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生物醫(yī)藥研發(fā)實(shí)驗(yàn)技術(shù)考核題目姓名_________________________地址_______________________________學(xué)號(hào)______________________密封線1.請(qǐng)首先在試卷的標(biāo)封處填寫您的姓名,身份證號(hào)和地址名稱。2.請(qǐng)仔細(xì)閱讀各種題目,在規(guī)定的位置填寫您的答案。一、選擇題1.下列哪種技術(shù)用于基因編輯?
A.CRISPRCas9
B.ZFN
C.TALEN
D.以上都是
2.生物醫(yī)藥研發(fā)中,以下哪項(xiàng)技術(shù)用于蛋白質(zhì)表達(dá)?
A.重組DNA技術(shù)
B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
C.植物細(xì)胞培養(yǎng)
D.以上都是
3.以下哪種方法是藥物篩選中常用的高通量篩選技術(shù)?
A.基因芯片
B.生物傳感器
C.藥物篩選自動(dòng)化平臺(tái)
D.以上都是
4.在生物制藥過(guò)程中,以下哪種方法用于純化蛋白質(zhì)?
A.凝膠過(guò)濾
B.離子交換層析
C.膜分離技術(shù)
D.以上都是
5.以下哪種方法在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中用于檢測(cè)細(xì)胞活性?
A.MTT法
B.CCK8法
C.流式細(xì)胞術(shù)
D.以上都是
6.在藥物研發(fā)過(guò)程中,以下哪種技術(shù)用于藥物靶點(diǎn)鑒定?
A.蛋白質(zhì)組學(xué)
B.代謝組學(xué)
C.系統(tǒng)生物學(xué)
D.以上都是
7.以下哪種技術(shù)用于基因克隆?
A.噬菌體克隆
B.載體克隆
C.PCR克隆
D.以上都是
8.在生物制藥中,以下哪種方法用于病毒疫苗的制備?
A.離體培養(yǎng)
B.真空吸附法
C.轉(zhuǎn)基因技術(shù)
D.以上都是
答案及解題思路:
1.答案:D
解題思路:CRISPRCas9、ZFN(鋅指核酸酶)和TALEN(轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)器核酸酶)都是基因編輯技術(shù),它們通過(guò)精確地切割DNA來(lái)改變基因序列。
2.答案:D
解題思路:重組DNA技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物細(xì)胞培養(yǎng)都是用于蛋白質(zhì)表達(dá)的技術(shù)。重組DNA技術(shù)用于構(gòu)建表達(dá)載體,動(dòng)物和植物細(xì)胞培養(yǎng)用于表達(dá)和純化蛋白質(zhì)。
3.答案:D
解題思路:基因芯片、生物傳感器和藥物篩選自動(dòng)化平臺(tái)都是高通量篩選技術(shù),它們用于篩選大量化合物或基因,以尋找潛在的藥物或功能基因。
4.答案:D
解題思路:凝膠過(guò)濾、離子交換層析和膜分離技術(shù)都是常用的蛋白質(zhì)純化方法。它們通過(guò)不同的物理和化學(xué)原理來(lái)分離和純化蛋白質(zhì)。
5.答案:D
解題思路:MTT法、CCK8法和流式細(xì)胞術(shù)都是檢測(cè)細(xì)胞活性的方法。它們通過(guò)不同的原理來(lái)評(píng)估細(xì)胞的代謝活性或數(shù)量。
6.答案:D
解題思路:蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)和系統(tǒng)生物學(xué)都是用于藥物靶點(diǎn)鑒定的方法。它們通過(guò)分析蛋白質(zhì)、代謝物和基因表達(dá)等數(shù)據(jù)來(lái)識(shí)別潛在的藥物靶點(diǎn)。
7.答案:D
解題思路:噬菌體克隆、載體克隆和PCR克隆都是基因克隆技術(shù)。它們用于將特定的DNA片段插入到載體中,以便進(jìn)行進(jìn)一步的研究或表達(dá)。
8.答案:D
解題思路:離體培養(yǎng)、真空吸附法和轉(zhuǎn)基因技術(shù)都是用于病毒疫苗制備的方法。它們用于生產(chǎn)病毒疫苗,以預(yù)防病毒感染。二、填空題1.生物醫(yī)藥研發(fā)過(guò)程中,常用的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)包括____原代細(xì)胞培養(yǎng)______、____傳代細(xì)胞培養(yǎng)______和____細(xì)胞系______。
2.重組DNA技術(shù)包括____獲取目的基因______、____構(gòu)建重組載體______和____轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞______三個(gè)步驟。
3.生物傳感器的主要組成部分包括____敏感元件______、____轉(zhuǎn)換元件______和____信號(hào)讀出裝置______。
4.在藥物篩選過(guò)程中,高通量篩選技術(shù)可以大致分為____細(xì)胞功能篩選______、____分子對(duì)接篩選______和____化學(xué)庫(kù)篩選______三種類型。
5.基因克隆過(guò)程中,常用的載體有____質(zhì)粒______、____噬菌體______和____病毒______。
答案及解題思路:
1.答案:原代細(xì)胞培養(yǎng)、傳代細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞系
解題思路:生物醫(yī)藥研發(fā)中,細(xì)胞培養(yǎng)是研究細(xì)胞生物學(xué)特性的基礎(chǔ),原代培養(yǎng)是從生物體內(nèi)直接獲取細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),傳代培養(yǎng)是將細(xì)胞代代相傳,細(xì)胞系則是經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期培養(yǎng)形成的具有穩(wěn)定遺傳特征的細(xì)胞群體。
2.答案:獲取目的基因、構(gòu)建重組載體、轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞
解題思路:重組DNA技術(shù)是生物技術(shù)中的核心技術(shù),其中獲取目的基因是提取特定的DNA片段,構(gòu)建重組載體是將目的基因插入到載體中,轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞是將重組載體引入宿主細(xì)胞中。
3.答案:敏感元件、轉(zhuǎn)換元件、信號(hào)讀出裝置
解題思路:生物傳感器通過(guò)敏感元件檢測(cè)目標(biāo)物質(zhì),轉(zhuǎn)換元件將物理或化學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)化為電信號(hào),信號(hào)讀出裝置用于檢測(cè)和記錄轉(zhuǎn)換后的電信號(hào)。
4.答案:細(xì)胞功能篩選、分子對(duì)接篩選、化學(xué)庫(kù)篩選
解題思路:藥物篩選是發(fā)覺(jué)新藥的關(guān)鍵步驟,高通量篩選技術(shù)可以大量、快速地篩選出有潛力的化合物,其中細(xì)胞功能篩選是檢測(cè)細(xì)胞活性,分子對(duì)接篩選是模擬藥物與靶標(biāo)蛋白的結(jié)合,化學(xué)庫(kù)篩選是從大量化合物中篩選出活性化合物。
5.答案:質(zhì)粒、噬菌體、病毒
解題思路:基因克隆是將目的基因插入到載體中,然后轉(zhuǎn)化到宿主細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制,質(zhì)粒、噬菌體和病毒是常用的克隆載體,它們可以分別用于不同類型的基因克隆。三、判斷題1.CRISPRCas9技術(shù)是一種基于RNA介導(dǎo)的基因編輯技術(shù)。()
答案:√
解題思路:CRISPRCas9技術(shù)是一種基于CRISPR(ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats)系統(tǒng)的基因編輯技術(shù),該技術(shù)利用細(xì)菌中的Cas9蛋白作為“分子剪刀”,通過(guò)一段與目標(biāo)DNA序列互補(bǔ)的RNA(sgRNA)引導(dǎo)Cas9蛋白切割特定的DNA序列,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)基因的編輯。因此,該技術(shù)確實(shí)是基于RNA介導(dǎo)的。
2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,常用的培養(yǎng)基為DMEM。()
答案:√
解題思路:DMEM(Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium)是一種廣泛使用的細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)培養(yǎng)基,適合多種細(xì)胞系生長(zhǎng)。在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,DMEM因其良好的細(xì)胞生長(zhǎng)功能和營(yíng)養(yǎng)均衡性,被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。
3.高通量篩選技術(shù)可以提高藥物研發(fā)的效率。()
答案:√
解題思路:高通量篩選技術(shù)是一種快速、高效地篩選大量化合物或基因的方法,可以在短時(shí)間內(nèi)篩選出具有潛在藥物活性的化合物或基因。這種技術(shù)可以大幅度提高藥物研發(fā)的效率,縮短研發(fā)周期。
4.離子交換層析主要用于蛋白質(zhì)的純化。()
答案:√
解題思路:離子交換層析是一種基于蛋白質(zhì)電荷差異的分離純化方法,廣泛用于蛋白質(zhì)純化。通過(guò)選擇合適的離子交換樹脂,可以使蛋白質(zhì)在層析過(guò)程中根據(jù)電荷差異被吸附或解吸,從而實(shí)現(xiàn)分離和純化。
5.MTT法是一種檢測(cè)細(xì)胞活性的方法。()
答案:√
解題思路:MTT(3(4,5二甲基噻唑2yl)2,5二苯基四唑溴化物)法是一種檢測(cè)細(xì)胞活性的經(jīng)典方法。該方法通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的活性細(xì)胞色素P450還原酶將MTT還原成紫色產(chǎn)物甲紫,從而判斷細(xì)胞的活性。MTT法因其操作簡(jiǎn)便、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確等特點(diǎn),在細(xì)胞生物學(xué)和藥物篩選等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。四、簡(jiǎn)答題1.簡(jiǎn)述重組DNA技術(shù)的基本原理。
原理:重組DNA技術(shù)是一種將不同來(lái)源的DNA片段結(jié)合在一起的技術(shù),通常涉及到以下幾個(gè)基本步驟:①DNA的切割:使用限制性內(nèi)切酶(限制酶)切割目的DNA和載體DNA;②DNA的連接:使用DNA連接酶將目的DNA片段和載體DNA連接起來(lái);③轉(zhuǎn)化:將重組DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞中。
2.簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本步驟。
步驟:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本步驟包括:①細(xì)胞的收集與處理:從組織中獲取細(xì)胞并進(jìn)行消化;②細(xì)胞的洗滌與計(jì)數(shù):去除未消化的組織碎片,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù);③細(xì)胞的傳代:將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)容器中繼續(xù)培養(yǎng);④細(xì)胞的培養(yǎng):在適宜的培養(yǎng)基中提供必要的營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)條件,保持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。
3.簡(jiǎn)述高通量篩選技術(shù)在藥物研發(fā)中的應(yīng)用。
應(yīng)用:高通量篩選技術(shù)在藥物研發(fā)中的應(yīng)用包括:①篩選先導(dǎo)化合物:通過(guò)自動(dòng)化系統(tǒng)對(duì)大量化合物進(jìn)行活性測(cè)試,篩選出具有潛在藥效的化合物;②篩選靶點(diǎn):尋找能夠調(diào)節(jié)生物體內(nèi)特定生理過(guò)程的分子靶點(diǎn);③篩選藥物遞送系統(tǒng):尋找能夠提高藥物靶向性和生物利用度的遞送系統(tǒng)。
4.簡(jiǎn)述離子交換層析在蛋白質(zhì)純化中的應(yīng)用。
應(yīng)用:離子交換層析在蛋白質(zhì)純化中的應(yīng)用是通過(guò)電荷差異分離蛋白質(zhì)的方法。具體步驟包括:①準(zhǔn)備離子交換層析柱:將固定有離子交換基團(tuán)的樹脂填充到層析柱中;②上樣:將混合蛋白質(zhì)溶液加入層析柱;③洗脫:通過(guò)改變?nèi)芤旱碾x子強(qiáng)度或pH值,使特定蛋白質(zhì)從層析柱中洗脫出來(lái);④收集和純化:收集目標(biāo)蛋白質(zhì)并進(jìn)一步純化。
5.簡(jiǎn)述MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性的原理。
原理:MTT法(3(4,5二甲基噻唑2)2,5二苯基四唑溴化物)檢測(cè)細(xì)胞活性的原理是利用活細(xì)胞線粒體中的細(xì)胞色素C氧化酶催化MethylthiazolylTetrazolium鹽(MTT)甲臜(Formazan)的藍(lán)色產(chǎn)物。通過(guò)測(cè)量的甲臜的量,可以定量地評(píng)估細(xì)胞的活性。
答案及解題思路:
1.答案:重組DNA技術(shù)的基本原理是通過(guò)限制酶切割、連接和轉(zhuǎn)化,將不同來(lái)源的DNA片段組合在一起。
解題思路:理解重組DNA技術(shù)的關(guān)鍵步驟,即切割、連接和轉(zhuǎn)化,以及它們?nèi)绾螌?shí)現(xiàn)DNA片段的組合。
2.答案:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本步驟包括細(xì)胞的收集與處理、洗滌與計(jì)數(shù)、傳代和培養(yǎng)。
解題思路:回顧動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)流程,保證理解每一步驟的目的和重要性。
3.答案:高通量篩選技術(shù)在藥物研發(fā)中的應(yīng)用包括篩選先導(dǎo)化合物、靶點(diǎn)和藥物遞送系統(tǒng)。
解題思路:了解高通量篩選技術(shù)在藥物發(fā)覺(jué)過(guò)程中的關(guān)鍵作用,包括對(duì)化合物、靶點(diǎn)和遞送系統(tǒng)的篩選。
4.答案:離子交換層析在蛋白質(zhì)純化中的應(yīng)用是通過(guò)電荷差異分離蛋白質(zhì)。
解題思路:掌握離子交換層析的原理,理解它是如何基于蛋白質(zhì)的電荷特性進(jìn)行分離的。
5.答案:MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性的原理是利用活細(xì)胞線粒體中的細(xì)胞色素C氧化酶催化MTT甲臜。
解題思路:理解MTT法的工作機(jī)制,即通過(guò)檢測(cè)甲臜的量來(lái)評(píng)估細(xì)胞活性。五、論述題1.論述生物傳感器在生物醫(yī)藥研發(fā)中的應(yīng)用。
生物傳感器作為一種高靈敏度、高選擇性的檢測(cè)工具,在生物醫(yī)藥研發(fā)中扮演著重要角色。
生物傳感器能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)生物體內(nèi)或生物樣品中的特定分子,如蛋白質(zhì)、DNA、細(xì)胞等,為疾病的診斷、藥物研發(fā)和治療監(jiān)測(cè)提供有力支持。
應(yīng)用實(shí)例:
在疾病診斷方面,生物傳感器可以用于檢測(cè)病原體、腫瘤標(biāo)志物等,實(shí)現(xiàn)對(duì)疾病的早期發(fā)覺(jué)和精準(zhǔn)診斷。
在藥物研發(fā)方面,生物傳感器可以用于篩選和評(píng)估藥物候選分子的藥效和毒性,提高藥物研發(fā)效率。
2.論述基因克隆技術(shù)在生物醫(yī)藥研發(fā)中的應(yīng)用。
基因克隆技術(shù)是生物醫(yī)藥研發(fā)中不可或缺的基礎(chǔ)技術(shù),它使科學(xué)家能夠精確地復(fù)制和操作特定的基因片段。
應(yīng)用實(shí)例:
在基因治療領(lǐng)域,基因克隆技術(shù)用于將正常基因?qū)牖颊唧w內(nèi),以糾正遺傳缺陷或治療疾病。
在疫苗研發(fā)中,基因克隆技術(shù)用于生產(chǎn)病毒或細(xì)菌的特定蛋白,作為疫苗成分,激發(fā)人體免疫反應(yīng)。
3.論述高通量篩選技術(shù)在生物制藥領(lǐng)域的應(yīng)用前景。
高通量篩選技術(shù)通過(guò)自動(dòng)化和并行化手段,能夠在短時(shí)間內(nèi)對(duì)大量化合物或基因進(jìn)行篩選,是生物制藥領(lǐng)域的重要技術(shù)。
應(yīng)用前景:
在藥物研發(fā)中,高通量篩選技術(shù)可以加速新藥發(fā)覺(jué)過(guò)程,提高藥物研發(fā)效率。
在生物活性物質(zhì)篩選中,高通量篩選技術(shù)可以幫助科學(xué)家發(fā)覺(jué)新的生物活性化合物,為藥物設(shè)計(jì)和開發(fā)提供更多選擇。
4.論述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在生物醫(yī)藥研發(fā)中的應(yīng)用。
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是生物醫(yī)藥研發(fā)中用于生產(chǎn)疫苗、抗體、細(xì)胞治療產(chǎn)品等的重要技術(shù)手段。
應(yīng)用實(shí)例:
在疫苗生產(chǎn)中,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)用于大規(guī)模生產(chǎn)病毒疫苗或疫苗載體。
在生物治療領(lǐng)域,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)用于生產(chǎn)細(xì)胞因子、抗體和細(xì)胞治療產(chǎn)品。
5.論述蛋白質(zhì)組學(xué)在生物醫(yī)藥研發(fā)中的應(yīng)用。
蛋白質(zhì)組學(xué)是研究細(xì)胞內(nèi)所有蛋白質(zhì)的組成、結(jié)構(gòu)和功能的一門學(xué)科,它在生物醫(yī)藥研發(fā)中具有廣泛的應(yīng)用。
應(yīng)用實(shí)例:
在疾病研究方面,蛋白質(zhì)組學(xué)可以幫助科學(xué)家發(fā)覺(jué)與疾病相關(guān)的蛋白質(zhì)標(biāo)志物,用于疾病的診斷和預(yù)后評(píng)估。
在藥物研發(fā)中,蛋白質(zhì)組學(xué)可以用于發(fā)覺(jué)新的藥物靶點(diǎn),指導(dǎo)藥物設(shè)計(jì)和開發(fā)。
答案及解題思路:
答案:
1.生物傳感器在生物醫(yī)藥研發(fā)中的應(yīng)用主要包括疾病診斷、藥物研發(fā)和治療監(jiān)測(cè)等方面。
2.基因克隆技術(shù)在生物醫(yī)藥研發(fā)中的應(yīng)用包括基因治療和疫苗研發(fā)等。
3.高通量篩選技術(shù)在生物制藥領(lǐng)域的應(yīng)用前景包括加速新藥發(fā)覺(jué)和生物活性物質(zhì)篩選。
4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在生物醫(yī)藥研發(fā)中的應(yīng)用包括疫苗生產(chǎn)和生物治療產(chǎn)品生產(chǎn)。
5.蛋白質(zhì)組學(xué)在生物醫(yī)藥研發(fā)中的應(yīng)用包括疾病研究和藥物研發(fā)。
解題思路:
對(duì)于論述題,首先需要明確題目要求,然后根據(jù)所學(xué)知識(shí)和相關(guān)實(shí)例進(jìn)行論述。在論述過(guò)程中,要注意邏輯清晰、條理分明,并結(jié)合實(shí)際案例來(lái)支撐觀點(diǎn)。對(duì)于每一個(gè)應(yīng)用領(lǐng)域,都要詳細(xì)闡述其具體應(yīng)用實(shí)例和重要性。六、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題1.設(shè)計(jì)一個(gè)基于CRISPRCas9技術(shù)的基因編輯實(shí)驗(yàn)方案。
目的:通過(guò)CRISPRCas9技術(shù)敲除特定基因,研究其功能。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1.設(shè)計(jì)gRNA:根據(jù)目標(biāo)基因序列設(shè)計(jì)特異性gRNA。
2.構(gòu)建CRISPRCas9表達(dá)載體:將gRNA和Cas9編碼序列克隆到表達(dá)載體中。
3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:使用脂質(zhì)體或電穿孔等方法將表達(dá)載體轉(zhuǎn)染至目標(biāo)細(xì)胞。
4.篩選編輯細(xì)胞:通過(guò)PCR或測(cè)序驗(yàn)證基因編輯效率。
5.功能驗(yàn)證:通過(guò)功能實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證基因敲除對(duì)細(xì)胞或生物體的影響。
2.設(shè)計(jì)一個(gè)基于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的蛋白質(zhì)表達(dá)實(shí)驗(yàn)方案。
目的:在動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)并純化特定蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1.構(gòu)建表達(dá)載體:將目標(biāo)基因克隆到表達(dá)載體中,并加入啟動(dòng)子和終止子。
2.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:使用病毒轉(zhuǎn)染或脂質(zhì)體等方法將表達(dá)載體轉(zhuǎn)染至動(dòng)物細(xì)胞。
3.篩選穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞:通過(guò)G418篩選等方法獲得穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞。
4.蛋白質(zhì)純化:使用親和層析等方法純化目標(biāo)蛋白質(zhì)。
5.純度檢測(cè):通過(guò)SDSPAGE和Westernblot等方法檢測(cè)蛋白質(zhì)純度。
3.設(shè)計(jì)一個(gè)基于高通量篩選技術(shù)的藥物篩選實(shí)驗(yàn)方案。
目的:利用高通量篩選技術(shù)篩選具有活性的藥物候選分子。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1.構(gòu)建文庫(kù):將大量化合物構(gòu)建成文庫(kù)。
2.細(xì)胞培養(yǎng):將細(xì)胞培養(yǎng)在96孔板中。
3.加藥:將文庫(kù)中的化合物加入細(xì)胞培養(yǎng)體系中。
4.篩選:通過(guò)細(xì)胞活性或功能檢測(cè)篩選出活性化合物。
5.驗(yàn)證:對(duì)篩選出的化合物進(jìn)行活性驗(yàn)證和結(jié)構(gòu)鑒定。
4.設(shè)計(jì)一個(gè)基于離子交換層析的蛋白質(zhì)純化實(shí)驗(yàn)方案。
目的:利用離子交換層析技術(shù)純化特定蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1.蛋白質(zhì)樣品制備:收集蛋白質(zhì)樣品并去除雜質(zhì)。
2.層析柱準(zhǔn)備:選擇合適的離子交換樹脂填充層析柱。
3.洗脫:使用不同pH或離子強(qiáng)度的緩沖液進(jìn)行洗脫。
4.收集:收集純化后的蛋白質(zhì)。
5.純度檢測(cè):通過(guò)SDSPAGE和Westernblot等方法檢測(cè)蛋白質(zhì)純度。
5.設(shè)計(jì)一個(gè)基于MTT法的細(xì)胞活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)方案。
目的:利用MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1.細(xì)胞培養(yǎng):將細(xì)胞培養(yǎng)在96孔板中。
2.處理細(xì)胞:對(duì)細(xì)胞進(jìn)行藥物處理或其他實(shí)驗(yàn)操作。
3.加試劑:向每孔加入MTT試劑。
4.孵育:在37℃孵育一段時(shí)間。
5.溶解:加入DMSO溶解結(jié)晶。
6.檢測(cè):使用酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度值,計(jì)算細(xì)胞活性。
答案及解題思路:
1.答案:
設(shè)計(jì)CRISPRCas9基因編輯實(shí)驗(yàn)方案時(shí),需考慮gRNA設(shè)計(jì)、載體構(gòu)建、細(xì)胞轉(zhuǎn)染、編輯驗(yàn)證和功能驗(yàn)證等步驟。解題思路是首先明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康模缓蟾鶕?jù)目的設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟,最后驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
2.答案:
設(shè)計(jì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)蛋白質(zhì)表達(dá)實(shí)驗(yàn)方案時(shí),需考慮載體構(gòu)建、細(xì)胞轉(zhuǎn)染、篩選穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞、蛋白質(zhì)純化和純度檢測(cè)等步驟。解題思路是明確蛋白質(zhì)表達(dá)的目的,然后根據(jù)目的設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟,最后進(jìn)行純度和活性檢測(cè)。
3.答案:
設(shè)計(jì)高通量篩選藥物實(shí)驗(yàn)方案時(shí),需考慮化合物文庫(kù)構(gòu)建、細(xì)胞培養(yǎng)、加藥、篩選和驗(yàn)證等步驟。解題思路是明確藥物篩選的目的,然后根據(jù)目的設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟,最后對(duì)篩選出的化合物進(jìn)行活性驗(yàn)證。
4.答案:
設(shè)計(jì)離子交換層析蛋白質(zhì)純化實(shí)驗(yàn)方案時(shí),需考慮蛋白質(zhì)樣品制備、層析柱準(zhǔn)備、洗脫、收集和純度檢測(cè)等步驟。解題思路是明確蛋白質(zhì)純化的目的,然后根據(jù)目的設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟,最后進(jìn)行純度檢測(cè)。
5.答案:
設(shè)計(jì)MTT法細(xì)胞活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)方案時(shí),需考慮細(xì)胞培養(yǎng)、處理細(xì)胞、加試劑、孵育、溶解和檢測(cè)等步驟。解題思路是明確細(xì)胞活性檢測(cè)的目的,然后根據(jù)目的設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟,最后進(jìn)行吸光度值檢測(cè)。七、綜合題1.分析生物制藥過(guò)程中常見的質(zhì)量控制問(wèn)題及解決方案。
生物制藥過(guò)程中常見的質(zhì)量控制問(wèn)題有哪些?
針對(duì)這些問(wèn)題,有哪些有效的解決方案?
2.探討生物醫(yī)藥研發(fā)過(guò)程中新技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)。
目前生物醫(yī)藥研發(fā)中哪些新技術(shù)正在興起?
這些新技術(shù)的應(yīng)用前景如何?
3.分析生物醫(yī)藥研發(fā)中,基因編輯技術(shù)在藥物研發(fā)中的應(yīng)用。
基因編輯技術(shù)在藥物研發(fā)中有哪些應(yīng)用?
這些應(yīng)用對(duì)藥物研發(fā)產(chǎn)生了哪些影響?
4.分析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在生物醫(yī)藥研發(fā)中的應(yīng)
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