單元檢測卷(一)(時間：75分鐘滿分：100分)一、選擇題：本題共20小題，第1～10小題每小題2分，第11～20小題每小題3分，共50分。每小題給出的四個選項中，只有一個選項是最符合題目要求的。1.(2021·青島二中期中)下列有關微生物篩選的敘述中，不正確的是(

)A.用全營養LB培養基篩選大腸桿菌B.用高NaCl的培養基篩選抗鹽突變菌株C.含酚紅的尿素培養基篩選鑒別出分解尿素的菌株D.利用高溫條件篩選耐熱的Taq細菌解析大多數微生物在全營養的LB培養基上都可以生長，所以不能篩選大腸桿菌，A錯誤；可以在高NaCl的培養基中生活的微生物能抗鹽，因此可實現篩選抗鹽突變菌種的目的，B正確；分解尿素的菌株可將培養基中的尿素分解為氨，使培養基pH升高，使酚紅變紅，C正確；Taq細菌耐高溫，可利用高溫條件進行篩選，D正確。A2.(2020·浙江7月選考，19，改編)下列關于微生物培養及利用的敘述，錯誤的是(

) A.利用尿素固體培養基可迅速殺死其他微生物，而保留利用尿素的微生物 B.配制培養基時應根據微生物的種類調整培養基的pH C.酵母菌不能直接利用糯米淀粉發酵得到糯米酒 D.適宜濃度的酒精可使醋酸菌活化A解析利用尿素固體培養基篩選尿素分解菌時，尿素固體培養基并不直接殺死其他微生物，而是其他微生物不能以尿素為氮源，無法在尿素固體培養基中存活，A錯誤；不同的微生物生長所需的最適pH不同，如細菌適宜生活在中性偏堿環境，霉菌適宜生活在中性偏酸環境，因此配制培養基時應根據微生物的種類調整培養基的pH，B正確；利用糯米釀酒需要先進行糖化，酵母菌不能直接利用淀粉進行發酵，C正確；醋酸菌的發酵底物可為一定濃度的酒—水混合物，適宜濃度的酒精可使醋酸菌活化，D正確。3.(2021·許昌市期末)某同學設計了如圖所示的發酵裝置來制作

果酒、果醋，下列有關敘述錯誤的是(

) A.甲用來制作果酒，乙用來制作果醋 B.乙裝置需要的溫度條件高于甲 C.該裝置便于發酵中產生氣體的排出 D.甲、乙裝置排液管排出液體的pH都下降

解析甲裝置密封可用來制作果酒，乙裝置通氣可用來制作果醋，A正確；乙裝置需要的溫度條件為30～35℃，高于甲的18～30℃，B正確；該裝置便于發酵液的連續發酵，但不利于產生CO2氣體的排出，C錯誤；甲裝置產生CO2、乙裝置產生醋酸都會導致排液管排出液體的pH下降，D正確。C4.(2021·安徽省馬鞍山期末)以下有關生物技術實踐的敘述中，錯誤的是(

)A.顯微鏡直接計數也是測定微生物數量的常用方法B.平板劃線法能用來測定土壤溶液中某活菌數目C.培養能合成脲酶的細菌時可在培養基中添加尿素作為唯一氮源D.挑選菌種時可在富含纖維素的環境中尋找纖維素分解菌解析在統計菌落數目時，常用來統計樣品中活菌數目的方法是稀釋涂布平板法，除此之外，顯微鏡直接計數也是測定微生物數量的常用方法，A正確、B錯誤；培養能合成脲酶的細菌時，可在培養基中添加尿素作為唯一氮源，在該培養基上只有能合成脲酶的細菌才能生長，C正確；尋找并挑選菌種時，應在適宜其生長的一定環境中進行，如尋找纖維素分解菌應在富含纖維素的環境中進行，D正確。B5.(2021·河北保定調研)如圖是探究果酒與果醋發酵的裝置

示意圖。下列相關敘述錯誤的是(

) A.改變通入氣體種類，可以研究呼吸作用類型對發酵的影響 B.果酒發酵過程中通入N2，酵母菌將從有氧呼吸轉變為無氧

呼吸 C.果醋的發酵周期與實驗設定的溫度密切相關 D.氣體入口與氣體出口可以交換使用D解析酵母菌屬于兼性厭氧菌，醋酸菌屬于需氧菌，控制氧氣的進入，可以研究呼吸作用類型對發酵的影響，A正確；果酒發酵初期通入氧氣，酵母菌進行有氧呼吸，可以提供較多能量，使酵母菌快速繁殖，中期通入氮氣，酵母菌將從有氧呼吸轉變為無氧呼吸，B正確；溫度影響酶活性，果醋的發酵周期與實驗設定的溫度密切相關，C正確；氣體入口與氣體出口不能交換使用，否則會使發酵液溢出，D錯誤。6.(2021·河北衡水中學調研)利用傳統發酵技術制作果酒、果醋和泡菜，三者的共同點是(

) A.所用菌種均為異養原核生物 B.必須將原料滅菌后再接種優良菌種進行發酵 C.必須保證在無氧條件下發酵 D.發酵液最終都呈酸性

解析果酒制作時所需的微生物是酵母菌，它屬于真核生物；果醋制作時所需的微生物是醋酸菌，它屬于原核生物；泡菜制作時所需的微生物是乳酸菌，它屬于原核生物，A不符合題意；在果酒、果醋和泡菜制作時對原料只進行了清洗，沒有進行滅菌，B不符合題意；醋酸菌是好氧細菌，必須保證在有氧條件下發酵，C不符合題意；果酒制作過程中會產生CO2，果醋制作過程中會產生醋酸，泡菜制作過程中會產生乳酸，即制作果酒、果醋和泡菜的發酵液最終都呈酸性，D符合題意。D7.(2021·山東淄博四中月考)下列有關傳統發酵技術應用的敘述，正確的是(

)A.傳統發酵技術的操作過程是在嚴格無菌的條件下進行的B.果醋發酵液中，液面處的醋酸菌密度低于瓶底處的密度C.利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養后密封發酵D.用帶蓋瓶子制作葡萄酒時，擰松瓶蓋的間隔時間不一定相同解析現代發酵技術的操作過程是在嚴格無菌的條件下進行的，傳統發酵技術的操作過程并不是在嚴格無菌的條件下進行的，A錯誤；醋酸菌是好氧細菌，制作果醋的發酵液中，液面處的醋酸菌密度高于瓶底處的密度，B錯誤；乳酸菌是厭氧細菌，利用乳酸菌制作酸奶的過程中，應一直密封發酵，C錯誤。D8.某生物興趣小組欲配制培養基從土壤中選擇尿素分解菌。下列相關敘述正確的是(

) A.配制以尿素為唯一氮源的液體培養基可用于選擇和觀察尿素分解菌 B.為獲取102的稀釋液可將90mL無菌水加入10g土壤樣品中 C.實驗中若需要統計尿素分解菌的菌落數目，接種時只能用平板劃線法 D.實驗中設置對照，同時培養一個空白培養基可檢驗培養基滅菌是否徹底

解析選擇和觀察尿素分解菌時需要配制以尿素為唯一氮源的固體培養基，A錯誤；10g土壤樣品加入90mL無菌水中，振蕩搖勻后可獲得10倍的稀釋液，B錯誤；實驗中若需要統計尿素分解菌的菌落數目，接種時只能用稀釋涂布平板法，C錯誤；實驗中設置對照，同時培養一個空白培養基，可通過空白培養基上是否有菌落來判斷培養基滅菌是否徹底，D正確。D9.(2021·江蘇省南京師大附中期中)下列有關微生物培養的敘述，正確的是(

)A.通常使用液體培養基分離獲得細菌單菌落B.若培養基需要調節pH，應該在滅菌后進行C.用顯微鏡直接計數固體培養基中微生物數量D.倒置平板可防止培養基被滴落的冷凝水污染解析常用固體培養基分離獲得細菌單菌落，液體培養基無法分離，A錯誤；若培養基需要調節pH，應該在滅菌前進行，B錯誤；顯微鏡直接計數法是測定培養液中微生物數量的方法，固體培養基上用稀釋涂布平板法直接計數單個菌落，C錯誤；平板倒置是避免冷凝的水掉到培養基上，污染培養基，D正確。D10.(2021·安陽市期中)在三個培養皿中各加入等量但不同種的大腸桿菌培養基，在培養皿中培養36小時后計算細菌的克隆數(下表)。下列培養皿的結果中，能說明大腸桿菌生長需要碳源的是(

)C在不同條件下大腸桿菌的生長量培養皿培養基培養皿上的細菌克隆數Ⅰ瓊脂、糖類35Ⅱ瓊脂、糖類和維生素250Ⅲ瓊脂和維生素0A.培養皿Ⅰ和Ⅲ B.培養皿Ⅰ和ⅡC.培養皿Ⅱ和Ⅲ D.培養皿Ⅲ解析分析表格數據可知，Ⅰ與Ⅱ對照，自變量是維生素的有無，說明大多數大腸桿菌生長需要外界提供維生素；Ⅱ和Ⅲ對照，自變量是糖類的有無，說明大腸桿菌的生長需要糖類(糖類主要提供碳源和能源)。綜上所述，C正確。11.(2021·江蘇無錫期末)尿素是一種重要的農業氮肥。當土壤中的細菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。下列關于土壤中分解尿素的細菌的分離與計數的敘述，正確的是(

) A.分離分解尿素的細菌應以尿素為唯一碳源 B.尿素的分解產物使培養基pH降低，從而使酚酞指示劑變成紅色 C.實驗組一平板上有56個菌落，空白對照平板上有3個菌落，則該實驗組菌落數記為53 D.用稀釋涂布平板法統計的菌落數往往比實際的活菌數目低D解析分離分解尿素的細菌應以尿素為唯一氮源，A錯誤；尿素的分解產物氨使培養基pH升高，從而使酚酞指示劑變成紅色，B錯誤；在完全正確的操作情況下，空白對照組中不應出現菌落，若空白對照組出現菌落，說明操作過程中存在微生物污染，屬于實驗失誤，所有實驗數據均不應采用，C錯誤；統計菌落數目的方法有顯微鏡直接計數法和稀釋涂布平板法，前者可用血細胞計數板直接計數，而用稀釋涂布平板法測定細菌數時，可能會把連接在一起的兩個或多個細菌統計成一個菌落，所以用該方法統計的細菌數可能會偏低，D正確。12.(2021·山東煙臺調研)某廠利用楊梅進行楊梅酒和楊梅醋的釀制，基本工藝流程如圖。有關敘述錯誤的是(

)BA.①②分別代表品種優良的酵母菌和醋酸菌B.滅菌后的③和⑥分別是釀制酒和醋的原料C.⑤裝置的作用是排出氣體并避免空氣進入D.該裝置可用于楊梅酒、楊梅醋的大規模生產解析甲罐不通空氣、乙罐通空氣，說明二者分別用于酒精發酵和醋酸發酵，大規模進行酒精發酵和醋酸發酵時，為保證品質，需進行嚴格滅菌并接種優良菌種，A正確；木材刨花有利于改善通氣狀況，使吸附的醋酸菌獲得充足的氧氣，B錯誤；酒精發酵過程中會產生二氧化碳，利用裝置⑤既可以隨時排出二氧化碳，又能避免空氣進入影響酒精發酵，C正確；該裝置進料口、進氣口、排氣口、產品出口等一應俱全，可用于果酒、果醋的大規模生產，D正確。13.(2021·江蘇蘇州調研)我國利用不同微生物的發酵作用制作食品的歷史悠久，在多種文獻中均有記載： ①《齊民要術》中記載：“作鹽水，令極咸，于鹽水中洗菜，即內雍中。” ②《北山酒經》中記載：“每壇加蠟三錢，竹葉五片，隔水煮開，乘熱灌封壇口。”

③《齊民要術》中記載了多種利用谷物釀制食醋的工藝，其經歷的三個主要發酵過程為糖化→酒化→醋化。

④《本草綱目拾遺》中記述：“豆腐又名菽乳，以豆腐腌過酒糟或醬制者，味咸甘心。”下列說法錯誤的是(

)A.①介紹的是泡菜制作技術，配制的鹽水要煮沸冷卻后使用B.②中加熱殺菌保存酒液的原理和方法，與釀酒中普遍使用的巴氏消毒法基本相同C.③中食醋的釀制過程：淀粉先在微生物的作用下分解成葡萄糖，葡萄糖再在酵母菌的作用下分解成酒精，最后醋酸菌在氧氣充足時將糖分解成醋酸，當缺少氧氣時將乙醇變為乙酸D.④從微生物培養的角度看，豆腐是固體培養基，接種時不需要對其進行嚴格滅菌C解析分析可知，①介紹的是泡菜制作技術，配制的鹽水要煮沸冷卻后使用，以殺滅鹽水中的微生物，防止雜菌污染，A正確；②中加熱殺菌保存酒液的原理和方法，與釀酒中普遍使用的巴氏消毒法基本相同，都是采用了低溫加熱處理的方法，B正確；③中的釀醋工藝是淀粉先在微生物作用下分解成葡萄糖，葡萄糖再在相關酶的作用下反應生成乙醇，在氧氣充足、缺少糖源的條件下，醋酸菌可將乙醇轉化為乙醛，再將乙醛變為乙酸，C錯誤；從微生物培養的角度看，豆腐是固體培養基，接種時不需要對其進行嚴格滅菌，D正確。14.(2021·黑龍江省牡丹江期末)將圖中果酒發酵裝置改裝后用于

探究酵母菌呼吸方式的實驗，下列相關操作錯誤的是(

) A.改裝時將盛有澄清石灰水的試劑瓶與管口2連通 B.經管口3取樣檢測酒精和CO2的產生情況 C.探究有氧條件下酵母菌呼吸方式時打開閥a D.實驗開始前對改裝后整個裝置進行氣密性檢查

解析改裝時將盛有澄清石灰水的試劑瓶與管口2連通，以檢測二氧化碳，A正確；管口3可取樣檢測酒精產生情況，管口2檢測CO2的產生情況，分別用酸性條件下重鉻酸鉀和溴麝香草酚藍溶液來檢測，B錯誤；探究有氧條件下酵母菌呼吸方式時，需要有氧條件，需要打開閥a以供氧，C正確；實驗開始前對改裝后整個裝置進行氣密性檢查，防止混入空氣，影響實驗結果，D正確。B15.(2021·河北衡水五校聯考)如圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法，圖丙是接種后培養的效果圖解。下列相關敘述不正確的是(

)BA.圖甲是平板劃線法，圖乙是稀釋涂布平板法B.這兩種方法所用的接種工具分別是接種針和接種環C.圖丙是采用圖乙所示方法得到的結果D.兩種方法的接種操作都一定要在火焰附近進行，因為火焰附近存在著無菌區域解析據圖分析，圖甲是平板劃線法，圖乙是稀釋涂布平板法，這兩種方法所用的接種工具分別是接種環和涂布器，B錯誤。16.(2021·江蘇徐州期末)

如圖是研究人員從紅棕壤中篩選高效分解尿素的細菌的過程示意圖，有關敘述錯誤的是(

)CA.實驗中錐形瓶、培養皿常用干熱滅菌法滅菌B.步驟③純化分解尿素細菌的原理是將聚集的細菌分散，獲得單菌落C.步驟③采用稀釋涂布平板法接種，并需向牛肉膏蛋白胨培養基中加入尿素D.步驟④挑取③中不同的菌落分別接種，比較細菌分解尿素的能力解析實驗中錐形瓶、培養皿常用干熱滅菌法滅菌，A正確；步驟③純化分解尿素的細菌的原理是將聚集的細菌分散，獲得單菌落，B正確；要篩選出能高效分解尿素的細菌，所選用的培養基要以尿素為唯一氮源，但牛肉膏和蛋白胨都可以提供氮源，因此步驟③所用的培養基中不能含有牛肉膏、蛋白胨，C錯誤；步驟④挑取③中不同種的菌落分別接種，比較細菌分解尿素的能力，D正確。17.(2021·吉林省寧江區期末)如圖是從土壤中篩選產脲酶細菌的過程，下列敘述錯誤的是(

)DA.能產生脲酶的細菌可以分解利用尿素B.圖中逐級稀釋的程度會直接影響細菌培養基上的菌落數量C.培養基中可添加KH2PO4、Na2HPO4以提供無機鹽和作為緩沖劑D.培養基①應以尿素為唯一氮源，培養基②的作用是純化培養產脲酶細菌解析酶具有專一性，能產生脲酶的細菌可以分解利用尿素，A正確；稀釋度越低，細菌培養基上菌落數越多，稀釋度越高，細菌培養基上菌落數越少，所以逐級稀釋的程度會直接影響細菌培養基上的菌落數量，B正確；細菌的生長繁殖需要無機鹽作為營養物質，培養基中添加磷酸二氫鉀，磷酸氫二鈉可提供無機鹽同時也可以作為緩沖劑，C正確；培養基①為選擇培養基，以尿素作為唯一氮源，培養基②為鑒別培養基，通過加入酚紅指示劑，判斷菌落周圍指示劑是否變紅，不是用于純化培養產脲酶細菌，D錯誤。18.(2021·沈陽期末)某生物興趣小組以帶有落葉的表層土壤(深5cm左右)為實驗材料，研究土壤微生物在適宜溫度下的分解作用，對土壤處理情況見下表。與此有關的敘述不正確的是(

)D組別1組2組3組4組土壤滅菌不滅菌滅菌不滅菌處理濕潤濕潤較干燥較干燥A.探究的問題是不同土壤濕度條件下，土壤微生物對落葉的分解作用B.預期結果是1、3組的落葉不被分解，2、4組中的落葉被不同程度的分解C.為了控制實驗中的無關變量，作為實驗材料的落葉也應進行滅菌處理D.該實驗的自變量為土壤是否滅菌處理，實驗中的對照組是1和3解析由表格可知，該實驗有兩個自變量：是否滅菌和濕度，探究的問題是不同土壤濕度條件下，土壤微生物對落葉的分解作用，A正確；1、3組滅菌，沒有微生物，落葉不被分解，2、4組有微生物，但濕度不同，則落葉分解程度不同，B正確；該實驗中微生物來自土壤，所以為控制無關變量，落葉應進行滅菌處理，C正確；該實驗有兩個自變量：是否滅菌和濕度，對照實驗需遵循單一變量原則，在濕潤條件下1、2形成對照，在較干燥條件下3、4形成對照，所以1、3分別是兩組對照實驗的對照組，D錯誤。19.(2021·大連市期末)原油中含有大量有害的、致癌的多環芳烴。土壤中有些細菌可以以原油中的多環芳烴為碳源，在培養基中形成分解圈。為篩選出能高效降解原油的菌種，某小組同學設計了相關實驗。下列有關敘述不正確的是(

) A.應配制被原油污染土壤的土壤稀釋液備用 B.配制以多環芳烴為唯一碳源的選擇培養基 C.將土壤稀釋液滅菌后接種到選擇培養基上 D.在選擇培養基上能形成分解圈的為所需菌種C解析篩選能夠利用多環芳烴為碳源的菌種，則在被原油污染的土壤中應該含有，所以配制來源于被原油污染的土壤稀釋液，A正確；配制選擇性培養基，該培養基與通用培養基成分的主要區別是以原油(多環芳烴)為唯一碳源，B正確；在無菌環境下，將土壤稀釋液接種到選擇培養上，將土壤稀釋液滅菌后會殺死原有菌種，C錯誤；題干有個信息“有些細菌可以利用原油中的多環芳烴為碳源，在培養基中形成分解圈”，因此在選擇性培養基上能形成分解圈的即為所需菌種，D正確。20.(2021·河南名校聯考)泡菜是我國的傳統食品之一，但制作過程中產生的亞硝酸鹽含量較高時對人體健康存在危害，某小組查得的資料如圖所示。下列相關說法錯誤的是(

)BA.從細胞結構方面比較，制作泡菜和制作果醋所用的微生物相同B.從細胞代謝方面比較，制作泡菜和制作果酒所用的微生物相同C.據圖分析，與第3天相比，第8天后的泡菜更適于食用D.據圖分析，pH下降是乳酸菌產生的乳酸積累的結果解析從細胞結構方面比較，制作泡菜所用的乳酸菌和制作果醋所用的醋酸菌都是原核生物，A正確；從細胞代謝方面比較，制作泡菜所用的乳酸菌是厭氧細菌，而制作果酒所用的酵母菌是兼性厭氧菌，B錯誤；據題圖分析，在第3天時，亞硝酸鹽的含量為40mg/kg，而在第8天時，亞硝酸鹽的含量只有約5mg/kg，故第8天后的泡菜更適于食用，C正確；乳酸菌進行無氧呼吸產生的乳酸呈酸性，故乳酸大量積累會使pH下降，D正確。二、非選擇題：本題包括5小題，共50分。21.(10分)(2021·四川綿陽模擬改編)利用微生物的發酵作用為人類造福，歷史悠久，前景廣闊。從傳統發酵到現代大規模生產的發酵工程，不同微生物具有各自獨特的作用。回答下列相關問題： (1)夏天，葡萄酒暴露在空氣中會變酸，這是因為當溫度適宜、氧氣________(填“充足”或“缺乏”)、糖源________(填“充足”或“缺乏”)時，醋酸菌能利用乙醇產生醋酸。 (2)利用酵母菌釀制葡萄酒時，發酵裝置不進行嚴格滅菌仍能獲得良好的發酵效果，原因是________________________。葡萄酒中乙醇的濃度一般不會超過16%，原因是_____________________________________________________。(3)工業生產實踐中，可以先利用纖維素分解菌處理植物秸稈，再通過酵母菌發酵最終可以獲得乙醇。為了分離纖維素分解菌，需要配制________的選擇培養基。(4)某同學欲從牛的瘤胃中分離得到纖維素分解菌。他將牛的瘤胃菌種提取液接種到適宜的培養基中，調節pH及溫度至適宜條件，并持續通入無菌空氣。一段時間后發現培養基中幾乎沒有菌落，原因可能是_____________________________________________________________________________________。答案(1)充足缺乏(2)在缺氧且呈酸性的發酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而其他微生物的生長繁殖受抑制乙醇濃度較高時會抑制酵母菌的生命活動(3)以纖維素為唯一碳源(4)瘤胃中的微生物為厭氧細菌，接觸空氣后死亡解析(1)夏天，葡萄酒暴露在空氣中會變酸，這是因為當溫度適宜、氧氣充足、糖源缺乏時，醋酸菌能利用乙醇產生醋酸。(2)由于酵母菌進行旺盛的發酵時發酵液中為缺氧、酸性環境，在缺氧且呈酸性的發酵液中酵母菌可以生長繁殖，而其他微生物的生長繁殖受抑制，所以利用酵母菌釀制葡萄酒時，發酵裝置不進行嚴格滅菌仍能獲得良好的發酵效果。由于乙醇濃度較高時會抑制酵母菌的生命活動，故葡萄酒中乙醇的濃度一般不會超過16%。(3)纖維素分解菌能合成纖維素酶，將纖維素分解，從中獲取碳源，而其他微生物因不能合成纖維素酶而不能利用纖維素，故在工業生產實踐中，為了分離纖維素分解菌，需要配制以纖維素為唯一碳源的選擇培養基。(4)由于瘤胃中的微生物為厭氧細菌，接觸空氣后會死亡，所以將牛的瘤胃菌種提取液接種到適宜的培養基中，調節pH及溫度至適宜條件，并持續通入無菌空氣，一段時間后會發現培養基中幾乎沒有菌落。22.(2020·全國卷Ⅰ，37)(10分)

某種物質S(一種含有C、H、N的有機物)難以降解，會對環境造成污染，只有某些細菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細菌菌株。實驗過程中需要甲、乙兩種培養基，甲的組分為無機鹽、水和S，乙的組分為無機鹽、水、S和Y。回答下列問題：(1)實驗時，盛有水或培養基的搖瓶通常采用________的方法進行滅菌。乙培養基中的Y物質是________。甲、乙培養基均屬于________培養基。(2)實驗中初步估測搖瓶M中細菌細胞數為2×107

個/mL，若要在每個平板上涂布100μL稀釋后的菌液，且保證每個平板上長出的菌落數不超過200個，則至少應將搖瓶M中的菌液稀釋________倍。(3)在步驟⑤的篩選過程中，發現當培養基中的S超過某一濃度時，某菌株對S的降解量反而下降，其原因可能是________________________________(答出1點即可)。(4)若要測定淤泥中能降解S的細菌細胞數，請寫出主要實驗步驟：___________________________________________________________________________________。(5)上述實驗中，甲、乙兩種培養基所含有的組分雖然不同，但都能為細菌的生長提供4類營養物質，即____________________________________________________________________________________________________________。答案(1)高壓蒸汽滅菌瓊脂選擇(2)104

(3)S的濃度超過某一值時會抑制菌株的生長(4)取淤泥加入無菌水中，涂布(或稀釋涂布)到乙培養基上，培養后計數(5)水、碳源、氮源和無機鹽解析(1)實驗過程中，對盛有水或培養基的搖瓶進行滅菌時，常采用高壓蒸汽滅菌法。據題圖分析可知，乙培養基為固體培養基，與甲培養基相比，其特有的組分Y物質應是凝固劑瓊脂。甲、乙培養基均只允許能利用物質S作為氮源和碳源的微生物生長，因此均為選擇培養基。(2)據題意，假設至少將搖瓶M中的菌液稀釋X倍，才能保證稀釋后的100μL菌液中細菌細胞數不超過200個，初步估測搖瓶M中細菌細胞數為2×107個/mL，則每mL中M細菌數÷稀釋倍數＝每mL涂布時的細菌數＝2×107÷X＝200/0.1，則X＝104，因此至少應將搖瓶M中的菌液稀釋104倍。(3)在篩選過程中，若培養基中S濃度過高，可能會導致細胞失水，進而抑制菌株的生長。(4)將含有能降解S的細菌的淤泥加入無菌水中，進行適當稀釋后，利用稀釋涂布平板法，取適量的菌液涂布到乙培養基上，在適宜條件下進行培養，一段時間后，統計菌落數，即可估算出淤泥中能降解S的細菌細胞數。(5)本實驗中，甲、乙兩種培養基所含有的組分雖然不同，但都能為細菌的生長提供的營養物質是水、碳源、氮源和無機鹽。23.(10分)(2021·安徽蚌埠模擬)圓褐固氮菌能將大氣中的氮氣轉化為氨，用于合成蛋白質等含氮的有機物，是異養需氧型的原核生物。某興趣小組對土壤中的圓褐固氮菌進行計數，請回答相關問題： (1)要想獲得圓褐固氮菌的菌種最好選擇________(填“表層”或“深層”)的土壤。 (2)在培養圓褐固氮菌的培養基中不需要加入的成分是________；該培養基從功能上劃分，屬于________培養基。 (3)在配制含瓊脂的培養基和倒平板的過程中，下列器材中不需要的是________(填序號)。 ①酒精燈②接種環③高壓蒸汽滅菌鍋④棉塞(4)本實驗采用的接種方法是________，其統計結果一般用________數而不是活菌數來表示；接種好的平板放入38℃恒溫箱中培養，每隔12h統計一次菌落數目，選取菌落數目穩定時的記錄作為結果，其原因是_________________________________________________________________________________。(5)在培養過程中將未接種菌種的空白平板與正常接種菌種的平板同時培養，這樣做的目的是______________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)表層(2)氮源選擇(3)②

(4)稀釋涂布平板法菌落防止因培養時間不足導致遺漏菌落數目

(5)檢測培養基是否被雜菌污染(或培養基是否滅菌合格)解析(1)據題干信息可知，圓褐固氮菌是好氧細菌，需要氧氣，故要想獲得圓褐固氮菌的菌種最好選擇氧氣含量較高的表層土壤。(2)因圓褐固氮菌能將大氣中的氮氣轉化為氨，用于合成含氮有機物，故在培養圓褐固氮菌的培養基中不需要加入氮源；該培養基從功能上劃分屬于選擇培養基。(3)制備培養基的基本流程為配制培養基→滅菌→倒平板，不需要使用接種環。(4)結合題中信息可知，該實驗還需對菌落進行計數，故采用的接種方法為稀釋涂布平板法。當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。為防止遺漏菌落數目，應選取菌落數目穩定時的記錄作為結果。(5)將未接種菌種的空白平板與正常接種菌種的平板同時培養的目的是檢測培養基是否被雜菌污染(或培養基是否滅菌合格)。24.(10分)(2021·遼寧沈陽期末)尿素是一種高濃度氮肥，被土壤中某些細菌分解為氨后，可以被植物吸收利用。某同學要分離土壤中能分解尿素的細菌，并統計每克土壤樣品中的活菌數目，培養基配方如表所示。KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O蛋白胨葡萄糖尿素瓊脂1.4g2.1g0.2g1.0g10.0g1.0g15.0g(1)根據培養基的成分分析，該同學________(填“能”或“不能”)分離出土壤中分解尿素的細菌，原因是________________。在接種前需要檢測培養基滅菌是否徹底，常用的檢測方法是_______________________________________。(2)某同學在分離純化土壤中分解尿素的細菌時，發現培養基上的菌落連成一片，最可能的原因是____________________，為避免此種現象發生，正確的操作方法是__________________________________________________________________________________________________________________________。(3)尿素分解菌因為能合成________，從而能將尿素分解成CO2和________。答案(1)不能尿素不是唯一氮源將未接種的培養基在適宜的溫度下放置一段時間，觀察是否有菌落產生(2)菌液濃度過高對菌液進行梯度稀釋(或加大稀釋倍數)

(3)脲酶NH3解析(1)分離尿素分解菌應該用以尿素為唯一氮源的選擇培養基，而表格中除了尿素，蛋白胨也能提供氮源，因此該培養基不能分離出土壤中分解尿素的細菌；檢測培養基滅菌是否徹底，可將未接種的培養基在適宜的溫度下培養一段時間，觀察是否有菌落產生。(2)培養基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高，為避免此種現象，應對菌液進行梯度稀釋。(3)尿素分解菌能夠合成脲酶，將尿素分解成