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文檔簡介

人民衛生出版社(第8版)

組織學與胚胎學

王世鄂

。人體解剖學與組織胚胎學系

緒論一、組織學的研究內容組織學(histology):研究機體微細結構及其相關功能的科學。它是以顯微鏡觀察組織切片為基本方法,又稱顯微解剖學。

二、內容:1、基本組織(總論):2、器官、系統(各論):

上皮組織結締組織肌組織神經組織

人體的組成200種Cell細胞(cell)

細胞外基質

(由細胞產生的非細胞物質)組織

Tissue器官organ系統人體4種組織按一定規律組合形成器官上皮組織

EpithelialTissue

結締組織ConnectiveTissue

肌組織

MuscularTissue神經組織

NervousTissue基本組織形態相似,功能相近的細胞群和細胞外基質構成組織基本單位,新陳代謝、生長發育、繁殖分化的形態基礎三、組織學常用計量單位1mm=1000μm,1μm=1000nm

問題

解決方法

觀察對象太小

放大

顯微鏡

觀察對象無色,無反差

染色(HE染色)

觀察對象生化成分不同

細胞化學、免疫組織化學

觀察對象是活體

培養四、組織學技術(一)一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡觀察組織切片組織切片標本—載玻片———蓋玻片————組織(lightmicroscope,LM)長度單位:μm分辨率:0.2μm

石蠟切片術(Paraffinsectioning)

1.LightMicroscopy

,

LM

:用顯微鏡觀察組織切片為最常用方法。標本要求:

保持生活狀態時的形態結構。

能透光。

易分辨不同結構(1)HE染色的石蠟切片制作過程:取材、固定脫水、包埋

切片、染色

封片

取材和固定:

保持生活狀態時的組織結構和成分。用固定劑如酒精、甲醛、混合固定劑,二甲苯酒精固定液

脫水:上行梯度酒精脫水,防止組織收縮。自動脫水機包埋:自動包埋機包埋材料:石蠟、火棉膠。

切片:切5

7m厚切片機MicrotomeEosin伊紅

酸性染料(粉紅色)

與被染物質結合結合染成紅色(被染物質)嗜酸性。

Hematoxylin

蘇木精堿性染料(藍色)與被染物質結合染成紫藍色(被染物質)嗜堿性。

染色:HE染色最常用

封片:

HE染色蘇木精:染色質、核糖體伊紅:細胞質、細胞外基質封片

HE染色切片標本

皮膚

卵巢(2)其他制片技術:涂片、鋪片、磨片等。

磨片

牙和骨等堅硬組織可磨成薄片。

涂片血細胞和分離培養的細胞可直接涂在玻片上制成。血涂片

鋪片:疏松結締組織和腸系膜等軟組織可撕成薄片鋪在玻片上。鋪片磨片

銀染法:硝酸銀、氯化金等重金屬鹽,其微粒附著在細胞或組織結構表面,而呈棕黑色或棕黃色。小腦蒲肯野細胞(3)特殊染色方法:銀染法、鐵蘇木精染色等激光掃描共聚焦顯微鏡技術共聚焦顯微鏡(二)電鏡技術(electronmicroscope,EM)

EM的原理和LM相似,但用電子束代替光線,磁場代替玻璃透鏡。

(二)電子顯微鏡術電子顯微鏡下才能看到的結構稱超微結構。1.透射電鏡:電子密度高:電子密度低:2.掃描電鏡:

分辨率:0.2nm計量單位:nm(納米)

透射電鏡(transmissionelectronmicroscope):

觀察細胞內部結構

掃描電鏡(scanningelectronmicroscope):

觀察組織或細胞表面的立體結構中性粒細胞(透射電鏡)黑白反差結構影像影像較黑稱電子密度高反之稱電子密度低(三)組織化學(細胞化學)術

Histochemistry(Cytochemistry)化學、物理、生物化學、免疫學、分子生物學原理和技術組織學技術顯示組織和細胞內化學成分的性質、位置、量的變化與功能的關系。(1)概念:+

一般組織化學術免疫組織化學術原位雜交術(2)分類肝細胞的ACP(酸性磷酸酶)化學反應有色沉淀1)一般組織化學技術PAS反應顯示肝細胞內糖原2)免疫細胞化學技術Immunocytochemistry:

用免疫學的抗原與其抗體特異性結合的原理,顯示組織細胞內的肽或蛋白質。此法特異性強,靈敏度高,在基礎與臨床研究中得到廣泛應用。直接法間接法Ag+AbAg—Ab+標記抗體顯色免疫組織化學染色免疫熒光染色3)原位雜交:InSituHybridization

原理:根據核酸DNA、RNA中的互補堿基專一配對的原理。

檢測:細胞內DNA和mRNA序列片段,原位研究細胞合成多肽或蛋白質的基因轉錄物mRNA表達。原位雜交原理(四)4.組織培養技術

TissueCulture

將離體的細胞、組織在體外合適的條件下培養,使其生存和生長的技術。研究各種理化因素對其生長代謝的影響。條件:適宜的營養、生長因子、PH值、滲透壓、O2和CO2濃度、溫度等,還須嚴防微生物的污染。原代培養:首次培養的細胞。傳代培養:細胞增殖到一定密度,需進行傳代再培養。培養液:培養基+5%~10%胎牛血清孵育液化的精液涂片培養的早期胚(四)圖像分析術:

(五)組織工程:TissueEngineering

組織工程是用細胞培養術在體外模擬構建機體組織和器官的技術。四要素:種子細胞:生物材料支架:構建組織或器官:移植:我國的曹誼林和Vacanti等在裸鼠背上成功的制造了人耳形和狗耳形。

三、組織胚胎學在醫學中的地位及學習方法

(一)地位

為什么要學習組織胚胎學?1.

組織學又叫微觀解剖學(Microanatomy),是解剖學知識的進一步完善。2.

結構是功能的基礎,學好組織學是學好生理學(Physiology)的基礎。3.

只有了解正常結構,才能學習其異常變化。因此組織學是病理學(Pathology)的基礎。4.

是相關臨床課程基礎5.

組織胚胎學學成績不及格,必須補考、重修和留級。排卵、早期胚發生及其與女性生殖道關系模式圖子宮內膜子宮肌層子宮外膜卵巢發育中的卵泡

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