人體寄生蟲學實驗顯微鏡使用了解顯微鏡的基本構造；掌握正確使用顯微鏡的方法；掌握油鏡的原理和使用方法。顯微鏡的基本構造

顯微鏡的構造機械裝置光學系統鏡座載物臺鏡臂標本夾和標本移動尺粗調螺旋和細調螺旋聚光鏡升降螺旋接目鏡接物鏡及鏡頭轉換器聚光鏡虹彩光圈電光源操作步驟放置好顯微鏡調節光源低倍鏡觀察高倍鏡觀察油鏡觀察清潔和還原顯微鏡1.放置好顯微鏡

顯微鏡置于平穩的實驗臺上，鏡座距實驗臺邊沿約為3~4cm。鏡檢者姿勢要端正。取、放顯微鏡時應一手握住鏡臂，一手托住底座，使顯微鏡保持直立、平穩。切忌用單手拎提；且不論使用單筒顯微鏡或雙筒顯微鏡均應雙眼同時睜開觀察。2.調節好光源接通電源，打開光源。-弱光：無色標本或未染色標本；低倍鏡；

強光：染色標本；高倍鏡光線調節：

撥動反光鏡：調節至視野最亮無暗影；

光源較強時用平面，較弱時用凹面；

需要強光：將聚光器提高，光圈放大；

需要弱光：將聚光器降低，光圈縮小。3.低倍鏡觀察將標本玻片放在載物臺上，用標本夾夾住，調節標本推進器，使觀察對象處于物鏡正下方。調節粗調螺旋，使物鏡（10×）與標本靠近，眼睛在測向注視物鏡，防止物鏡和載玻片相碰。張開雙眼向目鏡里觀察，如果見到目的物，但不十分清楚，可用細準焦螺旋調節，至目的物清晰為止。通過標本推進器慢慢移動玻片，認真觀察標本各部分，找到合適的目的物，仔細觀察并記錄所觀察到的結果。4.高倍鏡的觀察使用高倍鏡前，必須先用低倍鏡觀察，發現目的物后將它移至視野正中處。旋動轉換器換高倍鏡。如果高倍鏡觸及載玻片立即停止旋動，這說明原來低倍鏡并沒有調準，目的物并沒有真正找到，必須用低倍鏡重新調節。如果高倍鏡下觀察目的物有點模糊，調節細準焦螺旋，直到視野清晰。調節細準焦螺旋時要注意旋轉方向與載物臺上升或下降的關系，防止鏡頭與載玻片強力接觸，損壞鏡頭或載玻片。5.油鏡的觀察如果用高倍鏡目的物未能看清，可用油鏡。先用低倍鏡和高倍鏡檢查標本片，將目的物移到視野正中。下降載物臺，在載玻片上滴一滴香柏油，將油鏡移至正中，緩慢調節粗調螺旋使油鏡頭浸沒在油中，剛好貼近載玻片。然后再用細準焦螺旋微微向上調（切忌用粗準焦螺旋）即可。（應特別注意不要在升降載物臺時用力過猛，或者調焦時誤將粗調節螺旋向反方向轉動而損壞鏡頭及載玻片）6.清潔顯微鏡和還原顯微鏡觀察結束后，調節光源到最小再關掉電源開關。調節粗調螺旋，使載物臺下降到最低，取下玻片。把油鏡轉離光軸，擦鏡紙擦1～2次，去油，用二甲苯滴濕的擦鏡紙擦2次，再用擦鏡紙擦1～2次，順鏡頭直徑方向擦，不要圓周擦和來回擦。擦干凈鏡體，罩上防塵罩，然后放回原處。用擦油鏡頭的方法擦玻片。顯微結構圖的繪制

嚴格按光學顯微鏡的操作方法，依低倍、高倍及油鏡的次序觀察常見蟲卵或寄生蟲示教片，并繪出其形態圖。生物繪圖中繪出的圖要清楚，并正確的表示出形態構造的特點，繪圖注意事項如下：(1)繪圖要用黑色硬鉛筆，不要用軟鉛筆，一般用2H鉛筆為宜。(2)圖的大小及在紙上分布的位置要適當。一般畫在靠近中央稍偏左方，并向右方引出注明各部名稱的線條。各引出線條要整齊平列，各部名稱寫在線條右邊。(3)畫圖時先用輕淡小點或輕線條畫出輪廓，再依照輪廓一筆畫出與物象相符的線條。線條要清晰，比例要準確。較長的線條要向順手的方向運筆，或把紙轉動再畫。同一線條粗細相同，中間不要有斷線或開叉痕跡，線條也不要涂抹。(4)繪出的圖要正確，觀察時要把混雜物、破損、重疊等現象區別清楚，不要把這些現象繪上。(5)圖的明暗及濃淡，應用細點表示，不要采用涂抹方法。點細點時，要點成圓點，不要點成小撇。(6)整個圖要美觀、整潔，還要特別注意準確性。病原學檢查B選擇適宜的采血時間惡性瘧在發作前半小時至發作時間日瘧在發作后數小時至10余小時A血膜染色鏡檢：取外周血制作厚、薄血膜姬氏或瑞氏染劑染色

鏡檢

瘧原蟲瘧原蟲：

環狀體、滋養體、裂殖體、配子體1）瘧原蟲的基本構造為核、胞質、胞膜和瘧色素2）用瑞氏或姬氏染液染色后

核呈紫紅色胞質為天藍至深藍色瘧色素呈棕黃色、棕褐色或黑褐色胞核1個，較小，位于蟲體一側；胞質少、中間有空泡、蟲體多呈環狀，1/31、環狀體（早期滋養體）細胞核細胞質紅內期間日瘧原蟲Plamodiumvivax(Pv)紅細胞：體積脹大、顏色變淺、出現薛氏小點2、大滋養體（晚期滋養體）胞核增大、胞質增多、有時伸出偽足、開始出現瘧色素薛氏點瘧色素細胞核細胞質3、裂殖體（成熟）核反復分裂（12-24個）、胞質隨之分裂、核被胞質包裹成為裂殖子細胞核細胞質薛氏點瘧色素4、配子體經過數次裂體增殖后，部分裂殖子進入紅細胞后、核增大而不再分裂，胞質增多而無偽足、發育為圓形、卵圓形（或新月形）的個體。雄配子體（小配子體）圓形或橢圓形；蟲體較小；胞質稀薄；核質疏松，較大，位于蟲體中央；瘧色素少而細小。雌配子體（大配子體）圓形或橢圓形；蟲體較大；胞質致密；核質致密，較小，偏于蟲體一側或居中；瘧色素多而粗大。溶組織阿米巴1.滋養體(trophozoite)直徑12～60μμm；內外質：外質透明（凝膠），內質顆粒狀（溶膠），可見吞噬的紅細胞（組織內）；泡狀核：核仁小，居中；核膜內緣有染色質粒；核仁與核膜間有時可見網狀核纖絲；運動器官為葉狀偽足；滋養體（鐵蘇木素染色）2.包囊(cyst)未成熟成熟未成熟：近似圓形、1~2個核、擬染色體、糖原泡；成熟：圓形、4個泡狀核，與滋養體相似但稍小。單核包囊二核包囊四核包囊二分裂增殖陰道毛滴蟲活體無色透明，有折光性，體態多變，固定染色后呈梨形；體長7~23μm；有4根前鞭毛和1根后鞭毛。波動膜位于蟲體前1/2處，為蟲體作旋轉式運動器官；橢圓形泡狀核1個；軸柱纖細透明，縱貫蟲體，向后伸出。成蟲寄生于人或哺乳動物的靜脈內；口腹吸盤位于蟲體前端；雌雄異體；雄蟲雌蟲血吸蟲毛蚴卵殼小棘/側刺分泌物日本血吸蟲蟲卵橢圓形，淡黃色；卵殼厚薄均勻，無小蓋；卵殼一側有逗點狀小棘；表面常有宿主組織殘留物；薄層胚膜內含成熟毛蚴，

毛蚴前端有錐形頂突；中間宿主——湖北釘螺豬帶絳蟲牛帶絳蟲長度2-4m4-8m節片700-1000節，較薄1000-2000節，較厚頭節球形，有頂突及小鉤略呈方形,無頂突及小鉤成節卵巢分三葉卵巢分二葉孕節子宮每側7-13支子宮每側15-30支囊尾蚴可寄生人體不寄生人體蟲卵在形態上難以區別豬帶絳蟲牛帶絳蟲成蟲豬帶絳蟲牛帶絳蟲

豬帶絳蟲牛帶絳蟲成節：卵巢分三葉卵巢分二葉豬帶絳蟲牛帶絳蟲

豬帶絳蟲

牛帶絳蟲

孕節：子宮每側7-13支

子宮每側15-30支球形，直徑(31～43)μm。卵殼薄而透明，內為胚膜。胚膜較厚，棕黃色，由許多棱柱體組成，在光鏡下呈放射狀的條紋。胚膜內含球形的六鉤蚴，具3對小鉤。完整蟲卵不完整蟲卵蟲卵卵殼六鉤蚴胚膜六鉤蚴胚膜完整帶絳蟲卵不完整帶絳蟲卵堿性消化液囊尾蚴囊尾蚴頭節翻出即豬囊尾蚴(cysticercuscellulosae),俗稱囊蟲(bladderworm),為白色半透明、卵圓形的囊狀體,約黃豆大小(8~10)mmx5mm,囊內充滿透明的囊液。囊壁分兩層,外為皮層,內為間質層,間質層有一處向囊內增厚形成米粒大小的白點,是向內翻卷收縮的頭節,其形態結構和成蟲頭節相同。幼蟲標本觀察1.蛔蟲成蟲大體標本（示教）

Female:20-35cmMale:15-31cm形似蚯蚓，雌蟲長20~40cm,乳白色，兩端略尖，表面光滑，尾部挺直而鈍圓。雄蟲較小，長15~30cm，尾端向腹側彎曲，可見一交合刺。蛔蟲2.蛔蟲成蟲解剖標本（示教）3.蛔蟲性腸梗阻大體標本（示教）實驗方法直接涂片法在潔凈的載玻片上滴一滴生理鹽水，用竹簽挑取米粒大小的糞便，在生理鹽水中涂抹均勻，涂片的厚度以透過涂片隱約看到書上的字跡為宜。然后在顯微鏡下觀察，觀察時采用閱讀式順序檢查以防漏檢。4.受精蛔蟲卵（實驗）蛋白質膜卵殼卵細胞新月形空隙受精蛔蟲卵的發育5.未受精蛔蟲卵（實驗）蛋白質膜卵殼折光顆粒1.成蟲

（示教）

外形似馬鞭，前端細長，約占蟲體的3／5，后端明顯粗大。雌蟲長3～5cm，尾端鈍圓。雄蟲長3～4cm，尾端向腹面彎曲呈螺旋形。鞭蟲透明栓（蓋塞)卵殼卵細胞1)腰鼓形2)棕黃色3)中等偏小4)中等厚度5)卵細胞2.鞭蟲卵（實驗）1.鉤蟲成蟲大體標本十二指腸鉤蟲美洲鉤蟲鉤蟲2.鉤蟲成蟲解剖標本十二指腸鉤蟲口囊十二指腸鉤蟲交合傘美洲鉤蟲口囊美洲鉤蟲交合傘卵殼卵細胞空隙鉤蟲鉤蟲卵鉤蟲診斷1直接涂片法用竹簽挑取米粒大小的糞便，在生理鹽水中涂抹均勻，在潔凈的載玻片上滴一滴蟲卵懸液。然后在顯微鏡下觀察，觀察時采用閱讀式順序檢查以防漏檢。鉤蟲診斷2飽和鹽水浮聚法先在漂浮管中加入1／4量的飽和鹽水，用竹簽挑取蠶豆大小的糞便放入管中調勻，然后慢慢地加人飽和鹽水至管口，再用吸管加飽和鹽水至液面略高于管口而不外溢為止。靜置15分鐘，取一潔凈玻片輕輕扣壓液面，垂直提起，并迅速翻轉玻片，使液面朝上，置顯微鏡下檢查。鉤蟲診斷3鉤蚴培養法將濾紙剪成與試管等寬但較試管稍長的T字型紙條，用竹簽挑取約黃豆大小的糞便，均勻地涂抹在紙條上段2／3處，將紙條插入試管中，用滴管將清水從沒有紙條的一邊沿管壁加入底部,使水浸泡濾紙條的下段，以糞便不接觸水面為準。放入30℃溫箱中孵育，3～5天后觀察試管下段的清水中有無鉤蚴活動。可寄生人體絲蟲共有八種，中國只有兩種：班氏吳策線蟲Wuchereriabancrofti

(班氏絲蟲）馬來布魯線蟲Brugiamalayi(馬來絲蟲）均寄生于人淋巴系統，引起淋巴絲蟲病。臨床表現有淋巴管炎、乳糜尿、象皮腫等絲蟲是由節肢動物傳播的一類寄生性線蟲。絲蟲引起絲蟲病，是我國五大寄生蟲病之一；世界十大熱帶病之一。簡介形態♀♂1.成蟲1)乳白色，細絲線狀，體表光滑，長50~100mm2）雌蟲大于雄蟲，雄蟲尾部卷曲成圈。形態2.幼蟲頭間隙體核鞘膜1微絲蚴（microfilaria)班氏微絲蚴班氏微絲蚴頭間隙馬來微絲蚴馬來微絲蚴頭間隙尾核班氏微絲蚴馬來微絲蚴2.幼蟲2感染期幼蟲（絲狀蚴）成熟的絲狀蚴從蚊子的喙中逸出。形態成蟲微絲蚴臘腸期蚴臘腸期蚴絲狀蚴成蟲(淋巴系統)蚊吸血班氏:2周馬來:1周（夜晚）（蚊胸肌內）（蚊喙）蚊吸血2-3月成蟲壽命：4-10年蚊刺吸人血時，微絲蚴——胃(1-7h)——脫去鞘膜(穿過胃壁)——胸肌——臘腸期幼蟲（蛻皮2次）——感染期幼蟲（離開胸肌）——蚊體各部——口器蚊當蚊刺吸人血時，感染期幼蟲經吸血的皮膚傷口（侵入）——淋巴系統——成蟲（交配）——微絲蚴，隨淋巴液經胸導管至血循環。人中華按蚊淡色庫蚊VectorofB.malayiVectorofW.bancrofti微絲蚴→絲狀蚴：26-32℃

班氏絲蟲：10-14d，馬來絲蟲：6-6.5d只發育，不增殖⒈終宿主：人⒉保蟲宿主：

班氏絲蟲：無，人是唯一的終宿主 馬來絲蟲：多種脊椎動物⒊中間宿主：蚊⒋感染階段：絲狀蚴(感染期蚴)⒌感染方式：經蚊叮咬接種感染⒍致病階段：成蟲、微絲蚴⒎診斷階段：微絲蚴、成蟲生活史生活史要點：夜現周期性：微絲蚴白天滯留在肺毛細血管中，夜晚則出現在外周血液。這種微絲蚴在人體外周血液內晝少夜多的現象稱為夜現周期性。班氏微絲蚴：晚上10時~次晨2時馬來微絲蚴：晚上8時~次晨4時生活史高峰時間致病?病程主要是成蟲引起潛隱期+微絲蚴血癥期

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