自然界中微生物數量繁多，種類龐雜，要想從中分離出需要的特定微生物并不容易，尤其當要分離的微生物在混合的菌群中不是優勢種群時，僅通過一般的分離方法很難實現。該怎么辦呢？先選擇，再純化1.2.2微生物的選擇培養和計數WPS,aclicktounlimitedpossibilities匯報人：WPS選擇培養基PartOne科學實例：尋找耐高溫的DNA聚合酶（P86頁）1973年，布魯克在美國黃石國家公園的一個熱泉中發現了耐熱的水生棲熱菌，并從這種菌種提取出耐高溫的DNA聚合酶。美國黃石公園一、選擇培養基這種酶目前已被廣泛用于體外擴增DNA片段的聚合酶鏈式反應（PCR）耐高溫的DNA聚合酶因為熱泉的高溫條件淘汰了絕大多數微生物，而水生棲熱菌能在70~80℃高溫條件下生存。耐高溫的酶耐高溫生物體高溫環境（熱泉、火山口）尋找尋找[問題1]篩選水生棲熱菌的思路是怎樣的？[問題2]為什么水生棲熱菌能從熱泉中篩選出來呢？啟示：根據微生物對生存環境的要求，到相應的環境中去尋找。科學實例：尋找耐高溫的DNA聚合酶（P86頁）1973年，布魯克在美國黃石國家公園的一個熱泉中發現了耐熱的水生棲熱菌，并從這種菌種提取出耐高溫的DNA聚合酶。美國黃石公園一選擇培養基1.概念：選擇培養基：在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養基，稱為選擇培養基。2.原理：原理：人為提供有利于目的菌生長的條件（包括營養、溫度和PH等），同時抑制或阻止其他微生物的生長。一、選擇培養基類型條件分離得到的菌種營養不加碳源不加氮源石油是唯一碳源添加某種化學物質加入青霉素高濃度食鹽改變培養條件水中高溫水生棲熱菌酵母菌、霉菌等真菌金黃色葡萄球菌能分解石油的微生物自養型微生物固氮菌一選擇培養基CO(NH2)2+H2O CO2+2NH3

脲酶NO3-、NH4＋被植物吸收一、選擇培養基【思考·討論】

選擇培養基配方的設計CO(NH2)2+H2OCO2+2NH3NO3-NH4+脲酶轉化被植物吸收除以尿素作為唯一氮源外，該培養基的其他營養成分與普通培養基基本相同。1.你如何設計培養基配方，將土壤稀釋液中能分解尿素的細菌分離出來？2.該培養基與普通培養基有哪些共同點和不同點？培養基添加尿素作唯一氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素、缺乏氮源而不能生長發育繁殖。任務一二、微生物的選擇培養應該設置通用培養基（如牛肉膏蛋白胨培養基）作為對照，若通用培養基中生長的菌落數多于該選擇培養基，則該選擇培養基具有選擇性。通用培養基選擇培養基[現學現用]怎么證明一個選擇培養基具有選擇性呢？二、微生物的選擇培養一選擇培養基選擇培養基與鑒別培養基的比較項目選擇培養基鑒別培養基原理用途舉例加入不影響甚至促進目標微生物生長，而抑制或阻止其他種類微生物生長的化學物質加入某種指示劑或化學藥品(不影響微生物正常生長)，使微生物的某種代謝產物與培養基中的特定指示劑或化學藥品發生反應培養、分離出目標微生物鑒別目標微生物培養酵母菌和霉菌時，可在培養基中加入青霉素，抑制細菌的生長；利用以尿素為唯一氮源的培養基來培養可分解尿素的細菌可用伊紅美藍培養基鑒定飲用水或乳制品中是否含有大腸桿菌(若有，則菌落呈黑色)02微生物的選擇培養和計數PartTwo二微生物的選擇培養和計數怎么分離？如何計數？二、微生物的選擇培養（課本P18頁）二、微生物的選擇培養選擇培養基配方二微生物的選擇培養和計數分離的原理：絕大多數微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作為唯一氮源的選擇培養基，可以從土壤中分離出分解尿素的細菌。計數的原理：當樣品的稀釋度足夠高時，通過統計平板上的菌落數，能推測出樣品中的活菌數目。組分含量KH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素CO(NH2)21.0g瓊脂15.0g蒸餾水定容到1000ml篩選能分解尿素的細菌【土壤中分解尿素的細菌的分離與計數】二、微生物的選擇培養選擇培養基配方二微生物的選擇培養和計數分離的原理：絕大多數微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作為唯一氮源的選擇培養基，可以從土壤中分離出分解尿素的細菌。組分含量KH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素CO(NH2)21.0g瓊脂15.0g蒸餾水定容到1000ml篩選能分解尿素的細菌問：如何確定該選擇培養基具有選擇作用呢？配一種起對照作用的培養基（牛肉膏蛋白胨培養基）土壤微生物都能生存【土壤中分解尿素的細菌的分離與計數】牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g瓊脂20.0g蒸餾水定容到1000mL培養基一KH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g瓊脂15.0g蒸餾水定容到1000mL培養基二1.從物理性質來講，兩者屬于_____培養基，判斷依據是__________________；該類培養基的主要用途為___________________________。2.從用途上來講，____________屬于選擇培養基，目的是為了獲得_____________________。3.兩種培養基共有的培養基成分有：

。培養基一的主要碳源為

，主要氮源為

；培養基二的碳源為

，氮源為

。固體添加了凝固劑瓊脂分離、鑒定、計數、保存培養基二能分解尿素的微生物碳源、氮源、無機鹽、水牛肉膏、蛋白胨牛肉膏、蛋白胨葡萄糖尿素[現學現用]二、微生物的選擇培養二微生物的選擇培養和計數平板準備好的同時，還需要準備什么？土壤微生物問：土壤微生物存在土壤中，怎么選擇合適的土壤？細菌適宜在酸堿度接近中性的潮濕土壤中生長，絕大多數分布在距地表3?8cm的土壤層。因此，取樣時一般要鏟去表層土。在城市，常見的是公園里、街道旁、花盆中的土壤；在農村，則容易收集到農田或菜園里的土壤。22個【土壤中分解尿素的細菌的分離與計數】二、微生物的選擇培養二微生物的選擇培養和計數問：土壤微生物存在土壤中，怎么選擇合適的土壤？細菌適宜在酸堿度接近中性的潮濕土壤中生長，絕大多數分布在距地表3?8cm的土壤層。因此，取樣時一般要鏟去表層土。在城市，常見的是公園里、街道旁、花盆中的土壤；在農村，則容易收集到農田或菜園里的土壤。問：土壤收集后能不能直接倒入平板內培養？應該怎么操作？將土樣加入盛有無菌水的錐形瓶中，充分搖勻,取液體加入平板內培養？？問：如果想知道1g土壤中有多少能分解尿素的細菌，可否直接制備土壤溶液，接種到選擇培養基上得到純培養物？計數的原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的單菌落數，能大致推測出樣品中的活菌數目。1×101mL1mL1mL1mL1mL1mL9mL無菌水90mL無菌水10g微量移液器①鏟取土樣，將樣品裝入紙袋中。注意：取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的紙袋在使用前都要滅菌。取1mL上清液加入盛有9mL無菌水的試管中，依次等比稀釋。②將10g土樣加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中，充分搖勻，制成菌液。1.梯度稀釋菌液二、微生物的選擇培養稀釋涂布平板法1×1021×1031×1041×1051×1061×10702③取0.1mL菌液，滴加到培養基表面。⑥用涂布器將菌液均勻地涂布在培養基表面。涂布時可轉動培養皿，使涂布均勻。注意：多余的酒精在燒杯中滴盡，然后再放在火焰上灼燒。④將涂布