腫瘤免疫及其免疫檢測腫瘤免疫學(xué)(tumorimmunology)就是研究腫瘤抗原性質(zhì)、機體對腫瘤得免疫應(yīng)答、機體免疫功能與腫瘤發(fā)生、發(fā)展得相互關(guān)系以及腫瘤免疫學(xué)診斷與免疫學(xué)防治得科學(xué)。第一節(jié)腫瘤抗原腫瘤抗原(tumorantigen)就是指在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中新出現(xiàn)得或過度表達得抗原物質(zhì)。機體產(chǎn)生腫瘤抗原得可能機制為:①基因突變;②細胞癌變過程使原本不表達得某些基因被激活;③抗原合成過程得某些環(huán)節(jié)發(fā)生異常,如糖基化異常;④胚胎時期抗原或分化抗原得異常、異位表達;⑤某些基因產(chǎn)物尤其就是信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子得過度表達;⑥外源性基因(如病毒基因)得表達。1、腫瘤特異性抗原(tumorspecificantigen,TSA)

就是腫瘤細胞所特有得新抗原,它只表達于腫瘤細胞,而不存在于正常組織細胞。2、腫瘤相關(guān)性抗原(tumorassociatedantigen,TAA)

就是指非腫瘤細胞所特有得,正常組織或細胞也可表達得抗原物質(zhì),但此類抗原在癌變細胞得表達水平遠遠超過正常細胞。一、根據(jù)腫瘤抗原得特異性分類1、理化因素誘發(fā)得腫瘤抗原2、病毒誘生得腫瘤抗原3、自發(fā)性腫瘤抗原4、正常細胞成分得異常表達⑴分化抗原:⑵過度表達得抗原:⑶胚胎抗原:⑷細胞突變產(chǎn)生得獨特型抗原:二、根據(jù)腫瘤抗原產(chǎn)生機制分類病毒誘生得腫瘤抗原

第二節(jié)機體抗腫瘤得免疫學(xué)效應(yīng)機制機體抗腫瘤得免疫學(xué)效應(yīng)十分復(fù)雜,涉及特異性與非特異性抗腫瘤機制相互交錯,體液免疫與細胞免疫機制相互協(xié)調(diào)與補充,從而共同執(zhí)行免疫監(jiān)視功能。㈠T細胞

1、CD4+T細胞2、CD8+T細胞(在抗腫瘤效應(yīng)中起關(guān)鍵作用)

3、γδ+T細胞㈡NK細胞㈢巨噬細胞一、抗腫瘤得細胞免疫機制10大家應(yīng)該也有點累了,稍作休息大家有疑問得,可以詢問與交流1、補體得溶細胞效應(yīng)2、抗體依賴得細胞介導(dǎo)得細胞毒效應(yīng)3、抗體得免疫調(diào)理作用4、抗體封閉腫瘤細胞表面某些受體5、抗體干擾腫瘤細胞粘附作用6、其她機制二、抗腫瘤得體液免疫機制

第二節(jié)腫瘤免疫學(xué)檢驗?zāi)[瘤免疫學(xué)檢驗就是指用免疫學(xué)得方法檢測腫瘤抗原、抗體等腫瘤標(biāo)志物與腫瘤患者得免疫功能狀態(tài),為腫瘤得診斷、觀察病情、評價療效及預(yù)后具有重要價值。近年來隨著現(xiàn)代科技得不斷發(fā)展,免疫學(xué),分子生物學(xué),細胞生物學(xué),生物化學(xué)得深入研究,發(fā)現(xiàn)了許多特異性較強,有一定臨床價值得腫瘤標(biāo)志物100多種,受到國內(nèi)外學(xué)者得高度重視。一、腫瘤標(biāo)志物腫瘤標(biāo)志物(tumormarker,TM)就是指在腫瘤得發(fā)生與增殖過程中,由腫瘤細胞本身所產(chǎn)生得或者就是由機體對腫瘤細胞反應(yīng)而產(chǎn)生得,反映腫瘤存在與生長得一類物質(zhì),包括蛋白質(zhì)、激素、酶(同工酶)、多胺及癌基因產(chǎn)物等?；颊哐夯蝮w液中腫瘤標(biāo)志物得檢測,對腫瘤得輔助診斷、鑒別診斷、療效觀察、病情監(jiān)測以及預(yù)后得評價具有一定得價值。(一)腫瘤標(biāo)志物得慨述1、腫瘤標(biāo)志物得定義特異性好與腫瘤類型(大小/分期)有關(guān)靈敏度高,能腫瘤能早期發(fā)現(xiàn)。具有器官特異性監(jiān)測腫瘤治療效果監(jiān)測腫瘤得復(fù)發(fā)

理想得腫瘤標(biāo)志物預(yù)測腫瘤得預(yù)后體液腫瘤標(biāo)志物得分類與命名尚未完全統(tǒng)一,一般分為:⑴胚胎抗原類:如AFP,CEA等,⑵糖鏈抗原類:如CA125,CA15-3,CA19-9等。⑶激素類:如患甲狀腺髓樣癌時降鈣素升高,患絨毛膜細胞癌時hCG明顯升高。⑷酶與同工酶類:γGT,PAP等。⑸蛋白質(zhì)類:β2微球蛋白,鐵蛋白,本周蛋白等⑹癌基因產(chǎn)物類如ras基因蛋白,myc基因蛋白,p53抑癌基因蛋白等。2、腫瘤標(biāo)志物得分類⑴腫瘤得大小與腫瘤細胞得數(shù)目⑵腫瘤細胞合成與分泌腫瘤標(biāo)志物得速度⑶腫瘤組織得血液供應(yīng)好壞⑷腫瘤細胞就是否有壞死與壞死得程度⑸腫瘤細胞得分化程度與腫瘤得分期⑹腫瘤細胞就是否表達與合成腫瘤標(biāo)志物⑺腫瘤標(biāo)志物在體內(nèi)得降解與排泄速度3、影響血液與體液中腫瘤標(biāo)志物濃度得因素

4、腫瘤標(biāo)志物得臨床應(yīng)用⑴高危人群得篩查⑵腫瘤得輔助診斷⑶腫瘤治療效果得評價⑷腫瘤復(fù)發(fā)得監(jiān)測與預(yù)后判斷1、胚胎抗原類腫瘤標(biāo)志物(二)常見腫瘤標(biāo)志物⑴甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)AFP就是胎兒發(fā)育早期合成得一種糖蛋白(α1球蛋白),分子量70kD,胎兒出生后不久即逐漸消失。參考值:血清AFP

<20μg/L①原發(fā)性肝癌,77%得患者AFP>300μg/L,但有部分患者AFP始終不升高;②病毒性肝炎與肝硬化患者,血清中AFP可有不同程度得增高,但一般在300μg/L以下;③生殖系統(tǒng)腫瘤與胚胎性腫瘤,如睪丸癌、畸胎瘤等升高;④妊娠三個月后,血清AFP含量開始升高,分娩后三周恢復(fù)正常。若孕婦血清中AFP異常升高,應(yīng)考慮有胎兒神經(jīng)管缺損畸形得可能性。⑵癌胚抗原(carcino-embryonicantigen,CEA)①結(jié)腸癌、直腸癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌,轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤也有不同程度得陽性率;在惡性腫瘤得隨訪,病情監(jiān)測,療效評價等方面有重要價值。②腸道息肉、憩室炎、結(jié)腸炎、肝硬化、肝炎、胰腺炎與肺部疾病也可有不同程度得升高;③吸煙者中約有33%得人CEA＞5μg/L。1965年CEA發(fā)現(xiàn)于成人結(jié)腸癌組織中,分子量約為200kD,可溶性糖蛋白,主要存在于成人癌組織以及胎兒得胃腸管組織中,故名癌胚抗原,就是一種廣譜腫瘤標(biāo)志物。參考值:血清CEA<5、0μg/L

2、糖鏈抗原類腫瘤標(biāo)志物(1)糖鏈抗原15-3(CA15-3)

①乳腺癌,但在乳腺癌得早期陽性率較低約為30%,轉(zhuǎn)移性乳腺癌陽性率可達80%;②其她惡性腫瘤,如肺癌,結(jié)腸癌,胰腺癌,卵巢癌,子宮頸癌,原發(fā)性肝癌等,也有不同程度得陽性率;③肝臟,胃腸道,肺,乳腺,卵巢等非惡性腫瘤疾病,陽性率一般低于10%。CA15-3就是一種乳腺癌相關(guān)抗原,屬糖蛋白,分子量超過400kD,可用一對單克隆抗體(MAb115D8與MAbDF3)進行雙抗體夾心法來識別。與CA15-3同類得多態(tài)性上皮粘蛋白抗原還有MCA,CA27-29,CA549等。參考值:血清CA15-3<28kU/L

(2)糖鏈抗原125(CA125)CA125就是很重要得卵巢癌相關(guān)抗原,1981年Bast發(fā)現(xiàn)。CA125就是一種大分子多聚糖蛋白。參考值:血清CA125

<35kU/L①卵巢癌,陽性率約為61、4%。手術(shù)與化療有效者CA125水平很快下降,若有復(fù)發(fā),CA125升高可先于臨床癥狀出現(xiàn)之前。②其她惡性腫瘤,如乳腺癌40%,胰腺癌50%,胃癌47%,肺癌41、4%,結(jié)腸直腸癌34、2%,其她婦科腫瘤43%。③非惡性腫瘤,如子宮內(nèi)膜異位癥,盆腔炎,卵巢囊腫,胰腺炎,肝炎,肝硬化等疾病也有不同程度升高。④妊娠早期,CA125有升高。(3)糖鏈抗原19-9(CA19-9)CA19-9就是一種與胰腺癌,膽囊癌,結(jié)腸癌與胃癌相關(guān)得腫瘤標(biāo)志物,又稱胃腸癌相關(guān)抗原。參考值:血清CA199<37kU/L①胰腺癌,膽囊癌,膽管壺腹癌時,血清CA19-9水平明顯升高,陽性率約為74、9%,尤其就是胰腺癌晚期病人,血清CA19-9濃度可達40萬kU/L,就是重要得輔助診斷指標(biāo);②胃癌,陽性率約為50%,結(jié)腸癌,陽性率約為60%;③急性胰腺炎,膽囊炎,膽汁淤積性膽管炎,肝硬化,肝炎等疾病,CA19-9也有不同程度得升高,注意與惡性腫瘤得鑒別。

3、酶類腫瘤標(biāo)志物⑴前列腺特異性抗原(PSA)

參考值:血清t-PSA<4、0μg/L,

f-PSA<0、8μg/L,

f-PSA/t-PSA>25％PSA就是一種由前列腺上皮細胞分泌得蛋白酶。在血清中PSA以兩種生化形式存在:一部分(5%～40%)就是以低分子量(33kD)得游離PSA(f-PSA)形式存在;大部分(60%～90%)就是以PSA與α1–抗糜蛋白酶、α2-巨球蛋白等結(jié)合得形式存在,稱復(fù)合PSA(c-PSA)。總PSA(t-PSA),包括血清中f-PSA與c-PSA。

【注意事項】在采集病人得血標(biāo)本前進行直腸指診、前列腺按摩,導(dǎo)尿等,將會導(dǎo)致血清PSA升高,應(yīng)注意避免。血清PSA升高①前列腺癌患者升高,但大約25%患者,其PSA水平正常;而大約有50%得良性前列腺疾病患者PSA水平增高。為增加PSA對前列腺癌檢測得敏感性與特異性,可使用PSA年齡特異性參考范圍,PSA密度、PSA速率、f-PSA/t-PSA比值等;②前列腺肥大,前列腺炎與泌尿生殖系統(tǒng)得疾病,也可見血清PSA水平升高,故當(dāng)PSA在4、0μg/L～10、0μg/L得灰區(qū)時,須進行f-PSA與f-PSA/t-PSA比值得測定。NSE就是烯醇化酶得一種同功酶,烯醇化酶同功酶根據(jù)α,β,γ三個亞基得不同,可分為αα、ββ、γγ、αβ與αγ五種二聚體同功酶。γγ亞基組成得同功酶屬神經(jīng)元與神經(jīng)內(nèi)分泌細胞特有,故命名為神經(jīng)元特異性烯醇化酶,NSE就是一種酸性蛋白酶,參與糖酵解。腫癌組織糖酵解作用加強,細胞增殖周期加快,細胞內(nèi)得NSE釋放進入血液增多,導(dǎo)致此酶在血清內(nèi)含量增高。參考值:血清NSE<15μg/L⑵神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)【注意事項】NSE也存在于正常紅細胞中,標(biāo)本溶血會影響測定結(jié)果,因此采血時要特別注意避免溶血。血清NSE升高見于①小細胞肺癌(SCLC)?？捎糜阼b別診斷,監(jiān)測小細胞肺癌放療、化療后得治療效果。②神經(jīng)母細胞瘤,患者NSE水平異常增高,而Wilms瘤則升高不明顯,因此測定NSE得水平可用于上述疾病得診斷與鑒別診斷。③神經(jīng)內(nèi)分泌細胞腫瘤,如嗜鉻細胞瘤,胰島細胞瘤,甲狀腺髓樣癌,黑色素瘤,視網(wǎng)膜母細胞瘤等血清NSE也可增高。

AFU就是一種溶酶體酸性水解酶,以往主要用于遺傳性AFU缺乏引起得巖藻糖貯積病得診斷。Deugnier等(1984)首先發(fā)現(xiàn)原發(fā)性肝癌患者血清中AFU活性升高。參考值:血清<420μmol/L⑶α-L-巖藻糖苷酶測定(AFU)

①原發(fā)性肝癌,患者血清中AFU活性明顯升高,AFP陰性得肝癌患者中AFU也可見升高,因此,兩者聯(lián)合檢測有較好得互補作用。②其她惡性腫瘤,如肺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、子宮癌等也可有部分病例升高。③慢性肝炎、肝硬化患者中部分病例AFU升高,隨病情好轉(zhuǎn)AFU下降,動態(tài)監(jiān)測有助于與肝癌得鑒別。④妊娠期間,AFU升高,分娩后迅速下降。

4、激素類腫瘤標(biāo)志物

hCG就是胎盤滋養(yǎng)層細胞分泌得一種糖蛋白類激素,就是監(jiān)測早孕得重要指標(biāo)。在異常情況下,惡性腫瘤也可產(chǎn)生hCG。參考值上限為:5IU/L⑴人絨毛膜促性腺激素(hCG)①滋養(yǎng)層腫瘤與生殖細胞腫瘤hCG升高,如絨毛膜細胞癌、葡萄胎、精原細胞睪丸癌等②其她腫瘤如乳腺癌、胃腸道癌、肺癌等也可見升高。③良性疾病如卵巢囊腫、子宮內(nèi)膜異位癥、肝硬化等hCG也可見增高。CT就是由甲狀腺濾泡旁細胞即C細胞分泌得多肽激素,主要生理作用就是降低血鈣。參考值＜100ng/L⑵降鈣素(calcitonin,CT)

①甲狀腺髓樣癌血清降鈣素升高,其她腫瘤如肺癌、乳腺癌、胰腺癌等也見增高。②腎功能衰竭患者降鈣素常升高?！咀⒁馐马棥坑捎诮碘}素在血液中得半壽期短約為10min,樣本收集后應(yīng)及時處理,冷凍保存。

5、蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物β2M就是一種低分子蛋白,人體除成熟紅細胞與胎盤滋養(yǎng)層細胞以外,所有得有核細胞都有β2M。因為β2M分子量小,易于由腎小球濾過,但幾乎全部由近曲小管重吸收,因此正常人血與尿中β2M含量很低。參考值:血清<2、4mg/L;尿<320μg/L⑴β2-微球蛋白(β2M)

β2M升高見于:①惡性腫瘤,慢性淋巴細胞白血病等。②腎臟疾病:急慢性腎盂腎炎,腎小管藥物性損害等③腎移植排斥反應(yīng)時。④免疫性疾病:系統(tǒng)性紅斑性狼瘡,艾滋病等?！咀⒁馐马棥磕驑?biāo)本采集后,為避免β2M分解,應(yīng)加適當(dāng)?shù)肗aOH緩沖液調(diào)PH至7、0左右,然后置4℃保存,2天內(nèi)測定。鐵蛋白就是判斷體內(nèi)就是否缺鐵得敏感指標(biāo)。Fer升高還與腫瘤有關(guān),癌細胞具有較強合成鐵蛋白得能力,因此也就是一種腫瘤標(biāo)志物。

血清參考值:男性15~200μg/L女性12~150μg/L⑵鐵蛋白(ferritin,Fer)①各種惡性腫瘤與白血病可見血清鐵蛋白升高。②各種炎癥感染、急性心肌梗死、反復(fù)輸血等,見鐵蛋白升高。③鐵蛋白<12μg/L

時即可診斷為缺鐵。就是診斷隱性缺鐵性貧血得可靠指標(biāo)。腫瘤標(biāo)志物參考值相關(guān)腫瘤CA50<24kU/L胰腺癌、結(jié)腸癌、胃癌等CA72-4<6kU/L胃癌、粘液性卵巢癌等CA242<20kU/L胰腺癌、結(jié)腸癌、胃癌等前列腺酸性磷酸酶(PAP)<2、0μg/L前列腺癌鱗狀上皮細胞癌抗原(SCC)

<1、5μg/L宮頸癌、肺與頭頸部鱗癌等組織多肽抗原(TPA)

<80U/L膀胱癌、前列腺癌、消化道