ICS65.020.30DB12B44天津市地方標準DB12/T974—2020奶牛性控凍精人工授精技術規范Regulationaboutartificialinseminationwithsex-sortedsemenindairycattle天津市市場監督管理委員會發布DB12/T974—2020前言本標準依據GB/T1.1-2009給出的規則起草。本標準由天津市農業農村委員會提出并歸口。本標準起草單位：天津市畜牧獸醫研究所。本標準主要起草人：馬毅、陳麗麗、趙康、姚大為、趙慶彬、劉景喜、韓克元、尹春博。IDB12/T974—2020奶牛性控凍精人工授精技術規范12范圍本標準規定了奶牛性控凍精人工授精的方法和規范。本標準適用于應用性控凍精對母牛進行人工授精的奶牛場、奶牛養殖小區及奶牛養殖戶等。規范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB4143牛冷凍精液NY/T1335-2007牛人工授精技術規程3術語與定義NY/T1335-2007界定的以及下列術語和定義適用于本文件，為方便使用，以下重復列出了某些術語性控凍精sex-controlledcryogen對公牛所產生的精液，通過人為方法將X、Y精子進行科學分離，將分離后的X精子進行分裝冷凍制3.2人工授精artificialinsemination判斷母畜是否發情和確定適時配種的技術。[NY/T1335-2007，定義3.4]4達到適配標準的育成牛，初配月齡在13～15月齡之間，體重達380kg以上，體高124cm以上；健康，1DB12/T974—20205發情鑒定5.1外部觀察通過母牛的外部表現癥狀和生殖器官的變化判斷母牛是否發情和發情程度，見附錄A。5.25.3直腸檢查通過直腸檢查卵巢，觸摸卵泡發育程度，判斷發情程度及排卵時間，見附錄A?；顒恿勘O測利用計步器或其他電子監測裝置監測牛的活動量來判斷發情牛。發情牛表現為活動量增加，并伴有5.1所描述的全部或部分特征。6輸精準備6.1輸精器具清洗和消毒6.1.16.1.2凡是接觸精液和母牛生殖道的輸精用器具都應進行清洗和消毒。玻璃器皿使用前用水浸泡和洗滌。若有污物用加洗滌劑的溫水或重鉻酸鉀洗液浸泡數小時后，用水洗凈晾干，放置在電熱鼓風干燥箱160℃烘烤1h，冷卻備用。6.1.36.1.4金屬器械洗凈后，放置于電熱鼓風干燥箱120℃烘烤1h，自然冷卻備用。輸精用的橡膠、塑料品用高壓蒸汽消毒滅菌，或用濃度為75%的酒精消毒。冷凍精液應浸泡在液氮生物容器中貯存，包裝好的冷凍精液由一個液氮容器轉換到另一液氮容器7相比應用常規凍精配種的輸精時間向后推遲3h～4h，見NY/T1335-2007中7.1。母牛活動量開始增加，并表現出5.1所描述的特征后10h～16h左右輸精。2DB12/T974—2020剪去性控精液封口，剪口應正，斷面應齊。將剪去封口的細管精液迅速裝入輸精器管內，步驟為：剪去封口端的為前端，輸精器推桿后退，細管裝至管內，輸精器管進入塑料外套管，管口頂緊外套管中固定圈，輸精器管前推到頭，外套管后部與輸精器后部螺紋處擰緊，全部結合要緊密。7.3輸精方法使用直腸把握輸精法，輸精人員一手五指并握，呈圓錐形從肛門伸進直腸，動作要輕柔，在直腸內觸摸并把握住子宮頸，使子宮頸把握在手掌之中，另一手將輸精器從陰道下口斜上方約45°角向里輕輕插入，雙手配合，輸精器頭對準子宮頸口，輕輕旋轉插進，過子宮頸口螺旋狀皺壁1cm～2cm即可到達輸精部位。一頭母牛應使用一支輸精器或者一支消毒塑料輸精外套管。直腸把握輸精使用器械及其操作分為：a)用球式玻璃輸精器的，注入精液前略后退約0.5cm，手捏橡膠頭注入精液，輸精管抽出前不得松開橡膠頭，以免回吸精液；b)用金屬輸精器的，注入精液前略后退約0.5cm，把輸精器推桿緩緩向前推，通過細管中棉塞向前注入精液。7.4輸精部位越過子宮頸和子宮角分叉處，排卵側子宮角。8妊娠診斷8.1外部觀察妊娠母牛外部表現發情周期停止，食欲增進，毛色潤澤，性情變溫和，行為變安穩。懷孕中后期腹輸精后二個情期未發情（40天左右），通過直腸觸摸檢查子宮，可查出兩側子宮角不對稱，孕側子宮角較另側略大，且柔軟。60天后直腸觸摸可查出妊娠子宮增大、胎兒和胎膜。直腸觸摸同側卵巢較另用B超檢查母牛的子宮及胎兒、胎動、胎心博動等，最佳檢測時間為29天～31天，檢查時發現一個或是數個圓形或橢圓形的、規則分布的無回聲暗區，或是在沒有回聲的暗區內有胚胎出現即可判斷為懷孕。9輸精后，應做好繁殖及育種等相關數據記錄，記錄內容包括母牛號、配種日期、與配公牛號或性控3DB12/T974—2020AA附錄A（規范性附錄）發情外部表現癥狀和生殖器官的變化表A.1發情外部表現癥狀和生殖器官的變化期別發情初期（不接受爬跨期）發情盛期（接受爬跨期）發情末期（拒絕爬跨期）母牛興奮不安，牟叫，游走，采食漸少，奶牛產奶量降低，追逐、爬跨它牛，而它牛爬跨不予接受，一爬即跑母牛游走減少，它牛爬跨時站立不動、后肢張開，頻頻舉尾，接受爬跨母牛轉入平靜，它牛爬跨時，臂部避開，但很少奔跑外觀表現陰戶腫脹、松弛、充血、發亮，子宮頸口微張，有稀薄透明黏液流出，陰道壁潮紅子宮頸口紅潤開張，陰道壁充血，黏液量減少，混濁黏稠。子宮頸生殖器官變化卵泡變化黏液顯著增加，流出大量透明而黏稠的分泌物口緊閉，有少量濃稠黏液。陰唇消腫起皺、尾根緊貼陰門卵泡增大，波動明顯，泡壁由厚變薄一側卵巢增大卵泡直徑0.5cm～1.0cm卵巢變