增殖所致。

(2)毒性顆粒:胞漿中部分或全部顆粒變粗,著色深,顆粒的分布及大小

不等。可能為中性顆粒成熟過程中發生變性所致。

(3)空泡:可在胞漿或核中出現,常為多個,被認為是細胞脂肪變性后未

能著色所致。

(4)Dohle體:腦漿內出現嗜堿性點、線、梨形或云霧狀物質,可能為核

漿發育不平衡所致,為細胞嚴重毒性變的表現。

(5)核棘突:胞核有各種形態的芽狀突出,臨床意義尚不明確,可能與

中毒、癌轉移、嚴重放射損傷等有關。

3.退行性變:

表現為胞體腫大,結構模糊,邊緣不清。胞核可呈固縮、腫

脹、破碎、溶解等變化,退行變可以是細胞衰老死亡的表現。

(6.3.2)淋巴細胞

淋巴細胞形態變異在多種疾病如各種病毒感染、傳染性單核細胞增

多癥最為常見。此外,瘧疾、過敏性疾病、淋巴結炎等亦可見,統

稱為異型淋巴細胞。傳染性單核細胞增多癥患者血液中常可出現3

種異型淋巴細胞,即空泡型、不規則型和幼稚型。

(6.4)血紅蛋白

[參考值]

男:120T60g/L

女:110T50g/L

(6.5)紅細胞分布寬度

RDW為反映紅細胞體積異質性的參數,常以所測得紅細胞體積大小的變異

系數(CV%)來表示。它比血涂片上紅細胞形態大小不均的觀察更為客觀、

準確。RDW增大時有臨床意義。

(1)用于缺鐵性貧血(IDA)的診斷與療效觀察:

缺鐵性貧血時RDW增大,尤其是MCV尚處于參考值范圍時(缺鐵性貧血

時MCV應下降)RDW增大更是早期缺鐵的指征;MCV減小時,RDW增大更

為顯著,當給予鐵劑治療有效時,RDW將比給藥前更大,以后逐漸降

至正常水平。產生這種現象的原因,主要是因補鐵后產生網織紅細

胞,及正常紅細胞生成并釋放人血與給藥前的小紅細胞并存,故RDW

先增大,隨著正常紅細胞的增多和小紅細胞的減少,RDW便逐漸降至

參考范圍。

(2)用于小細胞低色素性貧血的鑒別診斷:

IDA和輕型地中海性貧血時,MCV均可減小。但IDA時RDW增大,而

輕型地中海性貧血時RDW正常。

(3)用于貧血的分類(Bessman分類法):

MCV只能反映紅細胞平均體積的大小,不能代表紅細胞體積大小的異質

性,對紅細胞體積大小的評價,過去靠血涂片上紅細胞形態的觀察,

這種觀察常受血涂片制作以及觀察者的主觀因素的影響較大,而且不

能定量,RDW能較好地反映紅細胞體積的異質性,把MCV和RDW結合

用于對貧血的分類將更為完善(表1—1—2)。

表IT-2BessmanMCV/

RDW貧血分類

類別MCVRDW

正常—?—?

缺鐵性貧血T

巨幼細胞性貧血tT

溶血性貧血TT

鐵粒幼細胞貧血—?T

再生障礙性貧血—?—?

單純小細胞性貧血1—?

注:f無變化;t增大;I減少

(6.6)平均血小板體積

MPV的臨床意義要結合PLT變化才有價值。

(1)鑒別血小板減少的原因:

①當骨髓造血功能損傷致血小板減少時,MPV減少;

②當血小板在周圍血液中破壞增多時,導致血小板減少,MPV

增大;

③血小板分布異常致血小板減少時,MPV正常。

(2)MPV增大可作為骨髓造血功能恢復的較早期指征:

骨髓造血功能衰竭時,MPV與PLT同時持續下降;造血功能抑

制越嚴重,功能恢復時,MPV增大常先于PioT升高。MPV

越小;當造血

(3)其他方面應用:

①MPV增大:見于骨髓纖維化、原發性血小板減少性紫痰

(ITP)、血栓性疾病及血栓前狀態、脾切除、慢粒、巨大血小

板綜合征、鐮刀細胞性貧血等。

②MPV減小:見于脾亢、化療后、再障、巨幼細胞性貧血等。

(6.7).血小板比積(plateletcrit,PCT)

參考范圍

男0.108%-0.272%

女0.114%—0.282%

PCT與PLT和MPV正相關,所以PLT、MPV的增減均可使

PCT發生變化。

增高:見于骨髓纖維化、脾切除、慢粒等。

減低:見于再障、化療后、血小板減少癥等。

(6.8)血小板體積分布寬度(plateletvolumedistribution

width,PDW)

參考范圍

0.155-0.181(15.5%T8.1%)

(以血小板體積變異系數CV%表示)PDW是反映血小板體積大小的異質性

參數。

增大:

急非淋化療后、巨幼細胞性貧血、慢粒、脾切除、巨大血小板綜合征、

血怪性疾病等。

(6.9)血細胞體積分布直方圖的應用

(1)紅細胞體積分布直方圖:

將MCV和RDW配合直方圖分析,可直接觀察紅細胞體積的分布情況。

①只現一個峰:見于正常人、缺鐵性貧血(峰左移)、巨幼細胞性貧血

(峰右移)。

②可現兩個峰:缺鐵性貧血給予鐵劑治療有效時,可出現一個小紅細

胞峰和另一個正紅細胞(或網織紅細胞)峰。巨幼(紅)細胞性貧血給

予葉酸、維生素B12治療有效時亦可見兩個峰。

(2)白細胞體積分布直方圖:

靜脈血比毛細管血白細胞數量略低。中檔的血細胞分析儀一般為

三分群,它是根據加入溶血劑后,白細胞膜通透性改變而發生皺

縮,不同類型的白細胞皺縮后體積有明顯差別,每個皺縮白細胞

通過血細胞分析儀的微孔時產生的脈沖信號經放大、甄別后,微

機處理數據得到其體積分布直方圖。

淋巴細胞群為35—90fl大小

中間細胞群為90—160fl大小

粒細胞群為160—450fl大小

三群細胞的百分比與白細胞數量的乘積為其絕對數

正常人白細胞體積分布直方圖,可見兩個明顯分離的峰,左峰為

小細胞群(淋巴細胞),右峰為大細胞群(粒細胞),兩峰之間為中

間細胞群的分布。

急性白血病時,由于異常的原始、幼稚細胞增多,可見中間細胞

明顯增高,這時直方圖上見一個峰,峰值常在90—160fl之

間。這時必須推片染色鏡檢。

(3)血小板體積分布直方圖:

正常人血小板體積主要分布在2—20fl之間,21—30fl之間有少

量大血小板,一般儀器以30fl為最大的分析界標。

血小板體積增大時,直方圖會出現明顯拖尾現象。有小紅細胞或紅

細胞碎片干擾時,直方圖尾部會抬高。

(6.10)三種紅細胞參數平均值的計算

1、原理

根據紅細胞、血紅蛋白濃度和紅細胞比積,計算紅細胞平均容量、

紅細胞平均血紅蛋白量、紅細胞平均血紅蛋白濃度,用作貧血的形

態學分類。

2、計算方法

(1)平均紅細胞體積(meancorpuscularvolume,MCV):是指每

個紅細胞的平均體積,以飛升(fD為單位。

每L血液中紅細胞體積(L)xl()i5

MCV=------------------------------=xxfl

每L血遇紅細胞數(個)

(2)平均紅細胞血紅蛋白含量(meanCorpuscularhemoglobin,

MCH):是指每個紅細胞內所含血紅蛋白的平均量,以皮克(pg)為單

位。

每L血液中血紅蛋白濃度(g)xl()i2

MCH=------------------------------=xxpg

每L血遮紅細胞數(個)

(3)平均紅細胞血紅蛋白濃度(meanCorpuscularhemoglobin

concentration,MCHC):是指平均每L紅細胞中所含血紅蛋白濃度

(g/L)o

每L血液中血紅蛋白g數(g/L)

MCHC=------------------------------=xxg/L

每L血液紅細胞比積(L/L)

3、臨床意義

正常人和各型貧血時紅細胞平均參考值表

平均值MCH(pg)MCV(fl)||MCHC(g/L)|

正常27-3182-95320-360

大細胞性貧血tT1-

正常細胞性貧血--1-

單純小細胞性貧血11-

小細胞低色素性貧血11

注:-正常;f增大;I減少

(6.11)紅細胞參數

1、紅細胞(redbloodcell,RBC)

男(4.0-5.5)X1012/L

女(3.5-5.0)X1012/L

2、血紅蛋白(hemoglobin,HGB)

男120—160g/L

$110-150g/L

3、紅細胞比積(hematocrit,HCT)

男0.40—0.50(40%—50%)

女0.35—0.45(35%—45%)

A2、嗜酸性粒細胞直接計數

[標本]

EDTA-K210ul抗凝靜脈血1ml

[原理]

手工法

血液中嗜酸性粒細胞在含有伊紅的低滲溶液中被染成紅色,而紅細胞及其

他白細胞破裂或溶解。

儀器法(VCS原理)

[試劑]

手工法

嗜酸性粒細胞直接計數的稀釋液種類較多,各有一定的優缺點,尚待大家

繼續實驗,找出最佳配方。下列3種稀釋液供參考。

1.Hinkelmann液

伊紅0.2g

95%石炭酸0.5ml

40%甲醛0.5ml

蒸儲水加到100ml

2.乙醇一伊紅稀釋液

90%乙醇30ml

甘油10ml

碳酸鉀1g

枸椽酸鈉0.5g

20g兒伊紅液10ml

蒸儲水加至100ml

本配方背景清晰,嗜酸性粒細胞著色鮮明,缺點是含10%甘油,比較粘

稠,細胞不易混勻,故計數前必須充分振搖。

3.伊紅一丙酮稀釋液

20g/L伊紅液5ml

丙酮5ml

蒸儲水90ml

新鮮配制效果好,每周配1次。

儀器法

COULTERHMX五分類血細胞儀及專用試劑

[操作]

手工法

1.小試管中加稀釋液0.38mlo

2.常法取末梢血20U1,加入管內混勻,待紅細胞溶解后兩側充池。

3.靜置3—5min,用低倍鏡(必要時用高倍鏡)鏡下計數10個大方格內

嗜酸性粒細胞數。

儀器法

操作同血常規

[計算]

10個大方格內嗜酸性粒細胞數X20X10=嗜酸性粒細胞/L

[參考值]

(50-300)X106/L(50-300/u1)

[附注]

1.血液稀釋后應于lh內計數完畢,否則嗜酸性粒細胞會逐漸被破壞,使結

果偏低或不易辨認。

2.充池前要充分混勻,但又不宜用力過猛,特別是使用含甘油的稀釋液要

適當延長混勻時間。

3.注意與中性粒細胞區別,以免誤認,中性粒細胞一般不著色,但也有著淺紅

色的,其顆粒較小。

4.住院病人采標本時間力求統一,以免受日間生理變化的影響。

5.用白細胞總數與分類百分率求得的絕對值不如直接計數結果準確。

[臨床意義]

1.直接計數主要用于觀察傳染病預后、手術和燒傷病人的預后及測定腎上

腺皮質功能。

2.其他變化的臨床意義同白細胞分類計數中嗜酸性粒細胞的增減。

A3、紅細胞沉降率測定

[標本]

200ul枸椽酸鈉抗凝靜脈血1.1ml,顛倒混勻。

[原理]

離體抗凝血液置于特制刻度測定管(魏氏法血沉管)內,垂直立于室

溫中,一定時間時觀察上層血漿高度的毫米數值報告之。

[儀器及試劑]

MONITORJI血沉儀、專用血沉管

109mmol/L(32g/L)枸椽酸鈉溶液:取含二分子結晶水的枸椽酸鈉

(分子量294.12)3.28,用蒸儲水溶解,稀釋至100ml。此液在室

溫保存不得超過2周。

[操作]

1.專用血沉管1支,加抗凝劑0.2ml。

2.靜脈采血后,取下針頭,加血至刻度,顛倒混勻。

3.用血沉管(300mmX2.5mm)吸取上述混勻血液至“0”刻度處,拭去管外

附著的血液,將血沉管直立在血沉架上。(MONITORJI操作)

4.記時,室溫中靜置lh,讀出血沉儀上的讀數即是血沉值。

[參考值]

男:<15mm/60min

女:V20mm/60min

[附注]

1.紅細胞在單位時間內下沉的速度與血漿蛋白的量和質,血漿中脂類的量

和質,紅細胞的大小與數量,是否成串錢相聚以及血沉管的內徑、清潔

度、放置位置是否垂直,室溫高低等因素都有關系。

2.要求

(1)標本采集時避免脂肪血。

(2)血液和抗凝劑比例要準確。

(3)血沉管內徑要標準(2.5mm),放置要垂直。

(4)做血沉的標本要在采集后3h內測定,并充分混勻。

3.室溫過低、過高和貧血時,對結果都有影響。為此,血沉應盡量

放在18—25℃室溫下測定。室溫過高時血沉加快,可以按溫度系

數校正。室溫過低時血沉減慢,無法校正。

[臨床意義]

增快:

(1)生理性:

年幼小兒、經期、妊娠3個月至產后1個月。

(2)病理性:

急性炎癥、結締組織病、活動性結核、風濕熱活動期、組織

嚴重破壞、貧血、惡性腫瘤、高球蛋白血癥、重金屬中毒

等。

A4、血型鑒定

(1)ABO血型鑒定

根據紅細胞上有或無A抗原或/和B抗原,將血型分為A型、B型、AB型及0型

4種。可利用紅細胞凝集試驗,通過正、反定型準確鑒定ABO血型。所謂正定

型,是用已知抗一A和抗一B分型血清來測定紅細胞上有無相應的A抗原或/和B

抗原;所謂反定型,是用已知A細胞和B細胞來測定血清中有無相應的抗一A或

/和抗一Bo

[試劑和材料]

1.抗一A(B型血)、抗一B(A型血)及抗一A十B(0型血)分型血清,制備方

法見本節附注;

2.5%A、B及0型試劑紅細胞鹽水懸液,制備方法見本節附注;

3.受檢者血清;

4.受檢者5%紅細胞鹽水懸液,制備方法見本節附注。

[方法]

1.試管法

⑴取潔凈小試管(內徑lOmmX60mm)3支,分別標明抗一A^抗一B和抗一A

十B,用滴管分別加抗一A、抗一B和抗一A十B。分型血清各1滴于試管

底部,再以滴管分別加入受檢者5%紅細胞鹽水懸液1滴,混和。

(2)另取潔凈小試管(內徑lOmmX60mm)3支,分別標明A、B和0細胞。用

滴管分別加入受檢者血清1滴于試管底部,再分別以滴管加入A、B和0

型5%試劑紅細胞懸液1滴,混和。

(3)立即以1000r/min離心Imin。

(4)將試管輕輕搖動,使沉于管底的紅細胞浮起,先以內眼觀察有無凝集

(或溶血)現象。如內眼不見凝集,應將反應物倒于玻片上,再以低倍鏡檢

查。

(5)觀察結果時既要看有無凝集,更要注意凝集強度,此有助于A、B亞

型、類B或cisAB的發現。

(6)凝集強度判斷標準

十紅細胞凝集成一大塊,血清清晰透明。

紅細胞凝集成數小塊,血清尚清晰。

紅細胞凝塊分散成許多小塊,見到游離紅細胞。

肉眼可見大顆粒,周圍有較多游離紅細胞

±鏡下可見數個紅細胞凝集在一起,周圍有很多游離紅細胞

混合凝集外觀(mixedfield)是指鏡下可見少數紅細胞凝集,而極

大多數紅細胞仍呈分散分布。

一表示陰性,鏡下未見凝集,紅細胞均勻分布。

2.玻片法

(1)取清潔玻片1張(或白瓷板1塊),用蠟筆劃成方格,標明抗-A、抗-B

和抗-A十B,分別用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清1滴

于標明的方格內,再各加受檢者2%紅細胞懸液1滴,混和。

(2)另取潔凈玻片一張(或白瓷板1塊),用蠟筆劃成方格,標明A細胞、

B細胞和0細胞,用滴管各加受檢者血清1滴,再分別用滴管滴加

A、B和0型試劑紅細胞懸液1滴。

(3)將玻片一(或白瓷板)不斷輕輕轉動,使血清與細胞充分混勻,連續約

15min,以肉眼觀察有無凝集(或溶血)反應。如以玻片作試驗時,也

可用低倍鏡觀察結果。

[結果判定]

ABO血型正反定型結果

分型血清+受檢者紅細胞受檢者血清+試劑紅細胞

受檢者血型

抗-A抗-B抗-A十BA細胞B細胞。細胞

十—十A—十—

—十十B十—'—

———0十十—

十十十AB———

注:十為凝集;一為一不凝集。

[附注]

1.分型血清質量性能符合要求,用畢后應放置冰箱保存,以免細菌污染。

2.試劑紅細胞以3個健康者同型新鮮紅細胞混和,用生理鹽水洗滌1次,以除

卻存在于血清中的抗體及可溶性抗原。

3.試管、滴管和玻片必須清潔干燥,防止溶血。

4.操作方法應按規定,?般應先加血清,然后再加紅細胞懸液,以便容易核實

是否漏加血清。

5.按理IgM抗-A和抗-B與相應紅細胞的反應溫度以4c為最強,但為了防止

冷凝集現象的干擾,一般仍在室溫(20—24℃)內進行試驗,37℃可使反應

減弱。

6.離心時間不宜過長或過短,速度不宜過快或過慢,以防假陽性或假陰性結

果。

7.觀察時應注意紅細胞呈特異性凝集、繼發性凝固以及緡錢狀排列的區別。

8.判斷結果后應仔細核對、記錄,避免筆誤。

[正反定型結果不一致的原因]

有技術性問題或紅細胞和血清本身的問題,常見者有以下兒種:

1.分型血清效價太低、親和力不強。如抗一A血清效價不高,可將A亞型誤

定為。型,AB型誤定為B型。

2.紅細胞懸液過濃或過淡,抗原抗體比例不適當,使反應不明顯,誤判為陰

性反應。

3.受檢者紅細胞上抗原位點過少(如亞型)或抗原性減弱(見于白血病或惡性

腫瘤:以及類B或cisAB等。

4.受檢者血清中蛋白紊亂(高球蛋白血癥),或實驗時溫度過高,常引起紅細

胞呈緡錢狀排列。

5.受檢者血清中缺乏應有的抗-A及或抗一B抗體,如丙種球蛋白缺乏癥。

6.各種原因引起的紅細胞溶解,誤判為不凝集。部分溶血時,可溶性血型物

質中和了相應的抗體.

7.由細菌污染或遺傳因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。

8.血清中有意外抗體,如自身抗一I,常引起干擾。

9.老年人血清中抗體水平大幅度下降正反定型結果不一致的解決辦法如發現

ABO正反定型結果不一致,先要重復作試驗1次。嚴格執行操作規程,使

用質量合格的試劑以及細心觀察和解釋試驗結果,就可解決明顯的問題,

對一些疑難問題月必須進一步研究。

[檢查步驟]

1.另從受檢者采取1份新鮮血液標本這樣可以糾正因污染或搞錯樣本造成的

不符合。

2.將紅細胞洗滌數次,配成5%鹽水細胞懸液,用抗一A、抗一B、抗一A1,

抗一A十B及抗H做試驗可以得到其它有用的信息。

3.對受檢紅細胞作直接抗球蛋白試驗,如結果呈陽性,表示紅細胞已被抗體

致敏。

4.用Al、Az、B、0紅細胞及自身紅細胞檢查受檢血清。如果懷疑是抗一I,

用0型(或ABO相合的)臍血紅細胞檢查。

5.如果試驗結果未見凝集,應將細胞及血清試驗至少在室溫和4

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