2025版新教材高考生物學第二輪復習

專題21細胞工程

五年高考

考點1植物細胞工程

1.（2024黑、吉、遼,6,2分）迷迭香酸具有多種藥理活性。進行工廠化生產時,先誘導外植體

形成愈傷組織，再進行細胞懸浮培養獲得迷迭香酸，加入誘導劑茉莉酸甲酯可大幅提高產

量。下列敘述錯誤的是（）

A.迷迭香頂端幼嫩的莖段適合用作外植體

B.誘導愈傷組織時需加入NAA和脫落酸

C.懸浮培養時需將愈傷組織打散成單個細胞或較小的細胞團

D.茉莉酸甲酯改變了迷迭香次生代謝產物的合成速率

2.（2024湖北,11,2分）植物甲抗旱、抗病性強,植物乙分篥能力強、結實性好。科研人員通

過植物體細胞雜交技術培育出兼有甲、乙優良性狀的植物丙，過程如圖所示。下列敘述錯

誤的是（）

______酶解（1.5小時）______

植物甲_^...與_甲的原

同融合的原

:①混合酶液處理:一生質體

植物乙乙的原

葉片生質體

I植物丙日愈傷組織內雜種細胞聲■

A.過程①中酶處理的時間差異，原因可能是兩種親本的細胞壁結構有差異

B.過程②中常采用滅活的仙臺病毒或PEG誘導原生質體融合

C.過程④和⑤的培養基中均需要添加生長素和細胞分裂素

D.可通過分析植物丙的染色體，來鑒定其是否為雜種植株

3.（不定項）（2024山東,20,3分）下列關于植物愈傷組織的說法正確的是（）

A.用果膠酶和膠原蛋白酶去除愈傷組織的細胞壁獲得原生質體

B.融合的原生質體需再生出細胞壁后才能形成愈傷組織

C.體細胞雜交獲得的雜種植株細胞中具有來自親本的2個細胞核

D.通過愈傷組織再生出多個完整植株的過程屬于無性繁殖

4.（2023河北,13,2分）植物細胞懸浮培養是將單個細胞或細胞團進行液體培養增殖的技術。

下列敘述錯誤的是（）

A.植物細胞懸浮培養的培養基須經無菌處理

B.經纖維素酶和果膠酶充分處理后，植物細胞團分散為單個完整的懸浮細胞

C.為使懸浮細胞正常生長,培養基須保持適當的溫度、pH和滲透壓

D.利用懸浮培養技術生產次生代謝物，可減少植物資源的消耗

5.（2023江蘇,13,2分）研究者通過體細胞雜交技術，探索利用條斑紫菜和擬線紫菜培育雜種

紫菜。下列相關敘述正確的是（）

A.從食用紫菜的動物消化道內提取蛋白酶，用于去除細胞壁

B.原生質體需在低滲溶液中長期保存，以防止過度失水而死亡

C.檢測原生質體活力時可用苯酚品紅或甲紫溶液處理,活的原生質體被染色

D.聚乙二醇促進原生質體融合后，以葉綠體顏色等差異為標志可識別雜種細胞

6.（2023山東,14,2分）利用植物細胞培養技術在離體條件下對單個細胞或細胞團進行培養

使其增殖，可獲得植物細胞的某些次生代謝物。下列說法正確的是（）

A.利用該技術可獲得某些無法通過化學合成途徑得到的產物

B.植物細胞體積小，故不能通過該技術進行其產物的工廠化生產

C次生代謝物是植物所必需的，但含量少，應選擇產量高的細胞進行培養

D.該技術主要利用促進細胞生長的培養條件提高單個細胞中次生代謝物的含量

7.（2022遼寧,14,2分）藍莓細胞富含花青素等多酚類化合物。在藍莓組織培養過程中，外植

體切口處細胞被破壞，多酚類化合物被氧化成褐色醍類化合物，這一過程稱為褐變o褐變會

引起細胞生長停滯甚至死亡，導致藍莓組織培養失敗。下列敘述錯誤的是（）

A.花青素通常存在于藍莓細胞的液泡中

B.適當增加培養物轉移至新鮮培養基的頻率以減少褐變

C.在培養基中添加合適的抗氧化劑以減少褐變

D.宜選用藍莓成熟葉片為材料制備外植體

8.（2023新課標,35,12分）根瘤菌與豆科植物之間是互利共生關系，根瘤菌侵入豆科植物根

內可引起根瘤的形成，根瘤中的根瘤菌具有固氮能力。為了尋找抗逆性強的根瘤菌,某研究

小組做了如下實驗:從鹽堿地生長的野生草本豆科植物中分離根瘤菌;選取該植物的莖尖

為材料，通過組織培養獲得試管苗（生根試管苗）;在實驗室中探究試管苗根瘤中所含根瘤

菌的固氮能力?；卮鹣铝袉栴}。

⑴從豆科植物的根瘤中分離根瘤菌進行培養，可以獲得純培養物，此實驗中的純培養物

是O

⑵取豆科植物的莖尖作為外植體,通過植物組織培養可以獲得豆科植物的試管苗。外植體

經誘導形成試管苗的流程是:外植體旦愈傷組織旦試管苗。其中①表示的過程

是，②表示的過程是o由外植體最終獲得完整的植株,這一過程說明

植物細胞具有全能性。細胞的全能性是

指。

⑶研究小組用上述獲得的純培養物和試管苗為材料,研究接種到試管苗上的根瘤菌是否

具有固氮能力，其做法是將生長在培養液中的試管苗分成甲、乙兩組，甲組中滴加根瘤菌菌

液,讓試管苗長出根瘤。然后將甲、乙兩組的試管苗分別轉入的培養液中培

養，觀察兩組試管苗的生長狀況，若甲組的生長狀況好于乙組，則說

明O

⑷若實驗獲得一種具有良好固氮能力的根瘤菌，可通過發酵工程獲得大量根瘤菌用于生

產根瘤菌肥。根瘤菌肥是一種微生物肥料，在農業生產中使用微生物肥料的作用是

（答出2點即可）。

考點2動物細胞工程

9.（2023遼寧,7,2分）大量懸浮培養產流感病毒的單克隆細胞，可用于流感疫苗的生產。下列

敘述錯誤的是（）

A.懸浮培養單克隆細胞可有效避免接觸抑制

B.用于培養單克隆細胞的培養基通常需加血清

C.當病毒達到一定數量時會影響細胞的增殖

D.培養基pH不會影響單克隆細胞的病毒產量

10.（2022湖北,7,2分）某興趣小組開展小鼠原代神經元培養的研究，結果發現其培養的原代

神經元生長緩慢，其原因不可能的是（）

A.實驗材料取自小鼠胚胎的腦組織

B.為了防止污染將培養瓶瓶口密封

C.血清經過高溫處理后加入培養基

D.所使用的培養基呈弱酸性

11.（2022湖北,15,2分）納米氧化亞銅是一種納米材料。為了探究納米氧化亞銅對貼壁生長

細胞活性的影響，研究者在培養基中添加一定量的納米氧化亞銅,8小時后觀察到細胞萎縮,

體積變小，細胞核變大，細胞膜內側出現納米氧化亞銅富集現象，培養瓶中大量貼壁細胞脫

落,出現細胞懸浮。根據該實驗現象，能得出的正確結論是（）

A.納米氧化亞銅改變了細胞的貼壁生長習性

B.納米氧化亞銅對該細胞生長有抑制作用

C.納米氧化亞銅能通過自由擴散進入細胞

D.納米氧化亞銅不影響細胞的新陳代謝

12.（2022山東,15,2分）如圖所示川各由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外

解偶聯后重新偶聯可制備雙特異性抗體，簡稱雙抗。下列說法錯誤的是（）

抗體1抗體2雙抗

A.雙抗可同時與2種抗原結合

B.利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞

C.篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原

D.同時注射2種抗原可刺激B細胞分化為產雙抗的漿細胞

13.（多選）（2022江蘇,19,3分）如圖表示利用細胞融合技術進行基因定位的過程，在人一鼠雜

種細胞中人的染色體會以隨機方式丟失,通過分析基因產物進行基因定位。現檢測細胞I、

n、in中人的4種酶活性，只有n具有芳蝶羥化酶活性，只有ni具有胸背激酶活性，i、in

都有磷酸甘油酸激酶活性,i、n、in均有乳酸脫氫酶活性。下列相關敘述正確的有（）

A.加入滅活仙臺病毒的作用是促進細胞融合

B.細胞I、n、ni分別為人一人、人一鼠、鼠一鼠融合細胞

C.芳煌羥化酶基因位于2號染色體上,乳酸脫氫酶基因位于11號染色體上

D.胸背激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上

14.（2021遼寧,13,2分）如圖是利用體細胞核移植技術克隆優質奶牛的簡易流程圖。有關敘

述正確的是（）

￡一窗

①供體細巧射

胞培養送］里激活并

，合，、培養移代孕

乙

牛重組細胞

生出后

代丁牛

A.后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質共同決定

B.過程①需要提供95%空氣和5%CO2的混合氣體

C.過程②常使用顯微操作去核法對受精卵進行處理

D.過程③將激活后的重組細胞培養至原腸胚后移植

15.（2021遼寧,3,2分）下列有關病毒在生物學和醫學領域應用的敘述，錯誤的是（）

A.滅活的病毒可用于誘導動物細胞融合

B.用特定的病毒免疫小鼠可制備單克隆抗體

C.基因工程中常用噬菌體轉化植物細胞

D.經滅活或減毒處理的病毒可用于免疫預防

16.（2023重慶,16,10分）妊娠與子宮內膜基質細胞的功能密切相關。某研究小組通過如圖

所示的實驗流程獲得了子宮內膜基質細胞，以期用于妊娠相關疾病的研究。

⑴手術獲得的皮膚組織需在低溫下運至實驗室，低溫對細胞中各種蛋白質的作用

為。

⑵過程①中，誘導形成iPS細胞時，需提高成纖維細胞中4個基因的表達量,可采用

技術將這些基因導入該細胞。這4個基因的主要作用為:M基因促進增殖,S基因和C基因

控制干細胞特性,K基因抑制凋亡和衰老。若成纖維細胞形成腫瘤細胞，最有可能的原因是

基因過量表達。

⑶培養iPS細胞時，應對所處環境定期消毒以降低細胞被污染風險?？捎米贤饩€進行消毒

的

是（多選）。

A.培養基B.培養瓶

C.細胞培養室D.CO2培養箱

⑷過程②中,iPS細胞經歷的生命歷程為。PCR技術可用于檢測子宮內

膜基質細胞關鍵基因的mRNA水平,mRNA需經過才能作為PCR擴增的模板。

17.（2023湖北,22,16分）某病毒對動物養殖業危害十分嚴重。我國學者擬以該病毒外殼蛋

白A為抗原來制備單克隆抗體，以期快速檢測該病毒,其主要技術路線如圖所示。

回答下列問題:

(1)與小鼠骨髓瘤細胞融合前，已免疫的脾細胞(含漿細胞)(填“需要”或“不需

要”)通過原代培養擴大細胞數量;添加脂溶性物質PEG可促進細胞融合，該過程中PEG對

細胞膜的作用是。

(2)在雜交瘤細胞篩選過程中，常使用特定的選擇培養基(如HAT培養基)，該培養基對

和生長具有抑制作用。

(3)單克隆抗體篩選中,將抗體與該病毒外殼蛋白進行雜交，其目的是

(4)構建重組質粒需要使用DNA連接酶。下列屬于DNA連接酶底物的是

HOOHPP

51??I?????????3,5，-mJ'i????????31

1

3，U_L_U_LJ11kli1」_5,3-.1.1l,1.1.1l,,!.!11.1..5

HOOHPP

①②

POHHOP

5|||I|||||||||3,5'TT"f11111111131

3>i?ii11iniii115>

3，J_LLLLU11kllJJ_5,

HOPPOH

③④

18.(2022遼寧,24,10分)某抗膜蛋白治療性抗體藥物研發過程中，需要表達N蛋白胞外段,

制備相應的單克隆抗體，增加其對N蛋白胞外段特異性結合的能力。

I.N蛋白胞外段抗原制備，流程如圖1

|N蛋白胞病毒

體

脂質

組

裝N蛋白胞|

包裝收集感染海一|

釋

放，外段表達、

導入

細胞病毒5SW|純化|

|毒質粒

圖1

(1)構建重組慢病毒質粒時，選用氨葦青霉素抗性基因作為標記基因，目的

是O用脂質體將重組慢病毒質粒與輔助質粒導入病毒包裝細胞,質粒被

包在脂質體(填“雙分子層中”或“兩層磷脂分子之間”)。

⑵質粒在包裝細胞內組裝出由組成的慢病毒，用慢病毒感染海拉細胞進而

表達并分離、純化N蛋白胞外段。

II.N蛋白胞外段單克隆抗體制備，流程如圖2

圖2

(3)用N蛋白胞外段作為抗原對小鼠進行免疫后，取小鼠脾組織用酶處理，制

成細胞懸液,置于含有混合氣體的中培養，離心收集小鼠的B淋巴細胞，與骨髓瘤

細胞進行融合。

⑷用選擇性培養基對融合后的細胞進行篩選，獲得雜交瘤細胞，將其接種到96孔板，進行

培養。用技術檢測每孔中的抗體,篩選既能產生N蛋白胞外段抗體，又

能大量增殖的單克隆雜交瘤細胞株，經體外擴大培養，收集，提取單克隆

抗體。

⑸利用N蛋白胞外段抗體與藥物結合，形成，實現特異性治療。

19.（2022福建,21節選,8分）美西螺具有很強的再生能力。研究表明,美西螺的巨噬細胞在

斷肢再生的早期起重要作用。為研究巨噬細胞的作用機制，科研人員制備了抗巨噬細胞表

面標志蛋白CD14的單克隆抗體，具體方法如下?；卮鹣铝袉栴}：

（二）抗CD14單克隆抗體的制備

流程如圖所示：

免疫

①陋』

特定培養專一抗⑤⑥

基篩選體檢測

SP2/0細胞③④

⑴步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射

和O

⑵步驟②所用的SP2/0細胞的生長特點是。

⑶吸?、壑械纳锨逡旱舰艿呐囵B孔中，根據抗原一抗體雜交原理，需加入進

行專一抗體檢測，檢測過程發現有些雜交瘤細胞不能分泌抗CD14抗體，原因

是。

⑷步驟⑥從中提取到大量的抗CD14抗體用于檢測巨噬細胞。

考點3胚胎工程

20.（2024湖北,5,2分）波爾山羊享有“世界山羊之王”的美譽，具有生長速度快、肉質細嫩等

優點。生產中常采用胚胎工程技術快速繁殖波爾山羊。下列敘述錯誤的是（）

A.選擇遺傳性狀優良的健康波爾母山羊進行超數排卵處理

B.胚胎移植前可采集滋養層細胞進行遺傳學檢測

C.普通品質的健康杜泊母綿羊不適合作為受體

D.生產中對提供精子的波爾公山羊無需篩選

21.（2024貴州,13,3分）生物學實驗中合理選擇材料和研究方法是順利完成實驗的前提條件。

下列敘述錯誤的是（）

A.稀釋涂布平板法既可分離菌株又可用于計數

B.進行胚胎分割時通常是在原腸胚期進行分割

C.獲取馬鈴薯脫毒苗常選取莖尖進行組織培養

D.使用不同的限制酶也能產生相同的黏性末端

22.（2023廣東,3,2分）科學家采用體外受精技術獲得紫羚羊胚胎，并將其移植到長角羚羊體

內，使后者成功妊娠并產仔,該工作有助于恢復瀕危紫羚羊的種群數量。此過程不涉及的操

作是（）

A.超數排卵B.精子獲能處理

C.細胞核移植D.胚胎培養

23.（2023浙江1月選考,12,2分）在家畜優良品種培育過程中常涉及胚胎工程的相關技術。

下列敘述第誤的是（）

A.經獲能處理的精子才能用于體外受精

B.受精卵經體外培養可獲得早期胚胎

C.胚胎分割技術提高了移植胚胎的成活率

D.胚胎移植前需對受體進行選擇和處理

24.（2022北京,11,2分）將黑色小鼠囊胚的內細胞團部分細胞注射到白色小鼠囊胚腔中，接

受注射的囊胚發育為黑白相間的小鼠（Me）。據此分析，下列敘述第誤的是（）

A.獲得Me的生物技術屬于核移植

B.Mc表皮中有兩種基因型的細胞

C.注射入的細胞會分化成Me的多種組織

D.將接受注射的囊胚均分為二，可發育成兩只幼鼠

三年模擬

綜合基礎練

1.（2024河北唐山一模,13）紫杉醇具有良好抗癌作用?？蒲腥藛T用植物外植體獲得愈傷組

織，然后在液體培養基中進行細胞懸浮培養，以獲得更多紫杉醇。下列敘述錯誤的是（）

愈

外

傷液體培養工廠化生產、

細胞懸浮_

r組

基中懸浮一培養與繼^弋一提取、檢測

織振蕩培養紫杉醇

A.誘導愈傷組織需要考慮外植體的取材部位、培養基組成和激素種類等

B.由愈傷組織得到懸浮細胞可以使用纖維素酶和果膠酶進行處理

C.使用液體培養基并振蕩有利于細胞獲取氧氣和營養物質，促進細胞生長

D.利用植物細胞培養技術獲得初生代謝產物紫杉醇能避免大量破壞野生紅豆杉種群

2.（2024九省聯考貴州卷,15）植物體細胞雜交技術可克服種間生殖隔離。應用該技術獲得

“番茄一馬鈴薯”雜種植株，拓展了植物的種質資源。下列敘述正確的是（）

A.植物細胞壁的水解需要纖維素酶和幾丁質酶

B.愈傷組織是由已分化的細胞所構成的細胞團

C.雜種細胞的染色體數一定是原細胞染色體數的2倍

D.“番茄一馬鈴薯”雜種植株未表現出親本的所有性狀

3.（2024湖北十一校二模,6）懸浮培養的動物細胞會因細胞密度過大、有害代謝產物積累等

而分裂受阻。生產上常用灌流式培養避免這些現象出現。灌流式培養是在細胞培養管內,

一邊不斷注入新鮮培養基,一邊將培養液的上清液不斷移出。下列相關敘述正確的是（）

A.灌流式培養的細胞會貼壁生長，但不會出現接觸抑制現象

B.灌流是在細胞密度達到一定濃度或者營養物質低于一定濃度時進行的

C.灌流速率越高，營養物質利用越充分

D.培養管通常放置在95%的02和5%CO2的環境中

4.（2024九省聯考江西卷,11）脂質體可作為運載工具海藥物分子運送到特定的細胞內發揮

作用。為了提高藥物運送的特異性,可在脂質體表面連接識別特定細胞的單克隆抗體，形成

藥物一脂質體一單克隆抗體復合物（見圖）。下列敘述錯誤的是（

單克隆抗體

脂質體

藥物

A.脂質體的作用是幫助復合物通過主動運輸進入特定細胞內

B.可將雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔內來獲取大量的單克隆抗體

C.復合物中的藥物借助單克隆抗體和細胞表面抗原的相互作用來實現運送的特異性

D.單克隆抗體的制備需使用特定的選擇培養基來篩選雜交瘤細胞

5.（2024九省聯考甘肅卷,16）胚胎工程技術的迅速發展實現了優良家畜品種的大量繁殖，能

顯著提高畜產品質量改善人民生活，還可以解決瀕危動物繁育的問題。下列有關哺乳動物

胚胎工程的敘述，正確的是（）

A.剛采集到的卵母細胞即可與獲能處理后的精子在體外受精

B.在卵細胞膜和透明帶之間觀察到兩個極體，標志著卵子受精

C.卵裂在透明帶內進行，此時胚胎細胞數量和總體積不斷增加

D.為了獲得大量同卵多胚,可對囊胚或桑意胚進行無限次分割

綜合拔高練

1.（2024九省聯考黑龍江、吉林卷,7）《本草綱目》記載，櫻桃具有利脾、止瀉的功效。櫻桃

中的棚皮素等酚類化合物具有抗氧化活性。我國已經利用組織培養技術繁育櫻桃優良品

種,滿足人們食用和藥用需要。下列敘述錯誤的是（）

A.應用微型繁殖技術可獲得大量櫻桃脫毒苗

B.可以選用櫻桃幼嫩的芽原基和葉原基作外植體

C.富含色氨酸的培養基有利于櫻桃幼嫩的芽合成生長素

D.應用櫻桃細胞培養可工廠化生產初生代謝產物柳皮素

2.（2024安徽合肥二模,15）植物A細胞核中具有耐鹽堿效應基因植物B細胞質中具有高產

效應基因。研究人員用A、B兩種植物的細胞進行體細胞雜交，最終獲得高產耐鹽堿再生

植株，如圖所示。下列有關敘述錯誤的是（）

使細胞質失活

0—^0愈傷組織雜種植株

使細胞核失活

A.高產耐鹽堿再生植株的獲得體現了生物多樣性的直接價值

B.選用兩種不同顏色的原生質體有利于觀察細胞的融合狀況

C.只有異源融合形成的細胞才能夠經①過程誘導為愈傷組織

D.①②過程所用培養基無需加入碳源，需加入高濃度的鈉鹽

3.（2024山東青島一模,13）研究表明，髓系細胞觸發受體2（TREM2）是一種免疫抑制受體，在

腫瘤免疫逃逸中發揮重要作用。因此,TREM2抗體藥物有望提高腫瘤免疫療法的療效。

如圖為TREM2單克隆抗體的制備流程圖，下列說法正確的是（）

免疫小鼠

4一⑤

特定培養專一抗體

基篩選檢測⑥

③④

A.步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射TREM2蛋白和分泌TREM2抗體的雜父瘤細胞

B.經步驟②誘導后融合的細胞既能分泌TREM2抗體又可無限增殖

C.步驟③和④的培養孔中均含有TREM2蛋白，依據的原理都是抗原一抗體雜交

D.步驟⑥和植物組織培養均需使用二氧化碳培養箱進行大規模培養

4.（2024T8一聯,14）嵌合體是指同一個生物體中同時存在兩種或兩種以上染色體組成不同

的細胞，且這些細胞相互間處于嵌合狀態。構建某種膚色為黑白相間的嵌合體小鼠的過程

如圖所示，下列有關敘述正確的是（）

發育成

白鼠的一造

受精卵A代孕&縊W

f母鼠一嵌合屋

發育成

黑鼠的一的幼鼠

受精卵8細胞胚

A.過程①使用的培養液需要適時更換

B.16細胞胚的形成依賴于細胞融合技術

C.囊胚的滋養層細胞發育成幼鼠的各種組織和器官

D.嵌合體幼鼠的每個細胞中都有來自白鼠和黑鼠的基因

5.（2024湖南衡陽八中二模,2）寄生性支原體是肺炎、支氣管炎等常見的病原體，也是動物細

胞培養難以根除的“絕癥”。在分離培養寄生性支原體時，需要先培養動物細胞后接種;而培

養獨立生存的支原體時則不需要。下列表述正確的是（）

A.動物細胞培養時可以使用氨葦青霉素防范支原體的感染

B.培養獨立生存的支原體一般不需要添加動物血清

C.稀釋涂布平板法不能用于支原體的計數

D.支原體細胞內的遺傳物質遇二苯胺試劑不能變藍

6.（多選）（2024河北石家莊二模,18）我國育種專家用普通小麥與耐鹽偃麥草體細胞雜交獲

得耐鹽新品種山融3號,培育過程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）

普通小麥

普通小麥、去除原生質體、PEG融合原

耐鹽偃麥草,細胞城耐鹽偃麥草/生厚體

原生質體

,lia47u,選擇用含06%鈉鹽愈傷.____雜種

“1犍3''一紉牙'的培養基培養組織細胞

A.原生質體由細胞膜、液泡膜及兩者之間的細胞質組成

B.融合原生質體需放在無菌水中培養，以防雜菌污染

C.愈傷組織再分化形成的芽產生的生長素會抑制愈傷組織生根

D.可將獲得的試管苗移栽于高鹽土壤中進行篩選后，再推廣栽培

7.（多選）（2024江西南昌二模,15）現代生物技術在畜牧業上有重要的應用。在某牧場中，偶

然出現了一只異常健壯的公馬,為了得到更多這種健壯的馬，下列方法中，可行的是（）

A.將該公馬的DNA提取出來，注入普通馬的受精卵中，最后繁殖出更多新個體

B.收集該公馬的精子用人工授精方式產生后代,挑選后代母馬繼續人工授精，如此不斷回

交

C.將該馬的體細胞提取出來,通過動物細胞培養快速培育出更多新個體

D.將該公馬的體細胞核注射到母馬的去核卵母細胞，經胚胎培養、胚胎移植等操作后培育

出

8.（2024湖南衡陽八中一模,21）雙特異性單克隆抗體是指可同時與癌細胞和藥物結合的特

異性抗體。如圖是科研人員通過雜交瘤細胞技術（免疫的B細胞和骨髓瘤細胞雜交技術）

生產能同時識別癌胚抗原和長春堿（一種抗癌藥物）的雙特異性抗體的部分過程?；卮鹣铝?/p>

問題：

溫富/管胞

?一圖2晶一幽一幽—

/曰HAT培養基多孔培養板

/③④

骨髓瘤0細胞

單克隆雜

提取雙特交鬻胞

異性抗體曷_______________

I:

單克隆雜：

交瘤細胞

⑴過程①處理后（填“需要”或“不需要”）對小鼠進行抗體檢測，理由

是O

⑵過程②常用滅活的病毒來誘導融合，其作用機理

是O

⑶過程③得到的雜交瘤細胞的特征是。

⑷過程④一般在多孔細胞培養板上進行:先將細胞懸浮液稀釋到7~10個細胞/mL,再在每

個培養孔中滴入01mL細胞稀釋液，其目的是。

⑸請簡述圖中過程⑤的操作目

的：。

專題21細胞工程

五年高考

考點1植物細胞工程

1.（2024黑、吉、遼,6,2分）迷迭香酸具有多種藥理活性。進行工廠化生產時,先誘導外植體

形成愈傷組織，再進行細胞懸浮培養獲得迷迭香酸，加入誘導劑茉莉酸甲酯可大幅提高產

量。下列敘述錯誤的是（B）

A.迷迭香頂端幼嫩的莖段適合用作外植體

B.誘導愈傷組織時需加入NAA和脫落酸

C.懸浮培養時需將愈傷組織打散成單個細胞或較小的細胞團

D.茉莉酸甲酯改變了迷迭香次生代謝產物的合成速率

2.（2024湖北,11,2分）植物甲抗旱、抗病性強,植物乙分篥能力強、結實性好。科研人員通

過植物體細胞雜交技術培育出兼有甲、乙優良性狀的植物丙，過程如圖所示。下列敘述錯

誤的是（B）

______酶解（1.5小時）______

植物甲區==^一甲的原

葉片一片產^一生質體

②」融合的原

:①混合酶液處理:一生質體

植物乙乙的原

葉片生質體

I植物丙日愈傷組織內雜種細胞聲■

A.過程①中酶處理的時間差異，原因可能是兩種親本的細胞壁結構有差異

B.過程②中常采用滅活的仙臺病毒或PEG誘導原生質體融合

C.過程④和⑤的培養基中均需要添加生長素和細胞分裂素

D.可通過分析植物丙的染色體，來鑒定其是否為雜種植株

3.（不定項）（2024山東,20,3分）下列關于植物愈傷組織的說法正確的是（BD）

A.用果膠酶和膠原蛋白酶去除愈傷組織的細胞壁獲得原生質體

B.融合的原生質體需再生出細胞壁后才能形成愈傷組織

C.體細胞雜交獲得的雜種植株細胞中具有來自親本的2個細胞核

D.通過愈傷組織再生出多個完整植株的過程屬于無性繁殖

4.（2023河北,13,2分）植物細胞懸浮培養是將單個細胞或細胞團進行液體培養增殖的技術。

下列敘述錯誤的是（B）

A.植物細胞懸浮培養的培養基須經無菌處理

B.經纖維素酶和果膠酶充分處理后植物細胞團分散為單個完整的懸浮細胞

C.為使懸浮細胞正常生長,培養基須保持適當的溫度、pH和滲透壓

D.利用懸浮培養技術生產次生代謝物，可減少植物資源的消耗

5.（2023江蘇,13,2分）研究者通過體細胞雜交技術，探索利用條斑紫菜和擬線紫菜培育雜種

紫菜。下列相關敘述正確的是（D）

A.從食用紫菜的動物消化道內提取蛋白酶，用于去除細胞壁

B.原生質體需在低滲溶液中長期保存，以防止過度失水而死亡

C.檢測原生質體活力時可用苯酚品紅或甲紫溶液處理,活的原生質體被染色

D.聚乙二醇促進原生質體融合后，以葉綠體顏色等差異為標志可識別雜種細胞

6.（2023山東,14,2分）利用植物細胞培養技術在離體條件下對單個細胞或細胞團進行培養

使其增殖，可獲得植物細胞的某些次生代謝物。下列說法正確的是（A）

A.利用該技術可獲得某些無法通過化學合成途徑得到的產物

B.植物細胞體積小，故不能通過該技術進行其產物的工廠化生產

C次生代謝物是植物所必需的，但含量少，應選擇產量高的細胞進行培養

D.該技術主要利用促進細胞生長的培養條件提高單個細胞中次生代謝物的含量

7.（2022遼寧,14,2分）藍莓細胞富含花青素等多酚類化合物。在藍莓組織培養過程中，外植

體切口處細胞被破壞，多酚類化合物被氧化成褐色醍類化合物，這一過程稱為褐變o褐變會

引起細胞生長停滯甚至死亡，導致藍莓組織培養失敗。下列敘述錯誤的是（D）

A.花青素通常存在于藍莓細胞的液泡中

B.適當增加培養物轉移至新鮮培養基的頻率以減少褐變

C.在培養基中添加合適的抗氧化劑以減少褐變

D.宜選用藍莓成熟葉片為材料制備外植體

8.（2023新課標,35,12分）根瘤菌與豆科植物之間是互利共生關系，根瘤菌侵入豆科植物根

內可引起根瘤的形成，根瘤中的根瘤菌具有固氮能力。為了尋找抗逆性強的根瘤菌,某研究

小組做了如下實驗:從鹽堿地生長的野生草本豆科植物中分離根瘤菌;選取該植物的莖尖

為材料，通過組織培養獲得試管苗（生根試管苗）;在實驗室中探究試管苗根瘤中所含根瘤

菌的固氮能力。回答下列問題。

⑴從豆科植物的根瘤中分離根瘤菌進行培養，可以獲得純培養物，此實驗中的純培養物是

根瘤菌。

⑵取豆科植物的莖尖作為外植體,通過植物組織培養可以獲得豆科植物的試管苗。外植體

經誘導形成試管苗的流程是:外植體旦愈傷組織旦試管苗。其中①表示的過程是脫分

化.②表示的過程是再分化。由外植體最終獲得完整的植株，這一過程說明植物細胞

具有全能性。細胞的全能性是指細胞經分裂和分化后，仍然具有產生完整生物體或分化

成其他各種細胞的潛能

⑶研究小組用上述獲得的純培養物和試管苗為材料,研究接種到試管苗上的根瘤菌是否

具有固氮能力，其做法是將生長在培養液中的試管苗分成甲、乙兩組，甲組中滴加根瘤菌菌

液,讓試管苗長出根瘤。然后將甲、乙兩組的試管苗分別轉入不含氮的培養液中培養,

觀察兩組試管苗的生長狀況，若甲組的生長狀況好于乙組,則說明根瘤菌具有固氮

能力。

⑷若實驗獲得一種具有良好固氮能力的根瘤菌，可通過發酵工程獲得大量根瘤菌用于生

產根瘤菌肥。根瘤菌肥是一種微生物肥料,在農業生產中使用微生物肥料的作用是』t

土壤肥力，改良土壤結構,促進植物生長（答出2點即可）。

考點2動物細胞工程

9.（2023遼寧,7,2分）大量懸浮培養產流感病毒的單克隆細胞，可用于流感疫苗的生產。下列

敘述錯誤的是（D）

A.懸浮培養單克隆細胞可有效避免接觸抑制

B.用于培養單克隆細胞的培養基通常需加血清

C.當病毒達到一定數量時會影響細胞的增殖

D.培養基pH不會影響單克隆細胞的病毒產量

10.（2022湖北,7,2分）某興趣小組開展小鼠原代神經元培養的研究，結果發現其培養的原代

神經元生長緩慢，其原因不可能的是（A）

A.實驗材料取自小鼠胚胎的腦組織

B.為了防止污染將培養瓶瓶口密封

C.血清經過高溫處理后加入培養基

D.所使用的培養基呈弱酸性

11.（2022湖北,15,2分）納米氧化亞銅是一種納米材料。為了探究納米氧化亞銅對貼壁生長

細胞活性的影響，研究者在培養基中添加一定量的納米氧化亞銅,8小時后觀察到細胞萎縮,

體積變小，細胞核變大，細胞膜內側出現納米氧化亞銅富集現象，培養瓶中大量貼壁細胞脫

落,出現細胞懸浮。根據該實驗現象,能得出的正確結論是（B）

A.納米氧化亞銅改變了細胞的貼壁生長習性

B.納米氧化亞銅對該細胞生長有抑制作用

C.納米氧化亞銅能通過自由擴散進入細胞

D.納米氧化亞銅不影響細胞的新陳代謝

12.（2022山東,15,2分）如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外

解偶聯后重新偶聯可制備雙特異性抗體，簡稱雙抗。下列說法錯誤的是(D)

抗體1抗體2雙抗

A.雙抗可同時與2種抗原結合

B.利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞

C.篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原

D.同時注射2種抗原可刺激B細胞分化為產雙抗的漿細胞

13.(多選)(2022江蘇,19,3分)如圖表示利用細胞融合技術進行基因定位的過程，在人一鼠雜

種細胞中人的染色體會以隨機方式丟失,通過分析基因產物進行基因定位?，F檢測細胞I、

n、in中人的4種酶活性，只有n具有芳燒羥化酶活性，只有ni具有胸背激酶活性,i、in

都有磷酸甘油酸激酶活性,I、n、in均有乳酸脫氫酶活性。下列相關敘述正確的有(ACD)

A.加入滅活仙臺病毒的作用是促進細胞融合

B.細胞I、n、ni分別為人一人、人一鼠、鼠一鼠融合細胞

C.芳煌羥化酶基因位于2號染色體上,乳酸脫氫酶基因位于11號染色體上

D.胸背激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上

14.(2021遼寧,13,2分)如圖是利用體細胞核移植技術克隆優質奶牛的簡易流程圖。有關敘

述正確的是(B)

￡一窗

①供體細片射

胞培養融激活并

令/、培養-麒備髓

乙便:構胚及1

牛重組細胞.V

生出后

代丁牛

A.后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質共同決定

B.過程①需要提供95%空氣和5%CO2的混合氣體

C.過程②常使用顯微操作去核法對受精卵進行處理

D.過程③將激活后的重組細胞培養至原腸胚后移植

15.(2021遼寧,3,2分)下列有關病毒在生物學和醫學領域應用的敘述，錯誤的是(C)

A.滅活的病毒可用于誘導動物細胞融合

B.用特定的病毒免疫小鼠可制備單克隆抗體

C.基因工程中常用噬菌體轉化植物細胞

D.經滅活或減毒處理的病毒可用于免疫預防

16.（2023重慶,16,10分）妊娠與子宮內膜基質細胞的功能密切相關。某研究小組通過如圖

所示的實驗流程獲得了子宮內膜基質細胞，以期用于妊娠相關疾病的研究。

,腫瘤細胞|

|人皮膚組織聲號成纖維細胞4H人iPS細胞|

|子宮內膜基質細臥——|體腔上至|

⑴手術獲得的皮膚組織需在低溫下運至實驗室,低溫對細胞中各種蛋白質的作用為3

制酶的活性（降低蛋白質或酶的活性），防止蛋白質變性（維持蛋白質的結構，抑制蛋白質變

性）。

⑵過程①中，誘導形成iPS細胞時，需提高成纖維細胞中4個基因的表達量,可采用轉基

因（顯微注射、病毒介導、基因工程。但是答農桿菌介導、侵染，基因槍均不對）技術將

這些基因導入該細胞。這4個基因的主要作用為:M基因促進增殖,S基因和C基因控制干

細胞特性,K基因抑制凋亡和衰老。若成纖維細胞形成腫瘤細胞,最有可能的原因是M

基因過量表達。

⑶培養iPS細胞時，應對所處環境定期消毒以降低細胞被污染風險?？捎米贤饩€進行消毒

的是CD（多選）。

A.培養基B.培養瓶

C.細胞培養室D.CO2培養箱

⑷過程②中,iPS細胞經歷的生命歷程為增殖分化（分裂分化）。PCR技術可用于檢測

子宮內膜基質細胞關鍵基因的mRNA水平,mRNA需經過逆轉錄才能作為PCR擴增

的模板。

17.（2023湖北,22,16分）某病毒對動物養殖業危害十分嚴重。我國學者擬以該病毒外殼蛋

白A為抗原來制備單克隆抗體，以期快速檢測該病毒,其主要技術路線如圖所示。

I基因A|—-孽塞圈T蛋白A|—T免疫小鼠卜

離體培養的小I

鼠骨盛型胞I吧鯉『~

I單克隆抗體篩選卜——I雜交言細胞的篩選I

回答下列問題:

⑴與小鼠骨髓瘤細胞融合前，已免疫的脾細胞（含漿細胞）」S需￡（填“需要”或“不需

要”）通過原代培養擴大細胞數量;添加脂溶性物質PEG可促進細胞融合，該過程中PEG對

細胞膜的作用是增加細胞膜的流動性。

⑵在雜交瘤細胞篩選過程中，常使用特定的選擇培養基（如HAT培養基），該培養基對未

融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞生長具有抑制作用。

⑶單克隆抗體篩選中.將抗體與該病毒外殼蛋白進行雜交.其目的是檢測抗體特異

（4）構建重組質粒需要使用DNA連接酶。下列屬于DNA連接酶底物的是④

HOOH

51??|*||????????3,

，3-1IIIIII.1IIII?

3UJ_U」J1fLJJ_L1_5,J11

HOOHPP

①②

POHHOP

5f??I|||||||||3r5ZTT|IIIIIIIII

3山11」1”"115,>lIIIIII“Ills，

J311J

HOPPOH

③④

18.（2022遼寧,24,10分）某抗膜蛋白治療性抗體藥物研發過程中，需要表達N蛋白胞外段,

制備相應的單克隆抗體，增加其對N蛋白胞外段特異性結合的能力。

I.N蛋白胞外段抗原制備，流程如圖1

|N蛋白胞病毒

體

脂質MN蛋白胞|

包裝|

收集感染海一

威,外段表達、

導入

細胞病毒5SW|純化|

毒質粒

圖1

⑴構建重組慢病毒質粒時.選用氨節青霉素抗性基因作為標記基因.目的是便于重組

DNA分子的篩選。用脂質體將重組慢病毒質粒與輔助質粒導入病毒包裝細胞.質粒被包

在脂質體雙分子層中（填“雙分子層中”或“兩層磷脂分子之間

（2）質粒在包裝細胞內組裝出由蛋白質和核酸組成的慢病毒，用慢病毒感染海拉細胞

進而表達并分離、純化N蛋白胞外段。

II.N蛋白胞外段單克隆抗體制備，流程如圖2

圖2

（3）用N蛋白胞外段作為抗原對小鼠進行免疫后.取小鼠脾組織用胰蛋白酶或膠原蛋白

酶處理.制成細胞懸液.置于含有混合氣體的CO2培養箱中培養.離心收集小鼠的B淋

巴細胞，與骨髓瘤細胞進行融合。

（4）用選擇性培養基對融合后的細胞進行篩選，獲得雜交瘤細胞，將其接種到96孔板，進行

克隆化培養。用抗原一抗體雜交技術檢測每孔中的抗體.篩選既能產生N蛋白胞外

段抗體，又能大量增殖的單克隆雜交瘤細胞株.經體外擴大培養，收集細胞培養液，提取

單克隆抗體。

⑸利用N蛋白胞外段抗體與藥物結合，形成抗體一藥物偶聯物（ADC），實現特異性治

療。

19.（2022福建,21節選,8分）美西螺具有很強的再生能力。研究表明,美西螺的巨噬細胞在

斷肢再生的早期起重要作用。為研究巨噬細胞的作用機制，科研人員制備了抗巨噬細胞表

面標志蛋白CD14的單克隆抗體，具體方法如下?；卮鹣铝袉栴}：

（二）抗CD14單克隆抗體的制備

流程如圖所示：

一n

h

BI

細F特定培養專一抗⑤⑥

基篩選體檢測

③④

⑴步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射CD14蛋白/CD14抗原和分泌抗CD14抗體的雜

交瘤細胞。

⑵步驟②所用的SP2/0細胞的生長特點是能在體外無限增殖。

⑶吸取③中的上清液到⑷的培養孔中.根據抗原一抗體雜交原理.需加入CD14蛋白

進行專一抗體檢測,檢測過程發現有些雜交瘤細胞不能分泌抗CD14抗體,原因是上與娶

成雜交瘤細胞的B淋巴細胞種類多，有的不能分泌抗CD14抗體。

⑷步驟⑥從小鼠腹水中提取到大量的抗CD14抗體用于檢測巨噬細胞。

考點3胚胎工程

20.（2024湖北,5,2分）波爾山羊享有“世界山羊之王”的美譽，具有生長速度快、肉質細嫩等

優點。生產中常采用胚胎工程技術快速繁殖波爾山羊。下列敘述錯誤的是（D）

A.選擇遺傳性狀優良的健康波爾母山羊進行超數排卵處理

B.胚胎移植前可采集滋養層細胞進行遺傳學檢測

C.普通品質的健康杜泊母綿羊不適合作為受體

D.生產中對提供精子的波爾公山羊無需篩選

21.（2024貴州,13,3分）生物學實驗中合理選擇材料和研究方法是順利完成實驗的前提條件。

下列敘述錯誤的是（B）

A.稀釋涂布平板法既可分離菌株又可用于計數

B.進行胚胎分割時通常是在原腸胚期進行分割

C.獲取馬鈴薯脫毒苗常選取莖尖進行組織培養

D.使用不同的限制酶也能產生相同的黏性末端

22.(2023廣東,3,2分)科學家采用體外受精技術獲得紫羚羊胚胎，并將其移植到長角羚羊體

內，使后者成功妊娠并產仔,該工作有助于恢復瀕危紫羚羊的種群數量。此過程不涉及的操

作是(C)

A.超數排卵B.精子獲能處理

C.細胞核移植D.胚胎培養

23.(2023浙江1月選考,12,2分)在家畜優良品種培育過程中常涉及胚胎工程的相關技術。

下列敘述錯誤的是(C)

A.經獲能處理的精子才能用于體外受精

B.受精卵經體外培養可獲得早期胚胎

C.胚胎分割技術提高了移植胚胎的成活率

D.胚胎移植前需對受體進行選擇和處理

24.(2022北京,11,2分)將黑色小鼠囊胚的內細胞團部分細胞注射到白色小鼠囊胚腔中，接

受注射的囊胚發育為黑白相間的小鼠(Me)。據此分析，下列敘述第誤的是(A)

A.獲得Me的生物技術屬于核移植

B.Mc表皮中有兩種基因型的細胞

C.注射入的細胞會分化成Me的多種組織

D.將接受注射的囊胚均分為二，可發育成兩只幼鼠

三年模擬

綜合基礎練

1.（2024河北唐山一模,13）紫杉醇具有良好抗癌作用?？蒲腥藛T用植物外植體獲得愈傷組

織，然后在液體培養基中進行細胞懸浮培養，以獲得更多紫杉醇。下列敘述錯誤的是（D）

愈

外

傷液體培養工廠化生產、

細胞懸浮_

r組

基中懸浮一培養與繼^弋一提取、檢測

織振蕩培養紫杉醇

A.誘導愈傷組織需要考慮外植體的取材部位、培養基組成和激素種類等

B.由愈傷組織得到懸浮細胞可以使用纖維素酶和果膠酶進行處理

C.使用液體培養基并振蕩有利于細胞獲取氧氣和營養物質，促進細胞生長

D.利用植物細胞培養技術獲得初生代謝產物紫杉醇能避免大量破壞野生紅豆杉種群

2.（2024九省聯考貴州卷,15）植物體細胞雜交技術可克服種間生殖隔離。應用該技術獲得

“番茄一馬鈴薯”雜種植株，拓展了植物的種質資源。下列敘述正確的是（D）

A.植物細胞壁的水解需要纖維素酶和幾丁質酶

B.愈傷組織是由已分化的細胞所構成的細胞團

C